JPG3单克隆抗体Dot-ELISA用于血吸虫病疗效考核的探讨

目的评估JPG3单克隆抗体Dot-ELISA在血吸虫病疗效考核中的应用价值.方法以吡喹酮(50mg·kg-1,顿服)治疗血吸虫病人后,采用JPG3单抗Dot-ELISA方法,追踪检测治疗后半年、1年和2年病人血清中的循环抗原(CAg),并计算其阴转率.结果治疗后半年、1年和2年病人血清中CAg阴转率分别为70.63%、80.40%和84.34%,与抗体检测方法(IHA)的阴转率分别为15.38%、27.24%和49.23%,有非常明显的差异;比较不同感染度、不同性别和不同年龄组患者之间CAg的阴转率均没有显著性差异.结论JPG3单抗Dot-ELISA在血吸虫病疗效考核中有较好的应用价值.     

血吸虫单抗夹心酶标法（S-ELISA）的建立及其检测循环抗原的实验研究

目的 建立血吸虫病循环抗原的检测方法.方法 用辣根过氧化物酶标记血吸虫单克隆抗体,建立夹心酶标法（S-ELISA）,并检测血吸虫病人及其它类型人群的血清.结果 S-ELISA对急性血吸虫病人的检出率为88.64%,OD值算术均数为0.372;慢性血吸虫患者和正常人的检出率分别为75.00%和6.00%,与肝吸虫和乙型肝炎血清的交叉反应为0,肺吸虫的交叉反应为10.39%.血吸虫不同感染度人群平均OD值无论是算术均数还是几何均数,均随着感染度的增加而呈现上升的趋势.结论 本方法操作简便,有较好的敏感性与特异性,适宜于对血吸虫病的检测.     

抗人IgG4单克隆抗体用于ELISA法诊断血吸虫病与疗效考核的研究

目的 探讨检测特异性IgG4诊断血吸虫病的效果及疗效考核价值。方法 采用SEA间接ELISA法检测血吸虫病人血清中的特异性IgG4和IgG4抗体及对肺吸虫、肝吸虫病人和健康人血清的交叉反应以及血吸虫病人治疗后不同时期特异性IgG4和IgG4抗体的变化。结果 血吸虫病人血清中IgG4敏感性为93．02％，特异性为100％，而IgG抗体的敏感性为95．35％，特异性为97．62％，IgG4与IgG无论其敏感性还是其特异性差异均无显著性（P＞0．05），与其它寄生虫病的交叉反应，IgG4显著低于IgG且差异显著（P＜0．05），血吸虫病人治后6个月IgG4抗体阴转率显著高于IgG（P＜0．05），治后12个月IgG4的阴转率与IgG比较差异非常显著（P＜0．01）。结论 ELISA法检测特异性IgG的诊断效能与IgG4相似，而特异性IgG4抗体可能系一短程抗体，用于评价疗效更具实际应用价值。     

血吸虫单抗夹心酶标法(S-ELISA)的建立及其检测循环抗原的实验研究

目的建立血吸虫病循环抗原的检测方法.方法用辣根过氧化物酶标记血吸虫单克隆抗体,建立夹心酶标法(S-ELISA),并检测血吸虫病人及其它类型人群的血清.结果S-ELISA对急性血吸虫病人的检出率为88.64%,OD值算术均数为0.372;慢性血吸虫患者和正常人的检出率分别为75.00%和6.00%,与肝吸虫和乙型肝炎血清的交叉反应为0,肺吸虫的交叉反应为10.39%.血吸虫不同感染度人群平均OD值无论是算术均数还是几何均数,均随着感染度的增加而呈现上升的趋势.结论本方法操作简便,有较好的敏感性与特异性,适宜于对血吸虫病的检测.     

抗人IgG4单克隆抗体用于ELISA法诊断血吸虫病与疗效考核的研究

目的探讨检测特异性IgG4诊断血吸虫病的效果及疗效考核价值.方法采用SEA间接EUSA法检测血吸虫病人血清中的特异性IgG和IgG4抗体及对肺吸虫、肝吸虫病人和健康人血清的交叉反应以及血吸虫病人治疗后不同时期特异性IgG和IgG4抗体的变化.结果血吸虫病人血清中IgG4敏感性为93.02%,特异性为100%,而IgG抗体的敏感性为95.35%,特异性为97.62%,IgG4与IgG无论其敏感性还是其特异性差异均无显著性(P＞0.05),与其它寄生虫病的交叉反应,IgG4显著低于IgG且差异显著(P＜0.05),血吸虫病人治后6个月IgG4抗体阴转率显著高于IgG(P＜0.05),治后12个月IgG4的阴转率与IgG比较差异非常显著(P＜0.01).结论ELISA法检测特异性IgG的诊断效能与IgG4相似,而特异性IgG4抗体可能系一短程抗体,用于评价疗效更具实际应用价值.     

Dot-ELISA法检测结核分枝杆菌特异性抗原CFP10的改进和建立

目的建立一种检测结核分枝杆菌特异性抗原培养滤液蛋白10（culture filtrate protein 10,CFP10）的斑点酶联免疫吸附试验（dot enzyme linked immunesorbant assay,Dot-ELISA）方法。方法采用真空泵抽吸浓缩检测样本,改进Dot-ELISA用改进前的和改进后的Dot-ELISA方法检测同一批临床确诊的结核性胸膜炎的胸腔积液25例和非结核性胸腔积液31例,比较方法改进前后检测CFP10的敏感性和特异性;改变实验程序中的工作条件（硝酸纤维素膜的孔径、滴加样本的体积、真空泵抽吸的压力、不同的封闭液、温育的温度和时间及抗体的滴度）,确定最适工作条件及重复性和稳定性。结果改进前检测CFP10的敏感性为76.0%,改进后并应用最适条件的敏感性为96.0%,差异有统计学意义（P=0.042）;特异性和重复性、稳定性实验结果表明,所建立的Dot-ELISA法特异性和改进前差异无统计学意义（P=0.641）,且稳定性和重复性较好。结论所建立的Dot-ELISA是一种比较敏感、特异和稳定的检测方法,能用于结核特异性抗原的检测和疾病的诊断。     

抗KLHIgG检测日本血吸虫病人血清中循环免疫复合物的研究

应用抗ＫＬＨＩｇＧ检测了１６７例日本血吸虫病人血清中循环免疫复合物，其检出率达９０％以上，显著高于对照组（７．４％），且治后病人约有６２．２％转阴，提示其具有潜在的疗效考核价值。     

SPA-ABC法用于急性日本血吸虫病的诊断且与ELISA、IHA的比较

本文报道了ABC—ELISA、常规ELISA、IHA检测90例急性血吸虫病人的血清特异抗体,其阳性检出率分别为100％、98.9％、97.8％。同一样本用两种方法做,ABC—ELISA较常规ELISA敏感者37例,抗体滴度平均高出1.3倍;较IHA敏感者62例,抗体滴度平均高出2.0倍。但50例健康人血清检测:ABC—ELISA未出现假阳性,常规ELISA、IHA假阳性各为2％、4％。显示SPA—ABC法敏感性高、特异性强且有助于低水平抗体的急性血吸虫病患者的诊断。     

日本血吸虫病循环免疫组份检测的研究

1血吸虫病诊断概述 血吸虫病是一种严重危害人类健康和社会经济发展的人兽共患寄生虫病,是我国重要的公共卫生问题之一。目前血吸虫病诊断主要有基于粪便检查的病原学诊断和基于抗体或抗原检测的免疫诊断两大类。病原学检查方法不易检出轻感染度病人,特别是在疫区人群经反复化疗,感染度低情况下，加之群众对粪检的依从性差，已难以用于大规模查病。     

学生标准化病人用于健康评估操作考核的探讨

[目的]了解学生标准化病人用于健康评估操作考核的效果。[方法]组织2004级五年制高职学生220人进行由学生标准化病人（SSP）参与的健康评估操作考核,结束后发放调查表,并进行分析。[结果]大多数学生认为由SSP参与的健康评估操作考核模式较合理,客观性强,能全面考核自己的健康评估能力、沟通技巧和职业态度等。[结论]把SSP运用于健康评估操作考核,可以达到对阳性体征考核的目的,且节约经费,能代替标准化病人（SP）运用于健康评估操作考核。     

Rapid and simple detection of a mycobacterium circulating antigen in serum of pulmonary tuberculosis patients by using a monoclonal antibody and Fast-Dot-ELISA

OBJECTIVES: Several immunoassays have been established for detection of Mycobacterium tuberculosis (MTB) antigens in serum, sputum and cerebrospinal fluid of tuberculous patients using polyclonal or monoclonal antibodies raised against different mycobacterium antigens. Some of these assays display both high sensitivity and specificity for the detection of these antigens. However, these assays require special and highly expensive equipment and the procedures require long periods for their completion. Thus, the rationale of this study was to establish and evaluate Fast-Dot-Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (FD-ELISA) as a fast, cheap and field applicable assay for detection of mycobacterium antigen in serum of patients with pulmonary TB. DESIGNS AND METHODS: This study included three groups: group I: 175 tuberculous patients with pulmonary TB proves with sputum Ziehl-Neelsen (ZN) for acid-fast bacilli and sputum culture (all cases were culture positive for MTB); Group II: 65 patients with diseases other than pulmonary TB as bronchial carcinoma (17 patients), bronchial asthma (29 patients) and chronic obstructive pulmonary disease (19 patients); group III: 50 healthy individuals. Groups II and III served as negative control groups. The target mycobacterium antigen was identified in both crude mycobacterium antigens extract and serum of patients with pulmonary TB, using western blotting technique and anti-TB monoclonal antibody (TB20-mAb) and then it was estimated in the serum samples of all studied groups as an index of tuberculosis, using a newly developed FD-ELISA. RESULTS: The target mycobacterium antigen was identified at 20 kDa molecular mass in crude mycobacterium antigens extract as well as in serum of patients with pulmonary TB. The developed FD-ELISA detected the mycobacterium antigen in the sera of 159 out of 175 pulmonary TB patients with a sensitivity of 90.8% and 93.0% positive predictive value (PPV). In addition, it identified 12 false weakly positive cases out of 115 samples of negative control groups (7 out of 65 non-TB patients and 5 out of 50 healthy individuals) with a specificity of 89.6% and 86.6% negative predictive value (NPV). Standardization of the FD-ELISA using a serial dilution of the purified mycobacterium antigen indicated that the assay was able to detect 1.8 microg/ml as a lowest detectable antigen concentration. CONCLUSIONS: The newly developed FD-ELISA is a simple, rapid and highly sensitive assay for detection of mycobacterium antigen in patients with pulmonary TB. Moreover, all steps were performed at room temperature and without the need to use expensive equipment, and this may enhance the application of this assay in tuberculosis screening programs. Further study is needed for confirmation of FD-ELISA reproducibility in light infected pulmonary TB patients and in a large population.     

ING1抑癌基因、c-erbB-2癌基因在血吸虫病并结肠癌中的表达

目的：探讨血吸虫病并结肠癌与ING1及c-erbB-2基因之间的相关性及其可能作用机制。方法：采用免疫组化Envision法检测血吸虫病并结肠癌62例、无血吸虫病56例结肠癌中的ING1、c-erbB-2的表达。结果：在血吸虫病并结肠癌组中的ING1阳性表达率（35．5％）明显低于无血吸虫病结肠癌组（46．4％），差异有统计学意义（P〈0．05）；而两组中的c-erbB-2阳性表达率的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：血吸虫病的感染对抑癌基因ING1在结肠癌发生中的失活有影响。     

Structural characterization of the epitope recognized by the new anti-Fy6 monoclonal antibody NaM 185-2C3

The epitope recognized by a new anti-Fy6 monoclonal antibody (MoAb) (clone name: NaM185-2C3) was characterized using peptides synthesized on pins (Epitope scanning kit). The clone was obtained from splenocytes of mice immunized with CHO cells expressing the recombinant Duffy glycoprotein. NaM185-2C3 recognized a linear epitope, the essential portion of which was pentapeptide Phe-Glu-Asp-Val-Trp comprising amino acid residues 22-26 of the main (336aa) isoform of the Duffy antigen. All the amino acid residues of the epitope, except Asp, were essential for the antibody-binding, because they could not be replaced by any or most other amino acid residues. The Asp residue could be replaced by most other amino acid residues and its replacement by some amino acid residues gave a distinct increase in the antibody-binding. The MoAb NaM185-2C3, similarly as other anti-Fy6 antibodies, inhibits interleukin (IL)-8-binding to the Duffy antigen. A part of the results was presented at ISBT meeting (Blanchard et al., 1998, Vox Sanguinis, 74, S1, Abstract no. 71).     

人性化护理在耳鼻喉科患者中的应用效果

目的：探讨人性化护理在耳鼻喉科中的应用效果.方法：选择我院2010年5月～2013年2月耳鼻喉科收治的患者130例,将其随机分为对照组和观察组,每组65例.对照组患者接受常规护理,观察组患者则接受人性化护理,对比两组患者对护理工作的满意率.结果：观察组患者对护理工作的满意率高于对照组,两者比较有统计学意义（P＜0.05）.结论：在耳鼻喉科实施人性化护理,对于提高患者满意度、促进病情康复具有积极意义.     

紫杉醇-抗HER2MAb偶联物体外抗肿瘤活性的研究

目的研究紫杉醇(Paclitaxel,TAX)与抗HER2(Human epidermal growth factor receptor2,表皮生长因子受体2)单克隆抗体(MAb)偶联物(TAX-抗HER2MAb)体外抗肿瘤作用。方法实验细胞为MCF-7乳癌细胞,MTT法检测细胞增殖抑制作用,进行统计学分析;FCM检测细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳分析凋亡细胞基因组DNA;Western-blot检测细胞HER2蛋白表达水平。结果在相同药物浓度下偶联物对肿瘤细胞抑制率明显高于TAX,具有统计学意义(P0.05);半数抑制率药物浓度(IC50)相差20%,具有统计学意义(P0.05);FCM和琼脂糖凝胶电泳DNA检测分析,偶联物作用的细胞凋亡效果明显高于TAX,Western-blot检测出偶联物作用的肿瘤细胞HER2蛋白表达量明显降低。结论 TAX-抗HER2MAb偶联物体外抗肿瘤作用明显高于TAX。