β-淀粉样肽对原代培养小鼠大脑皮质小胶质细胞形态学及细胞因子表达的影响

目的：研究原代培养的BALB/c小鼠大脑皮质小胶质细胞经β-淀粉样肽1-42（Aβ1-42）刺激后的形态学变化及细胞因子表达情况。方法：小胶质细胞用2次温和胰酶消化法分离,经预处理的Aβ1-42刺激后,相差显微镜观察形态学改变,RT-PCR检测IL-1β、-6基因表达水平。结果：小胶质细胞经Aβ1-42刺激后6 h细胞形态学发生明显改变;刺激24 h后IL-1β、-6基因表达水平明显上调（P〈0.05）。结论：Aβ1-42可明显活化小胶质细胞,并诱导炎性细胞因子的表达。     

尼古丁对脂多糖诱导的大鼠小胶质细胞激活和白细胞介素6表达的影响

目的:观察尼古丁对脂多糖(LPS)诱导的原代大鼠脑皮层小胶质细胞激活的影响及对细胞因子白细胞介素6(IL-6)表达的影响,探讨尼古丁在PD中的可能作用机制.方法:培养原代大鼠脑皮质胶质细胞,纯化小胶质细胞,用尼古丁预处理30 min,再加入LPS,采用ELISA检测小胶质细胞不同时间点分泌IL-6的水平及免疫细胞化学检...     

脂多糖刺激N9小胶质细胞释放炎性因子的时间和剂量效应

目的研究脂多糖刺激N9小胶质细胞释放炎性因子的时间和剂量效应。方法不同剂量脂多糖刺激N9小胶质细胞,在不同时间点,酶联免疫吸附试验检测培养基中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,硝酸还原酶法检测培养基中一氧化氮(NO)水平,Western blot检测细胞质和细胞核中核转录因子-κB(NF-κB)蛋白水平。结果刺激6、12 h后,各脂多糖组培养基中IL-1β和NO水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),刺激24 h后1 000、10 000μg.L-1脂多糖组培养基中的IL-1β和NO水平均较对照组升高(P<0.01)。刺激30 min后,各脂多糖组培养基中TNF-α水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),刺激6、24 h后,各脂多糖组培养基中TNF-α水平均较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01),且1 000μg.L-1脂多糖组TNF-α水平最高。Westernblot检测结果显示,各脂多糖组细胞质和细胞核内NF-κB蛋白水平较对照组显著增多(P<0.01),其中1 000μg.L-1脂多糖组细胞质和细胞核中NF-κB蛋白水平最高。结论 1 000μg.L-1脂多糖是激活N9小胶质细胞诱发其炎症反应的最佳剂量,脂多糖作用6 h主要促进TNF-α的释放,作用24 h后则IL-1β和NO的释放明显增加。     

腹腔内注射脂多糖对大鼠黑质多巴胺能神经元和小胶质细胞形态学影响及炎性因子变化

目的 观察腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)后,大鼠黑质多巴胺能神经元和小胶质细胞形态学变化及炎性因子的变化。方法 健康2月龄、12月龄斯普雷格-道利(Sprague-Dawley,SD)大鼠经腹腔注射LPS(1 mg/kg)后,分别于6 h,12 h,24 h,48 h,1 周处死,用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(streptavidin-peroxidase,SP)法进行抗酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)和抗钙离子结合蛋白1(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba-1)免疫组织化学染色,观察不同时间点脑黑质多巴胺能神经元阳性存活率及黑质小胶质细胞的激活情况。酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法分别检测相应时间点血及脑脊液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)及白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)的变化。结果 腹腔注射LPS(1 mg/kg)后,老龄组大鼠小胶质细胞呈明显激活改变,且早于青年组小胶质细胞的高峰;各组小胶质细胞的激活早于多巴胺能神经元的损毁;老年组脑脊液中各种炎性因子水平高于青年组。结论 老化因素与外周炎性介质诱发的中枢神经系统(central nervous system,CNS)炎性反应有关。     

脂多糖对THP-1细胞CD14诱导表达的影响

目的探讨脂多糖(LPS)对THP-1细胞CD14诱导表达的影响。方法应用不同质量浓度(0.1~50 mg/L)的LPS刺激培养48 h的THP-1细胞,并测定其CD14mRNA、肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素6(IL-6)表达的变化。结果正常培养条件下,THP-1细胞CD14表达量极低,而LPS对单核巨噬细胞THP-1具有显著的诱导激活作用,在较低质量浓度剂量刺激下即可被活化,表现为CD14mRNA表达量迅速增加,同时,LPS可诱导THP-1细胞产生TNF-α和IL-6,并在一定范围内呈剂量依赖关系。结论LPS可导致THP-1细胞活化,显著上调CD14mRNA的表达,并诱导产生炎症介质TNF-α和IL-6。     

柿叶黄酮对同型半胱氨酸诱导小胶质细胞细胞因子表达的影响

目的：观察柿叶黄酮对同型半胱氨酸诱导的小胶质细胞表达白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响,并与银杏叶提取物EGb761进行比较。方法将体外培养的小鼠小胶质细胞（BV-2细胞）分成空白对照组、同型半胱氨酸组（Hcy）、Hcy＋EGb761组（100mg/L）和Hcy＋低、中、高（12.5、25、50μg/mL）剂量柿叶黄酮组,培养72h。应用RT-qPCR方法评价各组IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达,酶联免疫吸附法（ELISA）测定培养上清液中上述细胞因子的蛋白浓度。结果与空白对照组比较,同型半胱氨酸组细胞内IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达和细胞培养上清液中蛋白浓度明显增加（P〈0.05）;与同型半胱氨酸组比较,Hcy＋EGb761组和Hcy＋低、中、高剂量柿叶黄酮组各细胞因子mRNA表达及培养上清液中蛋白浓度均降低（P〈0.05）,尤其是高剂量柿叶黄酮组结果与Hcy＋EGb761组作用相似。结论柿叶黄酮能抑制同型半胱氨酸诱导小胶质细胞表达IL-1β、IL-6和TNF-α,在一定浓度条件下其作用不亚于银杏叶提取物。     

缺氧增加小鼠小胶质细胞IRAK-4的表达

目的 观察缺氧后小鼠小胶质细胞株N9对白细胞介素-1受体相关激酶4( interleukin-1 receptor associated kinase-4, IRAK-4)表达的变化,探讨小胶质细胞内炎症反应的相关机制.方法 将培养的N9细胞置于低氧(3%O2,5%CO2,92%N2)条件下培养1、3、6、12、24 h,用Western blot检测蛋白表达的变化,用激光共聚焦技术观察IRAK-4在细胞内表达变化情况,用酶联免疫吸附法检测培养液上清肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量.结果 N9细胞IRAK-4的蛋白表达随缺氧时间延长而逐渐增高,1 h开始增加,3 h增加明显(P<0 01),6 h达高峰,12 h仍维持在较高水平(P<0 01),24 h 下降与常氧无显著性差异(P>0 05).激光共聚焦也显示随着缺氧时间的延长,荧光强度逐渐加强.培养液上清TNF-α含量的变化也符合相似的变化趋势.IRAK-4蛋白表达水平与培养液上清TNF-α含量的变化呈显著的正相关(r=0.863, P<0 05).结论 缺氧可以增加小鼠小胶质细胞内IRAK-4的蛋白表达,提示中枢神经系统内存在对免疫反应起着调控作用的TLR/IL-1R家族信号转导系统,调控下游炎症反应.     

炎性细胞因子对不同海拔地区干眼症患者的影响

目的 分析炎性细胞因子对不同海拔地区干眼症患者的影响。方法 回顾性分析180例不同严重程度和海拔地区的患者泪液炎性细胞因子白细胞介素-1β (interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干眼症状评分; Spearman相关性分析泪液炎性细胞因子 IL-1β、IL-6、TNF-α与干眼症状评分的相关性。结果 高海拔地区患者泪液炎性细胞因子 IL-1β、IL-6、TNF-α均高于亚高原和平原地区,差异均有统计学意义(P＜0.05);泪液炎性细胞因子 IL-1β、IL-6、TNF-α与干眼症状评分、严重程度呈正相关(P＜0.05)。结论 高原缺氧环境会促进干眼症患者病情进展,高海拔地区干眼症患者泪液炎性细胞因子表达越高,临床可通过检测泪液炎性细胞因子 IL-1β、IL-6、TNF-α浓度,评估疾病炎性程度,指导临床开展针对性治疗。     

脂多糖刺激星形胶质细胞SOCS-3及促炎性细胞因子的表达

目的以脂多糖（lipopolysaccride,LPS）i4激,模拟革兰阴性菌感染,观察体外培养大脑皮质星形胶质细胞分泌某些促炎性细胞因子及负性调控分子的变化,为进一步了解脑部炎症中星形胶质细胞的调节机制提供更丰富的实验依据。方法采用改良McCarthy法体外对大脑皮质星形胶质细胞进行培养,抗GFAP抗体荧光鉴定纯度后,用10ng／mlLPS刺激24h后收集细胞和培养上清,Westernblotting检测SOCS-3（Suppressor of Cytokine Signaling-3,SOCS-3）蛋白水平,ELISA法检测培养上清中TNF-α和IL-6水平。结果LPS刺激24h后,星形胶质细胞中SOCS-3有升高趋势,但与正常对照比较差异无统计学意义（P〉O．05）;星形胶质细胞培养上清中IL-6和TNF-α的水平明显升高,与正常对照比较差异均有统计学意义（P〈0．01,P〈0．05）。结论LPS刺激能有效促进星形胶质细胞分泌促炎性细胞因子;SOCS-3的表达与星形胶质细胞分泌细胞因子的变化密切相关,是调控星形胶质细胞适度产生促炎性细胞因子的重要负反馈因子。     

子痫前期患者血清血管紧张素原基因多态与胎盘中TNF-α及IL-6的关系

目的探讨血管紧张素原（angiotensinogen，AGT）基因多态、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和白细胞介素6（interleukin-6，IL-6）与子痫前期的关系及其相互关系。方法采用免疫组织化学染色法和逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR），检测45例子痫前期患者（子痫前期组）和45例正常孕妇（正常妊娠组）的血清中AGT基因多态及胎盘组织中TNF-α、IL-6的表达。结果TNF-α、IL-6在两组胎盘中均有表达，而在子痫前期组中两因子表达均较正常妊娠组明显增加，明显高于正常妊娠组（P〈0．01）。子痫前期组AGT基因TT型患者其胎盘中TNF-α、IL-6表达较正常妊娠组明显升高。结论炎性因子TNF-α、IL6在子痫前期发病机制中具有重要作用，携带有AGT基因TT型的妇女子痫前期发病危险升高。     

正常妊娠不同孕期血清hCG及IL-1β、IL-6和TNF-α水平的变化趋势

【目的】探讨正常妊娠妇女在妊娠过程中血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平随人绒毛膜促性腺激素hCG水平的变化规律。【方法】采用放射免疫测定法检测正常妊娠妇女在妊娠早、中、晚期血清hCG、TNF-α、IL-1β、IL-6水平，并与未孕妇女（对照组）进行对照研究。【结果】1．妊娠早期血清hCG浓度迅速升高，妊娠中晚期明显降低，但与正常对照组比较仍有显著性差异（P〈0．01）2．IL-1β血清水平在妊娠早期达到较高水平，中期有所下降，晚期又有所升高。3．与对照组比较，正常妊娠TNF-α血清水平在妊娠早、中、晚期均有所下降，但差异无显著性（P〉0．05）。4．正常妊娠早期血清IL-6水平随血清hCG浓度增高而增加，至妊娠中期血清IL-6水平持续增高，妊娠晚期达高峰。5.妊娠早期血清IL-1β／IL-6浓度的比值与对照组比较无显著性差异（P〉0．05），而妊娠中期和晚期差异有显著性（P〈0．01）。血清TNF-α／IL-6的浓度比值在妊娠早期、中期与对照组相比无显著差异（P〉0．05），晚期与对照组相比差异有显著性（P〈0．01）。【结论】妊娠期间细胞因子IL-1β和IL-6血清水平增高；妊娠期间正常分泌的hCG可能在细胞因子的产生中发挥作用；妊娠期间宿主的免疫反应可能发生了Th1向Th2型的转变。     

胃肠癌患者围手术期应用乌司他丁的临床效果评价

目的：探讨胃肠癌患者围手术期应用乌司他丁的临床效果。方法：胃肠癌手术患者30例为实验组，30例为对照组，检测两组术前1d ，术后1、3、5d的血清TNF-α、IL-6、血ALT、血肌酐及血α1-微球蛋白。结果：术后血清TNF-α、IL-6研究组明显低于对照组（P＜0．05）；术后血ALT、血肌酐及血α1-微球蛋白研究组明显低于对照组（P＜0．05）。结论：胃肠癌患者围手术期适当应用乌司他丁可抑制促炎介质释放，减轻重要器官组织损伤，增加围手术期的安全性。     

支气管哮喘患儿血清IL-6、IL-8、TNF的变化及临床意义

目的探讨支气管哮喘患儿血清白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)水平的变化及临床意义。方法应用放射免疫分析法分别测定34例哮喘急性发作期、30例哮喘缓解期患儿血清中IL-6、IL-8、TNF水平,并设28例健康儿童为对照组。结果哮喘急性发作期患儿血清中IL-6、IL-8、TNF平均水平明显高于哮喘缓解期及对照组,差异非常显著(P<0.001)。哮喘缓解期患儿血清中IL-6、IL-8、TNF水平仍高于对照组,差异显著(P<0.01)。结论不同时期支气管哮喘患儿血清中IL-6、IL-8、TNF水平的变化对探讨哮喘发病机制、病情进展及指导用药具有十分重要的临床价值。     

冠心病患者血清TNF-α和IL-1β水平检测

目的:探讨冠心病患者血清TNFα及IL1β的水平变化及临床意义。方法:采用ELISA法测定66例冠心病病人血清TNFα及IL1β水平,并与正常对照组比较。结果:冠心病病人TNFα及IL1β水平明显高于正常对照组(P<0.01),同时观察到病情加重,血清TNFα及IL1β水平增高。结论:冠心病病人存在细胞免疫功能紊乱,TNFα及IL1β水平增高可能与其发生,发展有关,并可作为病情判断及疗效的观察指标。     

脑梗死患者血清IL-6和TNF检测的临床意义

目的探讨白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子（TNF）在脑梗死过程中所起的作用和临床意义。方法采用ELISA方法测定42例脑梗死患者和40例同龄健康体检者血清IL-6和TNF含量,并分析它们与梗死体积的关系。结果急性脑梗死患者血清IL-6和TNF明显高于对照组,它们与脑梗死体积存在明显相关性。结论IL-6和TNF参与了急性脑梗死的发生发展。     

舍曲林对脑卒中后抑郁患者血清细胞因子水平的影响及疗效观察

目的探讨舍曲林对脑卒中后抑郁(PSD)患者血清细胞因子水平的影响及疗效观察。方法 80例PSD患者随机分为舍曲林组和对照组。两组均予以脑血管病常规治疗和康复训练。舍曲林组加用舍曲林治疗,对照组加用阿米替林治疗,疗程均为8周。结果治疗8周后,两组患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)水平较前均有明显下降(P<0.05或P<0.01),且舍曲林组下降值较对照组更明显(P<0.05);舍曲林组临床总有效率(95.0%)明显高于对照组(77.5%)(χ2=5.16,P<0.05)。结论舍曲林治疗PSD具有较好的疗效,作用机制与其降低血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平,纠正炎症细胞因子网络失衡密切相关。     

肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6在高血压心肌肥厚大鼠实验中的意义

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)在心肌肥厚大鼠血清和心肌中的表达变化及意义。方法 Wistar大鼠20只,随机分成两组,心肌肥厚组(OG)和假手术组(CG),每组10只。腹主动脉部分缩窄法制作压力负荷性心肌肥厚大鼠模型,手术后按要求饲养8周后处死,采血并取心肌标本。采用放射性免疫法检测大鼠血清TNF-α、IL-6含量,应用RT-PCR法检测心肌组织中TNF-α、IL-6 mRNA表达的变化。结果与假手术组比较,心肌肥厚组血清中TNF-α、IL-6含量增加(P<0.05);心肌中TNF-α、IL-6 mRNA表达增多(P<0.05)。结论TNF-α、IL-6参与心肌肥厚的发生和发展过程。     

慢性阻塞性肺疾病患者血清白细胞介素32水平的变化及意义

目的测定慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性加重期和稳定期患者血清白细胞介素32（IL-32）水平,以探讨IL-32在COPD发病机制中的作用。方法 2010年10月至2011年5月收集120例COPD患者,急性加重期60例,稳定期60例。另选同期30例非吸烟健康受试者作为对照组。用ELISA法检测血清IL-32和IL-8、肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量,同时测定肺功能（FEV1%pred、FEV1/FVC）,并分析IL-32水平与IL-8、TNF-α和气流阻塞之间的相关性。应用SPSS 13.0软件进行统计学分析,多组数据间比较采用单因素方差分析,采用Pearson相关分析进行相关性检验。结果 COPD急性加重期组血清IL-32的含量[（174.56±88.15）ng/L]显著高于对照组[（59.41±20.98）ng/L]和COPD稳定期组[（89.40±33.84）ng/L]（P均〈0.01）,COPD稳定期组血清IL-32含量显著高于健康对照组（P值〈0.01）;COPD急性加重期组、稳定期组血清IL-32水平与IL-8、TNF-α呈正相关（P均〈0.01）,与FEV1%pred、FEV1/FVC和PaO2呈负相关（P均〈0.01）;不同严重程度COPD患者血清IL-8、TNF-α和IL-32含量比较无统计学意义（P均〉0.05）。结论 COPD患者血清IL-32水平升高,可能与IL-8、TNF-α等炎性因子有关。IL-32可能作为一种促炎因子参与COPD的炎症反应。