苏木对C57BL／6荷瘤小鼠骨髓CK18、CK19表达影响的实验研究

目的通过检测荷瘤小鼠骨髓巾细胞角蛋白CK18、CK19的mRNA表达,研究苏水对肿瘤转移的影响。方法建立Lewis肺癌C57BL／6小鼠肿瘤模型,将小鼠随机分为苏木低剂量组（SML组）、苏术高剂量组（SMH组）、化疗组（CTX组）、化疗＋苏木低剂量组（CTX＋SML组）、化疗＋苏木高剂量组（CTX＋SMH组）、荷瘤对照组（NS组）6组,分别给予不同剂量苏木煎剂灌胃（每日1次）、环磷酰胺（接种后24h腹腔内注射1次）。在实验的第7、14、21天分批处死小鼠,摘取肺脏,观察肺转移灶;并采用实时定量PCR技术检测小鼠骨髓CK18、CK19的mRNA表达。结果CK18 mRNA表达,第7天CTX组和CTX＋SMH组、第14天SMH组和CTX＋SMH组、第21天CTX＋SMH组与同时点NS组比较,差异有统计学意义（P〈0．05、P〈0．01、P〈0．01）。CK19 mRNA表达,第7天SMH组、CTX＋SML组、CTX＋SMH组与NS组比较,差异有统计学意义（P值均〈0．05）;CTX＋SMH组与CTX组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;第14天、第21天各用药组均较NS组表达低,差异无统计学意义（P〉0．05）。各组小鼠第7、14天均未见肺转移灶,第21天各组均可见肺转移灶;用药各组肺转移灶数目均少于NS组,与NS组比较差异均有统计学意义,SML组（P=0．0117）、SMH组（P=0．0042）、CTX组（P=0．0001）、CTX＋SML组（P=0．0001）,CTX＋SMH组（P=0．0001）;CTX＋SML组的肺转移灶少于CTX组（P=0．0237）。各组肺转移灶的形态也存在较大差异。结论苏木具有抑制肿瘤转移的作用,苏木加化疗的抑制作用优于单纯化疗或者单纯苏木治疗。     

苏木对C57BL/6荷瘤小鼠骨髓CK18、CK19 表达影响的实验研究

目的通过检测荷瘤小鼠骨髓巾细胞角蛋白CK18、CK19的mRNA表达,研究苏水对肿瘤转移的影响。方法建立Lewis肺癌C57BL／6小鼠肿瘤模型,将小鼠随机分为苏木低剂量组（SML组）、苏术高剂量组（SMH组）、化疗组（CTX组）、化疗＋苏木低剂量组（CTX＋SML组）、化疗＋苏木高剂量组（CTX＋SMH组）、荷瘤对照组（NS组）6组,分别给予不同剂量苏木煎剂灌胃（每日1次）、环磷酰胺（接种后24h腹腔内注射1次）。在实验的第7、14、21天分批处死小鼠,摘取肺脏,观察肺转移灶;并采用实时定量PCR技术检测小鼠骨髓CK18、CK19的mRNA表达。结果CK18 mRNA表达,第7天CTX组和CTX＋SMH组、第14天SMH组和CTX＋SMH组、第21天CTX＋SMH组与同时点NS组比较,差异有统计学意义（P〈0．05、P〈0．01、P〈0．01）。CK19 mRNA表达,第7天SMH组、CTX＋SML组、CTX＋SMH组与NS组比较,差异有统计学意义（P值均〈0．05）;CTX＋SMH组与CTX组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;第14天、第21天各用药组均较NS组表达低,差异无统计学意义（P〉0．05）。各组小鼠第7、14天均未见肺转移灶,第21天各组均可见肺转移灶;用药各组肺转移灶数目均少于NS组,与NS组比较差异均有统计学意义,SML组（P=0．0117）、SMH组（P=0．0042）、CTX组（P=0．0001）、CTX＋SML组（P=0．0001）,CTX＋SMH组（P=0．0001）;CTX＋SML组的肺转移灶少于CTX组（P=0．0237）。各组肺转移灶的形态也存在较大差异。结论苏木具有抑制肿瘤转移的作用,苏木加化疗的抑制作用优于单纯化疗或者单纯苏木治疗。     

残胃癌外科治疗34例分析

目的：总结和分析残胃癌的临床诊治特点。方法：回顾性分析1982年12月～2006年12月我院收治的34例残胃癌病人。结果：本组残胃癌根治性手术切除27例，切除率为79．41％，根治性切除27例中患者5、3、1年生存率分别为11．76％，23．50％，52．94％；姑息性切除5例，切除率为14．70％。结论：根治性手术切除是残胃癌首选的治疗方法，能有效提高患者的生存时间和生存质量。晚期病例应该争取行姑息性切除手术。     

丹黄散对糖尿病大鼠创面愈合及新生皮肤中CK14、CK15表达的影响研究

目的探讨丹黄散对糖尿病大鼠创面愈合及新生皮肤中细胞角蛋白14(CK14)、细胞角蛋白15(CK15)表达的影响。方法链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型大鼠成功后,将实验大鼠随机分成丹黄散组、西药组、模型对照组和空白对照组,每组20只。在所有实验动物背部两侧制作直径约1 cm的圆形全层皮肤缺损创面,从造模当日开始,丹黄散组清创后外撒丹黄散后无菌棉纱覆盖;西药组清创后用山莨菪碱、庆大霉素和胰岛素的无菌棉纱外敷,空白对照组及模型对照组清创后无菌棉纱覆盖。分别于造模3 d、7 d、14 d、21 d后观察和记录各组创面未愈合面积,计算各时间点创面愈合率;取各组大鼠创缘新生皮肤组织进行HE染色,观察创缘组织修复情况及局部炎症反应;采用免疫组化法检测各组大鼠创缘组织中CK14和CK15蛋白表达情况。结果丹黄散组大鼠3 d时可见少量肉芽组织开始形成,21 d时创面基本愈合结痂,无死亡大鼠;西药组大鼠7 d时可见肉芽组织出现,到21 d表皮覆盖大部分创面,无死亡大鼠;模型对照组大鼠创面愈合缓慢,7 d、12 d各死亡1只,21 d时创面大多未愈合;空白对照组大鼠3 d时即可见新鲜肉芽组织生成,18 d时死亡1只,21 d时创面基本愈合。西药组、丹黄散组大鼠各时间点创面愈合率及创面组织中CK14、CK15表达水平均明显高于模型对照组(P均<0.05);丹黄散组大鼠3 d、7 d时创面愈合率及创面组织中CK14、CK15表达水平与西药组比较差异无统计学意义(P均>0.05),14 d、21 d时均明显高于西药组(P均<0.05)。结论丹黄散可有效促进糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合,机制可能与有效调控CK14、CK15表达有关。     

参附注射液对心内直视术后CK、CK-MB的影响

目的：观察先天性心脏病心内直视术后CK、CK－MB的变化及参附注射液对其的影响。方法：先天性心脏房、室间隔缺损71例，随机分为二组。Ⅰ组（参附注射液观察组）39例，Ⅱ组（对照组）32例，分别于术前，术后1h，1d，2d，3d，7d采取中心静脉血，测定血清CK及CK－MB浓度。结果：术前两组的CK、CK－MB均在正常范围，术后1d达高峰，其后缓慢下降。观察组CK水平在术后2d明显低于对照组，而CK－MB水平在术后3d,7d均低于对照组。结论：参附注射液可能加速先天性心脏病心内直视术后CK、CK－MB的恢复过程。     

胃癌病人FOLFOX加表阿霉素化疗提高手术切除率临床探讨

目的：探讨FOLFOX＋表阿霉素化疗提高胃癌病人手术切除率的影响。方法：观察术前经FOLFOX＋表阿霉素化疗的45例进展期胃癌患者（治疗组）的手术切除率,并与同期未进化疗的45例进展期胃癌患者（对照组）进行对比。结果：治疗组45例中41例（91．11％）获得切除,其中根治性切除32例（75．61％）。对照组45例中切除36例（80．0％）,其中25例（61．11％）获得根治性切除。两组比较,差别有显著性意3L（均P〈0．05）。结论：FOLFOX＋表阿霉素化疗能提高胃癌患者的手术切除率。     

人参皂苷CK抑制人结肠癌SW480细胞增殖的机制研究

目的研究人参皂苷CK对人结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响,并进一步探讨其作用机制。方法采用CCK-8法检测细胞活力;通过流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡、活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP)变化;Hoechst染色检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法检测细胞色素C(CytC)释放以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved Caspase-3等的表达。结果人参皂苷CK对SW480细胞的增殖有显著抑制作用。人参皂苷CK诱导SW480细胞周期阻滞于G0/G1期,促进细胞发生早期凋亡。人参皂苷CK可以显著增加细胞内ROS水平,降低MMP水平;人参皂苷CK促进Bax和cleaved Caspase-3的表达,抑制Bcl-2的表达。此外,人参皂苷CK使SW480细胞内CytC大量释放。结论人参皂苷CK对SW480细胞的增殖具有显著的抑制作用,其作用机制可能是通过促进线粒体超氧化物升高,导致胞内ROS水平显著增加和MMP显著下降,进而导致CytC释放,上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达,最终导致细胞发生凋亡。     

直肠癌合并肝转移癌术前介入治疗的临床观察

目的：评价直肠癌合并肝转移癌术前介入治疗在肿瘤综合治疗的价值。方法：采用Seldinger技术对16例直肠癌合并肝脏转移癌的患者进行术前肝脏及直肠局部介入化疗,其中6例对肝脏转移灶进行栓塞。术后3周进行手术治疗。结果：进行局部化疗后临床症状明显缓解,手术安全进行,有5例进行了根治性治疗,切除直肠及肝脏转移灶,14例原发灶完整切除。手术中出血减少,肿瘤易于剥离。结论：术前进行介入治疗不影响手术的安全性,可减少术中出血,提高手术切除率,减少术中扩散。在综合治疗中起相当重要的作用。     

AG372对重组人蛋白激酶CK2全酶的抑制动力学研究

目的　观察Tyrphostin中的AG372对重组人蛋白激酶CK2全酶的直接作用及其酶动力学机制。 方法　利用基因工程克隆、表达和纯化获得重组人蛋白激酶CK2α和 β亚基 ,在体外等摩尔数混合构成有最大生物活性的重组CK2全酶 ,在不同条件下测定CK2的活性。CK2活性通过测定转移到CK2底物上的 [γ 3 2 P]ATP或 [γ 3 2 P]GTP的 [3 2 P]放射活度来检测。结果　重组人CK2是一种Ca2 + ,cAMP和cGMP等第二信使非依赖性蛋白激酶 ,与天然CK2的性质一致。AG372对重组人CK2全酶具有很强的抑制作用 ,IC50 为 6 2 7.1nmol·L-1,抑制作用远大于已知CK2抑制剂DRB和A3。AG372对重组人CK2的动力学研究表明 :它与GTP呈竞争性抑制作用 ,与酪蛋白呈非竞争性抑制作用。结论　AG372是一种很强的重组人CK2抑制剂。重组人蛋白激酶CK2可作为一种较为简便筛选和开发有效的CK2抑制剂的分子靶点。     

胃癌手术治疗205例分析

目的：探讨胃癌外科治疗的现状。方法：对我院2005年01月～2009年06月收治并手术治疗的胃癌211例的临床资料进行回顾性分析。结果：211例胃癌中,手术切除201例（95．26％）,其中根治性切除187例（93．03％）,姑息性切除14例（6．97％）,远侧胃切除141例（70．15％）,近侧胃切除37例（18．40％）,全胃切除20例（9．95％）,残胃切除3例（1．50％）。结论：胃癌患者早期诊断仍困难,但手术切除率及根治性切除率较以前明显升高。体会规范化手术对治疗胃癌有重要的现实意义。     

槲皮素对重组人蛋白激酶CK2全酶的抑制作用及其动力学分析

目的 观察槲皮素对重组人蛋白激酶CK2全酶的直接作用及其酶动力学机制。方法 利用基因工程克隆，表达和纯化获得重组人蛋白激酶CK2α和β亚基，在体外等摩尔数混合构成有最大生物活性的重组CK2全酶，在不同条件下测定CK2的活性，CK2活性通过测定转移到CK2底物上的[γ-^32P]ATP的[^32P]放射活度来检测。结果 重组人蛋白激酶CK2是一种Ca^2 ,cAMP和cGMP等第二信使非依赖性蛋白激酶，与天然CK2的性质一致，槲皮素对重组人CK2全酶具有很强的抑制作用，IC50为522nmol/L，抑制作用大于CK2已知抑制剂DRB和A3，槲皮素对重组人蛋白激酶CK2的动力学研究表明；它与ATP和酪蛋白分别呈竞争性和非竞争性抑制作用。结论 槲皮素是CK2有效抑制剂，该抑制作用可能是槲皮素抗肿瘤作用又一分子机制。为今后筛选更有效的CK2抑制剂提供了一种较为简便的筛选方法。     

人参皂苷CK诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的研究

目的探讨人参皂苷CK对人肝癌HepG-2细胞凋亡的作用及机制。方法采用MTT法测定不同浓度(30,60,90μmol/L)人参皂苷CK对人肝癌HepG-2细胞的增殖抑制作用;通过HE染色、AO/EB染色观察人参皂苷CK诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的形态学变化;WesternBlotting检测凋亡相关蛋白P53、Bax和Bcl-2的表达情况。结果人参皂苷CK可明显抑制人肝癌HepG-2细胞的增殖,且呈剂量依赖性和时间依赖性。随着人参皂苷CK给药浓度的增加,出现典型凋亡形态特征的细胞逐渐增多,抗凋亡蛋白Bcl-2和P53表达量逐渐下降,而促凋亡蛋白Bax的表达逐渐升高,Bcl-2/Bax比例明显降低。结论人参皂苷CK可诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡,其作用机制可能与下调P53蛋白表达和降低Bcl-2/Bax比例有关。     

HBME-1、CK19、Galectin-3、34β E12在甲状腺微小乳头状癌中的表达

目的 探讨甲状腺微小乳头状癌中HBME-1、CK19、Galectin-3、34β E12的表达及意义.方法 采用免疫组化SP 法检测58例甲状腺微小乳头状癌、30例结节性甲状腺肿,26例甲状腺乳头状增生中的表达.结果 HBME-1、CK19、Galectin-3、34β E12在甲状腺微小乳头状癌和良性病变(结节性甲状腺肿、甲状腺乳头状增生)中的阳性表达率的差异有十分显著的统计学意义(P＜0.01),MBME-1敏感性、特异性、准确性分别87.9％、94.6％、91.2％,CK19敏感性、特异性、准确性分别为100％、89.2％、95.6％.Galectin-3敏感性、特异性、准确性分别为96.5％、87.5％、92.1％,34βE12敏感性、特异性、准确性分别为89.6％、96.4％、92.9％.结论 HBME-1、CK19、Galectin-3、34βE12联合检测将进一步提高甲状腺微小乳头状癌的准确性.     

加味异功散在结直肠癌肝转移转化化疗中的应用研究

<正>由于结直肠癌起病隐匿,约25%的患者在确诊时就已经发生转移且当时未转移的患者超过50%会进展为转移性结直肠癌[1]。结直肠癌远处转移中最常见的靶器官是肝脏。目前对于有肝转移的结直肠癌患者,手术切除是唯一可能治愈的方法。但遗憾的是所有肝转移病人中只有不足25%可以切除,如何提高肝转移瘤的切除率一直是研究的热点。笔者采用加味异功散联合化疗治疗     

加味四妙勇安汤干预蝮蛇咬伤患者血清CK、SOD、MDA的临床研究

目的 观察加味四妙勇安汤治疗蝮蛇咬伤后患者血清CK、SOD、MDA的变化.方法 将60例采用随机区组的方法分为治疗组和对照组,每组30例.分别给予加味四妙勇安汤加抗蝮蛇血清治疗和单纯抗蝮蛇血清治疗1周后,检测血清CK、SOD、MDA变化.结果 治疗组与对照组相比,能显著降低蝮蛇咬伤患者血清CK、MDA水平,升高血清SOD含量（P＜ 0.05或P＜0.01）.结论 加味四妙勇安汤通过调解蝮蛇咬伤患者血清CK、SOD、MDA水平,减轻肌肉损伤,提高机体抗氧化作用.     

肝叶切除在肝门胆管癌根治术中的应用效果分析

目的：探讨肝叶切除在肝门胆管癌根治术中的应用效果。方法：我院自2008年2月至2011年6月共收治行肝叶切除的肝门胆管癌患者52例,所有患者都采用肝门胆管癌根治术联合肝叶切除方法。结果：本组病例手术均实施顺利,无手术中死亡,并发症发生率为16．0％,随访中的死亡率为9．6％,通过统计分析,肝门部血管累及、淋巴结转移、神经浸润与患者的生存率显著相关（P〈O．05）。结论：肝叶切除在肝门胆管癌根治术中的应用效果好,能降低死亡率与并发症发生率。     

胆管癌根治性切除术中肝动脉的切除

胆管癌占肝外胆管癌总数的70％左右，而且发病率还在每年都增加。胆管癌的生物学特点是早期的癌组织把血管以及神经全部浸润后，沿着血管以及神经开始转移。治疗的手术难度很大，手术后很容易局部复发。本文主要探讨了在胆管癌根治性切除手术当中肝动脉的切除。     

RNAi研究CK18在肝癌增殖中的作用及不同中医治法的调节

目的:观察不同中医治法对大鼠肝癌CK18表达的调控差异,以及CK18在人肝癌细胞增殖中的作用。方法:(1)采用DEN诱发大鼠肝癌,分别经中药健脾益气、清热解毒、活血化瘀等治疗后,检测肝癌组织CK18表达的差异;(2)设计2个人CK18基因siRNA靶点,将重组质粒电转入SMMC-7721人肝癌细胞株,MTT法检测细胞生长增殖情况、Realtime-PCR检测该基因的表达差异。结果:(1)芯片结果显示,CK18基因在大鼠肝癌形成后表达显著增加,不同中医治法对其具有不同程度的轻度调控作用,其中健脾益气治法下调作用较明显;(2)采用MTT法筛选到一个CK18基因RNA干扰有效靶序列,转染144h后细胞的生长增殖得到了明显的抑制;(3)实时荧光定量PCR检测表明,转染72h后该基因的表达已明显降低。结论:肝癌细胞恶性增殖有赖于CK18基因的高表达,目前常用治法对该基因的调控作用有限,因而该基因可望作为肝癌疗效筛选评价指标。     

血瘀证乳腺癌分子分型与EGFR、CK5/6表达的相关性研究

目的探讨表皮生长因子受体(EGFR)、细胞角蛋白5/6(CK5/6)的表达情况与乳腺癌分子分型的相关性并评估血瘀证乳腺癌的预后。方法纳入浸润性乳腺癌患者80例,粗针穿刺或手术取得乳腺组织病理,采集资料行中医辨证分型,分为血瘀证组和非血瘀证组各40例。采用免疫组化法测定2组雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人类表皮因子受体2(HER-2)、增殖细胞核抗原(Ki-67)、EGFR、CK5/6的阴性和阳性表达情况,并进行分子分型;采用RT-PCR法检测EGFR、CK5/6的基因表达情况。结果血瘀证组EGFR蛋白阳性例数明显高于非血瘀证组(χ^2=6.146,P=0.013),CK5/6蛋白阳性例数与非血瘀证组比较差异无统计学意义(χ^2=3.660,P=0.056);EGFR蛋白表达与分子分型之间呈正相关(r=1.00,P=0.000),CK5/6蛋白表达与分子分型无相关(r=0.800,P=0.200);血瘀证组EGFR、CK5/6 mRNA表达与非血瘀证组比较明显提高(P<0.05);EGFR、CK5/6 mRNA表达与分子分型呈直线正相关(EGFR:r=0.726,P=0.000;CK5/6:r=0.550,P=0.000)。结论血瘀证乳腺癌预后可能较差。EGFR表达与分子分型呈正相关,分型越差,EGFR表达越高;EGFR、CK5/6的表达也呈正相关。     

人参皂苷CK对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制探讨

目的:探讨人参皂苷CK对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及潜在机制。方法:SD大鼠随机均分为5组,分别为假手术组及缺血再灌注模型组给予生理盐水、人参皂苷CK低、中、高剂量组(10,20,40 mg·kg-1),每组12只,ip人参皂苷CK,14 d后,行在体结扎冠状动脉前降支手术30 min后,再进行120 min灌注,复制心肌缺血再灌注大鼠模型,检测人参皂苷CK对心肌梗死面积,血清乳酸脱氢酶(LDH),肌酸磷酸激酶(CPK),诱导型一氧化氮合酶(i NOS),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,心肌组织丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性及高迁移率族蛋白1(HMGB1)蛋白表达的影响。结果:与正常组比较,缺血再灌注模型组心肌组织MDA含量明显升高,SOD活性明显降低,血清中i NOS,IL-6和TNF-α水平明显升高,心肌组织HMGB1蛋白的表达明显升高(P0.05);与缺血再灌注模型组比较,人参皂苷CK能够明显减少心肌梗死面积,降低LDH,CPK活性减少心肌组织MDA含量,提高SOD活性,明显降低血清中i NOS,IL-6和TNF-α水平(P0.05),此外,人参皂苷CK能够抑制心肌组织HMGB1蛋白的表达(P0.05)。结论:人参皂苷CK对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,该作用与其提高机体抗氧化能力、减少炎症反应及抑制HMGB1表达有关。