痰中结核分枝杆菌利福平耐药性检测的研究

目的以比例法为检测标准,了解应用噬菌体生物扩增技术（PhaB法）检测结核分枝杆菌利福平耐药性应用价值。方法选择涂片阳性和涂阴培阳病人标本,利用PhaB法对结核分枝杆菌利福平的耐药性进行直接和培养后检测。结果156例标本中,112例抗酸染色（＋）以上,44例（＋）以下及涂阴培阳。PhaB法对（＋）以上和（＋）以下及涂阴培阳的痰标本检测结核分枝杆菌的敏感性、特异性、符合率分别为82．61％、96．63％、93．75％和80．00％、100．00％、95．46％。结论噬菌体生物扩增法检测结核分枝杆菌对利福平的耐药性具有较高的敏感性和特异性,与比例法符合率高。     

细针穿刺细胞学结合聚合酶链反应在诊断淋巴结结核中的应用

目的 研究细针穿刺细胞学(FNAC)结合聚合酶链反应(PCR)扩增检测结核杆菌TB-DNA的方法对诊断淋巴结结核的应用价值.方法 选取162例淋巴结结核病例进行细针穿刺,涂片HE染色和抗酸染色,用细胞学剩余材料或重新穿刺材料进行PCR扩增检测结核分枝杆菌TB-DNA.结果 162例标本中117例TB-DNA阳性,阳性率为72.2％,抗酸染色阳性71例,占43.8％,抗酸染色阳性的病例TB-DNA均阳性,对照组病例全部阴性.162例细胞学涂片,Ⅰ型17例,Ⅱ型67例,Ⅲ型78例,其中TB-DNA阳性率分别为11.8％、70.1％、88.5％,抗酸染色阳性率则分别为0％、41.8％、55.1％.两者阳性率在Ⅱ型Ⅲ型明显高于Ⅰ型(P＜0.01).结论 FNAC 结合PCR扩增检测TB-DNA的方法在诊断淋巴结结核的应用中,具有敏感而特异,简便而快速的独特优势.     

细针吸取细胞学结合PCR法在淋巴结结核诊断中的应用及其与传统微生物检测方法的比较

目的研究对比162例淋巴结结核的诊断方法。方法选取浙江省金华市中心医院于2008年1月~2010年6月经细针穿刺细胞学诊断淋巴结结核或可疑结核的病例,穿刺组织同时进行抗酸染色、细菌培养及PCR扩增检测结核分枝杆菌DNA(TB-DNA)。结果 TB-DNA阳性117例,阳性率为72.2%;抗酸染色阳性71例,阳性率为43.8%;细菌培养阳性99例,阳性率为61.1%;在61例FNAC直接诊断结核的病例,PCR及细菌培养阳性率明显高于抗酸染色(χ2值均为13.739,P<0.01),在101例FNAC诊断为可疑结核或不排除结核的病例,PCR阳性率高于细菌培养及抗酸染色(χ2值分别为6.706、13.612,P均<0.01);抗酸染色及细菌培养阳性的病例TB-DNA均阳性;FNAC结合PCR结果可明确诊断80.9%结核。结论 FNAC是诊断淋巴结结核简便有效的方法 ,PCR扩增高效、快速、敏感、特异,可作为FNAC诊断结核很好的补充,FNAC结合PCR技术是较好的淋巴结结核的诊断方法。     

环介导等温扩增技术在检测痰标本结核分枝杆菌中的应用

目的评价结核分枝杆菌环介导等温扩增技术（LAMP）快速检测试剂盒的临床应用效果。方法选取肺结核患者183例（肺结核组）和非肺结核患者120例（对照组）。采用涂片抗酸染色、罗氏培养法和LAMP对痰标本进行检测,采用结核分枝杆菌核酸扩增荧光检测试剂盒（TB- PCR）检测罗氏培养与LAMP结果不符的标本,分析LAMP与罗氏培养的检出率及两者的符合率。结果去除经鉴定为非结核分枝杆菌的10例标本,涂片抗酸染色、罗氏培养法和LAMP的阳性检出率分为64.1%（111/173）、64.7%（112/173）、78.6%（136/173）。LAMP与抗酸染色、罗氏培养阳性检出率的差异有统计学意义（P＜0.01）,抗酸染色与罗氏培养比较差异无统计学意义（P＞0.05）。以罗氏培养为金标准,LAMP检测的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为88.5%（108/122）、82.3%（149/181）、77.1%（108/140）、91.4%（149/163）,LAMP检测与罗氏培养的符合率为84.8%（257/303）。结论结核分枝杆菌环介导等温扩增技术的灵敏度和特异度高,具有简单易行、快速准确的特点,在肺结核患者的早期诊断中将发挥重要作用。     

耐药肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌L型四种检测方法比较

目的:比较耐多药肺结核患者痰标本中结核分枝杆菌L型的四种实验室检查方法及其临床意义.方法:对103例耐多药肺结核患者的痰标本分别采用萋-尼(Ziehl-Neelsen)抗酸染色法、改良罗氏培养法、聚合酶链反应(PCR)和结核分枝杆菌L型培养法进行检测.结果:结核分枝杆菌L型培养阳性率高于抗酸染色涂片、改良罗氏培养和PCR检测(P＜0.05～P＜0.005).结论:结核分枝杆菌L型培养可提高结核分枝杆菌的阳性检出率,对结核病的早期、快速诊断具有重要价值;耐多药肺结核患者有较高的结核分枝杆菌L型感染率,这也是结核病程缓慢变化、复发、难治的重要原因.     

应用基因芯片检测分枝杆菌在关节结核早期诊断中的临床应用

目的 探讨基因芯片技术对关节结核的早期临床诊断价值.方法 抽取关节疾病108例患者的关节积液,应用基因芯片技术对关节积液进行分枝杆菌的检测及其菌种鉴定,并将结果与传统的抗酸染色法进行比较.结果 108例关节疾病中,确诊为结核性关节炎59例.基因芯片法显示结核分枝杆菌阳性51例,阳性率86.44％ (51/59);非结核分枝杆菌感染8例,阳性率7.41％ (8/108);2例复合阳性.抗酸染色显示阳性5例,阳性率8.47％(5/59),该5例基因芯片法也阳性.基因芯片法和抗酸染色法的结核分枝杆菌阳性检出率有统计学差异(P＜0.01).非关节结核49例基因芯片法检测结核分枝杆菌均阴性,特异度为100％.结论 基因芯片技术对鉴别结核分枝杆菌及非结核分枝杆菌分型具有快速、敏感、特异性高的特点,在关节结核早期诊断和治疗上具有重要临床价值.     

结核杆菌的细菌学、分子生物学和免疫学检测方法评价

目的比较涂片法、荧光定量PCR方法和结核抗体检测法对结核病的诊断价值。方法选取2006年7月~2010年8月期间临床确诊或怀疑结核的检样326例,进行涂片抗酸染色、荧光定量PCR检测和采集血样进行结核抗体检查。结果 326例检样中,检出TB-DNA阳性107例,阳性率32.82%。其中脓液、支气管灌洗液和痰液最高,分别为48.84%（86例）、31.71%（82例）、30.39%（102例）。抗酸染色标本痰液阳性率为9.80%,脓液25.58%,支气管灌洗液15.85%。结核抗体阳性率52.45%。抗酸染色法与荧光PCR法的符合率81.60%,而结核抗体检测法与抗酸染色法的符合率61.97%,与荧光PCR检测法的符合率为80.37%。结论三种方法中,以结核抗体法阳性率最高,荧光PCR法次之,抗酸染色法阳性率最低。三种方法联合运用,可弥补单独采用1种方法阳性率低的缺点,几种方法之间可相互佐证,从而使准确性得以提高。     

TB-DNA扩增对结核菌L型感染临床和病理学对照研究

目的:探讨结核菌L型感染的病理学、细菌学以及与肺癌之间的关系;对PCR-TB-DNA阳性患者组织标本进行病理学、细菌学和分子生物学研究。方法:选择经病理和临床证实为结核病或肺癌新鲜活检和石蜡组织包块作为对照。共分4组:结核病组,肺癌组、阴性对照组、阳性对照组等,试验组每组不少于40例,对照组20例左右,用定量TB-PCR方法做进一步测定。结果:TB-DNA扩增对结核菌L型感染的检出率高于抗酸染色法;TB-L型菌与结核病内源性复发和外源性再染息息相关,与肺癌的发生也具相关性,加强对临床标本中TB-L型的检测可以提高结核病的诊断率。结论:肺结核患者发生肺癌的危险性明显高于一般人群,TB-L型在肺癌的发病中可能起着某种关键作用。     

PCR检测胸水中结核分枝杆菌DNA的临床意义

应用聚合酶链反应(PCR)对82例胸腔积液患者的胸水进行结核分枝杆菌(MTB)DNA检测,并与胸水涂片抗酸染色结果进行比较 。结果显示82例胸水的MTB-DNA PCR总阳性率为48.8％,其中53例结核性胸水的PCR和涂片检测结果分别为75.5％和5.7％(P<0.01);29例非结核性胸水的涂片结果均为阴性,但2例(6.9％)出现PCR阳性结果。PCR检测的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为75.5％、93.1％、95.2％和67.5％。结果表明,PCR检测胸水标本中的MTB具有快速、敏感、特异等优点。对影响PCR检测结果的某些因素进行了讨论。     

XpertMTB/RIF检查技术在周围型肺结核诊断中的应用价值

目的 评价XpertMTB/RIF检测技术在周围型肺结核诊断中的应用价值。 方法 选取浙江大学医学院附属杭州市胸科医院结核科痰涂片及培养均为阴性的周围型肺部肿块住院患者,且在超声引导下活检同期进行了纤维支气管镜检查的127例患者纳入研究。应用XpertMTB/RIF分别对肺穿刺组织及肺泡灌洗液进行检测,并与肺泡灌洗液涂片抗酸染色相比较,评价XpertMTB/RIF的诊断效能。对结核分枝杆菌培养阳性标本进行药敏实验,评估XpertMTB/RIF利福平耐药检测技术的一致性。 结果 根据肺结核临床诊断标准127例患者中确诊为结核53例,非结核患者74例。结核组穿刺组织标本XpertMTB/RIF检测阳性有43例,肺泡灌洗液标本XpertMTB/RIF检测阳性有14例,肺泡灌洗液涂片抗酸染色阳性3例,非结核组XpertMTB/RIF检测及涂片抗酸染色均为阴性。穿刺组织XpertMTB/RIF检测的敏感性优于肺泡灌洗液XpertMTB/RIF及涂片抗酸染色检测（χ2=106.999和25.976,P值均＜0.05）。穿刺组织、肺泡灌洗液XpertMTB/RIF检测及肺泡灌洗液涂片抗酸染色的AUC依次为0.906、0.632及0.528,不同标本及方法间AUC差异具有统计学意义（z=5.972、3.690和12.649,P值均＜0.05）。以药敏试验为金标准,7例结核分枝杆菌培养阳性药敏试验证实有5例利福平耐药,XpertMTB/RIF均检出存在利福平耐药,与药敏试验结果一致,准确率100.0%。 结论 周围型肺结核穿刺组织标本XpertMTB/RIF检测的敏感性和准确性均高于肺泡灌洗液检测与涂片抗酸染色,同时XpertMTB/RIF可对结核分枝杆菌利福平耐药进行检测,在周围型肺结核的早期诊断及治疗具有重要意义。     

肺癌组织中结核菌L型的检出与意义

目的 探讨结核菌Ｌ型与肺癌的可能关系。方法应用改良抗酸染色法及免疫酶染色法,对９６例经纤维支气管镜活检标本及２０例手术切除肺标本进行结核菌及其Ｌ型检测,结果：９３例肺癌组织抗酸染色及免疫酶染色阳性率分别为３８．７１％和５１．６１％,均高于非肺癌非肺结核（对照）组（Ｐ〈０．０１和Ｐ〈０．０５）,抗酸染色所检出的结核菌除１例为典型杆菌外,其余都为Ｌ型,免疫酶染色阳性中,有２９．７１％阳性颗粒见于癌细胞     

实时荧光定量聚合酶链反应技术在肾结核病理诊断中的应用价值

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)技术在肾结核病理诊断中的应用价值。方法回顾性收集我院泌尿外科通过后腹腔镜技术或开放技术行肾切除术后石蜡组织标本55例患者的临床资料,以术前尿结核分枝杆菌培养结果为金标准,并结合术后病理诊断结果,将研究对象分为结核肾病组25例(阳性组),非结核肾病组30例(阴性组)。采用Taqman探针法实时荧光定量PCR技术和抗酸染色技术检测每个石蜡组织标本,对比分析两种检测技术在肾结核病理诊断中的诊断效能,绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线评估两种方法在肾结核病理诊断中的价值。结果实时荧光定量PCR技术检测的敏感度与抗酸染色技术检测的敏感度分别为80.0%(20/25)和48.0(12/25),前者相比后者敏感度提高了32.0%,差异有统计学意义(χ²=5.556,P=0.018)。荧光定量PCR检测的特异度、阳性预测值、阴性预测值均高于抗酸染色检测的结果,但两者比较差异均无统计学意义(P>0.05)。荧光定量...     

荧光定量PCR技术检测石蜡包埋组织结核杆菌DNA的应用评价

[摘要] 目的 探讨荧光定量PCR技术（FQ-PCR）检测石蜡包埋组织结核分枝杆菌DNA（TB-DNA）在结核病诊断中的应用价值。方法233例的石蜡包埋组织标本采用实时荧光定量PCR技术检测TB-DNA，同时进行抗酸染色和组织病理学检查，以临床诊断结果为金标准，分别计算TB-DNA、抗酸染色和病理学检查的灵敏度、特异性、准确度、阳性预测值和阴性预测值。结果129例临床诊断为结核病的组织标本中，TB-DNA阳性107例， TB-DNA阴性22例；104例非结核病的标本中， TB-DNA阳性2例，TB-DNA阴性102例。TB-DNA检测的灵敏度、特异性、准确度、阳性预测值和阴性预测值分别为82.95%、98.08%、89.70%、98.17%、82.25%，均高于抗酸染色的63.57%、95.19%、77.68%、94.25%、67.80%和病理学检查的77.52%、96.15%、85.84%、96.15%、77.52%。结论 FQ-PCR技术检测石蜡包埋组织的TB-DNA用于各种结核病的诊断具有灵敏度高、特异性强的优点，与病理学检查相结合可以大大提高结核病的诊断率，适合于临床推广应用。     

金胺O荧光染色与抗酸染色用于石蜡包埋组织结核杆菌检测的对比分析

目的比较金胺O荧光染色法与抗酸染色法在石蜡包埋组织中结核杆菌检测的差异。方法收集病理诊断为结核病或符合结核的石蜡包埋组织121例,每1例样本连续切片,同时采用金胺O荧光染色法和抗酸染色法进行检测。结果荧光染色组83例阳性,阳性率为68.60%,抗酸染色组45例阳性,阳性率为37.19%,对每1例标本两种染色的结果进行配对t检验,结果有非常显著性差异(P<0.01)。结论金胺O荧光染色法阳性检出率高于抗酸染色,尤其是在那些含菌量少的标本。     

痰结核杆菌DNA扩增对肺结核疗效监测

为探讨聚合酶链反应(PCR)痰结核杆菌DNA扩增对肺结核疗效监测的临床实用价值,对31例初治涂阳肺结核患者进行了为期2年的随访研究,定期行痰涂片抗酸染色和PCR检查。结果31例肺结核患者有27例痰PCR在治疗结束前转阴,另外4例痰PCR持续阳性时间长达12月左右。31例中有3例初治有效后复发,其中2例为PCR持续阳性患者,1例为痰涂片和PCR复阳患者,PCR-复阳时间比涂片早2月。485份痰标本痰PCR和涂片检查总合率为88.9％(431/485)。提示痰PCR是检测肺结核疗效敏感的方法,痰PCR和涂片检查总符合率较高;复发多见于痰PCR持续阳性的患者。     

快速石蜡切片与抗酸染色在细胞蜡块结核杆菌检测中应用

目的 探究快速石蜡切片技术结合传统抗酸染色方法在细胞蜡块结核分枝杆菌检测中的应用价值。方法 分析2019年1月至2021年10月湖北省中西医结合医院病理检查确诊或临床怀疑结核性炎症病例的细胞蜡块标本103例,细胞蜡块均是通过超声快速组织处理系统制作,结合传统抗酸染色方法,通过改进制片及染色的过程,分析快速石蜡切片与抗酸染色在细胞蜡块结核杆菌检测中的应用价值。结果103例细胞蜡块标本中,结核分枝杆菌检测阳性41例,阳性率为39.8%(41/103),其中20例为结核杆菌簇状阳性。胸腔积液、腹腔积液标本88例,结核杆菌检测阳性34例。肺泡灌洗液标本10例,阳性3例。髋关节和体表包块细针穿刺抽吸脓液标本5例,阳性4例。多数病例通过重复送检或者同时送检活体组织,检测结果均保持一致。结论 快速石蜡切片技术结合传统抗酸染色在细胞蜡块中检测结核分枝杆菌具有阳性率高,耗时短,操作简便,成本低廉等优势,非常具有临床诊断价值。     

肺结核、肺癌患者外周血结核分枝杆菌及其L型的检测方法

目的：建立检测血液中结核分枝杆菌及其Ｌ型的简便方法,并对其临床应用进行评价。方法：将红细胞裂解后离心检测,建立ＰＣＲ法、直接培养法、溶血离心培养法、溶血离心涂片法和滴片法。结果：１３例肺结核和２５例肺癌患者中,肺结核和肺癌患者外周血结核分枝杆菌ＰＣＲ检测的阳性数为８例中３例和１１例中３例;结核分枝杆菌及其Ｌ型直接培养法总阳性率为１７．６５％,溶血离心涂片法、溶血离心培养法、滴片法的总阳性率分别为９．５２％、４１．１８％和５８．８２％;肺结核和肺癌患者外周血结核分枝杆菌以Ｌ型为主,表现为抗酸或非抗酸。结论：肺结核和肺癌患者外周血存在结核分枝杆菌及其Ｌ型,并以Ｌ型为主;溶血离心培养法和滴片法结合免疫酶染色可常规用于检测血液中结核分枝杆菌及其Ｌ型。     

肺结核56例痰标本FQ-PCR检测价值分析

目的:探讨不同检测方法对肺结核的诊断价值。方法:以实时荧光定量聚合酶链反应法、痰直接涂片找抗酸杆菌法、痰结核杆菌培养法对56例确诊肺结核患者痰标本检查结果进行比较。结果:荧光定量PCR法检出结核杆菌阳性率显著高于痰涂片抗酸染色和培养法(P<0.05),其他非肺结核结果阳性率仅为2.7%,特异度较高。结论:实时荧光定量聚合酶链反应法对肺结核诊断方面灵敏度及特异度较高,同时反映抗结核治疗过程中痰标本中的结核杆菌的数量变化,对抗结核药物疗效有良好的监控效果。     

结核感染T细胞检测在骨关节结核中的诊断价值

目的：评价结核感染T细胞检测（tuberculous infection of T cells spot test,T-SPOT．TB）在疑似骨关节结核病中的诊断价值。方法选取80例确诊为骨关节结核患者和44例排除结核患者。分别进行抗酸染色、结核菌培养、实时荧光定量 PCR 检测及 T-SPOT．TB,比较并分析检测结果。结果 T-SPOT．TB 的敏感度、特异度和准确度分别为82．5％、75．0％、79．8％。T-SPOT．TB 的阳性检出率显著高于抗酸染色、结核分枝杆菌培养（P ＜0．05）,而在不同疾病部位（脊柱、四肢关节）及不同病程分组间阳性检出率差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论 T-SPOT．TB 可以作为骨关节结核病的重要辅助诊断方法。     

68例骨关节结核的临床特征

目的 探讨骨关节结核的临床特点。方法 对北京协和医院2013年1月至2020年12月住院治疗的68例骨关节结核患者进行回顾性分析。结果 68例骨关节结核患者中,男42例(61.8%)、女26例(38.2%),中位年龄56岁。病原学诊断39例(57.4%)、临床诊断29例(42.6%)。从发病至确诊的病程中位时间为4个月。局部疼痛和功能障碍(86.8%)是最常见的临床表现,其次是发热(47.1%)、消瘦(36.8%)和盗汗(13.2%)。27例(39.7%)合并其他部位活动性结核。单一部位骨关节结核51例(75.0%)、多发骨关节结核17例(25.0%),胸椎和腰椎是最常见受累部位。92.7%的患者结核T细胞检测阳性。患者骨组织活检标本提示上皮样肉芽肿伴/不伴坏死,75.0%的患者组织PCR检测结核分枝杆菌DNA阳性,55.1%的患者组织分枝杆菌培养阳性,20.0%的患者组织抗酸染色阳性。相较单一部位骨关节结核,消瘦患者出现多发骨关节结核的风险是无消瘦患者的5.333倍(P=0.013)。结论 骨关节结核诊断困难,结核T细胞检测是有效的鉴别手段,组织活检是确诊的关键,PCR检测结核分枝杆...