慢性活动性EB病毒感染中的病毒免疫逃逸机制

慢性活动性EB病毒感染是EB病毒相关疾病中的一种较少见类型，其发病既有病毒方面的因素，亦有机体免疫功能方面的因素。EB病毒感染T细胞或自然杀伤细胞导致的克隆性扩增在发病中起关键作用，但机制尚不十分明确。EB病毒有其特殊的策略逃避免疫监视，EB病毒基因编码产物（如EBNA-1、LMP1、LMP2、EBNA-2）与宿主基因表达产物（如白细胞介素-10、转化生长因子-β、CD40-CD40配体）都参与了EB病毒的免疫逃逸。根据其免疫逃逸原理选择新的治疗方法将是今后的研究重点。     

严重慢性活动性EB病毒感染12例临床回顾与随访

目的 报告12例符合诊断标准的严重慢性活动性EB病毒感染(SCAEBV).方法 回顾性分析12例SCAEBV患儿的临床资料、实验室、血清学、影像学和病理学检查以及初步随访的结果.结果 SCAEBV临床主要表现为发热、脾肿大、肝肿大、淋巴结肿大,其他表现有皮疹、黄疸、肺动脉高压、口腔溃疡和胆囊炎等.辅助检查的异常包括乳酸脱氢酶升高、肝功能异常、贫血、白细胞降低、中性粒细胞降低、血小板减少以及胸部X线的异常等.所有患者均有抗EB病毒衣壳抗原IgG抗体的升高,而其IgM和IgA的阳性率分别为33.3%和66.7%;检测5例EB病毒早期抗原IgG均为阳性,而其IgA的阳性率为40.0%.实时定量聚合酶链反应检测外周血EB病毒DNA载量(中位数)为8.12×10~6copies/ml.12例患者中4例死亡,其中2例死于噬血细胞综合征,1例死于多重感染,1例死于多脏器功能衰竭;其余病例随访中1例发生了T细胞性非霍奇金淋巴瘤,1例脾切除术后发生了肝肺综合征.结论 SCAEBV临床表现多样,常伴有各系统严重并发症,预后差,死亡率高,应引起儿科临床医师的关注.     

儿童慢性活动性EB病毒感染临床及实验室检查特征

目的 研究慢性活动性EB 病毒感染(CAEBV)患儿的临床及外周血淋巴细胞亚群等实验室检查特征,为CAEBV 的诊治提供依据.方法 分析13 例CAEBV 患儿的临床资料,包括患儿的临床表现、病毒学检测及淋巴细胞亚群测定结果,并与15 例急性EB 病毒感染(AEBV)病例作对照研究.结果 两组患儿临床表现类似,主要为发热、肝脾肿大、淋巴结肿大等传染性单核细胞增多症(IM)样症状,区别在于CAEBV 患儿病程较长,上述症状持续或反复出现.CAEBV 组患儿外周血EBV-DNA 载量明显高于AEBV 组(P<0.05).CAEBV 组VCA-IgG 明显高于AEBV 组(P<0.05).CAEBV 组外周血白细胞计数、淋巴细胞计数、B 细胞计数、总T 细胞计数、CD4+ T 细胞计数和CD8+ T 细胞计数均低于AEBV 组(P<0.05).随访13 例CAEBV 患儿,8 例死亡,2 例好转,2 例病情仍有反复,1 例转院后失访.15 例AEBV 患儿均治愈,随访1 年无病情反复.结论 CAEBV患儿临床表现多样,早期较难与AEBV 鉴别,预后差,病死率高.外周血EBV-DNA 载量、VCA-IgG 及淋巴细胞亚群的测定对CAEBV 诊断具有一定帮助.     

早产儿外周血淋巴细胞亚群分布的研究

目的 探讨早产儿外周血淋巴细胞亚群分布及与胎龄、出生体质量关系.方法 检测生后2 h内胎龄28～34周(A组)、34～37周(B组)早产儿及足月新生儿外周血淋巴细胞亚群CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+、CDl9+、CD(16+56)+分布情况.结果 早产儿CD3+CI)4+明显高于足月儿,CD3+CD8+、CD19+、CD(16+56)+均明显低于足月儿,差异有统计学意义(P值分别为0.002,0.002,0.036,0.0001);A组CD3+明显高于B组,CD19+、CD(16+56)+明显低于B组,差异有统计学意义(P值分别为0.015,0.025,0.0006);新生儿CD4+/CD8+与胎龄、出生体质量的相关系数分别为0.45和0.48(P值均＜0.01);CD(16+56)+百分比与胎龄、出生体质量的相关系数分别为0.53和0.58(P值均＜0.01).结论 早产儿淋巴细胞免疫功能低于足月儿;胎龄越小、出生体质量越低,其细胞免疫功能越不成熟;新生儿外周血CD4+/CD8+、CD(16+56)+百分比与胎龄、出生体质量有一定的相关性.     

手足口病患儿外周血淋巴细胞亚群变化的临床研究

目的 探讨手足口病(HFMD)患儿外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞、NK细胞的变化特点.方法 将41例HFMD患儿分为一般病例组23例,重症病例组18例,选择20例健康儿童作为对照组,采用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞、NK细胞.结果 CD3~+与CD4~+细胞表达:HFMD重症组、一般病例组、对照组依次显著降低(P＜0.01);CD8~+细胞表达:HFMD重症组、一般病例组、对照组依次显著降低(P＜0.05);NK细胞表达:HFMD重症组与一般病例组相似(P＞0.05),皆高于对照组(P＜0.05);B淋巴细胞表达:HFMD重症组、一般病例组、对照组依次升高(P＜0.01).结论 HFMD患儿免疫系统功能紊乱,其中细胞免疫有不同程度的抑制,体液免疫反应亢进.     

慢性活动性EB病毒感染患儿外周血单个核细胞EB病毒DNA及感染细胞类型检测的临床意义

目的 研究EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)慢性活动性感染(CAEBV)、急性感染(AEBV)以及正常儿童的外周血单个核细胞(PBMC)的EBV-DNA水平,以及EBV感染细胞类型的差异,探讨其与CAEBV临床表型的关系.方法 收集2004年3月至2008年4月在我院住院的CAEBV患儿10例,AEBV患儿13例,以及正常儿童12例的外周血单个核细胞,应用实时荧光定量PCR法检测EBV-DNA水平,并对EBV-DNA阳性的CAEBV和AEBV及正常儿童,用免疫磁珠法分选各种淋巴细胞后进行EBV编码的RNA-1(EBV encoding RNA-1,EBER-1)探针荧光原位杂交(FISH)确定EBV感染细胞的类型.结果 CAEBV组EBV-DNA载量为[(6.8×107)±(1.1 x 108)]/ml,AEBV组EBV-DNA载量为[(1.3×106)±(1.6×106)]/ml,两组比较差异有统计学意义,CAEBV组PBMC的EBV-DNA水平明显高于AEBV组(P＜0.01);7例CAEBV患儿做细胞分选及FISH后,发现EBV不仅可以引起B细胞感染,而且还引起NK细胞、CD4+和CD8+T细胞不同程度的感染,临床表现为反复或持续的传染性单核细胞增多症(IM)样症状.6例患儿以感染T细胞为主,其中1例以CD8+T细胞感染为主,临床表现除高热,肝脾淋巴结大,伴严重的血液系统一系或三系降低外,还并发了爆发性的致死性T淋巴细胞增殖综合征而死亡.1 例以NK细胞感染为主,临床表现还伴有对蚊虫叮咬高度敏感且IgE高达2500 U/ml.AEBV组7例患儿均显示感染B淋巴细胞,临床表现为可以痊愈的IM.6例正常儿童均为阴性.结论 CAEBV患儿体内存在更多的EBV复制和不同的EBV感染细胞类型,实时荧光定量PCR检测EBV-DNA水平并测定EBV感染的淋巴细胞类型有可能协助CAEBV临床个体化诊治和评估病情进展.

Abstract：

Objective To study the difference in the EBV-DNA level in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and the type of Epstein-Barr virus(EBV)-infected cells in pediatric patients with chronic active EBV(CAEBV) infection,acute EBV infection(AEBV)and healthy children,and to analyze the relationship between the above difference and the clinical manifestation of CAEBV.Method Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction (PCR) was used to detect the EBV-DNA levels in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) in 12 normal children, 10 pediatric patients with CAEBV infection and 13 pediatric patients with AEBV infection in our hospital between March 2004 and April 2008. Immunomagnetic bead cell fractionation and fluorescent in situ hybridization(FISH) by EBV encoding RNA-1(EBER-1) probe were used in the healthy children, EBV-DNA positive CAEBV patients and AEBV patients to detect the type of EBV-infected cells.Result The average EBV-DNA level in CAEBV patients'PBMC was(6.8×107±1.1×108)copies/ml, while the average EBV-DNA level of AEBV patients' PBMC was(1.3×106±1.6×106)copies/ml.The average EBV-DNA level of CAEBV infected patients' PBMC was significantly higher than that of AEBV infected patients' PBMC(P＜0.01).The cell fractionation and FISH in seven CAEBV patients showed that EBV in CAEBV patients infected not only B cells,but NK cells and CD4+ and CD8+ T cells to different degree, and these patients presented recurrent and persistent infectious mononucleosis(IM)-like symptoms.In 6 CAEBV patients infection mainly occurred to T cells, in one case,infection occurred mainly in CD8+T cells, and the patient died from fulminant and deadly T lymphocytes proliferative syndrome except presenting firstly high fever, enlargment of the liver, spleen, lymphnode and the severe decrease of one or three kinds of blood cells. In 1 CAEBV patient the infection was mainly found in NK cells, who presented with hypersensitivity to mosquito biting and high IgE level (2500 U/ml).But EBV in seven AEBV patients infection was found only in B cells who presented with only IM for one time and no EBV-infected PBMC were found in the remaining 6 healthy children. Conclusion There are much more EBV replications and different EBV-infected cell types in CAEBV patients. Detection of EBV-DNA level by real-time fluorescent quantitative PCR and the detection of the type of EBV-infected cells may help in diagnosis, treatment and development evaluation of children with CAEBV infection.     

窒息早产儿T淋巴细胞亚群变化研究

目的 探讨窒息对早产儿免疫功能的影响及其临床意义.方法 采用流式细胞仪对25例轻度窒息早产儿及20例重度窒息早产儿生后第1天、第14天静脉血T淋巴细胞亚群进行测定,对照组为同期在本科住院的无窒息早产儿22例.结果 重度窒息组CD3、CD4、CD4/CD8明显低于对照组与轻度窒息组,P<0.05;轻度窒息组CD3、CD4、CD4/CD8亦明显低于对照组,P0.05),但重度窒息组各项指标与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 窒息缺氧可导致早产儿T淋巴细胞亚群紊乱,窒息程度越重,T淋巴细胞亚群改变越明显.     

癫痫患儿外周血T淋巴细胞亚群及催乳素变化

采用APAAP法和放射免疫分析法检测癫痫患儿外用血T淋巴细胞亚群及血清催乳素（PRL）水平的变化。结果癫痫患儿CD4细胞及CD4／CD8比值明显低于对照组（P＜0．01）；CD8细胞和PRL水平显著高于对照组（P＜0．01），且上述指标的改变与癫痫的发作频率有明显的关系；PRL与CD4／CD8比值之间呈显著负相关，提示癫痫患儿体内神经内分泌免疫调节网络功能的紊乱在癫痫的发病中起着重要的作用。     

EB病毒相关性噬血细胞综合征的临床特征及外周血淋巴细胞亚群的变化

目的 分析EB病毒相关性噬血细胞综合征(EBV-AHS)患儿的临床特点,了解其外周血淋巴细胞亚群的变化.方法 20例EBV-AHS患儿,均符合噬血细胞综合征的诊断标准,并有EBV感染的证据,对其临床特点进行总结分析,并采用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群CD4+、CD8+、CD19+、CD16+CD56+、CD4+/CD8+的水平.选择20例健康儿童作为对照组.结果 在EBV-AHS的诊断标准中,以发热、血常规2系以上降低、乳酸脱氢酶升高(＞1 000 U/L)、高密度脂蛋白降低及铁蛋白增高(＞1 500 g/L)5项指标异常发生率最高,均为100%.与对照组相比,EBV-AHS患儿外周血CD8+T及CD19+B细胞比例增高(分别为53.70% ±10.6% vs 27.05% ±8.22%,24.95% ±5.34% vs11.85% ±4.53%),而CD4+T及CD16+CD56+NK细胞比例下降(分别为23.60% ±6.42% vs 45.20% ±5.74%,5.55% ±2.87% vs 14.70% ±4.16%),CD4+/CD8+比值降低(0.46±0.16 vs 1.84±0.68),差异均有显著性(P＜0.01).结论 EBV-AHS患儿细胞及体液免疫功能发生紊乱,导致了疾病的发生发展.     

不同年龄组淋巴细胞亚群的变化

不同年龄组淋巴细胞亚群的变化广州南方医院儿科（５１０５１５）李春富，吴学诗，丁雪梅，张肇和对淋巴细胞亚群的研究日益受到重视，但多涉及成年人［１］。作者就淋巴细胞亚群在儿童生长发育过程中淋巴细胞百分率与中性粒细胞百分率发生两次交叉现象中的作用，调查了不...     

慢性活动性EB病毒感染的研究进展

慢性活动性EB病毒感染(chronic active Epstein-Barr virus infection,CAEBV)是一种定义未明疾病,以严重的慢性或复发性传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)样表现为主要特征,临床表现包括发热、肝脾肿大、持续性肝炎、全身淋巴结肿大等,常伴外周血EB病毒载量的明显升高和(或)EB病毒相关抗体的异常改变.本病治疗困难,预后差,病死率高,死因多为肝衰竭、机会性感染或淋巴组织增生性噬血细胞综合征,目前尚无明确的治疗方案.越来越多的证据表明,被EB病毒感染的T细胞或自然杀伤细胞克隆性增殖在发病中起至关重要的作用.     

脓毒性休克患儿外周血淋巴细胞亚群的动态变化及临床意义

目的：探讨脓毒性休克(septic shock,SS)患儿外周血淋巴细胞亚群(总淋巴细胞、CD3＋T、CD4＋T、CD8＋T、CD19＋B、CD56＋NK)计数的变化特点及对预后的影响。方法检测 SS 重度组25例、SS轻度组24例入院时的外周血淋巴细胞亚群,并与同期健康体检小儿(正常对照组)25例进行比较分析。SS 重度组、轻度组于入院后第3、8天动态监测以上指标,同时记录病情变化和预后转归,并根据 SS 重度组转归分为死亡组与存活组,比较上述指标。结果入院时 SS 重度组、轻度组的淋巴细胞各亚群计数与正常对照组比较均有明显降低,三组相比差异具有显著性(P ＜0.05)。入院第3天,SS 轻度组的 CD4＋T、CD3＋T、总淋巴细胞计数较入院时有显著升高(P ＜0.05);SS 重度组除了 NK 细胞外,其余淋巴细胞亚群均较入院时显著降低(P ＜0.05)。入院第8天,SS 轻度组的 CD4＋T 计数与正常对照组比较已无显著差异(P ＞0.05);SS 重度组的 CD4＋T、CD3＋T、总淋巴细胞计数较入院时有显著升高,但与正常对照组比较差异仍有统计学意义(P ＜0.05),其余淋巴细胞亚群计数有所上升。SS 患儿重度组5例死亡(死亡组)均发生在入院后2～5 d,与其余生存的20例(存活组)相比,两组入院时的淋巴细胞各亚群计数比较无显著差异,死亡组入院第3天的淋巴细胞各亚群计数值明显降低,与存活组同期存在显著差异(P ＜0.05)。结论SS 患儿外周血淋巴细胞各亚群计数值越低,病情越严重,持续低水平提示死亡风险大;经过治疗,病情有效控制者首先表现为 CD4＋T、CD3＋T、总淋巴细胞计数上升,尤其是 CD4＋T。因此,动态监测 SS 患儿的淋巴细胞亚群对判断病情的严重程度、疗效、预后具有较高临床价值。     

Epstein-Barr virus load in cerebrospinal fluid of patients with chronic active Epstein-Barr virus infection

Chronic active Epstein-Barr virus (EBV) infection is a rare chronic mononucleosis syndrome involving clonally proliferating EBV-infected T-/NK-cells. EBV DNA was quantified in nonpleocytotic cerebrospinal fluid (CSF) of 9 patients. Three patients with neurologic and/or neuroimaging abnormalities showed high CSF copy numbers. In 1 patient, CSF copy number exceeded the peripheral blood value. CSF EBV-load may predict the central nervous system involvement of EBVT-/NK-cells.     

儿童急性白血病淋巴细胞变化与化疗和感染相关性探讨

目的 分析儿童急性白血病化疗后外周血中淋巴细胞的变化,探讨淋巴细胞值异常与患儿继发免疫紊乱,导致感染及重症感染发生之间的关系。方法 急性淋巴细胞白血病(ALL)27例,急性髓性白血病(AML)9例,经化疗骨髓持续缓解(CCR)9-12个月和21-24个月,外周血白细胞≥4.0×109／L时,用流式细胞仪、单克隆抗体(美国BD公司)分别检测患儿外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD16／56+细胞的百分数,进行统计分析。结果 1.随着化疗次数的增加,机体的免疫活性细胞会受到不同程度损害,T细胞亚群的比例明显失调,CD4+细胞百分数下降(P<0.01),CD8+细胞百分数上升(P<0.05),CD4+／CD8+细胞比值严重倒置(P<0.01),CD19+细胞百分数下降(P<0.05),临床上常见白血病患儿易感染和多发严重感染亦与此有关。2.CD16／56+标记的自然杀伤细胞并不随化疗次数增加而有变化(P>0.05),在白血病的治疗中有重要意义。3.AML外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+／CD8+、CD19+、CD16+／56+细胞百分数无改变(P>0.05)。结论 ALL患儿免疫活性细胞随着化疗次数的增加受到明显影响,有必要尽早进行免疫干预治疗,以提高患儿机体的免疫功能,以增强抗感染能力,恢复机体的免疫监督能力。对CD19+细胞减少,在感染发生时,给与丙种球蛋白,可减轻感染程度。     

弓形虫感染患儿淋巴细胞亚群及干扰素-γ的变化及临床意义

目的探讨淋巴细胞各亚群及细胞免疫应答产物干扰素-γ(IFN-γ)水平在弓形虫感染患儿细胞免疫应答中的变化趋势及临床意义。方法选取2011年1月至2014年4月检测出Tox-Ig M阳性的34例患儿为Tox-Ig M阳性组,同时选取既往感染的TOX-Ig G阳性患儿12例为TOX-Ig G阳性组,另选取行健康体检的健康儿童54例为对照组。应用流式细胞仪检测各组外周血淋巴细胞CD4+、CD8+、CD19+和NK细胞水平,并计算CD4+/CD8+比值;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组患儿血清中IFN-γ的水平。结果 Tox-Ig M阳性组患儿CD4+、CD4+/CD8+比值明显低于TOX-Ig G阳性组和对照组,CD8+、NK细胞和血清IFN-γ水平高于TOXIg G阳性组和对照组(P0.05)。TOX-Ig G阳性组患儿血清IFN-γ水平高于对照组(P0.05)。Tox-Ig M阳性组患儿CD8+水平与血清IFN-γ水平呈正相关(r=0.756,P0.05)。结论 CD4+、CD8+以及NK细胞等免疫细胞及其免疫应答产物IFN-γ水平变化在弓形虫感染过程中发挥着重要的作用。