羊抗人lgG抗体的IgG—SpA菌体免疫法

免疫学技术的飞跃发展,对第二抗体需要日趋增加,由于用常规法制备第二抗体操作复杂,本室等曾报道了免抗人、免抗小鼠IgG抗体制备的IgG—SpA菌体免疫法。本文报道用人血清致敏SpA菌体作为免疫原,免疫山羊制备抗人IgG抗体获得满意结果,现报道如下。材料一、菌株:含A蛋白葡萄球菌系本室自选的NO:1800株。二、人血清:健康人脐带血清由附属医     

金黄色葡萄球菌蛋白A的纯化

葡萄球菌蛋白 A(简称 SpA)是大多数金黄色葡萄球菌所具有的细胞壁成份,它能与人及多种哺乳动物血清 IgG 的 Fo 片段发生非特异性结合。为进一步研究 SpA 的结构和生物学特性,必须获得纯化的 SpA。纯化方法有用酸沉淀和电泳或用柱层析、凝胶过滤等,但都较繁复,产率不高。Hjelm 等(1972)用溶葡萄球菌素(Lysostaphin)消化细菌后再经 IgG 柱的亲和层析以纯化 SpA,产率高,但溶葡萄球菌素来源困难,价格昂贵。我们利用现有实验条件对这一方法作些改良,获得产率较高的纯化 SpA。     

EHF早期快诊技术研究(Ⅱ.RFC—SpA法检测EHF病人血清中IgG抗体)

用RFC—SpA法诊断流行性出血热。先在抗原片中加入EHF病人血清,经作用后加入SpA菌体试剂,洗涤、染色后在普通光学显微镜下观察花环形成细胞。共检测77份病人血清中EHF IgG体滴度,结果表明本法与IFA及HRP—SpA染色法是特异的,敏感的。还就RFC—SpA实验条件选择以及IgG抗体检测与病程的关系进行了讨论。     

选择A蛋白葡萄球菌标准株(Cowan Ⅰ)替代菌株的实验研究

国外对金黄色葡萄球菌A蛋白(SpA)及其应用,已进行了广泛的研究。我们从收集到的金黄色葡萄球菌中,选出了含有丰富A蛋白的Z_5和No.1800株及不含A蛋白的Z_(12)株,经特异性抗体标记后的协同凝集反应,证明Z_5和No.1800株结合IgG的效果良好,可以替代国外标准株Cowan Ⅰ,而Z_(12)株因不含A蛋白,不能结合IgG,故可替代国外标准株Wood 46。Z_5和No.1800株及Z_(12)株的建立为开展SpA在免疫学方面的研究提供了必要条件。     

SAT花环形成试验检测人外周血T淋巴细胞的初步探讨

本文报告以猪抗人胚胸腺细胞球蛋白(AHTG)致敏人外周血T细胞后,用含SpA的葡萄球菌体(Cowan Ⅰ株)作用,使菌体结合于致敏T细胞周围,形成花环,即SAT(S:SpA,A:AHTG,T:T细胞)花环试验,是检测T淋巴细胞的一种新的试验方法。探讨了有关试验方法的建立及其影响因素;并用此法对96例健康献血员进行检验,其外周血中T细胞百分率为76.72％,符合正常人外周血T细胞百分率;同时设不合SpA的Z_(12)株、正常猪血清及非特异性IgG(抗AFP血清)3个     

SpA菌体吸收肿瘤病人血清的研究(Ⅰ、吸收前后血清Ig变化的初步观察)

本文报道用富含SpA的1800株稳定液吸收肿瘤病人血清,并与正常人和IgG升高性疾病活动性肺结核病人进行了比较。结果表明:IgG下降百分率,正常人、活动性肺结核病人、肿瘤病人治疗前和后依次为45.85、46.57、78.02和68.14;IgM分别为5.09、6.91、39.55和40.27;IgA和IgD变化不显著。提示肿瘤病人血清中IgG和IgM类抗体可被SpA菌体选择性地吸附,该抗体对SpA的亲和力远大于正常人和活动性肺结核病人。我们认为检测该亲SpA类抗体有助于肿瘤疗效判断和随访监测,或可发展为肿瘤筛选的指标之一。     

酶标葡萄球菌A蛋白ELISA法检测大年龄人群白喉免疫效果的研究(简报)

人群对白喉免疫力的高低与体内抗毒素抗体水平有密切关系,因此,检测人群血清中白喉抵毒素抗体水平,对评价免疫状况、观察预防接种效果等均有重要意义。本研究为配合白喉预防及流行病学调查的实际需要,探讨用酶标葡萄球菌A蛋白(简称酶标SpA)的 ELISA法检测人群血清白喉抗毒素抗体水平,并与间     

EHF早期快诊技本研究(Ⅲ.RFC—SpA和IFA法快速检测EHF病人尿中抗体)

用RFC—SpA和IFA法检测EHF病人尿中EHF IgG抗体111份,阳性率为94.6％,与平行进行的血清标本阳性率95.5％是相似的。     

抗IgG血清制备法——IgG-SPA菌免疫法

本文介绍一种制备抗 IgG 血清的方法,即利用含 A 蛋白的金黄色葡萄球菌(SPA 菌)吸附 IgG 的 FC 段后不改变 FC 段结构、仍保持其抗原特异性这一特点而制备抗血清.这样可省去提纯 IgG 的复杂步骤,同时 SPA 菌在免疫过程中又起到了良好的佐剂作用,增强了抗原的免疫原性。结果可获1:320的效价,免疫电泳鉴定纯度,仅在 IgG 图形部位出现一条粗沉淀线的抗 IgG 血清.此法简单,适用于教学实验.     

应用含A蛋白的葡萄球菌(SpA)快速鉴定钩端螺旋体菌株群(型)别的实验研究

葡萄球菌细胞壁A蛋白(SpA)具有与人及多种哺乳动物IgG分子Fc段结合而Fab段仍保持抗原抗体反应的特性。国外从70年代初开始将SpA作为一种新的免疫试剂应用于多种细菌和病毒的鉴定,国内开展SpA的研究较迟。晚近,张颖悟等报告,用自选的葡萄球菌Z_5株作肠道病原菌和钩端螺旋体(简称钩体)的鉴定,并用1800株作脑膜炎球菌的群别鉴定,效果满意,可以代替传统的试验方法。鉴于钩体菌型复杂和来源的多样性,张氏等作钩体协同凝集试验(简称CA)时,标本数较少,菌型和来源亦较单一,故我们作了进一步研究。兹将实验情况和应用结果报告如下。     

酶标SpA免疫酶法检测宫颈癌患者血清中单纯疱疹病毒抗体

许多报告认为单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)感染与宫颈癌的发生有关。应用免疫酶法和免疫荧光法检测 HSV/IgG 抗体已有报道。前者需用荧光显微镜,应用受到限制。免疫酶法检测患者体液中病毒特异性抗体比其它方法简便易行,且敏感性和特异性较好,应用日广。用它检测病毒 IgG 抗体,通常以酶标抗人 IgG(简称酶标抗体)作为第二抗体。本文将辣根过氧化物酶标记葡萄球菌 A 蛋白(简称酶标 SpA)用于免疫酶法     

人和羊IgG对噬菌体展示细菌免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库的体外进化筛选

目的 使用人和羊不同物种IgG来诱导噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库进行体外分子进化筛选,判断不同的Fc段构像是否具有特异的结合优势,同时探索其优势结合序列的组合特点.方法 通过PCR获得金黄色葡萄球菌蛋白A(SpA)的A、B、D、E和链球菌(C和G群)蛋白G (SpG)的B2、B3各单结构域片段,构建...     

葡萄球菌A蛋白对小鼠外周血某些成分的影响

本文采用静脉注射葡萄球菌A蛋白(SpA)对615小鼠外周血某些成分进行了动态观察。发现SpA有降低血红蛋白含量的作用。结果还表明,白细胞总数无明显变化,淋巴细胞百分比有所升高,而血小板数则明显下降。     

SPA痢疾杆菌分型试剂在实际应用上的价值

金黄色葡萄球菌细胞壁的主要成分 A 蛋白(Staphylococcal Protein A,简称 SPA)能与正常人及多种哺乳动物血清中 IgG 分子 Fc 段非特异结合,而 IgG 的 Fab 段则暴露于外,并保持其正常抗体的活性,当与特异性抗原相遇时,则抗原与 IgG 的 Fab 段相结合。如将含 A 蛋白葡萄球菌本身作为载体,用特异抗体致敏,如遇特异抗原,则能引起协同凝集反应。协同凝集反应已在细菌学上应用于细菌的分型,但大多属于实验室方面的研究,正式作为诊断试剂应用于临床的报告不多。     

SpA致病性和基因表达调控的研究进展

SpA是金黄色葡萄球菌的重要毒力因子,在金葡菌抗吞噬、诱导B细胞凋亡、引起葡萄球菌性肺炎、心内膜炎等方面发挥重要作用.SpA的表达由非常精细复杂的系统调控.对SpA致病和基因调控机制的研究有助于发现治疗金葡菌感染的新途径.     

用间接SPA法检测人外周血T细胞亚群

葡萄球菌A蛋白(SPA)是葡萄球菌菌体蛋白成分之一。它能与哺乳类动物的IgG的Fc段非特异结合,而不影响单克隆抗体(McAb)的活性,因此,将人T细胞的McAb与外周血中的T细胞结合,再加上IgG致敏的SPA菌体,由于IgG的介导,葡萄球菌围绕在T细胞的周围,形成光学显微镜下可见的花环。用该法检测外周血中T细胞亚群,操作简单,不需     

SpA诱导615小鼠外周血淋巴细胞微核与双核的初步观察

将金黄色葡萄球茵A蛋白纯品和含A蛋白的金黄色葡萄球菌以不同剂量、不同途径注入615近交系小鼠体内。采用微核测定法检测小鼠外周血淋巴细胞微核和双核。表明SpA纯品和SpA菌体对小鼠淋巴细胞染色体均有损伤作用。SpA纯品0.5mg/只腹腔注射诱导小鼠外周血淋巴细胞微核率达7‰,双核率达30.45‰,对淋巴细胞染色体的损伤程度最重。各组的SpA茵体诱导小鼠外周血淋巴细胞的双核率明显高于微核率。由此提出把双核测定也作为检测致突变物致突变作用的一种方法。     

酶标抗体与酶标葡萄球菌A蛋白在ELISA中检测病毒抗体的比较

用酶标抗体(HRP-抗人IgG)与酶标葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)作ELISA检测临床疑似乙脑病人单份血清91份,及临床诊断疑似腺病毒感染病人单份血清63份,7例双份血清14份的结果,两种方法都有较高敏感性与特异性。HRP-SPA敏感性较HRP-抗人IgG低,而HRP-SPA非特异性反应较少,且制备简单,比较稳定,一种HRP-SPA可以检测多种动物血清,有可能替代HRP-抗人IgG在FLISA中应用。     

SpA菌体吸收肿瘤病人血清的研究(Ⅱ、吸附有肿瘤Ig的SpA菌体对吞噬细胞吞噬功能的影响)

我们观察了吸附有肿瘤病人血清中Ig的SpA菌体对吞噬细胞吞噬功能的影响。实验发现,小鼠腹腔巨噬细胞、正常人外周血中性粒细胞和单核细胞对吸附有肿瘤病人血清Ig的SpA菌体的吞噬(吞噬率和吞噬指数)显著高于对SpA菌体的吞噬(P<0.001)。提示吸附有肿瘤病人血清中Ig的SpA菌体所明显增强吞噬细胞的吞噬功能,此结果有助于阐明SpA菌体的体内抗瘤机制。     

辣根过氧化物酶标葡萄球A蛋白组化法快速诊断流行性出血热

本文报告辣报过氧化物酶标葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA) 间接组化法检测EHF特异性IgG抗体,并与IFA法进行了比较。结果表明HRP—SPA组化法和IFA一样,具有相同的特异性而且敏感性更高,其血清抗体滴度为IFA法2～4倍。