人参皂苷Rh2 对荷Lewis 肺癌小鼠抗肿瘤作用

目的观察人参皂苷Rh2（ginsenoside Rh2,G-Rh2）对荷Lewis肺癌小鼠抗肿瘤作用并探讨其作用机制。方法建立Lewis肺癌实体瘤模型,观察G-Rh2的抗肿瘤作用、观察肿瘤内血管密度（MVD）,以及免疫组化法观察瘤体血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果 0.3 mg·kg^-1、1.0 mg·kg^-1和3.0 mg·kg^-1G-Rh2组对Lewis肺癌小鼠实体瘤均有抑制作用（P〈0.05）;1.0 mg·kg^-1和3.0 mg·kg^-1 G-Rh2组MVD明显低于对照组（P〈0.05）;免疫组化结果显示,0.3 mg·kg^-1、1.0 mg·kg^-1和3.0 mg·kg^-1 G-Rh2组瘤组织内的VEGF蛋白表达阳性率均低予对照组（P〈0.05）。结论 G-Rh2可抑制Lewis肺癌生长及抑制肿瘤新生血管生成的作用,可能是通过降低VEGF表达来实现的。     

人参皂苷Rh2提高人乳腺癌细胞MCF-7对5-氟尿嘧啶诱导凋亡的敏感性

目的探讨人参皂苷Rh2(ginsenoside Rh2,G-Rh2)能否提高人乳腺癌细胞MCF-7对5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)的敏感性,通过协同作用扩大细胞凋亡信号。方法先用MTT法确定G-Rh2的无毒增敏质量浓度,随后将对数生长的人乳腺癌细胞MCF-7分为4组:control(不加药),G-Rh2(加入10 mg.L-1 G-Rh2),5-FU(加入25 mg.L-1 5-FU),G-Rh2+5-FU组(加入10 mg.L-1 G-Rh2和25 mg.L-15-FU),通过MTT计算联合作用指数,激光共聚焦观察细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞周期,免疫荧光染色检测caspase-3、多聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymer-ase,PARP)的剪切情况。结果 MTT结果显示,G-Rh2可导致5-FU诱导的人乳腺癌细胞MCF-7死亡率增加,形态学、细胞周期检测、caspase-3和PARP凋亡蛋白免疫荧光染色结果都显示,G-Rh2+5-FU组可显著提高人乳腺癌细胞MCF-7死亡率,且引起的细胞死亡为细胞凋亡作用。结论 G-Rh2可以提高人乳腺癌细胞MCF-7对5-FU的敏感性,通过协同作用诱导细胞凋亡。     

人参皂苷Rg3与Rh2的研究进展

人参是我国传统的名贵中草药材,人参皂苷是人参的主要有效成分。人参皂苷Rg3,Rh2具有抗疲劳、舒张血管、提高免疫力、抗肿瘤等药理作用。综述了人参皂苷Rg3,Rh2的药理作用及制备方法。     

人参皂苷Rh2逆转MCF-7/ADM多药耐药性的研究

目的观察人采用人参苷Rh2对逆转人乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7/ADM的分子机制。方法采用MTT比色法对不同浓度下人参皂苷Rh2对MCF-7/ADM的阿霉素(ADM)以及氟尿嘧啶(Fu)耐药逆转指标检测,同时使用多功能酶标仪检测人参皂苷Rh2干预对细胞内罗丹明123荧光强度以反映其对细胞多药耐药蛋白P-gp活性的影响。结果经过人参皂苷Rh2的干预,MCF-7/ADM对ADM以及Fu两种临床常用化疗的敏感性增强。另外,人参皂苷Rh2还对细胞的罗丹明123外排有显著的浓度依赖性抑制作用。结论人参皂苷Rh2能够有效逆转MCF-7/ADM多药耐药性,其作用机制可能主要为抑制了细胞多药耐药蛋白P-gp的活性。     

人参皂苷Rh2与P13K/AKT信号通路抑制剂LY294002对乳腺癌细胞转移和侵袭的影响

目的：研究人参皂苷Rh2（GensenosideRh。）与磷脂酰肌醇-3-激酶／丝苏氨酸蛋白激酶（P13K／AKT）信号通路抑制剂LY294002对乳腺癌细胞转移和侵袭的影响。方法：试验分为对照（空白培养液）组、人参皂苷Rh2（80μmol／L）组、LY294002（50gmol／L）组与人参皂苷Rh2（80gmol／L）＋LY294002（50gmol／L）组。人参皂苷Rh：与LY294002体外作用于人乳腺癌细胞MCF7／Adr,Westernblot法检测细胞基质金属蛋白酶（MMP）2、P-糖蛋白（P-gP）、丝苏氨酸蛋白激酶（AKT）、磷酸化丝苏氨酸蛋白激酶（p-AKT）蛋白表达;黏附试验观察细胞与基底膜的黏附力,Transwell法观察细胞侵袭能力和迁移能力。结果：与对照纽比较,人参皂苷Rh2组、LY294002组与人参皂苷Rh2＋LY294002组p—AKT、P—gP、MMP．2蛋白表达显著减弱,细胞与基底膜的黏附力、细胞迁移能力与侵袭能力显著减弱（P〈0．05）;人参皂苷Rh2＋LY294002组与人参皂苷Rh2组、LY294002组比较以上指标差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论：抑制P13K／AKT信号通路可有效降低MCF7／Adr侵袭迁移能力,P13K／AKT通路是调控乳腺癌侵袭迁移的重要信号通路之一。     

人参皂苷单体Rh_2抑制小鼠前胃癌系细胞增殖及其机制

目的探讨人参皂苷Rh2(G-Rh2)对小鼠前胃癌系(MFC)细胞增殖的抑制作用及其机制。方法分别对MFC正常细胞组和G-Rh2(3、10、30mg.L-1)组经MTT法检测MFC细胞活性;倒置显微镜和Hoechst33258荧光染色观察凋亡细胞形态;AnnexinV-FITC双染法分析G-Rh2对细胞凋亡率的影响;分别对MFC正常细胞组、G-Rh2(10mg.L-1)处理不同时间(30min、1、2、4h)组、SP600125(5μmol.L-1)预处理2h+G-Rh2(10mg.L-1)不同时间(30min、1、2、4h)给药组经MTT法检测MFC细胞活性;Westernblot法检测G-Rh2(10mg.L-1)处理不同时间(5、15、30、45min、1、2、4h)组p-JNK(c-JunN-terminalkinase1)激酶和p-c-jun在MFC细胞中的活性,免疫细胞化学染色法检测caspase-3阳性细胞的表达率。结果G-Rh2对无血清MFC细胞有明显细胞毒活性,呈时间和剂量依赖关系;能明显诱导细胞皱缩,核染色质固缩,核碎裂,形成大约为180～200bp或其多聚体组成的寡核苷酸片断,凋亡细胞比率上升。G-Rh2处理后4h内,p-JNK激酶和p-c-jun活性持续升高,此过程可被预处理2h的SP600125(5μmol.L-1)部分抑制。结论人参皂苷G-Rh2可诱导MFC细胞凋亡,其作用机制之一可能是通过激活JNK信号传导途径,并最终增加caspase-3的激活而完成。     

人参次苷H滴丸定性与定量方法研究

目的:建立人参次苷H滴丸质量控制方法。方法:采用薄层色谱法同时鉴别人参皂苷Rh1和Rh2;采用香草醛冰醋酸-高氯酸比色法测定总皂苷含量;采用高效液相色谱法测定人参皂苷Rh1和Rh2含量。结果:人参皂苷Rh1和Rh2样品分离较好,薄层色谱斑点清晰;总皂苷含量测定的平均回收率为98.81%,线性范围为0.056~0.448 mg.mL-1;人参皂苷Rh1线性回归方程y=6 462.7x+2.073 5,当进样量在0.208~4.16μg范围内,与其峰面积呈线性,r=0.9997;人参皂苷Rh2线性回归方程y=9867.2x+0.1204,当进样量在1.148~22.96μg范围内,与其峰面积呈线性,r=0.999 9。结论:建立的人参次苷H滴丸质控方法准确、专属性及重现性好且快速简便,可用于该制剂的质量控制。     

用含人参提取物或人参皂苷的制剂治疗癌症、过敏性疾病等

本品由人参提取物或其皂苷[人参炔三醇，人参环氧炔醇，人参炔醇，人参皂苷Rc、Rb1，20(S)-人参皂苷Rg3，20(R)-人参皂苷Rg3，20(S)-人参皂苷Rh2，20(R)-人参皂苷Rh2，20(R)-原人参萜二醇，20(S)-原人参萜三醇，20(S)-人参皂苷Rh1和20(S)-原人参萜三醇]及载体组成。     

人参皂苷Rh2对高脂膳食大鼠心肌缺血再灌注时内皮祖细胞的影响

目的观察人参皂苷Rh2对高脂膳食大鼠心肌缺血再灌注(IR)时内皮祖细胞数量的影响。方法健康成年雄性SD大鼠,体重180~240 g,高脂饲料喂养24周后,随机分为缺血再灌注组(GIR组)、人参皂苷Rh2组(Rh2组)、假手术组(GS组),另设正常对照组(N组),给予基础饲料喂养24周。每组6只,记录各组大鼠体重。在高脂饲养基础上,采用结扎冠状动脉左前降支30 min,再灌注120 min的方法建立心肌缺血再灌注模型,GS组只穿线不结扎。Rh2组大鼠于缺血再灌注前30 min腹腔注射人参皂苷Rh2 10 mg/kg,GS组、GIR组大鼠于术前30 min腹腔注射等体积生理盐水。于再灌注120 min后处死大鼠,测定血脂水平以及血清血管内皮生长因子(VEGF)水平,流式细胞仪计数大鼠外周血内皮祖细胞(Endothelial progenitor cells,EPCs)的数量。结果喂养24周后,与正常对照组比较,其余组大鼠体重与血脂水平均升高(P<0.05),假手术组大鼠外周血EPCs数量与血清VEGF水平较正常对照组稍有下降,差异有统计学意义(P<0.05);与假手术组比较,缺血再灌注组与人参皂苷Rh2组大鼠外周血内皮祖细胞数量及血清VEGF水平均有升高,且人参皂苷Rh2组升高更为显著(P<0.05)。结论人参皂苷Rh2可增加高脂膳食大鼠心肌缺血再灌注后外周血内皮祖细胞数量,从而减轻心肌缺血再灌注损伤,可能与提高血清VEGF水平相关。     

人参皂苷Rh2调控微小RNA-133a-3p对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响

目的 探讨人参皂苷Rh2调控微小RNA(miR)-133a-3p对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)凋亡的影响.方法 用浓度为50、100、200 mg/L的人参皂苷Rh2培养KF,未给人参皂苷Rh2的KF记为对照(NC)组;将miR-NC、miR-133a-3p分别转染至KF中记为miR-NC组、miR-133a-3p组;将...     

人参叶中人参二醇组皂苷降解转化为人参皂苷Rg_3和Rh_2的工艺考察

目的研究人参叶中人参二醇组皂苷降解转化为人参皂苷Rg3、Rh2的最佳工艺,以适应工业化生产的需要。方法用均匀设计法优化降解工艺条件,采用HPLC法测定人参皂苷Rg3、Rh2的含量。结果最佳降解工艺条件为体积分数60%的乙酸、55℃降解1 h。结论该工艺合理、可行,适用于工业化大生产。     

黑曲霉Aspergillus niger对人参皂苷Re的微生物转化

目的：筛选长白山人参土壤中的活性微生物,转化单体人参皂苷产生稀有人参皂苷成份。方法：从长白山人参根际土壤中分离各类菌株,对单体人参皂苷Re进行微生物转化,通过硅胶柱层析等方法对转化产物进行分离纯化,采用波谱解析及理化常数对其进行结构鉴定。结果：从长白山人参根际土壤中分离各类真菌菌株68株,3株真菌对三醇组人参皂苷Re具有转化作用,其中黑曲霉Aspergillusniger的转化活性较强,转化产物为人参皂苷Rg1、Rg2和Rh1。结论：首次报道黑曲霉能将人参皂苷Re转化为人参皂苷Rg1、Rg2和Rh1这一转化过程。     

S型与R型人参皂苷Rh2诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的体外研究

目的探讨人参皂苷Rh2(S型与R型)能够诱导人肺腺癌A549细胞凋亡。方法采用MTT实验测定细胞增殖能力;台肦蓝染色法检测细胞存活率;碘化丙啶(PI)单染流式细胞仪分析细胞周期中各时期的细胞百分数;电镜观察细胞凋亡。结果 30μg/mL的S型和R型人参皂苷Rh2作用于A549细胞48h后,死亡率均明显高于正常组细胞(P<0.05);20(S)-Rh2能阻滞细胞周期于G1期,并且2(S)-Rh2型的抗肿瘤活性明显强于20(R)-Rh2;电镜结果显示染色质浓集、断裂,核固缩并出现凋亡小体。结论 S型和R型人参皂苷Rh2均具有促进A549细胞凋亡的生物学功能。     

HPLC法测定人参毛状根及不同人参样品中9种人参皂苷的含量

目的采用HPLC法测定不同人参样品中9种人参皂苷(Rc、Rb1、Rb2、Re、Rd、Rg1、Rg2、Rg3和Rh2)的含量。方法色谱条件:Zorbax SB C18柱(4.6mm×250mm,5μm),保护柱Extend-C18柱(4.6mm×12.5mm,5μm);以乙腈-水为流动相,梯度洗脱;流速:1.0ml/min;检测波长:203nm;柱温:35℃。结果 9种人参皂苷Rg1、Rb1、Re、Rc、Rg2、Rh2、Rg3、Rb2和Rd在120min内基线分离。方法学表明其线性关系良好,精密度、稳定性和重复性RSD均小于2.0%,加样回收率在98.3%~102%之间。测得人参叶和人参须根中的总皂苷含量最高,分别为48.9、23.6mg/g;人参毛状根中的总皂苷与人参主根和人参果的总皂苷含量差别不大,为7.47mg/g。结论该法准确性高,操作简便、快速,重复性好,精密度高,可用于不同人参样品中9种人参皂苷的含量测定。     

人参皂苷Rg1的微生物转化研究

论文首次报道了利用49种微生物菌株对人参皂苷Rg1进行生物转化研究,发现小型丝状真菌黑曲霉(Aspergillus niger 3．1858)与蓝色梨头霉(Absidia coerulea 3．3538)具有转化能力。经正交试验优化转化条件,放大培养,制各得到产物MT1与MT2,经化学与波谱技术鉴定,MT1与MT2为同一产物即人参皂苷Rh1。运用TLCS方法探索了真菌体系中底物人参皂苷Rg1与转化产物人参皂苷Rh1的生物转化动力学曲线。     

siRNA-DAD1联合人参皂苷Rh 2对肝癌SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨基因沉默DAD1 联合人参皂苷Rh2 对肝癌细胞增殖和凋亡的作用机制。方法　化学合成siRNADAD1,然后转染肝癌SMMC-7721 细胞,分别采用Q-PCR 和Western blot 检测DAD1 的mRNA 及蛋白表达水平变化,CCK-8 法检测肝癌SMMC-7721 细胞增殖能力的改变,DNA Ladder 法和流式细胞术检测肝癌SMMC-7721 细胞凋亡的变化。结果　siRNA-DAD1 可下调肝癌SMMC-7721 细胞中DAD1 的mRNA 及蛋白表达水平;siRNA-DAD1 与人参皂苷Rh2 均具有抑制SMMC-7721 细胞增殖的能力,并促使其发生凋亡,二者联合作用效果更好（P<0.05）。结论　siRNADAD1可下调肝癌SMMC-7721 细胞中DAD1 的mRNA 和蛋白表达水平,与人参皂苷Rh2 协同抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖并促进其凋亡。     

人参皂苷Rh2和Rg3对胃癌细胞增殖和侵袭的影响

目的：探讨人参皂苷Rh2和Rg3在免疫微环境中通过调节程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)对胃癌细胞增殖和侵袭的影响。方法：将胃癌细胞MGC-803分为三组,即对照组、Rh2+Rg3组(采用40μg/mL混合有人参皂苷Rh2和Rg3的培养基)和Rh2+Rg3+PD-L1组(将转染PD-L1载体质粒以3×10³的密度经过质量浓度为40μg/mL的人参皂苷Rh2和Rg3处理)。采用定量反转录聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测PD-L1的表达;采用Annexin-V检测胃癌细胞MGC-803的凋亡情况;采用EdU方法检测胃癌细胞MGC-803的增殖情况;采用Transwell检测胃癌细胞MGC-803的迁移和侵袭情况。结果：Rh2+Rg3组的PD-L1 mRNA和蛋白的表达水平明显低于对照组,Rh2+Rg3+PD-L1组的PD-L1 mRNA和蛋白的表达水平明显高于Rh2+Rg3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Rh2+Rg3组的细胞凋亡率明显高于对照组,Rh2+Rg3+PD-L1组的细胞凋亡率明显低于Rh2+Rg3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。R...     

人参皂苷对电压门控离子通道的影响

离子通道是细胞膜和细胞器膜等生物膜上一类允许离子通透的蛋白质。许多离子通道,如大多数钠通道、钾通道、钙通道和部分氯通道受电压门控调节,这些电压门控离子通道具有广泛的生理功能。人参皂苷是中药人参、西洋参和三七等五加科人参属植物的主要活性成分,包括Ra1,Ra2,Rb1,Rb2,Rb3,Rc,Rd,Rg3和Rh2等原人参二醇,以及Re,Rf,Rg1,Rg2和Rh1等原人参三醇等。本文综述了人参皂苷多种成分对各种电压门控钠通道、钾通道、钙通道和氯通道的不同作用特点及可能的机制,提示人参皂苷多种成分不仅能直接作用于电压门控离子通道,还可以通过G蛋白和一氧化氮等信号通路途径,间接影响电压门控离子通道功能。     

高效液相色谱法同时测定人参皂苷Rg1、Rh1的含量

目的同时测定提取三七总皂苷后的母液中人参皂苷Rg1、Rh1的含量.方法采用反相高效液相色谱法测定三七总皂苷中人参皂苷Rg1,Rh1的含量.色谱柱Merck Li Lichro CART(r)C18(125 mm×4 mm,5μm,德国).流动相乙腈-水(1981、1981、4060、1981和1981)用80min的时间梯度洗脱.流速1 ml/min,检测波长为203 nm,柱温35℃.用外标法计算.结果三七总皂苷母液中人参皂苷Rg1的含量为23.07%,平均回收率为100.03%,RSD为0.49%;人参皂苷Rh1的含量为12.05%,平均回收率为98.718%,RSD 0.42%.结论提取三七总皂苷后剩余的母液中人参皂苷Rg1、Rh1的含量仍然很高,有很好的回收利用价值.     

人参炮制对其化学成分和药理作用的影响

目的:探究炮制对人参化学成分和药理作用方面的影响,为其新的炮制品研发奠定基础。方法:查阅中国知网、万方数据库、维普数据库等收录的近20年有关人参及炮制品化学成分和药理作用研究的文献资料,进行总结和综述。结果:人参炮制方法多样,炮制品以生晒参和红参为主。在人参加工成红参过程中,产生红参的特有成分,包括人参皂苷Rh2、20-(R)-人参皂苷Rh1、20-(S)-人参皂苷Rg3、20-(R)-人参皂苷Rg2、人参皂苷Rs1、人参皂苷Rs2、麦芽酚、人参炔三醇和人参炔二醇等;炮制使人参在抗肿瘤、抗疲劳、抗衰老、抗肝毒及促进组织血液循环方面的活性增强。结论:人参在加工过程中不但使各类成分发生转化,而且生成活性更强的新化合物,但是目前并没有彻底解决其副作用问题。应根据中医传统理论和临床应用的需要,结合中药炮制学理论,研制新的人参炮制品,使其既能体现中医辨证施治精髓,又制约其副作用,提高临床应用安全性。