补肾固冲系列方诱发小鼠排卵的实验研究

目的探讨补肾固冲系列方诱发雌性未成年小鼠排卵的作用.方法在解剖镜下直接观察经补肾固冲系列方治疗后小鼠输卵管内新鲜的卵子数.结果补肾固冲系列方对经PMSG(孕马血清)处理的未成年小鼠没有直接的诱发排卵的作用,根据临床用药先后(先Ⅱ号方再Ⅲ号方),可明显增加PMSG+HCG(绒毛膜促性腺激素)处理的小鼠排卵数目(P＜0.01).结论补肾固冲系列方可增进HCG的促排卵作用.     

补肾调经方、逍遥丸对雄激素致排卵障碍模型大鼠腺垂体、卵巢影响的比较研究北大核心CSCD

目的观察补肾调经方、逍遥丸对雄激素致排卵障碍模型大鼠(ASR)腺垂体、卵巢形态及其分泌性激素的影响。方法 60只9日龄SD雌性大鼠随机选取10只为正常组,余50只皮下注射丙酸睾丸酮建立ASR模型,选取30只造模成功者,随机分为模型组、补肾调经方组(灌服补肾调经方混悬液)、逍遥丸组(灌服逍遥丸混悬液),每组10只,给药5周,择动情前期,断头法取血,放射免疫分析法检测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)、睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH);HE染色后观察腺垂体、卵巢形态。结果与正常组比较,模型组血清E2、T升高,FSH、LH降低(均P<0.01);腺垂体、卵巢形态异常。与模型组比较,补肾调经方组和逍遥丸组E2、T降低,FSH、LH升高(P<0.05,P<0.01),且补肾调经方组E2、T,逍遥丸组FSH恢复正常(均P>0.05);两组受损的腺垂体、卵巢结构均得到不同程度修复。结论补肾调经方及逍遥丸可改善排卵障碍性疾病。     

补肾法、疏肝法对超促排卵小鼠卵母细胞数量及GDF-9表达的影响

目的 观察补肾法、疏肝法对超促排卵小鼠卵母细胞数量及质量的影响.方法 将90只雌性昆明小鼠随机分为对照组、正常组、补肾高剂量组、补肾低剂量组、疏肝高剂量组、疏肝低剂量组各15只,补肾高、低剂量组分别给予补肾调经方精制口服液5.4、2.7 g/ml,疏肝高、低剂量组分别给予逍遥丸混悬液0.6、0.3 g/ml,对照组和正常组用蒸馏水灌胃,各组小鼠按均1 ml/1009体重灌胃,连续10d.第11日除正常组外其余各组小鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素,48h后腹腔注射人绒毛膜促性腺激素,16h后测定各组小鼠血清中雌二醇(E2)、促黄体生成激素(LH)和促卵泡生成激素(FSH)的水平,比较各组排卵数、优质卵泡数,检测卵母细胞中生长分化因子-9(GDF-9)蛋白和GDF-9 mRNA的表达. 结果 各给药组FSH、LH、E2表达和GDF-9蛋白及其mRNA显著高于对照组(P＜0.05);并且补肾高剂量组和疏肝高剂量组均显著高于补肾低剂量组和疏肝低剂量组(P＜0.05).各给药组优质卵泡数均高于对照组(P＜0.05).对照组及各给药组排卵数较正常组显著增加(P＜0.05). 结论 补肾法、疏肝法可增加小鼠卵母细胞数量、提高优质卵泡率、促进卵子排出,其作用机制可能与调控卵母细胞GDF-9表达相关.     

补肾调经方、逍遥丸对雄激素致排卵障碍模型大鼠腺垂体、卵巢影响的比较研究

目的观察补肾调经方、逍遥丸对雄激素致排卵障碍模型大鼠（ASR）腺垂体、卵巢形态及其分泌性激素的影响。方法60只9日龄SD雌性大鼠随机选取10只为正常组,余50只皮下注射丙酸睾丸酮建立ASR模型,选取30只造模成功者,随机分为模型组、补肾调经方组（灌服补肾调经方混悬液）、逍遥丸组（灌服逍遥丸混悬液）,每组10只,给药5周,择动情前期,断头法取血,放射免疫分析法检测血清雌二醇（E2）、孕酮（P）、睾酮（T）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）;HE染色后观察腺垂体、卵巢形态。结果与正常组比较,模型组血清E2、T升高,FSH、LH降低（均P〈0．01）;腺垂体、卵巢形态异常。与模型组比较,补肾调经方组和逍遥丸组E2、T降低,FSH、LH升高（P〈0．05,P〈0．01）,且补肾调经方组E2、T,逍遥丸组FSH恢复正常（均P〉O．05）;两组受损的腺垂体、卵巢结构均得到不同程度修复。结论补肾调经方及逍遥丸可改善排卵障碍性疾病。     

补肾调经方和逍遥丸对体外培养小鼠卵泡中ADAM8 及 ADAMTS-1 影响的比较

目的?探讨补肾调经方和逍遥丸对体外培养小鼠卵泡中去整合素-金属蛋白酶8（ADAM8）和Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶（ADAMTS-1）表达的影响。方法?机械法分离昆明乳鼠窦前卵泡，随机分为空白组、正常组、补肾组、疏肝组，空白组不加血清，正常组加入正常大鼠血清，体外培养12天；补肾组加入补肾调经Ⅱ号方高剂量大鼠含药血清，疏肝组加入逍遥丸高剂量大鼠含药血清体外培养11天。11天时补肾组和疏肝组分别改为补肾调经Ⅲ号方高剂量和逍遥丸低剂量大鼠含药血清体外培养1天。培养12天加入人绒毛膜促性腺激素（hCG）后0、8、12、16 h采用RT-PCR法检测各组卵泡和卵丘卵母细胞复合体（COCs）中ADAM8、ADAMTS-1 mRNA表达，细胞免疫荧光染色法比较各组ADAM8、ADAMTS-1蛋白表达。结果?加入hCG后0、8、12、16 h，各组ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白的表达逐渐升高，各时间点空白组与正常组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。与本组0、8 h比较，补肾组12、16 h ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白表达升高（P<0.05）。与本组0 h比较，疏肝组8 h ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白表达升高（P<0.05）。与空白组和正常组比较，补肾组与疏肝组8、12、16 h ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白表达升高，8 h疏肝组高于补肾组，12 h补肾组高于疏肝组（均P<0.05）。补肾组ADAM8、ADAMTS-1 mRNA及蛋白的表达高峰高于疏肝组（P<0.05）。结论?补肾调经方和逍遥丸均可通过增强ADAM8和ADAMTS-1的蛋白溶解作用，使卵泡壁破裂而诱发排卵，补肾法诱发排卵的作用优于疏肝法。     

补肾固冲系列方诱发小鼠排卵的实验研究

目的：探讨补肾固冲系列方诱发雌性未成年小鼠排卵的作用。方法：在解剖镜下直接观察经补肾固冲系列方法后小鼠输卵管内新鲜的卵子数。结果：补肾固冲系列方对经PMSG（孕马血清）处理的未成年小鼠没有直接的诱发排卵的作用,根据临床用药先后（先Ⅱ号方再Ⅲ号方）,可明显增加PMSG＋HCG（绒毛膜促性腺激素）处理的小鼠排卵数目（P＜0．01）。结论：补肾固冲系列方可增进HCG的促排卵作用。     

补肾调周法对卵巢早衰模型大鼠血清INHB, VEGF的影响

目的:探讨补肾调周法对卵巢早衰模型大鼠血清抑制素B(INHB)、血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响。方法:90只大鼠随机分为9组,即空白对照组,模型对照组,补肾Ⅰ号方高、低剂量(68.67,34.30 g·kg-1)组,补肾Ⅱ号方高、低剂量(61.40,30.70 g·kg-1)组,补肾调周高、低剂量组,分别序贯给药Ⅰ号,Ⅱ号高、低剂量(每2天轮换一次),阳性对照组,每组各10只。除空白对照组外其余各组均采用环磷酰胺(CTX)造模。给药20 d后,ELLSA法测定各组大鼠血清INHB,VEGF水平,光镜下观察卵巢的病理组织形态。结果:补肾调周法能显著提高血清INHB,VEGF水平,从而提高卵巢的贮备能力,并能增加各级卵泡与黄体组织数量。结论:补肾调周法可提高卵巢早衰模型大鼠的卵巢储备能力,这可能是对卵巢早衰早期干预的机制之一。     

恒清Ⅱ号方对阿尔茨海默病模型小鼠认知行为的影响

目的探讨恒清Ⅱ号方对阿尔茨海默病模型小鼠认知行为的影响。方法将72只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、恒清Ⅱ号方低剂量组、恒清Ⅱ号方中剂量组、恒清Ⅱ号方高剂量组和盐酸多奈哌齐组,每组12只。采用海马CAI区Aβ1-42寡聚体溶液注射方法造模。造模次日起,恒清Ⅱ号方低、中、高剂量组小鼠分别给予恒清Ⅱ号方20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg灌胃,盐酸多奈哌齐组给予盐酸多奈哌齐片5 mg/kg灌胃,假手术组和模型组小鼠给予生理盐水灌胃,均1次/d,连续8周。灌胃结束后采用水迷宫实验检测各组小鼠的认知行为。结果水迷宫实验第1-4天,模型组小鼠逃避潜伏期和定位航行路径长度均明显长于假手术组(P均0.05),恒清Ⅱ号方中、高剂量组和盐酸多奈哌齐组小鼠逃避潜伏期和定位航行路径长度均明显短于模型组(P均0.05);水迷宫实验第3天和第4天,恒清Ⅱ号方中、高剂量组和盐酸多奈哌齐组小鼠逃避潜伏期和定位航行路径长度均明显短于恒清Ⅱ号方低剂量组(P均0.05);水迷宫实验第4天,恒清Ⅱ号方高剂量组小鼠逃避潜伏期和定位航行路径长度均明显短于恒清Ⅱ号方中剂量组和盐酸多奈哌齐组(P均0.05)。水迷宫实验第5天,模型组小鼠穿越隐匿平台次数明显少于假手术组(P0.05),恒清Ⅱ号方中、高剂量组和盐酸多奈哌齐组小鼠穿越隐匿平台次数均明显多于模型组和恒清Ⅱ号方低剂量组(P均0.05),且恒清Ⅱ号方高剂量组明显多于恒清Ⅱ号方中剂量组和盐酸多奈哌齐组(P均0.05)。结论恒清Ⅱ号方可明显改善阿尔茨海默病模型小鼠的学习记忆能力,且量效关系呈正相关,高剂量恒清Ⅱ号方的效果优于盐酸多奈哌齐。     

补肾调经汤对多囊卵巢综合征模型大鼠血清瘦素、胰岛素和睾酮的影响

目的探讨补肾调经汤改善多囊卵巢综合征(PCOS)排卵状况的作用机制。方法选用80只雌性SD大鼠,建立PCOS大鼠模型,随机分为空白组、模型组、二甲双胍组、补肾调经汤高剂量组、低剂量组,每组10只,其余大鼠剔除。观察各组大鼠血清瘦素、胰岛素和睾酮激素的变化。结果补肾调经汤高剂量组、低剂量组均可以使PCOS大鼠血清瘦素、胰岛素、睾酮降低,补肾调经汤高剂量组与二甲双胍组在降低瘦素、胰岛素和睾酮水平方面作用相近。结论补肾调经汤可能通过对瘦素、胰岛素、睾酮的调节促进PCOS大鼠排卵。     

补肾调经方对小鼠体外培养卵泡卵母细胞BMPRⅡ/ALK6-Smads表达的影响

目的观察补肾调经方对小鼠体外培养窦前卵泡成活数及卵母细胞骨形成蛋白Ⅱ型受体(bone morphogenetic protein receptorⅡ,BMPRⅡ)/激活素受体样激酶6-Smads(activin receptor-like kinase6-drosophila mothers against decapentaplegic proteins,ALK6-Smads)信号通路的影响,探讨其提高体外生长卵泡卵母细胞质量的作用机制。方法 65只12日龄健康雌性昆明小鼠,采用机械法分离其窦前卵泡,分别以正常大鼠血清、高、中、低剂量补肾调经方大鼠含药血清、高剂量补肾调经方大鼠含药血清+K02288孵育,分为对照组、补肾高、中、低剂量组(即补肾组)、抑制剂组,普通法体外培养。培养第6天比较补肾组与对照组窦前卵泡成活数,实时荧光定量PCR法检测卵母细胞中BMPRⅡ、ALK6、Smad1、Smad5、Smad8mRNA表达;细胞免疫荧光法检测上述指标和磷酸化的Smad1/5/8(phospho-Smad1/5/8,p-Smad1/5/8)蛋白表达水平。结果与对照组比较,补肾高剂量组窦前卵泡成活数增加,补肾各剂量组BMPRⅡ、ALK6、Smad5、Smad8 mRNA表达水平升高,上述指标及p-Smad1/5/8蛋白表达水平升高,补肾高、中剂量组Smad1 mRNA及其蛋白表达水平升高(P0.05)。与补肾高剂量组比较,抑制剂组p-Smad1/5/8蛋白表达降低(P0.05)。结论补肾调经方能增加体外培养窦前卵泡成活数,提高卵母细胞质量,其作用机制可能与调控卵母细胞中BMPRⅡ/ALK6-Smads信号通路有关。     

补肾法对恶性肿瘤骨转移模型小鼠的作用价值

目的:从RANKL/RANK/OPG系统探讨补肾法抑制恶性肿瘤骨转移的作用机制。方法:在C57BL/6雄性小鼠左后肢接种Lewis肺癌细胞株制备肺癌骨转移动物模型,并将18只造模小鼠随机分为6组:模型对照组,补肾方低剂量组,补肾方中剂量组,补肾方高剂量组,唑来膦酸盐组以及补肾方(低)+唑来膦酸盐组。观察小鼠骨肿瘤组织病理,骨组织骨护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、白介素-6(IL-6)蛋白的表达情况。结果:模型组小鼠病理图片显示:骨皮质表面大部分被肿瘤细胞侵蚀破坏,骨髓腔内骨小梁被严重破坏,骨髓腔内造血细胞部分坏死,结构模糊不清(+++);唑来膦酸组及补肾方中剂量、补肾方(低)+唑来膦酸盐组小鼠病理:骨皮质完整结构清晰,骨髓腔内骨小梁与造血细胞少量破坏(+);模型组转移癌OPG的表达较低,补肾方中剂量及补肾方(低)+唑来膦酸盐的OPG蛋白的表达增高,与模型组相比差异有统计学意义(P0.05);补肾方低剂量、补肾方高剂量、唑来膦酸盐的OPG蛋白的表达与模型组相比差异无统计学意义(P0.05);模型组转移癌RANKL的表达较高,补肾方高剂量的RANKL蛋白的表达降低,与模型组相比差异有统计学意义(P0.01,)补肾方中剂量、唑来膦酸盐及补肾方(低)+唑来膦酸盐的RANKL蛋白的表达降低,与模型组相比差异有统计学意义(P0.05),补肾方低剂量的RANKL蛋白的表达与模型组相比差异无统计学意义(P0.05);模型组转移癌IL-6的表达较高,补肾方中剂量、补肾方高剂量的IL-6蛋白的表达降低,与模型组相比差异有统计学意义(P0.01),唑来膦酸盐及补肾方(低)+唑来膦酸盐的IL-6蛋白的表达降低,与模型组相比差异有统计学意义(P0.05),补肾方低剂量的IL-6蛋白的表达与模型组相比差异无统计学意义(P0.05)。结论:补肾方可能通过增加OPG蛋白的表达,从而抑制破骨细胞活性,抑制肺腺癌细胞的骨转移;同时,还可能通过抑制RANKL及IL的表达从而抑制肿瘤组织对骨质的溶骨性破坏。     

通莲Ⅰ号方抑制小鼠食管癌移植瘤生长作用及其机制研究

目的:研究通莲I号方对食管癌Eca109细胞荷瘤小鼠的抑瘤作用及其对肿瘤组织免疫因子TNF-α、IL-6和IL-8的影响。方法:食管癌Eca109细胞接种于小鼠右前肢皮下。小鼠随机分为模型组和通莲I号方低、中、高剂量组,分别灌胃生理盐水和通莲I号方各剂量。各组连续给药3周,末次给药结束3周后分离小鼠瘤组织,计算抑瘤率,ELISA法检测肿瘤组织上清液TNF-α、IL-6和IL-8含量。结果:通莲I号方高剂量组瘤重明显低于模型组(P0.05),抑瘤率明显高于通莲I号方低剂量组(P0.05)。HE染色可见,通莲I号方高剂量组的肿瘤细胞淡染,核分裂较少,可见较多肿瘤细胞肿胀变性坏死。通莲I号方高剂量组肿瘤组织TNF-α、IL-6和IL-8表达明显低于模型组与通莲I号方中、低剂量组(P0.05,P0.01)。结论 :通莲I号方可抑制小鼠食管癌Eca109细胞移植瘤生长,其抑瘤机制与下调瘤组织TNF-α、IL-6和IL-8等因子水平,增强免疫调节有关。     

乳康平对大鼠乳腺增生及性激素的影响

目的探讨乳康平对大鼠乳腺增生及性激素的影响。方法50只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、逍遥丸组和乳康平低、高剂量组。苯甲酸雌二醇配合黄体酮肌内注射法造模。造模成功后常规适应性饲养7d后,正常对照组和模型对照组灌服0.9%氯化钠注射液2mL/次;逍遥丸予逍遥丸药液按生药2.1g/kg灌服,2mL/次;乳康平低、高剂量组按生药5.85、23.4g/kg灌服,2mL/次。各组均每日灌服1次,连续30d。30d后处死,检测乳头直径,放射免疫法测定血清性激素雌二醇(E2)、孕酮(P)及催乳激素(PRL)水平。结果模型对照组E2、PRL高于正常对照组,P低于正常对照组(P0.01或P0.05);逍遥丸组和乳康平低、高剂量组E2、PRL低于模型对照组,P高于模型对照组(P0.01或P0.05);乳康平高、低剂量组间有一定量效趋势,乳康平高剂量组与逍遥丸组相比有明显改善(P0.01)。结论乳康平能抑制大鼠乳腺增生,其作用机制可能是通过调节大鼠的性激素水平来实现的。     

补肾与活血序贯干预对月经模型小鼠子宫内膜修复的影响

目的探讨补肾与活血序贯干预对月经模型小鼠子宫内膜修复的影响及可能作用机制。方法将140只雌性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(40只)、模型组(50只)、序贯干预组(50只),模型组和序贯干预组采用切除小鼠双侧卵巢后行激素序贯处理复制小鼠月经模型。序贯干预组在激素序贯处理的同时序贯给予补肾方及活血方,每天相应药物2 ml/100 g灌胃,共计给药14天。模型组、假手术组灌胃等量蒸馏水。在孕酮撤退后24 h、32 h、40 h、48 h、72 h对各组小鼠诱导侧(右侧)子宫角进行形态学观察及评分,并检测各组小鼠子宫Cxcl 2蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组小鼠子宫内膜形态学评分在24 h、32 h、40 h、48 h显著降低(P0.05);与模型组比较,序贯干预组小鼠子宫内膜形态学评分在24 h、32 h、40 h、48 h显著升高(P0.05)。与假手术组比较,模型组Cxcl 2蛋白表达在各个时间点均升高(P0.05);与模型组比较,序贯干预组Cxcl 2蛋白表达在各个时间点均升高(P0.05)。结论补肾与活血序贯干预可促进月经模型小鼠子宫内膜修复,其作用机制可能与调控Cxcl 2蛋白表达有关。     

舒肝补肾方对慢性应激肝郁模型大鼠排卵功能及血清IL-1β和IL-6的影响

目的 研究肝郁对女性排卵功能及血清IL-1β、IL-6的含量的影响,初步探讨肝郁与排卵功能障碍的关系及舒肝中药的作用机理.方法 复制慢性应激肝郁大鼠模型,将60只性周期表现正常的大鼠随机分为5组,即正常组、模型组、阳性组、舒肝补肾高组、舒肝补肾低组.造模的同时,正常组、模型组和阳性组灌以等量蒸馏水,舒肝补肾高、低组分别灌以舒肝补肾方浸膏稀释液高剂量(生药浓度约3.744 g/mL)和低剂量(生药浓度约1.872 g/mL),连续造模及给药20 d.造模第18 d阳性组每只大鼠腹腔注射HMG40IU,48 h后再腹腔注射HCG50IU,24h后处死.其余各组于造模第20d经阴道涂片观察挑选处于动情期的大鼠并间隔24h处死,进行指标测定.动态观察大鼠动情周期的变化；解剖取出输卵管并捡出卵子,镜下观察卵子形态,初步评估卵子质量；对照观察卵巢组织形态学的改变；用放射免疫法检测大鼠血清IL-1β、IL-6的含量.结果 同正常组相比,模型组大鼠的性周期出现不同程度的紊乱,卵子质量较差,卵巢组织形态异常,血清IL-1β及IL-6的含量显著降低(P＜0.05).同模型组相比,舒肝补肾高、低组大鼠的紊乱性周期得到改善,卵子质量有一定提高,卵巢组织的异常形态得到一定纠正,血清IL-1β含量显著升高(P＜0.05),IL-6的含量无显著差异(P＞0.05).结论 舒肝补肾方能明显改善大鼠性周期的紊乱,并在一定程度上提高卵子成熟度,改善卵巢的异常形态,有效升高大鼠血清IL-1β水平,促进卵子发育成熟和排卵,为临床运用舒肝补肾法治疗肝郁型排卵功能障碍提供了有价值的客观依据.     

补肾活血方对复发性流产小鼠蜕膜组织VEGF/PI3K/Akt通路表达的影响

目的观察补肾活血方对复发性流产小鼠蜕膜组织VEGFA、VEGFR2及对PI3k/Akt信号转导通路的影响,探讨其治疗复发性流产的可能作用机制。方法建立BALB/c×CBA/J正常妊娠小鼠模型及DBA/2×CBA/J复发性流产小鼠模型,实验随机分为正常组、模型组、黄体酮组(3.33 mg/kg)、补肾活血方低剂量组(10.47 g/kg)、补肾活血方中剂量组(20.93 g/kg)、补肾活血方高剂量组(41.87 g/kg),各组给予相应药物灌胃2周。观察各组不同浓度药物干预后CBA/J小鼠的胚胎丢失率;采用免疫组化检测小鼠蜕膜组织VEGFA、VEGFR2蛋白的表达;采用Western blot检测小鼠蜕膜组织VEGFA、VEGFR2、PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达。结果 (1)与模型组比较,黄体酮组和补肾活血方低、中、高剂量组小鼠胚胎丢失率均明显下降(P0.05)。(2)免疫组化结果表明,与模型组比较,黄体酮组和补肾活血方中、高剂量组VEGFA蛋白阳性表达增强,黄体酮组和补肾活血方低、中、高剂量组VEGFR2蛋白阳性表达增强(P0.05);与补肾活血方低剂量组比较,补肾活血方中、高剂量组VEGFA蛋白阳性表达增强(P0.05)。(3)Western blot结果表明,与模型组比较,黄体酮组和补肾活血方低、中、高剂量组VEGFA、VEGFR2、PI3K、p-Akt蛋白表达水平明显升高(P0.05);与补肾活血方低、中剂量组比较,补肾活血方高剂量组VEGFA、VEGFR2、PI3K、p-Akt蛋白表达水平明显升高(P0.05)。结论补肾活血方能上调复发性流产模型小鼠蜕膜组织VEGFA及其受体VEGFR2的表达,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路相关。     

补肾活血中药对薄型子宫内膜大鼠子宫内膜干细胞标志物的影响

目的探讨补肾活血中药对薄型子宫内膜大鼠子宫内膜干细胞标志物的影响。方法取处于动情期的雌性大鼠36只随机分为正常对照组、模型组、补佳乐组以及补肾活血中药高、中、低剂量组。除正常对照组外,其余各组大鼠建立肾虚血瘀薄型子宫内膜模型。正常对照组灌服蒸馏水,模型组建立模型后灌服蒸馏水,补佳乐组建立模型后灌服补佳乐0.3 mg/(kg·d),补肾活血中药高、中、低剂量组建立模型后分别灌服补肾活血中药8.64、4.32、2.16 mg/kg。经过3个动情周期后,处死大鼠,取材。免疫组织化学检测活化β-catenin蛋白的表达、RT-PRC检测Oct4基因表达以及Wertern blot法检测ABCG2蛋白的表达。结果 1)活化β-catenin蛋白的表达:模型组较对照组极显著降低(P0.001),给药后各组β-catenin不同程度增加,低剂量组较模型组有显著性差异(P0.05),中剂量组、高剂量组、补佳乐组与模型组有极显著性差异(P0.001)。2)Oct4基因的表达:模型组较对照组极显著降低(P0.001),给药后各组OCT4表达量不同程度增加,其中低剂量、中剂量与模型组无显著性差异,高剂量与模型组有极显著性差异(P0.001),补佳乐组与模型组有显著性差异(P0.05)。3)ABCG2蛋白的表达:模型组较对照组极显著降低(P0.001),给药后各组ABCG2表达量不同程度增加,其中低剂量与模型组无显著性差异,中剂量组与模型组有显著性差异(P0.05),高剂量、补佳乐组与模型组有极显著性差异(P0.001)。结论补肾活血中药可以不同程度的增加β-catenin蛋白、OCT4基因及ABCG2蛋白的表达。     

逍遥丸对小鼠卵母细胞BMP-6表达及妊娠结局的影响

目的观察逍遥丸对小鼠卵母细胞BMP-6表达及妊娠结局的影响。方法将160只雌性小鼠随机分为4组:疏肝高、低剂量组;COH组和空白对照组,每组40只;健康雄性小鼠80只,每组20只。应用免疫组化和real-time PCR方法分别测定卵母细胞中骨形态发生蛋白-6(bone morphogenetic protein-6,BMP-6)蛋白和m RNA的表达,并比较各组获卵数、优质卵泡率、妊娠率及子宫胚胎数。结果疏肝高低剂量组及空白对照组妊娠率均高于COH组(P0.05);疏肝高低剂量组卵母细胞BMP-6蛋白及m RNA表达均高于空白对照组和COH组(P0.05),其中疏肝高剂量组表达高于疏肝低剂量组(P0.05)。结论逍遥丸可在促性腺激素应用的基础上增加小鼠妊娠率,其作用机制可能与调控卵母细胞BMP-6的表达,提高卵母细胞质量相关。     

补肾通络方对膝骨性关节炎大鼠血清中PGE-2、NO及iNOS的影响

目的:观察补肾通络方对膝骨性关节炎大鼠的血清中前列腺素E-2(prostaglandin E-2,PGE-2)、一氧化氮(nitric oxide,NO)及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的影响。方法:随机选取6只大鼠为正常组,其余制备膝骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的模型。造模成功后,将造模成功的36只大鼠随机分为模型组、西药组、成药组、补肾通络方低剂量组、补肾通络方中剂量组和补肾通络方高剂量组,每组各6只。正常组及模型组大鼠均给予10 mL·kg~(-1)蒸馏水灌胃;根据大鼠与人的体表面积比值进行换算后,西药组大鼠给予0.875mg·kg~(-1)的美洛昔康制成的混悬液灌胃,成药组大鼠给予0.612 5 g·kg~(-1)的抗骨增生胶囊制成的混悬液灌胃,补肾通络方低剂量组、补肾通络方中剂量组和补肾通络方高剂量组分别予0.875 g·kg~(-1)、1.75 g·kg~(-1)、3.5 g·kg~(-1)的补肾通络颗粒方制成的混悬液灌胃。每天灌胃给药1次,连续4周。取大鼠腹主动脉血,离心取血清,测定其中PGE-2、NO和iNOS的含量水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中PGE-2,NO和iNOS含量明显升高,差异具有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,给药组中PGE-2,NO和iNOS含量降低,差异具有统计学意义(P0.05)。补肾通络方高剂量组PGE-2含量与模型组、西药组、成药组及补肾通络方低剂量组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。补肾通络方高剂量组NO含量与补肾通络方低剂量组比较,差异具有统计学意义(P0.05)。补肾通络方高剂量组iNOS含量与补肾通络中剂量组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:补肾通络方可以通过降低血清中NO、PGE-2和iNOS的含量水平,以减轻膝骨性关节炎大鼠的膝关节炎症表现,有利于改善膝关节炎的症状,提高患者的生存质量,从而达到治疗膝骨性关节炎的作用。     

补肾调经方对PCOS模型大鼠性激素、卵巢形态及TGF-β_1/smad通路的影响

目的探讨补肾调经方对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠性激素、卵巢形态及转化生长因子-β_1(TGF-β_1)/smad通路的影响。方法将60只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、补肾调经方低剂量组、补肾调经方中剂量组、补肾调经方高剂量组与炔雌醇环丙孕酮组,每组10只。除空白组外,其余组大鼠采用丙酸睾酮+注射用绒促性素建立PCOS模型。造模成功后,补肾调经方低、中、高剂量组给予0.264 g/(kg·d)、0.528 g/(kg·d)、1.056 g/(kg·d)的补肾调经方溶液灌胃,炔雌醇环丙孕酮组给予临床剂量1倍的炔雌醇环丙孕酮溶液灌胃,空白组、模型组给予等体积蒸馏水灌胃,均1次/d,连续12 d。末次灌胃结束后次日,采用放射免疫法测定各组大鼠血清黄体生成激素(LH)、睾酮(T)、促卵泡成熟激素(FSH)、雌二醇(E_2)水平;光镜下观察各组大鼠卵巢组织形态学变化,并计算卵泡数目;蛋白免疫印迹法检测各组大鼠卵巢组织中TGF-β_1、Smad3、Smad4和Smad 7蛋白表达情况。结果与模型组比较,补肾调经方中、高剂量组与炔雌醇环丙孕酮组大鼠血清LH、T水平及卵巢组织中Smad 7蛋白表达量均明显降低,血清FSH、E_2水平及卵巢组织中TGF-β_1、Smad3、Smad4蛋白表达量均明显升高,卵巢质量减轻,卵泡数目减少,差异均有统计学意义(P均0.05);与炔雌醇环丙孕酮组比较,补肾调经方高剂量组大鼠血清LH、T水平及卵巢组织中Smad 7蛋白表达量更低,血清FSH、E_2水平及卵巢组织中TGF-β_1、Smad3、Smad4蛋白表达量更高,卵巢质量更轻,卵泡数目更少,差异均有统计学意义(P均0.05)。补肾调经方各剂量组与炔雌醇环丙孕酮组大鼠卵巢病理性改变均呈不同程度改善,以补肾调经方高剂量组改善最为明显。结论补肾调经方可有效调节PCOS大鼠性激素分泌,促进卵泡发育和排卵,能够改善卵巢形态,机制可能与调控TGF-β_1/Smad信号通路的激活有关。