心脏移植大鼠自发免疫耐受模型中CD4+ CD25+Treg与FOXP3的变化

目的行Wistar(供体)到SD(受体)大鼠的腹部异位心脏移植建立自发免疫耐受模型,探讨CD4 CD25 Treg与FOXP3在同种异体心脏移植大鼠自发免疫耐受形成过程中的作用。方法以光镜、电镜观测移植心肌的病变特点、以流式细胞术检测外周血CD4 CD25 T淋巴细胞数量变化、RT-PCR检测其功能基因FOXP3的表达情况。结果CD4 CD25 T淋巴细胞在对照组中无明显变化,在心脏移植组(实验组)中CD4 CD25 T淋巴细胞术后第1天开始上升,第3天[(6.07±1.55)]达峰值,第5天[(5.44±1.47)]、第7天[(3.35±0.46)]逐渐下降,术后第3,5天明显高于对照组(P<0.05);FOXP3在对照组中无明显表达,在实验组中术后第3、5天表达明显,第7天表达下降。移植心脏的心肌病理改变在第1,3天逐渐加重,第5天时病变最重,第7天减轻,第7天移植心脏排斥反应减轻提示移植心脏产生免疫耐受。结论心脏移植大鼠自发免疫耐受模型中CD4 CD25 T与FOXP3均上调。且基本与移植心脏排斥反应呈负相关,提示CD4 CD25 T细胞的数量与功能变化可能参与自发免疫耐受的形成。     

正常妊娠外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞和雌二醇水平变化的研究

目的 探讨外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率和雌二醇水平在正常妊娠整个过程中的变化.方法 采用三色荧光标记流式细胞术检测正常非妊娠健康女性(对照组),早早孕组、早孕组、中孕组、晚孕组各35例妇女外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率;采用电化学发光酶免分析技术分别检测以上各对象外周血雌二醇水平.结果 对照组和早早孕组外周血雌二醇水平明显低于早孕组、中孕组、晚孕组(P＜0.05),并且随孕周增大而升高(P＜0.05);对照组和早早孕组外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率明显低于早孕组、中孕组、晚孕组(P＜0.05),并且随孕周增大而升高(P＜0.05),晚孕组略低于中孕组,但无统计学意义(P＞0.05).结论 正常妊娠过程孕8周左右之后CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率和雌二醇水平均呈现明显升高,并且随孕周增大而升高,正常的CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞百分率和外周血雌二醇水平在维持正常妊娠过程中发挥重要作用.     

应用CD4+CD25+Treg细胞诱导大鼠肾移植免疫耐受的研究

目的 应用供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞诱导移植免疫耐受,抑制大鼠肾移植慢性排斥反应.方法 以SD、Wister大鼠分别为供、受体建立同种异体肾移植慢性排斥反应动物模型;受体脾细胞悬液同供体肾组织抗原孵育培养,诱导获得对供体抗原的特异性;采用MACS法分选具有供体抗原特异性的CD4 CD25 T细胞,FACS流式细胞法检测分选的CD4 CD25 T细胞及CD4 CD25 Treg细胞纯度;获得之供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞于同种异体肾移植术后2、4、6、8、10周,分别经尾静脉注射入受者体内(实验组,n=12),选取未注射组为对照(n=12).观察两组移植肾脏存活时间;术后第10、40、80天MTT法检测比较两组受体脾细胞对供体抗原刺激反应程度;术后第10、20、40、60、80天分别监测各组血肌酐水平.结果 FACS流式细胞法检测分选的CD4 CD25 T细胞得率为4.13%,分离纯度为73.34%;CD4 CD25 Treg细胞纯度为65.22%.所分选之CD4 CD25 Treg细胞成功获得供体抗原特异性,对供体抗原的抑制率(IR)为85.4%.移植肾存活时间:治疗组移植肾存活时间为(98.83±6.66)d,显著长于对照组的(78.25±4.71)d,组间差异有统计学意义(P＜0.05);术后第40、80天治疗组脾细胞对供体抗原刺激反应程度均明显低于对照组,两组间差异有统计学意义(P＜0.05).术后第20、40、60、80天对照组血肌酐指标明显高于治疗组,同治疗组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 供体抗原特异性CD4 CD25 Treg细胞可特异性抑制受体对供体抗原的免疫反应,有效抑制了移植肾慢性排斥反应的发生.     

Ⅳ期恶性肿瘤患者外周血CD4~+CD25~+FOXP3~+Treg细胞的测定

目的通过检测Ⅳ期恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg(Treg)细胞的情况,探讨Ⅳ期肿瘤患者免疫功能状态。方法选择本院肿瘤科收治的99例Ⅳ期恶性肿瘤患者和16例健康对照组,均在接受化疗前空腹抽取外周血样本并在流式细胞仪上做Treg细胞的测定。结果Ⅳ期恶性肿瘤患者外周血Treg细胞百分比水平为(9.99±7.73)%,健康对照组为(11.93±9.78)%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);若以患者的Treg细胞百分比平均值10%为基线,发现全组病例只有36.36%(36/99)的患者外周血Treg细胞百分比高于基线水平。结论Ⅳ期恶性肿瘤患者外周血Treg细胞整体水平低于健康人群;但部分病例存在百分比增高现象。     

CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞及其功能性分子FGL2在自身免疫性肝炎中的作用和机制研究

目的：：探讨CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞及其功能性分子FGL2在自身免疫性肝炎中的作用和机制研。方法：通过流式细胞术检测外周血中CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的比例,ELISA法检测血浆中FGL2的表达水平,全自动生化仪检测患者肝功能。结果：经比较,研究组患者外周血中的CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例明显减少（p＜0.05）;经免疫抑制剂治疗后,研究组患者血浆中的FGL2水平（11.65±2.34 ng/ml）低于治疗前（21.08±2.05 ng/ml）及正常对照组患者（14.92±2.43 ng/ml）（p＜0.05）;随着肝炎严重程度的增加,血浆中FGL2水平也逐渐升高。结论：CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞及其功能性分子FGL2可能参与了自身免疫性肝炎疾病的发生和发展,这将可能成为治疗免疫性肝炎的一条新的免疫调控治疗路径。     

CD4+CD25+Treg细胞在复发性自然流产中的作用及意义

目的 探讨复发性自然流产患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达特点及其相关临床意义。方法 选取2015年3月至2017年7月在我院妇产科就诊的复发性自然流产妇女100例作为复发性自然流产组(RSA组),另选择同期在我院妇产科就诊的正常妊娠产妇50例作为对照组(正常妊娠组)。采用流式细胞术检测两组外周血CD4+CD25+Treg细胞表达水平,并对两组结果进行比较分析。结果 复发性自然流产组CD4+CD25+Treg细胞表达水平为(5.06±1.35)%,显著低于正常妊娠组的(10.43±2.59)%(P0.05)。结论 复发性自然流产患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达水平较正常孕产妇显著降低,提示CD4+CD25+Treg细胞参与了复发性自然流产的发生、发展过程。通过检测CD4+CD25+Treg细胞表达水平变化可为复发性自然流产的发病机制提供新的思路,为临床诊疗提供更多的治疗方法。     

CD4+CD25+Treg细胞在人类疾病中的研究进展

免疫系统的稳态控制对机体至关重要,它既要有能够识别外来抗原或病原体并将其清除的能力,也要具有识别自身抗原并诱导自身免疫耐受的机制。1995年Sakaguchi等[1]首次报道调节性T细胞(CD4 CD25 Treg)后即引起广泛关注。目前认为调节性T细胞在诱导和维持外周免疫耐受中具有重要的作用。现今世界各国的多家实验室致力于调节性T细胞的研究工作,并有许多成果发表。研究证实CD4 CD25 Treg细胞功能受损与人类某些疾病的发生密切相关,如自身免疫性、感染性、过敏性疾病及癌症等。我们就CD4 CD25 Treg在人类疾病中的作用进行综述。一、CD4 C…     

供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg对心脏移植小鼠体内B细胞功能的影响

目的 观察供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg对同种异系心脏移植小鼠受体B细胞功能的影响.方法 以Balb/c小鼠为供体、C57bl/6小鼠为受体建立小鼠心脏移植模型,于术前1 d、术后2周分别将供体抗原特异性的CD4+CD25+Treg (1×106)于尾静脉注入受体体内,术后1个月抽取小鼠外周血,分离B细胞,检测其在抗IgM抗体刺激下的增殖情况,检测小鼠外周血IgG、IgA水平,以判断应用CD4+CD25+Treg后小鼠体内B细胞功能状态.实验组:术前、术后2周使用CD4+CD25+Treg(n＝8);阳性对照组:术前、术后未使用CD4+CD25+Treg(n＝8);空白对照组:未移植小鼠(n＝8).结果 实验证实,实验组B细胞增殖水平最低,空白对照组其次,阳性对照组最高,3组差异均有统计学意义(P<0.05).外周血IgG、IgA水平检测证实,实验组与空白对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),二者明显低于阳性对照组(P<0.01).结论 经尾静脉注入CD4+CD25+Treg后心脏移植受体体内B细胞的功能可明显受到抑制,CD4+CD25+Treg可通过对B细胞的这一作用调节受体免疫状态,从而达到控制排斥反应,诱导免疫耐受的作用.     

CD4+CD25+FOXP3+Treg对乙型肝炎病毒宫内感染的影响

目的探讨CD4+CD25+Foxp3+Treg的表达水平对乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染的影响。方法将109例HBsAg阳性无其他妊娠合并症孕妇按新生儿脐血HBsAg检测结果分为2组:HBsAg阳性表达为研究组,HBsAg阴性表达为对照组。采集孕妇外周血及其分娩新生儿脐血,运用流式细胞仪检测CD4+CD25+Foxp3+Treg的表达水平,ELISA法检测I-10、TGF-β1含量。结果新生儿脐血HBsAg阳性12例,宫内感染率为11.01%。研究组孕妇外周血及其新生儿脐血CD4+CD25+Foxp3+Treg的表达水平、I-10和TGF-β1含量均明显高于对照组(P<0.001);研究组与对照组孕妇外周血及分娩新生儿脐血CD4+CD25+Foxp3+Treg表达水平与I-10、TGF-β1分泌水平均无明显相关性(P>0.05)。结论HBV宫内感染孕妇及其新生儿CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达水平明显升高,可能是HBV宫内感染的危险因素。 更多还原     

自身免疫调节因子对CD4+CD25+Treg细胞的影响

目的：观察自身免疫调节因子（AIRE）对CD4+CD25+Treg细胞的影响,探讨其在外周免疫耐受中的作用及机制。方法：pEGFPC3-AIRE质粒通过脂质体介导转染RAW264.7细胞;通过流式细胞术检测CD4+CD25+Treg细胞的数量;采用半定量RT-PCR法检测Foxp3和转化生长因子β（TGF-β）mRNA的表达;采用ELISA法检测TGF-β1水平。结果：AIRE转染的RAW264.7细胞可直接或间接诱导CD4+CD25+Treg细胞的产生及Foxp3 mRNA表达增强(P<0.05)。结论：表达在外周抗原提呈细胞（APCs）上的AIRE可直接和（或）间接影响CD4+CD25+Treg细胞的诱导产生及功能,从而可能在外周免疫耐受中发挥重要作用。     

多发性硬化患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞FOXP3 mRNA的表达及临床意义

目的探讨多发性硬化（MS）患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数量以及叉头样转录因子（FOXP3）表达水平及其临床意义。方法（1）按Poser诊断标准结合头颅MRI增强扫描,排除合并其他神经系统疾病和免疫系统疾病,选择临床确诊和临床可能的MS患者53例（男15例,女38例）。所有患者近期均未行特殊免疫治疗。以统一标准进行登记临床评价、扩展的残癌状态评分;以健康体检者作为对照组,共51例（男14例,女37例）;（2）流式细胞仪检测外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数量的变化;（3）免疫磁珠分离出CD4^＋CD25^＋T细胞,RT-PCR法检测CD4^＋CD25^＋T细胞FOXP3 mRNA的表达,并进行半定量分析。结果（1）MS患者外周血中CD4^＋CD25high T细胞数量与正常组比较没有明显变化（P〉0.05）,但在活动期低于正常组,且差异有统计学意义（P〈0.05）;（2）同一个体在疾病活动期外周血中CD4^＋CD25 high T细胞数量较非活动期减少（P〈0.05）;（3）MS患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞的FOXP3 mRNA表达降低（P〈0.05）,在活动期降低更明显（P〈0.01）。结论（1）就总体而言MS患者外周血CD4^＋CD25 high T细胞数量变化不明显,但CD4^＋CD25 high T细胞抑制活性降低,FOXP3 mRNA表达减少且与MS疾病活动性有关;（2）就个体而言MS患者外周血中CD4^＋CD25 high T细胞数量与疾病的活动性有关。     

前列腺癌患者外周血CD4 + CD25+调节性T细胞及FOXP3 mRNA的表达及临床意义

[摘要] 目的 探讨CD4 + CD25 +调节性T细胞和FOXP3在前列腺癌发病过程中的作用。方法 应用流式细胞术检测30例前列腺癌、40例前列腺增生患者及20例健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+ CD25+ 调节性T细胞占CD4 +T细胞的比例, 应用RT-PCR技术检测人外周血PBMC FOXP3基因的表达。结果 前列腺癌患者外周血PBMC中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例高于前列腺增生患者和健康志愿者,前列腺增生患者和健康志愿者之间差异无统计学意义（P>0.05）;前列腺癌患者外周血PBMC中FOXP3 mRNA的表达水平高于非肿瘤患者表达水平( P < 0.05) , 前列腺增生患者和健康志愿者之间差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 CD4+CD25+调节性T细胞及其特异标志物FOXP3在维持自身免疫稳定的同时对肿瘤免疫具有抑制作用, 该细胞群比例的增加可能参与前列腺癌的发生。 结论: CD4+CD25+调节性T细胞及其特异标志物FOXP3在维持自身免疫稳定的同时对肿瘤免疫具有抑制作用, 该细胞群比例的增加可能参与前列腺癌的发生。     

CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞在成人免疫性血小板减少症中的意义

目的 :探讨CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(Treg)在成人免疫性血小板减少症(ITP)发病及发展中的意义。方法 :采集26例成人ITP患者和20例正常对照者外周血标本,应用流式细胞术检测正常对照组及ITP患者治疗前后的CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的比例,并将正常对照组与ITP组及ITP组治疗前后的Treg细胞进行比较。结果 :ITP组(治疗前)较对照组CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞下降,差异有统计学意义(P<0.05);ITP组经治疗后18例有效,8例无效,有效组治疗后CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞明显上调(P<0.05);治疗无效组治疗后Treg细胞的比值较前无明显统计学意义(P>0.05)。结论 :ITP的发病可能与CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的比例下调相关,治疗有效后Treg细胞的失调会得到改善,改善Treg细胞的功能并增加其数量可能是一个新的治疗方法。     

CD4~+CD25~+FOXP3~+Treg细胞在高危多发性骨髓瘤治疗中预测复发及治疗意义

目的 探讨CD4+CD25+FOXP3+调节性T淋巴细胞(Treg)在高危多发性骨髓瘤治疗中预测复发及治疗意义。方法 选择2018年3月至2019年3月我院收治的126例高危多发性骨髓瘤患者为病例组,同期在我院体检健康者100例为对照组,比较病例组和对照组不同化疗疗效、不同复发情况患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例,用Spearman相关性分析CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例与患者复发的相关性,用受试者工作特征曲线(ROC)分析CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例预测患者复发的价值,并进行CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例不同患者随访期间无进展生存的Kaplan-Meier分析。结果 病例组CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例远高于对照组(P0.001);化疗无效患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例远高于化疗有效患者(P0.001);复发患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例远高于未复发患者(P0.001);CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例与患者复发呈正相关(P0.05);CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例预测患者复发的AUC(95%CI:0.759～0.856)为0.809,敏感性为62.80%,特异性为95.80%,准确性为89.30%,截断值为3.66%。CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例3.66%组随访期间无进展生存率显著低于CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例3.66%组(P0.05)。结论 CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例在高危多发性骨髓瘤患者外周血中呈上升状态,其水平检测对于化疗后复发有一定预测价值,有助于临床预测化疗效果、监测早期复发及预后判断。     

体外诱导扩增CD4＋ Treg细胞诱导大鼠心脏移植免疫耐受

目的探讨体外扩增CD4＋ T细胞对大鼠心脏移植的长期存活影响。方法采用磁珠分离供体大鼠CD4＋ T细胞并体外扩增,流式细胞法分析其表型变化,同时输注给受体大鼠后监测心脏移植大鼠的存活及移植心脏的病理变化。结果CD4＋ T细胞体外扩增后细胞表达CD4＋CD25＋,输注给受体大鼠能够明显抑制免疫排斥反应,而对照组免疫排斥反应强烈,证实体外诱导扩增的CD4＋ T细胞能够诱导移植器官的免疫耐受。结论体外诱导扩增的CD4＋ T细胞为iTregs胞,具有诱导器官移植免疫耐受功能。     

川崎病患儿外周血中FOXP3 mRNA表达与CD4~＋CD25~＋调节性T细胞的变化

目的探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在川崎病（KD）发病机制中作用。方法 32例KD患儿为研究对象,以年龄匹配的30名儿童作为对照组（其中15例急性呼吸道感染的发热患儿为非KD发热组,15名健康体检儿童为健康组）,KD患儿分别于静注丙种球蛋白（IVIG）治疗前和静注IVIG治疗后热退2～3 d取外周血用流式细胞仪测CD4＋CD25＋调节性T细胞,并用RT-PCR测定外周血单个核细胞（PBMC）叉头/翼状螺旋转录因子（FOXP3）mRNA的表达水平。结果急性期KD患儿外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞比例与对照组相比均显著降低（P〈0.01）,而IVIG治疗后热退2～3 d,其比例显著升高,接近于正常水平,而外周血PBMC FOXP3 mRNA表达水平也出现同样的改变。结论 CD4＋CD25＋调节性T细胞可能参与了KD的发病机制。     

CD4+CD25+Foxp3+Treg在子痫前期患者外周血中表达的意义及与妊娠结局的相关性分析

目的 分析CD4+CD25+叉头框蛋白3(Foxp3)+调节性T淋巴细胞(Treg)在子痫前期(PE)患者外周血表达中的意义及与妊娠结局的相关性。方法 选取2020年1月～2023年1月收治的112例PE患者为疾病组,另根据年龄、孕周匹配选取健康孕妇60例为健康组。疾病组中根据疾病严重程度分为轻度组与重度组。比较外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg水平差异及不良妊娠结局发生率。疾病组根据是否存在妊娠不良结局分为不良组与良好组。对比良好组与不良组患者临床资料。Logistic回归分析影响PE患者不良妊娠结局的因素。Spearman相关性分析法分析CD4+CD25+Foxp3+Treg与不良妊娠结局的相关性。结果 疾病组、轻度组、重度组CD4+CD25+Foxp3+Treg百分比均低于健康组,不良妊娠结局发生率均高于健康组(P<0.01)。疾病组、重度组CD4+CD25+Foxp3+Treg百分比均低于轻度组,不良妊娠结局发生率高于轻度组(P<0.01),重度组CD4+CD25+Foxp3+Treg百分比低于疾病组,不良妊娠结局发生率高于疾病组(P<0.01)。不...     

人 CD4+T细胞在肠道细菌抗原刺激前后CD25与FOXP3的表达

目的：探讨新鲜分离及自身肠道菌群抗原刺激后的人外周血CD4^＋T细胞CD25和FOXP3表达的相关性及变化规律．方法：分离人的外周血单核细胞和淋巴细胞，单核细胞经自身肠道菌群抗原刺激后与淋巴细胞混合培养，新鲜分离及混合培养14d的淋巴细胞用三色流式细胞术在单细胞水平同时检测CD4，CD25和FOXP3的表达．结果：新鲜分离的淋巴细胞约43．4％表达CD4，在CD4^＋T细胞中，约5．8％表达CD25，而高表达的只有1．9％，约5．2％表达FOXP3，CD25和FOXP3均表达的占3．3％，CD25^hi FOXP3^＋细胞占1．6％，CD4^-细胞几乎不表达FOXP3．经抗原刺激后，淋巴细胞总数均轻度增加（与未刺激组比较，平均增加21．0％，P〈0．001）．CD4^＋细胞的比例均明显上升（67．1％vs43．4％，P〈0．001），CD25^＋，FOXP3^＋及CD25^＋FOXP3^＋细胞的比例变化不大．CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞占CD4^＋CD25^＋T细胞的比例及CD4^＋CD25^hi FOXP3^＋T细胞占CD4^＋CD25^hiT细胞的比例在所有研究对象中均呈下降趋势（前者从59．8％降到52．0％，后者从86．3％降到77．9％，均P〈0．05）．结论：CD25和FOXP3的表达具有一定的相关性，但CD25及CD25^hi均不能很可靠地标记人类的调节性T细胞，尤其是在淋巴细胞受到抗原刺激以后．肠道菌群抗原作为外来抗原刺激自身的淋巴细胞后，活化增殖的细胞中主要是CD4^＋CD25^＋FOXP3^-反应性T细胞，而不是CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞．     

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与肝移植免疫耐受

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞因其独特的免疫抑制功能而备受关注,在诱导和维持移植免疫耐受方面具有重要的作用。肝脏具有移植免疫特性．但肝移植术后如何避免排斥反应、诱导免疫耐受、提高存活率这一问题仍尚未解决。CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在肝移植免疫耐受中具有重要的作用。本文即从CD4^＋CD25^＋调节性T细胞入手,对其在肝移植排斥反应与免疫耐受中的作用加以综述。