碳青霉烯类抗生素的高效液相色谱峰形研究Ⅰ.帕尼培南色谱峰的展宽和裂分

由于帕尼培南在水溶液中以一对构象异构体 (约 1∶1 )的形式存在 ,因此在某些色谱系统中 ,因构象异构体在色谱过程中相互间转化的速率较低 ,导致帕尼培南峰展宽甚至裂分 ,并与有关物质的分离较差。本文定性地研究了柱温、pH、流速、硅胶、固定相和对离子等对帕尼培南峰形和构象异构体分离的影响。结果显示 ,提高柱温或pH ,流动相中添加荷正电的对离子 ,均可改善帕尼培南峰形 ;反之 ,降低柱温或 pH ,增加流速 ,流动相中添加荷负电的对离子 ,均有利于构象异构体的分离。硅胶对构象异构体具有分离能力。在此研究基础上初步提出了适用于注射用帕尼培南含量测定的HPLC系统。     

HPLC法测定亚胺培南的有关物质

目的：建立亚胺培南有关物质的测定方法。方法：采用Hypersil ODS 250mm 4．6mm（5μm）色谱柱,A相（0.01mol／L磷酸二氢钾溶液）-B相（甲醇）为流动相,梯度洗脱,检测波长300nm,柱温为室温。结果：亚胺培南自身对照溶液在供试品溶液0．2％～1．2％浓度范围内呈线性,硫霉素峰和亚胺培南峰的分离度大于4．0。结论：该方法灵敏度高、专属性强、结果准确可靠,可用于亚胺培南有关物质的检查。     

高效液相色谱法测定亚胺培南的有关物质

目的建立高效液相色谱法测定亚胺培南的有关物质。方法采用主成分自身对照法,色谱柱为SHISEDOC18 AQ柱（4．6mm×250mrn,5μm）;以磷酸盐缓冲液（pH7．3）-乙腈（99．3：0．7）为流动相A,磷酸盐缓冲液（pH7．3）-乙腈（75：25）为流动相B,梯度洗脱;检测波长210nm。结果亚胺培南主峰与各杂质峰分离完全,最低检测限为0．5ng。结论该法专属性强,准确,灵敏,可用于亚胺培南有关物质的检查。     

伏立康唑对映体的手性高效液相色谱分离

目的:采用氨基酸衍生物基团键合硅胶手性分离柱Chiralcel OD-RH(150×4．6 mm,5μm)对伏立康唑手性对映体进行分离。方法:以Chiralcel OD-RH(150×4．6 mm,5μm)手性色谱柱为分析色谱柱,流动相为0．2 mol·L-1磷酸二氢钾溶液-乙腈(68:32),柱温25℃,检测波长为256 nm,流速为0．5 ml·min-1。结果:伏立康唑手性对映体在Chiralcel OD-RH柱上能够达到基线分离。结论:Chiralcel OD-RH对伏立康唑手性对映体有良好的拆分能力,可用于伏立康唑原料中右旋异构体的限度控制。     

反相高效液相色谱梯度洗脱法测定厄他培南钠的含量和有关物质

目的 建立反相高效液相色谱梯度洗脱法测定厄他培南钠含量及有关物质的方法.方法 采用Inertsil ODS C18柱(250mm×4.6mm,5μm),0.01 mol/L乙酸铵溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速为1.0mL/min,柱温25℃,检测波长为230nm.结果 厄他培南在0.17～0.87mg/mL范围内线性关系良好,r=0.9997,最低检测浓度为17ng/mL,噁嗪酮、Promaba、开环降解物和二聚物等有关物质在该色谱条件下均分离良好.结论 本法重现性好,专属性强,可用于测定厄他培南钠的含量和有关物质.     

谈谈HPLC法色谱柱的维护保养

<正>高效液相色谱法最常用的色谱柱填充剂为化学健合硅胶。反相色谱系统使用非极性填充剂,以十八烷基硅烷健合硅胶为常用,正相色谱系统使用极性填充剂,以硅胶常用。它的性能直接影响待测物的保留行为和分离效果。也就是说色谱柱是HPLC的心脏部分,在使用时对其维护和保养是相当重要的,以免出现不良情况。这里就色谱柱的维护保养谈一下。     

麻黄碱类离子液体分离5种药物及其色谱行为影响的研究

目的建立了以麻黄碱类离子液体作为流动相添加剂,分离5种药物的高效液相色谱法（HPLC）。方法通过改变离子液体的浓度、流动相的pH以及改变阴离子组成,考察离子液体对5种药物分离的影响,并在此基础上研究麻黄碱类离子液体在高效液相色谱法中的色谱行为。色谱柱Kromasil C18柱（200mm×4．6mm,5μm）,流动相为甲醇-水-60：40（v／v）,pH=4．0．离子液体5mmol·L^-1。结果所分离的5种药物是关托洛尔、比索洛尔、普萘洛尔、奥美拉唑、酮洛芬。5种药物在此备件下达到完全分离。结论离子液体的阴阳离子均可影响分析物的色谱行为。所采用的离子液体缩短了酸性药物的保留时间。本离子液体可以作为1种潜在的流动相添加剂用于高效液相色谱法中。     

流动相的离子强度对RP-HPLC中抗生素色谱峰形的影响

在反相高效液相色谱(RP-HPLC)过程中,流动相的离子强度可显著影响可解离的化合物如抗生素的色谱峰形,原因在于流动相的离子强度较低时,色谱填料的固定相易于过载,使离子化的化合物的色谱峰形呈典型的过载特征——峰形接近直角三角形。随着进样量的增加,色谱区带中高浓度的前半部的保留时间减少,但色谱区带均在同一时刻结束,色谱峰的拖尾因子及峰宽均显著增加,同时被测物与有关物质间的分离也随之变差。选择合适的缓冲盐并适当地增加流动相的离子强度即可显著改善抗生素的色谱峰形,色谱峰的拖尾因子及峰宽均随之降低,同时被测物与有关物质间也更加易于分离。     

利巴韦林的强酸型阳离子交换高效液相色谱法的研究

目的：研究国产麦科菲高聚物型阳离子交换（磺酸型）高效液相色谱柱（MKF—CIS柱）对利巴韦林分离性能的影响。方法：考察了MKF—CIS柱的基本物理性能以及功能基担载量、填料粒径、柱尺寸、温度等对分析利巴韦林的影响，并将该色谱柱与高聚物型反相色谱柱和常用硅胶C18色谱柱的分析结果做了比较。结果：在各项因素优化的条件下样品分离柱效达到8000，大大超过药典的要求，且MKF—CIS柱在低于美国药典要求的65℃的条件下（室温条件）分析利巴韦林时仍符合药典要求，优于进口色谱柱。不同批次MKF—CIS柱之间重复性良好。结论：国产麦科菲磺酸型色谱柱可代替且优于C18硅胶柱和同类型进口柱用于高效液相色谱法分析利巴韦林。     

离子对凝胶色谱分离头孢菌素中高分子杂质实验条件的选择

以建立Ceftazidime中高分子杂质含量的测定方法为例,对不同离子对试剂、洗脱剂pH对头孢菌素在离子对凝胶色谱中色谱行为的影响,洗脱剂类型、离子对浓度等因素对头孢菌素中高分子杂质的分离效果的影响进行了探讨。 所建立的测定Ceftazidime中高分子杂质的离子对凝胶色谱法为:内径1.3cm、Vt=50ml的Sephadex G-10(粒度40～120μ)凝胶柱:洗脱剂采用pH7.0的0.4mol/L磷酸缓冲液或含0.25mol/L(NH_4)_2SO~4,pH7.0的0.01mol/L磷酸盐缓冲液,洗脱速度为0.5ml/min。上样量为200μl。     

药物分析中C18色谱柱的差异与选择

在药物分析中高效液相色谱法用得非常普遍,而色谱柱的选择直接影响实验结果与药物的质量控制。不同C18色谱柱的保留行为千差万别,选择适宜的色谱柱对分析样品至关重要。以C18色谱柱的内部化学键合相为切入点,介绍C18色谱柱的差异,并综述在不同的pH环境、流动相极性、药物极性等条件下以及根据色谱柱的分类系统选择合适的键合相,为如何正确快速的选择C18色谱柱提供参考。     

探讨液相色谱中部分中药生物碱在SCX柱上的色谱分离行为

目的运用HPLC法以微粒SCX色谱柱对中药中的一些亲水性生物碱成分进行分离分析,并考察它们在SCX柱上的色谱机制.方法选用Spherisorb SCX色谱柱.流动相选用不同离子浓度和pH的磷酸盐溶液,分析麻黄碱类时流动相中加入少量乙腈.测定鲜益母草胶囊中的水苏碱,使君子药材中的胡芦巴碱,半夏露糖浆中的麻黄碱、伪麻黄碱.结果选择适当的色谱条件,以上成分可以分离测定.各成分在SCX柱上除离子交换保留机制外还有其他保留机制.尽管流动相pH变化可影响测定成分的质子化带电情况,但以含盐水溶液为流动相,测定物pKa值无法用于指示流动相pH在何处时其保留因子开始迅速变化(增加).结论 SCX柱可作为C18柱的补充,用于测定中药中一些亲水性生物碱成分,并可提供这些生物碱类成分的指纹图谱信息.     

离子对薄层色谱分离检测氨甲环酸中的顺式异构体

用薄层色谱法分离检测氨甲环酸中顺式异构体的方法,系基于氨甲环酸离子与反离子(四丁铵离子)形成离子对,利用顺、反异构体与之形成的离子对在硅胶上吸附性能的差异,可以正丙醇-水(4:1)展开,而在薄层上完全分离。本法简便、快速、灵敏度高,最低检出量为0.02μg。     

焦谷氨酸对映体的手性高效液相色谱分离

目的:采用大环抗生素游壁菌素键合硅胶手性分离柱 Chirobiotic T 对焦谷氨酸手性对映体进行分离。方法:以 Chirobi-otic T 柱为色谱柱,流动相为甲醇-三乙胺缓冲溶液(醋酸调 pH)体系和甲醇-醋酸-三乙胺极性有机溶剂体系,检测波长为214 nm,考察了焦谷氨酸对映体的分离,并与大环抗生素万古霉素键合硅胶手性分离柱 Chirobiotie V 进行了比较。结果:在甲醇-0.1%三乙胺(80:20,以醋酸调 pH 4.0)为流动相时,焦谷氨酸对映体在 Chirobiotic T 柱上可以实现基线分离,但有系统峰干扰;而甲醇-醋酸-三乙胺极性有机溶剂体系则更利于焦谷氨酸对映体的分离,并可对实际样品进行定量分析,无系统峰干扰。而在这2种条件下,Chirobiotic V 柱无法基线拆分焦谷氨酸对映体。结论:Chirobiotie T 柱对焦谷氨酸手性对映体有很好的拆分能力,可用于实际样品的定量分析。     

液相色谱色谱填料选择性的研究方法

反相液相色谱(RPLC)是药物分析和分离纯化过程检测的首选方法,选择合适的色谱柱是检测方法的关键.本文综述了C18色谱柱及高交联度聚合物色谱柱选择性研究的一些方法,包括溶剂三角形法,相似系数法,选择性比较法,logK值法和类正相模式法.这些研究方法从本质上研究了色谱柱选择特性的物质基础和影响选择性的因素.高交联度聚苯乙烯色谱柱的研究也可以为分离纯化中常用的吸附树脂选择特性的研究提供借鉴.     

高效液相色谱-离子肼质谱法鉴别阿胶真伪的应用

目的:建立高效液相色谱-离子肼质谱法鉴别阿胶真伪.方法:高效液相色谱-离子肼质谱法,以C 18化学键和硅胶为固定相,以0.1%甲酸溶液为流动相A,以乙腈为流动相B.电喷雾正离子模式.流速为0.3mL/min,柱温30℃.结果:提取的样品离子流色谱中,同时呈现出与对照药材保留一致的色谱峰,稳定性试验RSD为1.12%,重复性试验为0.79%.结论:此方法简便,准确,专属性强,可用于真伪阿胶的鉴别.     

对桑叶配方颗粒芦丁含量测定中色谱柱使用的建议

目的：建议在桑叶配方颗粒芦丁含量测定项使用极性改性C18色谱柱。方法：分别使用多款不同规格的十八烷基键合硅胶（C18）固定相色谱柱，考察桑叶配方颗粒中芦丁的分离情况。结果：使用极性改性C18色谱柱能有效分离芦丁及其共存成分。结论：色谱柱是影响含量测定结果准确性的关键因素，在实际检测过程中应充分考虑不同色谱柱之间的差异，降低因色谱柱选择性差异导致检测结果不准确的风险。     

一种蛹拟青霉代谢产物中抗肿瘤活性组分的分离纯化

目的对一种蛹拟青霉代谢产物中抗肿瘤活性组分进行分离纯化。方法通过最佳展开剂的选择,找到硅胶柱色谱系统的最佳洗脱条件,粗分离后的供试品通过凝胶柱色谱系统分离纯化得到纯供试品。结果分离纯化得到的供试品纯度均大于95%,通过后期的体外抗肿瘤实验,证明具有良好的肿瘤细胞抑制率。结论硅胶柱色谱和凝胶柱色谱的混合利用可以提高供试品的分离纯化效果。     

盐酸帕罗西汀中R-异构体的HPLC测定

建立了HPLC法测定盐酸帕罗西汀中R-异构体的含量.采用Chiral-AGP手性色谱柱,考察了流动相中有机溶剂的种类和比例、磷酸盐缓冲液浓度和pH值,以及柱温、流速对分离效果的影响.结果表明,以甲醇-0.04mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.0)(10:90)为流动相,流速0.8ml/min,检测波长293nm,盐酸帕罗西汀与其R-异构体能完全分离,两者检测限均为10ng.     

HPLC法测定盐酸左西替利嗪及其片剂中s-异构体

目的：建立HPLC法测定盐酸左西替利嗪及其片剂中s-异构体。方法：用α-手性糖蛋白键合硅胶色谱柱，以0．01mol&#183;L^-1的磷酸盐缓冲液（pH7．1）-乙腈（93：7）为流动相；流速为0．5mL&#183;min^-1，检测波长为230nm。结果：盐酸左西替利嗪与s-异构体分离良好，最低检测量为0．9ng，s-异构体的回收率为98．0％。结论：方法快速、简便、准确，可用于盐酸左西替利嗪及其片剂中s-异构体的测定。