美国与墨西哥交界城市缺乏适宜排污设施和饮用水家庭的隐孢子虫和贾第鞭毛虫感染

微小隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫是分布广泛的两种寄生于人体肠道的原虫,所导致的隐孢子虫病和贾第虫病均为地方性流行肠道疾病。Redlinger等调查了在美国和墨西哥交界地区城市周围的3个定居点NuevaGaleana ,PlutarcoEliasCalles和Fe lipeAngeles的微小隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫感染因素,以研究低收入人群感染贾第鞭毛虫和隐孢子虫在流行病学方面的差异。所调查的3个社区是城市周围不相邻的低发展地区。社区选入的标准包括:低经济收入、缺乏合适的生活用水和排污设施,住房普遍拥挤。调查以家庭为单位,检测标本来自安装的可储存厕所(SIR D…     

隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫分子流行病学研究进展

宿主被隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫(简称贾第虫)感染后会出现腹泻等健康问题,严重时可致死亡。隐孢子虫病和贾第虫病均属于新发传染病,其疾病负担往往被低估,是被忽视的重要公共卫生问题。分子生物学技术在隐孢子虫和贾第虫的检测、基因分型及溯源等方面发挥着重要作用。本文就隐孢子虫和贾第虫的分子流行病学进展作一综述,为其防控提供依据。     

宠物犬蓝氏贾第鞭毛虫和隐孢子虫感染的分子检测

目的了解皖浙两省部分城镇地区宠物犬蓝氏贾第鞭毛虫和隐孢子虫感染情况,及聚集体类型或虫种。方法在安徽多地和浙江杭州共采集315份新鲜宠物犬粪样,分别采用基于蓝氏贾第鞭毛虫谷氨酸脱氢酶(GDH)基因的半巢式PCR和隐孢子虫核糖体小亚基(SSU r RNA)基因的巢式PCR方法对所有粪样进行扩增,并对获得的阳性扩增产物进行测序和生物信息学分析,确定蓝氏贾第鞭毛虫的聚集体和隐孢子虫的虫种类型。结果 315份犬粪样中,蓝氏贾第鞭毛虫和隐孢子虫的阳性率分别为3.2%(10/315)和1.6%(5/315)。幼龄犬(≤12个月)蓝氏贾第鞭毛虫阳性率(17.8%)和隐孢子虫阳性率(11.1%)均显著高于成年犬(0.7%和0)(P0.05)。雌性犬和雄性犬蓝氏贾第鞭毛虫和隐孢子虫阳性率差异均无统计学意义(P0.05)。发现蓝氏贾第鞭毛虫两种聚集体类型,即聚集体B(n=6)和聚集体D(n=4)。从5份阳性犬粪中分离的隐孢子虫经巢式PCR SSU r RNA基因检测,均为犬隐孢子虫(Cryptosporidium canis)。结论皖浙两省部分地区宠物犬蓝氏贾第鞭毛虫和犬隐孢子虫的阳性率分别为3.2%和1.6%。发现的蓝氏贾第鞭毛虫聚集体类型为聚集体B和聚集体D。     

艾滋病患者几种易被忽视的肠道寄生虫感染

为提高临床医生对艾滋病合并肠道寄生虫感染的认识，本文从病原学、流行病学、诊断方法、治疗和预防措施等方面对艾滋病患者混合感染常见的肠道寄生虫，如隐孢子虫、微孢子虫、蓝氏贾第鞭毛虫和粪类圆线虫等进行综述。     

环介导等温扩增技术检测蓝氏贾第鞭毛虫

目的 建立应用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测蓝氏贾第鞭毛虫的方法. 方法 体外培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体,提取DNA.根据GenBank显示的贾第虫序列及环介导等温扩增技术的原理,设计4条贾第虫特异引物,利用LAMP检测蓝氏贾第鞭毛虫DNA,以隐孢子虫卵囊DNA、疟原虫DNA为对照,并将不含病原体DNA的纯水作为阴性对照.LAMP产物经SYBR green I显色后观察结果,绿色为阳性,棕色为阴性;对LAMP产物进行琼脂糖凝胶电泳分析,观察其特征条带的情况. 结果 蓝氏贾第鞭毛虫DNA检测管经显色后呈绿色,隐孢子虫卵囊DNA、疟原虫DNA及水阴性对照管呈棕色.含有蓝氏贾第鞭毛虫DNA的LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,安氏隐孢子虫DNA、恶性疟原虫DNA及阴性对照水无扩增产物. 结论 成功建立了检测蓝氏贾第鞭毛虫的LAMP方法.     

云南孟连县HIV感染者机会性致病肠道原虫感染现状调查

目的了解云南孟连县HIV感染者机会性致病肠道原虫的感染情况。方法随机抽样孟连县HIV确诊病例46例,入户问卷调查,收集新鲜粪便标本,用直接涂片卢戈氏碘液染色法检查蓝氏贾第鞭毛虫包囊、用金铵-酚改良抗酸染色法检查隐孢子虫卵囊。结果 46份粪便标本检出寄生虫感染11份,感染率为23.91%,其中钩虫2份,溶组织内阿米巴5份,微小内蜒阿米巴1份,结肠内阿米巴2份,蓝氏贾第鞭毛虫1份,未检出隐孢子虫。结论 HIV感染者机会性致病肠道原虫检测应列入常规检测项目。     

环介导等温扩增技术检测蓝氏贾第鞭毛虫

目的 建立应用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测蓝氏贾第鞭毛虫的方法. 方法 体外培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体,提取DNA.根据GenBank显示的贾第虫序列及环介导等温扩增技术的原理,设计4条贾第虫特异引物,利用LAMP检测蓝氏贾第鞭毛虫DNA,以隐孢子虫卵囊DNA、疟原虫DNA为对照,并将不含病原体DNA的纯水作为阴性对照.LAMP产物经SYBR green I显色后观察结果,绿色为阳性,棕色为阴性;对LAMP产物进行琼脂糖凝胶电泳分析,观察其特征条带的情况. 结果 蓝氏贾第鞭毛虫DNA检测管经显色后呈绿色,隐孢子虫卵囊DNA、疟原虫DNA及水阴性对照管呈棕色.含有蓝氏贾第鞭毛虫DNA的LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,安氏隐孢子虫DNA、恶性疟原虫DNA及阴性对照水无扩增产物. 结论 成功建立了检测蓝氏贾第鞭毛虫的LAMP方法.     

环介导等温扩增技术检测蓝氏贾第鞭毛虫

目的 建立应用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测蓝氏贾第鞭毛虫的方法. 方法 体外培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体,提取DNA.根据GenBank显示的贾第虫序列及环介导等温扩增技术的原理,设计4条贾第虫特异引物,利用LAMP检测蓝氏贾第鞭毛虫DNA,以隐孢子虫卵囊DNA、疟原虫DNA为对照,并将不含病原体DNA的纯水作为阴性对照.LAMP产物经SYBR green I显色后观察结果,绿色为阳性,棕色为阴性;对LAMP产物进行琼脂糖凝胶电泳分析,观察其特征条带的情况. 结果 蓝氏贾第鞭毛虫DNA检测管经显色后呈绿色,隐孢子虫卵囊DNA、疟原虫DNA及水阴性对照管呈棕色.含有蓝氏贾第鞭毛虫DNA的LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,安氏隐孢子虫DNA、恶性疟原虫DNA及阴性对照水无扩增产物. 结论 成功建立了检测蓝氏贾第鞭毛虫的LAMP方法.     

贾第虫病分子生物学诊断方法及其应用

蓝氏贾第鞭毛虫病（giardiasis）,简称贾第虫病,是由蓝氏贾第鞭毛虫（Giardia lamblia）引起的一种以腹泻为主要症状的肠道疾病,也有人称蓝氏鞭毛虫病（lambliasis）。因贾第虫病曾在国际旅游者中流行,故又称为＂旅游者腹泻＂。自20世纪70年代以来,在世界各地相继发生     

蓝氏贾第鞭毛虫和微小隐孢子虫双重荧光定量PCR两步法检测技术的建立

目的 建立同时检测蓝氏贾第鞭毛虫和微小隐孢子虫的双重荧光定量PCR两步检测方法。方法 针对蓝氏贾第鞭毛虫的gdh基因和微小隐孢子虫的cowp基因分别设计特异性引物和TaqMan探针。优化引物和探针浓度后,确定反应体系和反应条件,对其灵敏度、特异性、稳定性和重复性进行评价。通过与金标层析法进行医源性腹泻样本检测的比较评估该方法的实际应用价值。结果 该方法能特异地检测蓝氏贾第鞭毛虫和微小隐孢子虫,对其它非目标虫种均不产生扩增曲线,特异性良好。对阳性质粒pMD^TM19-T-GIA和pMD^TM19-T-CRY同时定量扩增的敏感度分别为45.1 copies/μL和52.8 copies/μL;阳性质粒标准品的标准曲线在10⁹ copies/μL10¹ copies/μL之间线性关系良好(R²=0.99),批内和批间重复实验的变异系数均小于5%。该方法与金标层析法具有较好的一致性。结论 建立的双重荧光定量PCR两步法可快速、灵敏、特异地同时检测蓝氏贾第鞭毛虫和微小隐孢子虫,具有较好的实际应用价值。     

重组酶介导的蓝氏贾第鞭毛虫特异性等温核酸扩增方法的建立及评价

目的　建立基于重组酶介导的等温扩增技术（RAA）的蓝氏贾第鞭毛虫核酸检测方法,并评价其检测敏感性和特异性。方法　选择蓝氏贾第鞭毛虫β?贾第素（β?giardin）基因作为检测靶基因,设计、合成特异性检测引物及荧光探针,建立荧光RAA检测体系。分别以不同拷贝数的重组质粒（含β?giardin基因靶序列）和不同浓度蓝氏贾第鞭毛虫基因组DNA为模板进行荧光RAA扩增,评价其检测敏感性;分别以蓝氏贾第鞭毛虫、日本血吸虫、华支睾吸虫、微小隐孢子虫、似蚓蛔线虫、沙门氏菌及志贺氏菌基因组DNA为模板进行扩增,评价其检测特异性。结果　成功建立了蓝氏贾第鞭毛虫荧光RAA检测方法,其可在等温（39 ℃）条件下实现对靶基因片段的快速、特异性扩增（20 min内）。分别以重组质粒和蓝氏贾第鞭毛虫基因组DNA为模板,该方法的检测敏感性可达102拷贝/μL和1 pg/μL;以日本血吸虫、华支睾吸虫、微小隐孢子虫、似蚓蛔线虫、沙门氏菌及志贺氏菌基因组DNA为模板的RAA检测结果均为阴性,具备较好特异性。结论　建立了一种操作简便、敏感、特异的可用于蓝氏贾第鞭毛虫核酸检测的荧光RAA方法。     

蓝氏贾第鞭毛虫感染的免疫学诊断方法

蓝氏贾第鞭毛虫感染可引起人及其他哺乳动物腹泻.近年来,贾第虫病的严重性和危害性日益受到重视.本文对蓝氏贾第鞭毛虫感染的免疫学诊断方法研究进行了综述,比较了各种方法的优缺点,简要介绍了一些商品化试剂盒的使用情况.贾第虫病免疫学诊断方法的应用,对贾第虫病的临床诊断、治疗、预后将带来极大的方便.     

蓝氏贾第鞭毛虫病流行的近况

蓝氏贾第鞭毛虫是人类肠道寄生虫感染中最常见的一种疾病,也是重要的致病性原虫病之一,它是由蓝氏贾第鞭毛虫(以下简称贾第虫,贾第虫病)寄生于小肠所致的一种传染病,主要症状有腹泻、吸收障碍和体重减轻,并成为旅行者腹泻的主要原因之一。本病广泛流行,对人民健康危害大,1986年8月在澳大利亚召开的第三届国际寄生虫学会议上,已将贾第虫病列为今后斗争重点的寄生虫病之一。本文就流行的近况作一概述。     

蓝氏贾第虫基因转染研究进展

蓝氏贾第虫 (Giardialamblia)是一种单细胞寄生性原虫 ,能够感染包括人在内的多种动物 ,引起的蓝氏贾第虫病 ,以腹泻和消化不良为主要症状。以往认为本病是人类的一种共栖性肠道鞭毛虫病 ,大多数患者为隐性感染 ,近年来很多临床病例和流行病学资料都已证明蓝氏贾虫病是一种重要的人兽共患寄生虫病。蓝氏贾第虫生活周期简单 ,包括包囊和滋养体两个发育阶段 :包囊通过污染的食物、水或粪便经口感染 ,在小肠上部去包囊 ,发育成为滋养体 ,粘附于小肠上段进行分裂 ,从而导致病变。滋养体随宿主肠道内容物下行 ,在结肠形成包囊 ,随粪便排出 ,能在…     

上海市饮用水和环境水中隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫污染状况调查

目的了解上海市饮用水、水源水和环境水中隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫污染情况。方法通过抽滤、淘洗、离心浓缩、磁抗体分离和免疫荧光染色等技术检测饮用水、水源水和环境水。结果采集上海市16个区出厂水(32份)、管网水(38份)和小区直饮水(86份)等水样156份,均未检出隐孢子虫卵囊和蓝氏贾第鞭毛虫包囊;采集5个区自来水厂水源水(15份)、黄浦江原水(25份)、动物饲养场周边河水(15份)、污水处理厂出水(9份)和生活污水(6份)等水样70份,隐孢子虫卵囊检出率分别为1份(6.7%)、2份(8.0%)、7份(46.7%)、1份(11.1%)和1份(16.7%),蓝氏贾第鞭毛虫包囊检出率分别为1份(6.7%)、3份(12.0%)、6份(40.0%)、2份(22.2%)和2份(33.3%),隐孢子虫卵囊总检出率为17.1%(12/70),蓝氏贾第鞭毛虫包囊总检出率为20.0%(14/70)。结论上海市饮用水中未检出隐孢子虫卵囊和蓝氏贾第鞭毛虫包囊,但在水源水和环境水中检出,应加强自来水厂水源水的监测。     

环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫的研究

目的 用环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫.方法 提取牛粪中隐孢子虫卵囊DNA.根据隐孢子虫18S rRNA序列及环介导等温扩增(100p-mediated isothermal amplification,LAMP)技术的原理,设计4条隐孢子虫特异引物,利用LAMP检测牛粪中隐孢子虫卵囊DNA和蓝氏贾第鞭毛虫DNA,以正常牛粪DNA为阴性对照.LAMP产物经SYBR Green I显色及电泳后观察结果,绿色判为阳性,棕色判为阴性,对LAMP产物进行电泳分析,观察其特征条带的情况.结果隐孢子虫卵囊DNA检测管经显色后时不再呈绿色,阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA呈棕色.隐孢子虫LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA无扩增产物.结论 LAMP方法敏感、特异、简便,可用于检测牛粪中的隐孢子虫.     

环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫的研究

目的 用环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫.方法 提取牛粪中隐孢子虫卵囊DNA.根据隐孢子虫18S rRNA序列及环介导等温扩增(100p-mediated isothermal amplification,LAMP)技术的原理,设计4条隐孢子虫特异引物,利用LAMP检测牛粪中隐孢子虫卵囊DNA和蓝氏贾第鞭毛虫DNA,以正常牛粪DNA为阴性对照.LAMP产物经SYBR Green I显色及电泳后观察结果,绿色判为阳性,棕色判为阴性,对LAMP产物进行电泳分析,观察其特征条带的情况.结果隐孢子虫卵囊DNA检测管经显色后时不再呈绿色,阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA呈棕色.隐孢子虫LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA无扩增产物.结论 LAMP方法敏感、特异、简便,可用于检测牛粪中的隐孢子虫.     

环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫的研究

目的 用环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫.方法 提取牛粪中隐孢子虫卵囊DNA.根据隐孢子虫18S rRNA序列及环介导等温扩增(100p-mediated isothermal amplification,LAMP)技术的原理,设计4条隐孢子虫特异引物,利用LAMP检测牛粪中隐孢子虫卵囊DNA和蓝氏贾第鞭毛虫DNA,以正常牛粪DNA为阴性对照.LAMP产物经SYBR Green I显色及电泳后观察结果,绿色判为阳性,棕色判为阴性,对LAMP产物进行电泳分析,观察其特征条带的情况.结果隐孢子虫卵囊DNA检测管经显色后时不再呈绿色,阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA呈棕色.隐孢子虫LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA无扩增产物.结论 LAMP方法敏感、特异、简便,可用于检测牛粪中的隐孢子虫.     

环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫的研究

目的 用环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫.方法 提取牛粪中隐孢子虫卵囊DNA.根据隐孢子虫18S rRNA序列及环介导等温扩增(100p-mediated isothermal amplification,LAMP)技术的原理,设计4条隐孢子虫特异引物,利用LAMP检测牛粪中隐孢子虫卵囊DNA和蓝氏贾第鞭毛虫DNA,以正常牛粪DNA为阴性对照.LAMP产物经SYBR Green I显色及电泳后观察结果,绿色判为阳性,棕色判为阴性,对LAMP产物进行电泳分析,观察其特征条带的情况.结果隐孢子虫卵囊DNA检测管经显色后时不再呈绿色,阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA呈棕色.隐孢子虫LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA无扩增产物.结论 LAMP方法敏感、特异、简便,可用于检测牛粪中的隐孢子虫.     

环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫的研究

目的 用环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫.方法 提取牛粪中隐孢子虫卵囊DNA.根据隐孢子虫18S rRNA序列及环介导等温扩增(100p-mediated isothermal amplification,LAMP)技术的原理,设计4条隐孢子虫特异引物,利用LAMP检测牛粪中隐孢子虫卵囊DNA和蓝氏贾第鞭毛虫DNA,以正常牛粪DNA为阴性对照.LAMP产物经SYBR Green I显色及电泳后观察结果,绿色判为阳性,棕色判为阴性,对LAMP产物进行电泳分析,观察其特征条带的情况.结果隐孢子虫卵囊DNA检测管经显色后时不再呈绿色,阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA呈棕色.隐孢子虫LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA无扩增产物.结论 LAMP方法敏感、特异、简便,可用于检测牛粪中的隐孢子虫.