妇产科概论——解剖、生理和组胚学

子宫内膜体外构建及其应用研究进展，左旋炔诺孕酮对人子宫内膜细胞体外增殖及细胞间通讯的影响，雌孕激素合剂和雌激素治疗青春期功能失调性子宫出血的效果比较，雌、孕激素及肝素结合生长因子对Ishikawa细胞HOXAIO基因表达的调节，女性阿尔茨海默病与雌激素水平的关系[编者按]     

HB-EGF对HSC-T6细胞Ras/ERK通路的激活及对MMP-2、TIMP-1表达的影响

目的 观察肝素结合性表皮生长因子样生长因子(HB-EGF)激活肝星状细胞(HSC)过程中Ras/ERK信号通路的变化和对金属基质蛋白酶(MMP)及其抑制物的影响. 方法 传代培养HSC-T6细胞,分空白对照组、HB-EGF处理组(20,40,80 ng/mL),采用QRT-PCR法检测MMP-2、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)及表皮生长因子受体(EGFR) mRNA的表达,并确定HB-EGF刺激HSC-T6 Ras/ERK通路(ERK1、ERK2、P38MAPK)活化的最佳浓度及最佳时间,检测该通路活化情况. 结果 QRT PCR检测提示,MMP-2的表达随HB-EGF干预时间的延长增加,TIMP-1的表达随干预时间的延长递减;40 ng/mL HB-EGF培养HSC-T6 48 h后,EGFRmRNA的表达较空白对照组明显上调(P＜0.05);选择40 ng/mL HB-EGF培养48 h为最佳刺激时间与浓度,该处理组ERK1 mRNA的表达较空白对照组明显上调(P＜0.05),但ERK2、P38MAPK的变化无统计学意义;Western-blot检测提示该处理组ERK1蛋白的表达较空白对照组上调(P＜0.05). 结论 HB-EGF可影响HSC-T6的MMP-2、TIMP-1的表达;HB-EGF通过促进HSC-T6表达EGFR、ERK1,有效激活细胞内Ras/ERK信号通路.     

雌、孕激素和米非司酮对子宫内膜癌细胞的作用

目的:了解雌、孕激素和米非司酮对子宫内膜癌细胞生长的影响.方法:体外培养高分化子宫内膜癌细胞Ishikawa和中分化子宫内膜癌细胞Hec-1B,分为对照组、雌激素组、雌孕激素联合组、雌孕激素和米非司酮联合组,在24,48,72,96 h测定各组细胞生长趋势的变化.结果:雌激素作用72 h Ishikawa细胞生长显著高于对照组,Hec-1B细胞较对照组有升高趋势,但差异无统计学意义.孕激素作用72 h对Ishikawa细胞有显著抑制作用,96 h后对Hec-1B细胞有显著抑制作用.在雌、孕激素基础上加入米非司酮96 h后Ishikawa细胞明显增生,48 h后Hec-1B细胞明显增生.结论:雌激素可以刺激子宫内膜癌细胞的生长.孕激素在雌激素基础上抑制内膜癌细胞的生长.米非司酮有拮抗孕激素的抑制子宫内膜癌细胞生长的作用.     

血小板源性生长因子提高血管平滑肌细胞基质金属蛋白酶-2活性的机制

目的 研究在血小板源性生长因子作用下,大鼠血管平滑肌细胞表达膜型基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制物的变化,同时探讨两者对基质金属蛋白酶-2活性的影响.方法 体外培养的血管平滑肌细胞经血小板源性生长因子处理0 min、20 min和6h后进行如下检测:利用明胶SDS-PAGE酶谱检测血管平滑肌细胞分泌基质金属蛋白酶-2活性;基因芯片和RT-PCR技术检测血管平滑肌细胞表达膜型基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制物的变化.结果 明胶酶谱测定表明:血小板源性生长因子显著提高血管平滑肌细胞分泌的基质金属蛋白酶-2的活性;基因芯片和RT-PCR结果显示:血小板源性生长因子对血管平滑肌细胞表达膜型基质金属蛋白酶有明显的诱导作用,作用20 min和6h后的表达是对照组(0min)的1.86倍和2.93倍(P＜0.05);同样血小板源性生长因子显著增强基质金属蛋白酶组织抑制物的表达,作用20 min和6h后的基因表达是对照组(0 min)的1.35倍和1.82倍(P＜0.05).结论 血小板源性生长因子显著增强了血管平滑肌细胞对膜型基质金属蛋白酶和基质金属蛋白酶组织抑制物的表达,同时两者的协调作用使MMP-2的活性呈明显的增加趋势.     

雌孕激素受体调节剂治疗子宫肌瘤

子宫肌瘤是女性最常见的良性肿瘤,临床上约25%的妇女都有子宫肌瘤,30～50岁的女性发病率较高.子宫肌瘤主要由子宫平滑肌细胞增生而形成,其中有少量结缔组织纤维仅作为一种支持组织而存在,因其发病和女性激素(雌激素、孕激素)有关,故属性激素依赖性肿瘤.体外实验也支持雌、孕激素在子宫肌瘤发病机制中起主要作用的论断.研究表明,雌、孕激素可能通过与其特异性受体结合而调节局部生长因子及凋亡相关因子,影响子宫肌瘤的发生与发展[1].     

雌激素、孕激素对去卵巢大鼠子宫内膜血管内皮生长因子及基质金属蛋白酶表达的研究

目的:探讨雌、孕激素对去卵巢大鼠子宫内膜血管内皮生长因子及基质金属蛋白酶表达的影响.方法:建立卵巢去势大鼠模型,分别给予雌激素(E)、孕激素(P)、雌激素(E) 孕激素(P)肌肉注射,对照组(C)未注射任何药物,植物油组(O)注射助溶剂植物油,通过免疫组化法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组大鼠子宫内膜微血管密度,血管内皮生长因子(VEGF)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平.结果:非去势组(N)相比,E组及E P组微血管密度、VEGFmRNA及MMP-9mRNA水平均明显升高(P<0.05) ,O组、C组及P组各指标明显下降(P<0.01) .结论:子宫内膜周期性变化主要受卵巢激素的影响,同时子宫内膜微环境中的细胞因子和酶等通过自分泌和旁分泌方式参与调节子宫内膜复杂的生理和病理过程.     

雌激素在慢性肾脏疾病中的肾保护作用

雌激素可通过对α平滑肌肌动蛋白、基质金属蛋白酶、金属蛋白酶组织抑制因子1和转化生长因子β作用的调节,影响细胞外基质代谢;调节血管紧张素(Ang)-Ⅱ受体亚型间的比例、促进Ang-Ⅱ向舒血管的Ang-(1～7)的转化等,抑制肾内高表达的Ang-Ⅱ;并通过调节一氧化氮系统在慢性肾脏疾病不同阶段病理生理过程中的作用而发挥肾保护作用。本研究对雌激素在慢性肾脏疾病中的肾保护作用予以综述。     

异常妊娠

050877妊娠高血压综合征患者胎盘基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物1的表达及胎盘病理改变/王轶英…∥华中科技大学学报(医学版).—2005,34(1).—76～78,83研究基质金属蛋白酶(MMP)-9及其组织抑制物(TIMP)-1在妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘中的表达,探讨其与妊高征发病的关系     

基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1与2型糖尿病亚临床大血管病变的相关性

糖尿病大血管病变的本质是动脉粥样硬化(AS),AS的形成过程也是细胞外基质(ECM)重构的过程。基质金属蛋白酶(MMP)-9对ECM有极强的降解作用,而基质金属蛋白酶组织抑制剂(TI MP)-1是MMP-9的特异抑制物,调节MMP-9的活性[1]。本研究联合检测2型糖尿病     

肝素结合表皮生长因子样生长因子与银屑病

肝素结合表皮生长因子样生长因子(heparin-bindingepidermalgrowthfactor-likegrowthfactor,HB-EGF)是表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)家族中的一员,与肝素有强的亲和性,生物活性与EGF类似。HB-EGF与EGF家族的其他成员共同调节角质形成细胞(keratinocyte,KC)的生长。HB-EGF可能在银屑病发病的早期及维持银屑病表皮角质形成细胞的增殖中起关键作用,维A酸可能通过某种机制来调节表皮HB-EGF的表达,从而抑制银屑病表皮增殖并诱导正常分化。现将HB-EGF的来源、功能及与银屑病的关系综述如下。     

外源性雌孕激素对人子宫内膜异位症裸鼠模型早期病灶中MMP1和TIMP1表达的影响

目的通过建立裸鼠人子宫内膜异位症模型,探讨雌激素、孕激素对子宫内膜异位症早期病灶中基质金属蛋白酶-1（MMP1）及其抑制剂（TIMP1）表达的影响。方法将育龄妇女的分泌晚期子宫内膜组织种植入裸鼠的盆腹腔,建立人子宫内膜异位症裸鼠模型,随机将裸鼠分为4组：雌激素组、孕激素组、雌孕激素联合组（n=12）和对照组（n=8）,分别肌肉注射雌激素、孕激素和雌孕激素,对照组肌注注射用水。在饲养15d后处死裸鼠,取异位病灶组织,采用免疫组织化学方法（SP法）检测早期子宫内膜病灶中MMP1和TIMP1的表达。结果与对照组相比,雌激素组、雌孕激素联合组、孕激素组的MMP1表达均明显增高,TIMP1表达均明显减低,差异有显著性（F=11.134、16.758,q=3.52～4.60,P〈0.01）;孕激素组MMP1表达明显强于雌激素组,TIMP1表达明显弱于雌激素组（q=3.52、4.57,P〈0.05）;雌孕激素联合组与孕激素组相比MMP1、TIMP1表达无明显差异（P〉0.05）。结论雌激素、孕激素均能加强异位病灶MMP1的合成,抑制TIMP1的产生,其促进子宫内膜异位症的作用机制可能与此有关。     

肝细胞生长因子对高糖条件下系膜细胞基质降解酶系统及转化生长因子β1的影响

目的通过体外培养大鼠肾系膜细胞,研究肝细胞生长因子(hepatocyte grouth factor,HGF)对高糖条件下系膜细胞表达及分泌转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)及其抑制物金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的影响,从而探讨HGF在糖尿病肾病中肾脏保护作用的机制。方法体外培养大鼠肾系膜细胞,分为正常对照组、高糖刺激组及HGF干预组,通过MTT比色测定不同时间、不同HGF浓度对大鼠肾系膜细胞增殖的影响;采用ELISA法测定细胞上清中MMP-9、TIMP-1、TGF-β1、HGF以及Ⅳ型胶原(Ⅳcol)的含量;以RT-PCR法检测系膜细胞MMP-9,TIMP-1、TGF-β1及HGF基因的表达。结果同正常对照组相比高糖刺激系膜细胞增生,HGF可以抑制高糖引起的系膜细胞增生。通过外源添加HGF可以显著抑制高糖条件下系膜细胞Ⅳcol、TIMP-1及TGF-β1的分泌,但对高糖条件下系膜细胞MMP-9的分泌则无显著影响。同高糖刺激组相比,外源HGF使系膜细胞MMP-9及HGF基因表达明显增强,而显著抑制系膜细胞TIMP-1及TGF-β1基因的表达。结论HGF对于高糖条件下的大鼠肾系膜细胞可能具有保护性作用,这一作用可能同以下途径有关:HGF抑制高糖刺激所导致的系膜细胞增生;HGF抑制TIMP-1mRNA表达及蛋白合成,促进MMP-9mRNA表达,从而调节MMP-9与TIMP-1之间的比例促进ECM降解;HGF显著抑制TGF-β1mRNA表达及蛋白合成,并且促使内源HGFmRNA表达增高,从而恢复TGF-β1与HGF之间的平衡。     

蜕膜细胞条件培养液对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响

目的 探讨蜕膜细胞条件培养液（DCM）对洋养细胞侵袭调节基因表达的影响。方法 用体外培养早孕，早孕蜕膜细胞的方法制备DCM，然后将其处理体外培养的早孕滋养细胞，用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分析早孕滋养细胞侵袭调节基因表达的变化。结果 正常培养的早孕滋养细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2，MMP-9，基质金属蛋白酶抑制物（TIMP-1），尿激酶型纤溶酶原激活因子（u-PA)mRNA均有表达；而TIMP-2，纤溶酶原激活因子抑制因子（PAI-1)mRNA未见表达，早孕和晚孕DCM均能下调滋养细胞MMP-2，MMP-9，uPAmRNA的表达，而上调TIMP-1mRNA的表达。早孕，晚孕DCM均能诱导滋养细胞PAI-1mRNA的表达，但对TIMP-2mRNA的表达未见有影响。结论 蜕膜细胞可能通过调节滋养细胞中MMP-2，MMP-9与TIMP-1之间的平衡以及u-PA与PAI-1之间的平衡，而影响滋养细胞的侵袭能力。     

雌、孕激素对兔膝关节滑膜中金属蛋白酶及其组织抑制物和白细胞介素-1β mRNA表达的影响

目的 观察雌性新西兰兔膝骨关节炎(OA)模型在去势后给予不同剂量雌激素或联合应用孕激素,对OA关节滑膜中金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3、金属蛋白酶组织抑制物(TIMP)-1和白细胞介素(IL)-1βmRNA表达水平的影响。方法对65只雌性新西兰兔采用膝关节伸直位石膏固定5周制成兔膝OA模型,随机抽取5只兔以过量麻醉法处死以检测动物模型是否成功;剩余60只兔随机分为A、B、C、D、E、F共6组,每组10只,对A—E组行去势手术,F组行假去势手术。之后给予口服戊酸雌二醇(E2V)或联合应用安宫黄体酮(MPA)共16周,A组E2V1．8mg／d,B组E2V3．6mg／d,c组E2V7．2mg／d,D组E2V3．6mg／d MPA3．6mg/d,E组和F组均不用药。于用药8周和16周时分批处死兔,采用RT-PCR法对兔膝关节滑膜组织中MMP-1、MMP-3、IL-1β和TIMP-1mRNA表达水平进行半定量测定,观察雌、孕激素对OA滑膜中上述指标的影响。结果去势后兔膝OA滑膜组织中MMP-1、MMP-3和IL-1βmRNA表达增加,给予雌激素后三者的表达均有抑制,加用孕激素可使这一抑制作用增强。低剂量雌激素可使MMP-1／TIMP-1和MMP-3／TIMP-1比值降低,加用孕激素后可使这两个比值进一步降低,而高剂量雌激素可使这两个比值增加,但仍低于不用药组。结论低剂量雌激素或合适比例的雌孕激素协同作用对于维持关节软骨正常生理功能至关重要,雌激素水平过高或过低均会对关节软骨产生不利影响,以雌激素缺乏产生的损伤作用更重。     

miR-613靶向PTBP1抑制子宫内膜癌细胞侵袭和迁移的实验研究

  目的  探讨微RNA-613(miR-613)靶向多聚嘧啶区结合蛋白1(PTBP1)对子宫内膜癌细胞(Ishikawa)增殖、迁移及侵袭的影响。  方法  采用RT-qPCR法检测子宫内膜癌组织miR-613及PTBP1 mRNA表达;体外培养Ishikawa细胞并对Ishikawa细胞进行干预,过表达miR-613、抑制PTBP1表达或共同过表达miR-613与PTBP1,分别检测Ishikawa细胞增殖、迁移与侵袭及PTBP1、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达情况;双荧光素酶报告实验验证miR-613与PTBP1的靶向关系。  结果  子宫内膜癌组织中miR-613表达水平为0.48±0.09,显著低于癌旁组织的1.03±0.11(P＜0.05),PTBP1 mRNA表达水平为2.78±0.23,显著高于癌旁组织的1.01±0.12(P＜0.05),miR-613与PTBP1 mRNA呈负相关关系(r=-0.523,P＜0.05);双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-613靶向负调控PTBP1表达;过表达miR-613与抑制PTBP1表达,Ishikawa细胞存活率、细胞迁移与侵袭数、PTBP1、MMP-2及MMP-9表达水平显著降低(均P＜0.05);过表达PTBP1逆转过表达miR-613对Ishikawa细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用。  结论  miR-613在子宫内膜癌组织中低表达,过表达miR-613可通过靶向抑制PTBP1表达,抑制人子宫内膜癌细胞的增殖、迁移及侵袭。      

雌、孕激素对大鼠成骨细胞基质金属蛋白酶及其抑制因子的作用

目的研究基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)在离体成骨细胞上的表达特点及雌、孕激素对MMP-2、TIMP-1的影响,初步探讨MMP-2、TIMP-1在骨吸收中的作用。方法采用免疫组化方法对成骨细胞中MMP-2蛋白的表达进行检测。采用逆转录定量PCR检测雌、孕激素对成骨细胞分泌MMP-2、TIMP-1mRNA的影响。结果MMP-2蛋白在成骨细胞上表达阳性,雌激素对MMP-2蛋白的表达有抑制作用,成骨细胞分泌的MMP-2在雌、孕激素作用下呈剂量依赖性下降。成骨细胞分泌的TIMP-1在雌、孕激素作用下变化不显著。结论雌、孕激素可通过对成骨细胞MMP-2的抑制作用促进骨形成、减缓骨吸收和骨基质降解。孕激素治疗绝经后骨质疏松症与雌激素同样具有重要意义。     

蜕膜细胞条件培养液对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响

目的　探讨蜕膜细胞条件培养液（DCM）对滋养细胞侵袭调节基因表达的影响。方法　用体外培养早孕、晚孕蜕膜细胞的方法制备DCM,然后将其处理体外培养的早孕滋养细胞。用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）分析早孕滋养细胞侵袭调节基因表达的变化。结果　正常培养的早孕滋养细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、基质金属蛋白酶抑制物（TIMP-1）、尿激酶型纤溶酶原激活因子（u-PA）mRNA均有表达;而TIMP-2、纤溶酶原激活因子抑制因子（PAI-1）mRNA未见表达。早孕和晚孕DCM均能下调滋养细胞MMP-2、MMP-9、u-PAmRNA的表达,而上调TIMP-1mRNA的表达。早孕、晚孕DCM均能诱导滋养细胞PAI-1mRNA的表达,但对TIMP-2mRNA的表达未见有影响。结论　蜕膜细胞可能通过调节滋养细胞中MMP-2、MMP-9与TIMP-1之间的平衡以及u-PA与PAI-1之间的平衡,而影响滋养细胞的侵袭能力。     

雌孕激素调节水通道蛋白9表达并通过细胞外调节蛋白激酶通路影响囊胚着床的研究

目的 探讨卵巢雌孕激素对囊胚滋养外胚层细胞水通道蛋白9(AQP9)表达的调节并通过细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2通路影响囊胚的粘附和着床.方法 将小鼠囊胚分别分为空白对照组(Ctrl组)、雌二醇组(E2组)、孕激素组(P4组)、E2+P4联合处理组处理,RT-PCR检测囊胚细胞中AQP9表达.在加入卵巢激素的培养囊胚中给予siRNA-AQP9(si-AQP9),蛋白质印迹技术检测囊胚磷酸化ERK1/2的表达.在体外培养囊胚加入卵巢激素后,将分别加入si-AQP9和ERK1/2的抑制剂U0126的囊胚与子宫内膜上皮Ishikawa细胞株联合培养,倒置显微镜观察囊胚粘附率.结果 1)E2+P4联合组AQP9在囊胚细胞中的表达升高(P<0.05);2)与正常对照组囊胚粘附率相比较,siRNA干扰组囊胚的粘附率下降(P<0.05);3)si-AQP9干扰组囊胚滋养外胚层细胞磷酸化ERK1/2的表达较Ctrl组降低(P<0.05),U0126组囊胚的粘附率较Ctrl组降低(P<0.05).结论 卵巢雌孕激素可上调早期胚胎细胞A Q P9表达,并通过ERK通路参与早期胚胎滋养外胚层细胞对子宫内膜细胞的粘附和侵袭,在胚胎着床中发挥了重要的作用.     

子宫内膜种植窗期基质金属蛋白酶-9及其抑制物-1的表达与雌孕激素关系

目的:探讨内膜种植窗期基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)与血清雌孕激素的关系.方法:选择排卵正常妇女的种植窗期子宫内膜31例,同时抽取其静脉血;用免疫组化法检测种植窗期子宫内膜组织中MMP-9/TIMP-1蛋白的表达;测定种植窗期血清雌(E2)、孕激素(P)值.分析MMP-9/TIMP-1蛋白分别与血清E2、P的相关性.结果:种植窗期子宫内膜组织中MMP-9/TIMP-1蛋白表达的光密度值分别为:0.163±0.025、0.143±0.015;同期血清E2、P值分别为:182.153±45.774pg/ml、22.997±6.697ng/ml;MMP-9与血清P呈负相关性(P＜0.001),TIMP-1与P无相关性(P＞0.05);MMP-9/TIMP-1与血清E2均无相关性(P＞0.05).结论:MMP-9与血清P呈负相关,TIMP-1与P无相关性.MMP-9/TIMP-1与血清E2均无相关性.     

子宫内膜种植窗期基质金属蛋白酶-9及其抑制物-1的表达与雌孕激素关系

目的:探讨内膜种植窗期基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)与血清雌孕激素的关系。方法:选择排卵正常妇女的种植窗期子宫内膜31例,同时抽取其静脉血;用免疫组化法检测种植窗期子宫内膜组织中MMP-9/TIMP-1蛋白的表达;测定种植窗期血清雌(E2)、孕激素(P)值。分析MMP-9/TIMP-1蛋白分别与血清E2、P的相关性。结果:种植窗期子宫内膜组织中MMP-9/TIMP-1蛋白表达的光密度值分别为:0.163±0.025、0.143±0.015;同期血清E2、P值分别为:182.153±45.774pg/ml、22.997±6.697ng/ml;MMP-9与血清P呈负相关性(P<0.001),TIMP-1与P无相关性(P>0.05);MMP-9/TIMP-1与血清E2均无相关性(P>0.05)。结论:MMP-9与血清P呈负相关,TIMP-1与P无相关性。MMP-9/TIMP-1与血清E2均无相关性。