电针对链脲佐菌素AD模型大鼠海马区Aβ阳性细胞表达和脑内SOD活性的影响

[摘 要] 目的：探讨电针对AD大鼠学习记忆能力改善的可能机制。方法：将Wistar大鼠随机分成正常组、盐水组、模型组、西药组和电针组,每组12只。侧脑室注射STZ制备动物模型,以Morris水迷宫评价大鼠学习记忆能力,用免疫组法和可见光分光光度计比色法观测大鼠海马区Aβ阳性细胞表达情况和脑内SOD活性情况。结果：与正常组及盐水组比较,模型组海马区Aβ蛋白表达水平升高(P<0.01),SOD活性降低(P<0.01)。治疗后电针组与模型组比较,Aβ蛋白表达水平降低(P<0.01) ,SOD活性升高(P<0.01)。结论：电针可能通过降低Aβ蛋白表达,提高SOD活性来改善学习记忆能力。     

固本健脑液对阿尔兹海默症大鼠生物钟基因Clock、Bmal1及海马Aβ的影响

目的:通过观察固本健脑液对AD大鼠学习记忆、生物钟基因及海马Aβ含量的影响,探索该方改善学习记忆和睡眠障碍的可能机制。方法:实验大鼠随机分为正常组、模型组、药物高、中、低剂量组。自主活动分析仪检测各组大鼠的自主活动情况;Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力;ELISA检测大鼠海马Aβ1-40和Aβ1-42含量;免疫组化检测SCN中Bmal1和Clock的蛋白表达水平。结果:自主活动结果显示模型组大鼠活动时间较空白组呈现出显著的增加(P<0.01);各给药组出现活动时间减少(P<0.05)。Morris水迷宫结果显示,模型组大鼠较空白组逃避潜伏期显著延长,目标象限游泳时间百分比显著下降(P<0.01);各观察组逃避潜伏期显著缩短,目标象限游泳时间百分比显著上升(P<0.01,P<0.05);ELISA结果显示,模型组大鼠海马Aβ1-40和Aβ1-42含量较空白组显著增多(P<0.01),固本健脑液中、高剂量组海马Aβ1-40和Aβ1-42含量显著下降(P<0.01)。免疫组化结果:模型组大鼠SCN中Bmal1和Clock表达水平较空白组下降(P<0.01),给药后,各组大鼠SCN中Bmal1和Clock表达上升(P<0.05)。结论:结果显示AD大鼠存在一定程度的昼夜节律紊乱且生物钟节律基因表达降低,固本健脑液干预后可改善痴呆大鼠的昼夜节律紊乱及海马Aβ的异常表达,其机制则可能与固本健脑液上调Bmal1、Clock表达有关。     

基于雌激素受体通路探讨青娥丸对CUMS大鼠的抗抑郁机制

目的:研究青娥丸对慢性温和不可预知应激模型(CUMS)大鼠的抗抑郁效果,及其对雌激素受体及相关信号通路的调控作用,探讨青娥丸的抗抑郁机制。方法:54只SD大鼠建立CUMS抑郁大鼠模型,实验设为正常组、模型组、草酸依他普伦组(6.3 mg·kg^-1)及青娥丸低、中、高剂量组(1.71,5.13,15.39 g·kg^-1)。CUMS造模4周后给予各组相应药物治疗2周,采用行为学[糖水消耗实验(SPT),强迫游泳实验(FST),旷场实验(OFT)]评价大鼠抑郁状态;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测雌激素受体α(ERα),雌激素受体β(ERβ),脑源性神经营养因子(BDNF)及酪氨酸激酶受体B(Trk B)的蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠的糖水消耗率及旷场得分均下降(P<0.05,P<0.01),游泳不动时间显著延长(P<0.01),同时ERα,ERβ,BDNF和Trk B的蛋白表达水平下降(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠的行为学表现得到改善,糖水消耗率及旷场得分增加(P<0.05,P<0.01),游泳不动时间减少(P<0.05),同时ERα,ERβ,BDNF和Trk B蛋白的表达明显上调(P<0.05,P<0.01),其中青娥丸中剂量组的调节作用更为显著。结论:青娥丸可改善CUMS模型大鼠的抑郁样行为,其机制可能与上调ERα,ERβ的表达,激活雌激素受体介导的ERβ/BDNF/Trk B通路起到神经保护作用有关。     

基于明确靶标及分子对接验证技术探究五味子醇甲对阿尔茨海默病的作用机制

目的：明确五味子醇甲对阿尔茨海默病的作用机制。方法：选取24只大鼠按体质量随机分为空白组、模型组和给药组，每组8只。采用对大鼠海马CA1区注射Aβ_1-40的方法制备阿尔茨海默病大鼠模型，造模1 d后灌胃给予30 mg/kg的五味子醇甲溶液，造模7 d后，进行Morris水迷宫行为学测试。在此基础上，对与阿尔茨海默病明确相关的β-分泌酶、雌激素受体β(ERβ)、谷氨酸受体1(NMDAR1)等蛋白进行验证，以蛋白表达量及药物成分与靶标作用的分子对接能进行评价，并通过分子对接技术计算五味子醇甲与各蛋白的对接能，达到理论验证的目的。结果：与空白组比较，模型组大鼠海马组织匀浆中β-分泌酶的活性含量明显增加(P<0.01),大鼠海马组织中ERβ表达显著降低(P<0.01),P-P38/P38表达明显升高(P<0.01),BACE1表达显著升高(P<0.01),NMDAR1表达明显降低(P<0.01);与模型组比较，给药组大鼠海马组织匀浆中β-分泌酶的活性含量明显减少(P<0.01),给药组大鼠海马组织中ERβ表达显著升高(P<0.01...     

酸枣仁汤对抑郁模型大鼠海马DKK-1与β-catenin、GSK-3β的影响

目的：探讨酸枣仁汤的抗抑郁作用及机制。方法：48只大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、酸枣仁汤低、中、高剂量组及氟西汀组,采用慢性轻度不可预见性应激制备抑郁大鼠模型,酸枣仁汤与氟西汀连续治疗28 d后观察各组大鼠体质量、糖水消耗、旷场实验得分,免疫组化法检测海马中DKK-1蛋白表达,荧光定量PCR法检测海马组织中β-catenin及GSK-3β的mRNA表达。结果：与正常组比较,模型组大鼠体质量、糖水偏爱百分比和旷场试验得分均显著降低(P<0.01),海马区DKK-1蛋白表达明显上升(P<0.01),GSK-3β的mRNA表达明显下降(P<0.01);与模型组比较,酸枣仁汤中、高剂量组、氟西汀组较模型组体质量、糖水偏爱百分比和旷场试验得分均明显升高(P<0.05,P<0.01),酸枣仁汤低、中、高剂量组及氟西汀组大鼠海马中DKK-1蛋白表达显著下降(P<0.01),酸枣仁汤高剂量组大鼠海马中β-catenin、GSK-3βmRNA表达明显上升(P<0.05,P<0.01)。结论：酸枣仁汤能够调节抑郁模型大鼠海马组织中DKK-1蛋白与β-...     

双蓣调脂汤对高胆固醇血症模型大鼠肝组织中HMGCR、ABCG5及ABCG8表达的影响

目的探讨双蓣调脂汤治疗高胆固醇血症的可能作用机制。方法32只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、双蓣调脂汤组和辛伐他汀组,每组8只。除正常组给予普通饲料外,其余各组大鼠均给予高脂饲料喂养4周建立高胆固醇血症模型。双蓣调脂汤组给予双蓣调脂汤7.8 g/(kg·d)灌胃,辛伐他汀组给予辛伐他汀混悬液4 mg/(kg·d)灌胃,对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃,每组均连续灌胃4周或8周,HE染色法观察大鼠肝组织病理变化,测定各组大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,并采用荧光定量PCR、Western Blot、免疫组化法检测肝组织中3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、三磷酸腺苷结合盒G5(ABCG5)和三磷酸腺苷结合盒G8(ABCG8)mRNA或蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠肝组织出现明显的脂肪变性,TC、TG及LDL-C水平均显著升高(P<0.01),肝组织中HMGCR、ABCG5和ABCG8表达升高;与模型组比较,双蓣调脂汤组肝脏脂肪变性明显减轻,TC、TG及LDL-C均明显降低(P<0.05),肝组织中HMGCR mRNA及蛋白水平显著降低(P<0.01),而ABCG5 mRNA和ABCG8 mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.01),并且双蓣调脂汤灌胃8周比4周作用更显著(P<0.01)。结论双蓣调脂汤能减轻肝脏脂肪变性,降低高胆固醇血症大鼠血脂,其机制可能与下调HMGCR表达,同时上调ABCG5和ABCG8表达有关。     

左归丸对去势骨质疏松模型大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:观察左归丸对去势骨质疏松大鼠模型骨代谢和Wnt/β-链蛋白(β-catenin)信号通路的影响,探讨左归丸防治骨质疏松症的分子生物学机制。方法:采用双侧卵巢切除法制备绝经后骨质疏松症大鼠模型,60只雌性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,雌二醇组(戊酸雌二醇片0.05 mg·kg^-1·d^-1),左归丸低、中、高剂量组(5.5,11,22 g·kg^-1·d^-1)。从造模成功后(第13周)开始,每日灌胃(ig)1次,共持续12周。给药结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠股骨组织结构变化;双能X射线仪检测各组大鼠股骨骨密度(BMD)和骨矿质(BMC);MTS Acumen3型生物力学测试系统检测各组大鼠骨生物力学性能;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中骨碱性磷酸酶(BALP),骨钙素(BGP),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP),Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)等骨代谢标志物含量及雌二醇(E2)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠胫骨组织中Wnt2,β-catenin,低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)水平及糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)磷酸化水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠BMD,BMC,最大载荷和刚度显著降低(P<0.01),血清E2和PINP含量显著降低(P<0.01),BALP,BGP,TRAP含量显著升高(P<0.01),骨组织中Wnt2,p-GSK-3βSer9,LRP5和β-catenin蛋白表达水平显著降低(P<0.01),股骨骨小梁稀疏变细,数量减少;与模型组比较,雌二醇组和左归丸各组BMD,BMC,最大载荷和刚度明显升高(P<0.05,P<0.01),血清E2和PINP含量明显升高(P<0.05,P<0.01),BALP,BGP,TRAP含量显著降低(P<0.01),骨组织中Wnt2,p-GSK-3βSer9,LRP5,β-catenin蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),股骨骨小梁较模型组变粗,数量增加,结构基本清晰。结论:左归丸对去势大鼠骨质疏松症具有一定的防治作用,其机制可能与提高雌激素水平,激活Wnt/β-catenin信号通路,上调Wnt2和LRP5蛋白表达,抑制GSK-3β的活性,减少β-catenin的降解,协调骨形成与骨吸收的动态耦联平衡,纠正骨代谢紊乱,从而改善骨组织形态相关。     

电针通过mTOR1自噬途径调节改善胰岛素抵抗认知障碍大鼠的学习记忆功能

目的:从哺乳动物雷帕霉素靶蛋白1(mTOR1)自噬途径探讨电针治疗胰岛素抵抗(IR)大鼠认知障碍的可能机制。方法:45只Wistar大鼠采用随机数字表法选取10只进行普通饲料喂养命名为正常组,其余35只给予高脂饲料喂养8周,造模结束后检测各组大鼠FINS、FPG,计算IRI,采用Morris水迷宫实验剔除不合格认知功能损害模型,将其余胰岛素抵抗认知障碍大鼠随机分为模型组、假电针组和电针组,电针组电针刺激“百会”“足三里(后)”“中脘”“关元”“丰隆”5穴,“百会穴”向后方平刺2～5 mm,不接电针;假电针组进行针刺后连接电针但不接通电源,每周3次,共8周。干预结束,水迷宫检测大鼠行为学改变;Western blot法检测大鼠下丘脑可溶性淀粉样蛋白(Aβ1-42)、海马磷酸化tau蛋白(p-Tau)、S100钙结合蛋白B重组蛋白(S100b)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白1(mTOR1)、WIPI2、自噬相关基因B(Atg13)及Beclin1蛋白的表达;免疫组织化学检测下丘脑阳性表达并计算Aβ1-42与p-Tau平均光密度。结果:与正常组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长,差异具有统计学意义(P<0.01),目标停留象限时间缩短,差异具有统计学意义(P<0.01),穿越平台次数显著减少,差异具有统计学意义(P<0.01),Aβ1-42、p-Tau、S100b及mTOR1蛋白表达水平显著增加,差异具有统计学意义(P<0.01),Beclin1、WIPI2及Atg13蛋白含量相对降低,差异具有统计学意义(P<0.01),模型组大鼠Aβ1-42、p-Tau的阳性表达明显增多,平均光密度明显增高,差异具有统计学意义(P<0.01);与假电针组、模型组比较,电针组大鼠逃避潜伏期显著缩短,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),目标停留象限时间增加,差异具有统计学意义(P<0.01),穿越平台次数显著增加,差异具有统计学意义(P<0.01),Aβ1-42、p-Tau、S100b及mTOR1的蛋白表达量降低,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),Beclin1、WIPI2及Atg13蛋白表达水平出现了不同程度的增加,差异具有统计学意义(P<0.01),电针组Aβ1-42、p-Tau的阳性表达出现不同程度减少,平均光密度明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:电针可以有效改善胰岛素抵抗认知障碍大鼠下丘脑区的Aβ1-42、p-Tau及S100b表达水平,降低下丘脑区Aβ1-42与p-Tau阳性表达,其作用机制与电针抑制mTOR1通路激活自噬有关。     

基于PP2A与GSK-3β探讨丹栀逍遥散对阿尔茨海默病模型大鼠tau蛋白磷酸化水平的作用机制

目的：研究丹栀逍遥散对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马中tau蛋白磷酸化水平与糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、磷酸丝氨酰/磷酸苏安酰蛋白磷酸酶2A(PP2A)不同位点的影响及作用机制。方法：选用90只SPF级Wistar雄性大鼠,用双侧海马区注射冈田酸的方式建立AD大鼠模型。筛选出造模成功的大鼠,随机分为模型组,安理申组(0.5 mg·kg^-1),丹栀逍遥散高、中、低剂量组(17.55、8.77、4.38 g·kg^-1),连续灌胃42 d,1次/d。Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,尼氏染色观察海马区神经元形态结构,实时荧光定量聚合链式反应(Real-time PCR)检测tau蛋白、GSK-3β、PP2A mRNA表达情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测tau蛋白、GSK-3β、PP2A及相关蛋白的表达。结果：与空白组比较,模型组大鼠学习记忆能力显著降低(P<0.01),海马CA3区细胞结构异常,排列杂乱,数量减少,GSK-3β mRNA、GSK-3β、p-GSK-3β-Tyr216、p-PP2A、p-tau表达...     

远志皂苷通过UPP通路清除AD大鼠脑神经细胞代谢废物积聚的作用机制研究

目的探讨远志皂苷（tenuigenin, TEN）对AD大鼠脑内β淀粉样蛋白（amyloid β protein, Aβ）沉积、异常磷酸化Tau浓度积聚的清除作用及其作用机制。方法大鼠右侧海马CA1区注射Aβ1-40建立AD模型,透模成功的大鼠分为模型组、TEN低、中、高剂量组,并用远志皂苷（18.5、37.0、74.0 mg/kg）对大鼠进行灌胃治疗,另设假手术组;免疫组织化学法观察大鼠脑海马神经元中Aβ1-40、Tau p-Ser262 蛋白的表达;Western blot检测大脑神经元中泛素蛋白（ubiquitin,Ub）和泛素连接酶E3（ubiquitin-protein ligase E3）的表达水平。ELISA法检测大脑神经元中26S蛋白酶体的含量。结果免疫组化显示,与假手术组比较,模型组大鼠海马神经元中Aβ、Tau p-Ser262 蛋白阳性反应的神经元数量显著增多（P<0.01）;Western blot 检测显示,与假手术组比较,模型组大鼠脑组织中Ub表达水平上调,而E3表达下调（P<0.01）。ELISA检测显示,AD大鼠脑内的26S蛋白酶体含量显著减少（P<0.01）。与模型组比较,TEN各组大鼠海马神经元中Aβ1-40、Tau p-Ser262和Ub表达水平下降明显,泛素连接酶E3表达水平和26S蛋白酶体含量也明显升高,以37.0 mg/kg和74.0 mg/kg剂量组效果最佳（P<0.05, P<0.01）。结论UPP通路参与了AD的发生过程,远志皂苷能明显降低AD大鼠脑内Aβ1-40沉积和tau异常磷酸化水平。     

黄连素对阿尔兹海默症大鼠学习记忆功能及海马组织GSK3β、p-Tau蛋白表达的影响

目的探究不同剂量黄连素对阿尔兹海默症大鼠学习和认知功能的影响,以及黄连素对丝氨酸蛋白激酶3β(serine protein kinase 3β,GSK3β)、p-Tau蛋白表达的影响。方法大鼠分为假手术组、模型组、黄连素低中高剂量组,除假手术组外,其余各组采用腹腔注射D-半乳糖联合Aβ25-35脑注射的方法建立阿尔兹海默症模型大鼠,药物干预4周后,检测Morris水迷宫实验、海马组织GSK3β、p-Tau蛋白表达量。结果与模型组相比,黄连素治疗组大鼠逃避潜伏期、游泳总路程不同程度降低,穿越目标区域次数增加,其中黄连素高剂量组降低最显著(P<0.01,P<0.05)。黄连素组海马GSK3β、p-Tau蛋白表达较模型组显著降低,高剂量组降低最显著(P<0.01)。结论黄连素能改善阿尔兹海默症大鼠学习和记忆能力,其中150 mg/kg黄连素对善阿尔兹海默症大鼠治疗效果优于50 mg/kg及100 mg/kg,其机制与黄连素降低大鼠海马组织GSK3β、p-Tau蛋白表达有关。     

茵陈蒿汤不同组分降脂作用的比较

目的:研究茵陈蒿汤水提和醇提组分的降脂作用及其机制。方法:给大鼠灌胃脂肪乳制备高血脂模型,分别给模型大鼠灌胃高、中、低剂量的茵陈蒿汤水提、醇提组分连续21 d,测定大鼠血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量。结果:模型组大鼠与正常组大鼠比较,血清TG、TC、LDL-C含量极显著升高(P<0.001),HDL-C含量极显著降低(P<0.001)。与模型对照组比较,茵陈蒿汤水提组分高、中剂量组血脂各项指标明显改善(P<0.01或P<0.05),醇提组分各剂量组均有明显改善(P<0.001或P<0.01),醇提组分模型大鼠血脂各项指标的改善明显优于水提组分。结论:茵陈蒿汤水提组分、醇提组分均有较强的降血脂作用,但醇提组分的降脂作用优于水提组分。     

姜黄素对AD双转基因小鼠的Aβ产生神经保护作用的影响

目的:观察姜黄素对3月龄APPswe/PS1d E9双转基因小鼠干预6个月脑内Aβ40,Aβ42和Aβ42寡聚体-ADDLs的变化,探讨姜黄素的神经保护作用。方法:将APPswe/PS1d E9双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮组(10 mg·kg-1·d-1)和姜黄素高、中、低剂量组(400,200,100 mg·kg-1·d-1),正常对照组采用的是同月龄同背景的C57/BL6J小鼠,于3月龄开始连续灌胃6个月,运用免疫组织化学方法和Western blot方法观察小鼠海马CA1区Aβ40,Aβ42和ADDLs的阳性细胞及分布和蛋白表达的变化。结果:免疫组织化学和Western blot方法均观察到模型组小鼠海马CA1区Aβ40,Aβ42和ADDLs阳性细胞数和蛋白表达均较对照组增加(P<0.01)。与模型组相比,免疫组化结果罗格列酮组与模型组相比均降低(P<0.05),Western blot见显著减低(P<0.01);姜黄素高剂量组Aβ40,Aβ42和ADDLs阳性细胞数和蛋白表达均减少,中剂量组显著减少(P<0.01),低剂量组Aβ40和Aβ42蛋白表达也减少。结论:姜黄素连续干预6个月仍可以显著减少APPswe/PS1d E9双转基因小鼠脑内海马Aβ40,Aβ42和ADDLs的表达,姜黄素是否可以通过下调Aβ40,Aβ42和ADDLs的表达,影响Aβ级联反应,从而发挥神经保护,还需要更深入的研究。     

活血解毒方对糖尿病大鼠胰岛β细胞保护作用的研究

目的:观察活血解毒方对糖尿病大鼠胰岛β细胞的保护作用。方法:雄性SD大鼠分为正常组,模型组,活血解毒方高、低剂量组。链脲佐菌素(STZ)腹腔注射65mg/kg造模,放免法检测血清C肽,HE染色观察胰岛,免疫组化法观察胰岛素的表达,TUNEL法检测胰岛细胞凋亡,免疫组化法检测胰岛中核因子-κB(NF-κB)的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血糖升高(P<0.05),血清C肽含量降低(P<0.01),胰岛萎缩,胰岛内胰岛素表达减少(P<0.05),凋亡增加(P<0.05),NF-κB表达增加(P<0.01)。与模型组比较,活血解毒方低剂量组血糖降低(P<0.05),活血解毒方高、低剂量组大鼠C肽含量升高(P<0.01),胰岛内胰岛素表达增加(P<0.01,P<0.05),凋亡减少(P<0.01),NF-κB表达减少(P<0.01)。结论:活血解毒方可能是通过抑制细胞凋亡及胰岛中NF-κB的表达保护β细胞,促进C肽分泌。     

脑尔康对AD模型小鼠脑内APP,Aβ表达的影响

目的:观察复方中药脑尔康对慢性铝中毒阿尔茨海默病(AD)模型小鼠学习记忆及脑内淀粉样前体蛋白(APP),β淀粉样蛋白(Aβ)表达的影响,探讨该药抗痴呆的分子机制。方法:60只昆明小鼠随机分为空白对照、模型、西药吡啦西坦、脑尔康高、中、低剂量6组,除空白组外,其余各组均采用氯化铝(AlCl3)溶液以100 mg.kg-1ip造模,空白组给予等量生理盐水ip,3个剂量脑尔康组给予脑尔康(34,17,8.5 g.kg-1.d-1)连续ig 50 d,吡啦西坦组给予吡啦西坦(10 g.L-1)ig,空白组和模型组给予等量生理盐水ig。采用跳台法检测AD模型小鼠学习记忆成绩,用免疫组织化学方法观察脑尔康对AD模型小鼠脑皮层及海马结构区域APP,Aβ表达的影响,对APP,Aβ阳性反应物质采用图像信号采集与分析系统进行灰度分析。结果:与对照组比较,模型组记忆潜伏期明显缩短(P<0.01),学习潜伏期明显延长(P<0.05),学习与记忆的错误次数明显增多(P<0.01);用药各组分别与模型组比较记忆潜伏期明显延长(P<0.01),学习潜伏期明显缩短(P<0.05),学习与记忆的错误次数明显减少(P<0.01)。各用药组模型小鼠脑内APP,Aβ的表达均不同程度减少(P<0.05或P<0.01);脑尔康3个剂量组比较存在明显量效关系。结论:脑尔康对慢性铝中毒AD模型具有显著的抗痴呆作用,其作用机制可能与调控APP,Aβ表达有关。     

辛润苦泄法对胰岛素抵抗大鼠TNF-α和PPAR-γ表达的影响

目的:研究辛润苦泄法对胰岛素抵抗大鼠肝脏和脂肪组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)表达的影响。方法:采用高糖高脂饲料喂养制作胰岛素抵抗大鼠模型,将成功造模的30只大鼠随机分为模型组、唐旨宁组和文迪雅组,每组10只。药物干预6周后,用ELISA方法定量测定血清中TNF-α水平;免疫组织化学方法检测肝脏和脂肪组织中PPAR-γ蛋白表达;RT-PCR法检测肝脏和脂肪组织中TNF-αmRNA及PPAR-γmRNA的表达。结果:高糖高脂饲料喂养6周后,模型组大鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和血清胰岛素(FIN)s均明显高于对照组(P<0.01),胰岛素敏感性指数(ISI)明显低于对照组(P<0.01);药物干预6周后,与模型组比较,唐旨宁组和文迪雅组大鼠血清TNF-α显著降低(P<0.01),肝脏和脂肪组织中PPAR-γ蛋白的表达均显著增高(P<0.01,P<0.05),TNF-αmRNA表达明显减少(P<0.05,P<0.01),PPAR-γmRNA表达显著增加(P<0.01)。结论:唐旨宁能明显改善胰岛素抵抗大鼠的糖脂毒性,其作用机制可能是通过下调TNF-α、上调PPAR-γ的表达而实现的。     

电针对β-淀粉样前体蛋白转基因小鼠行为学及其淀粉样前体蛋白、β淀粉样蛋白及胆碱乙酰转移酶水平的影响

目的:探讨针刺治疗阿尔茨海默病(AD)的可能作用机制。方法:将3月龄的β-淀粉样前体蛋白(APP)转基因小鼠随机分为模型组和电针组,每组6只,以相同月龄的C 57 BL/6 J小鼠6只为正常组。电针取"百会"涌泉"穴,每次治疗15 min,隔日1次,治疗3个月。以Y型电迷宫测定APP转基因小鼠学习记忆能力,免疫组化技术检测脑内APP、β淀粉样蛋白(Aβ)及胆碱乙酰转移酶(ChAT)水平。结果:模型组Y型电迷宫试验达标所需训练次数明显多于正常组(P<0.05),电针组达标所需训练次数较模型组明显减少(P<0.01)。模型组大脑皮层、海马CA 1区的APP阳性细胞面积及Aβ水平明显高于正常组(P<0.01),大脑皮层ChAT水平低于正常组(P<0.05);电针组大脑皮层、海马CA 1区APP阳性细胞面积及海马CA 1区Aβ水平低于模型组(P<0.05),大脑皮层、海马CA 1区ChAT水平高于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论:电针可能通过降低APP转基因小鼠大脑皮层及海马CA 1区APP、Aβ表达水平,增加ChAT表达水平,达到改善其学习、记忆能力的作用。     

基于“心与小肠相表里”探讨回肠菌群在七圣丸抗阿尔茨海默病中的变化

目的:在"心与小肠相表里"理论指导下,探究七圣丸治疗阿尔茨海默病的作用及其对回肠菌群的影响。方法:采用双侧脑室注射β-淀粉样蛋白1-42(Aβ_1-42)的方法建立阿尔茨海默病(AD)模型,将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组及七圣丸低、中、高剂量组(5.6,11.2,22.4 g·kg^-1·d^-1)和多奈哌齐组(多奈哌齐,0.46 mg·kg^-1·d^-1),连续给药28 d后,采用水迷宫实验观察大鼠的空间记忆能力,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测海马组织中的Aβ_1-42和核转录因子-κB(NF-κB),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)含量。另取其回肠内容物采用16S r RNA高通量测序技术检测各组大鼠回肠菌群的变化。结果:与正常组和假手术组比较,模型组的大鼠的目标象限停留时间、目标象限穿越次数与平台穿越次数明显降低(P<0.05,P<0.01),海马中的Aβ_1-42含量显著升高(P<0.01),中枢炎症因子NF-κB,TNF-α,IL-6水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,七圣丸各给药组可明显回调其空间记忆功能损伤(P<0.05,P<0.01),改善大鼠海马组织的Aβ_1-42沉积(P<0.05,P<0.01),明显降低中枢神经炎症因子表达(P<0.05,P<0.01),对AD大鼠有较好的治疗作用。16S分析结果表明模型组大鼠的回肠菌群结构相对于正常组和假手术组显著偏离,且毛螺菌科NK4A136(Lachnospiraceae NK4A136 group)的丰度显著升高(P<0.01),埃希氏菌-志贺氏菌(Escherichia-Shigella)的丰度明显降低(P<0.05,P<0.01)。而七圣丸给药组可显著调节大鼠回肠的菌群结构,同时调节Lachnospiraceae NK4A136 group,Escherichia-Shigella,瘤胃菌科(Ruminococcaceae)等菌群的相对丰度。结论:七圣丸对阿尔茨海默病有良好的治疗效果,可明显增强AD大鼠的记忆认知能力,其作用机制可能与调节大鼠回肠菌群结构以及Lachnospiraceae NK4A136 group,Escherichia-Shigella,Ruminococcaceae等菌群的相对丰度,减轻中枢神经炎症反应,降低中枢Aβ_1-42沉积有关。     

参龙健脑胶囊对脑缺血损伤大鼠海马区胆碱 乙酰基转移酶表达的影响

目的:探讨参龙健脑胶囊对脑缺血损伤大鼠脑保护作用及对海马区胆碱乙酰基转移酶(ChAT)表达的影响。方法:采用结扎双侧颈总动脉制备脑缺血模型,参龙健脑胶囊低、高剂量组和吡拉西坦组剂量分别为0.4,1.2,0.45 g.kg-1,ig 1次/d。ig 28 d后观察神经功能并评分、脑病理组织切片并应用免疫组织化学染色法观察ChAT在缺血脑损伤大鼠海马区的表达。结果:模型组大鼠神经功能缺损明显(P<0.05),海马区ChAT表达减少(P<0.01);与模型组相比,参龙健脑胶囊治疗组大鼠的神经功能缺损改善(P<0.05),大鼠海马区ChAT表达显著增加(P<0.01,P<0.05)。结论:参龙健脑胶囊对脑组织损伤的保护作用与其促进脑组织ChAT表达密切相关。