胃肠道间质瘤伊马替尼耐药细胞株的建立及细胞凋亡的实验研究

目的 体外构建胃肠道间质瘤耐药细胞株GIST-882-IM,鉴定其生物学特性。方法 采用首剂大剂量冲击和逐步增加剂量相结合的方法诱导胃肠道间质瘤细胞GIST-882对Imatinib耐药,建立耐药细胞株,CCK8法绘制细胞生长曲线,计算细胞的倍增时间及半抑制浓度IC₅₀,流式细胞仪检测GIST-882及耐药株GIST-882-IM细胞凋亡及细胞周期。结果 耐药株GIST-882-IM的倍增时间为58.95±1.56h,高于细胞株GIST-882 49.49±0.69h,GIST-882-IM IC₅₀=1.869±0.103μmol,GIST-882 IC₅₀=0.054±0.001μmol,其耐药指数为34.62（P<0.01）。耐药细胞株GIST-882-IM相对于GIST-882,凋亡受到抑制,24、48、72h其细胞凋亡率分别为1.97%±0.38%、2.87%±0.38%、4.40%±0.36%,GIST-882凋亡率分别为6.07%±0.96%、11.17%±0.64%、16.97%±0.12%。细胞周期分析,耐药细胞株的G₀/G₁期增加,S期、G₂/M期减少。结论 成功构建GIST882 Imatinib耐药细胞株,耐药细胞与非耐药细胞的生物学特性不同。这为下一步研究伊马替尼耐药机制和筛选伊马替尼耐药的替代靶向药物奠定基础。     

近红外光谱技术快速测定白芍药材烘干过程中水分

目的 利用近红外光谱（NIRS）技术对白芍药材烘干过程中的水分进行快速测定。方法 通过使白芍药材获得一定含水量后,放入烘箱进行烘干,于不同时间点取样,采集所取样品的NIRS,同时以烘干法测定样品中的水分,运用偏最小二乘法建立NIRS与水分值之间的多元校正模型。结果 水分定量校正模型的决定系数为99.93%,对验证集进行预测,预测值与真实值的相关系数达0.999 7,利用所建模型对一批未知样品进行测试,结果满意。结论 该方法分析时间较短,预测结果准确,为中药制药烘干过程的在线监测提供了实验依据。     

靶向壳聚糖新型纳米药物体外抗胰腺癌细胞的实验研究

目的 合成靶向表皮生长因子受体（EGFR）壳聚糖吉西他滨纳米粒,研究其在体外胰腺癌细胞的靶向性及对细胞增殖的影响。方法 采用壳聚糖制备EGFR-吉西他滨-壳聚糖纳米粒（G-GC-Dox）、吉西他滨-壳聚糖纳米粒（GC-Dox）。在体外实验研究中将药物作用于EGFR+胰腺癌细胞系SW1990细胞,研究胰腺癌细胞体外摄取实验,并采用四甲基偶氮唑蓝法（MTT）法观察该体系对胰腺癌SWl990细胞生长增殖的影响。结果 EGFR-吉西他滨-壳聚糖纳米粒组体外SW1990胰腺癌细胞平均摄取纳米药物的量明显强于同一时间点吉西他滨-壳聚糖纳米粒组平均摄取纳米药物的量。G-GC-Dox组处理12、24、48h后细胞存活率（43.14%±2.51%、31.21%±2.37%、18.26%±2.75%）对比GC-Dox组（64.22%±3.11%、45.43%±3.04%、35.23%±3.15%）对肿瘤细胞具有更好的抑制作用（P<0.05）。结论 本实验成功研制了靶向EGFR壳聚糖吉西他滨纳米粒,并证实了该纳米粒能提高药物在体外胰腺癌细胞的靶向性,同时对胰腺癌SW1990细胞增殖具有明显抑制作用,可能为将来靶向治疗胰腺癌提供新的研究思路。     

辐射增敏交联聚丙烯片材的超临界二氧化碳发泡

用三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯(TMPTMA)作为辐射交联增敏剂与聚丙烯(PP)共混制得片材。采用γ-射线辐照PP片材,并利用超临界二氧化碳(scCO₂)发泡技术对PP进行了发泡研究。通过对PP样品的凝胶含量、热性能和黏度分析,研究了γ射线辐照对PP结构和性能的影响;通过扫描电子显微镜对PP泡孔形貌进行观测,分析了γ射线辐射改性对PP片材发泡行为的影响。结果表明:当以TMPTMA为辐射交联增敏剂时,γ射线辐照诱导PP发生交联从而产生凝胶,同时辐照会引起PP裂解导致黏度降低。经γ-射线辐射增敏交联改性后的PP可以获得理想的泡孔结构,对于本研究中PP片材而言,适宜的吸收剂量为10~20 kGy,此时对应的凝胶质量分数为25%~35%。当吸收剂量为10 kGy时,辐射改性PP的发泡温度范围可达12 ℃。     

黄芩质量评价谱–效相关模式的研究

目的 建立一种客观有效的评价黄芩内在质量的新模式。方法 广泛收集代表性黄芩样品,制备各样品的供试液,分别测定其HPLC色谱指纹图谱及抑菌效果,并用数学方法将指纹图谱数据与抑菌率关联。结果 由建立的数学模型计算得到的20批黄芩验证样品的抑菌率值与实验测得值的偏差率全部在10%以内,其中15批样品的偏差率在5%以内。结论 运用所建立的数学模型基本能够实现通过指纹图谱数据对黄芩药材抑菌效果的评价。     

胸痛三联症患者前瞻性与回顾性门控扫描模式的效果对比

目的 对胸痛三联症患者应用128排双源CT扫描,比较前瞻性和回顾性门控扫描模式对患者的辐射剂量及采集的图像质量的差异。方法 选择陕西省人民医院2015年1~6月可疑胸痛三联症患者41例（女性23,男性18）,根据患者心率不同分别采用回顾性门控扫描模式（心率>80次/min）和FLASH Spiral前瞻性门控扫描模式（≤80次/min）,其中低心率组19例,高心率组22例,采用t检验比较两组辐射剂量,以及主动脉、肺动脉、冠状动脉显影质量。结果 2种扫描模式图像质量的主观评价和客观评价无明显差异。有效剂量（ED）和容积CT剂量指数（CTDIvol）由回顾性门控扫描模式的（22.54±9.49）mSv和（25.32±12.34）mSv下降到前瞻性扫描模式的（2.36±0.70）mSv和（3.14±1.25）mSv,平均下降20.18 mSV（89.53%）、22.18 mSV（87.60%）,差异均有统计学意义（t=-11.982,P<0.001,t=-14.582,P<0.001）。结论 无论是FLASH前瞻性门控扫描模式还是回顾性门控扫描模式均可得到较好的图像质量,而FLASH前瞻性门控扫描模式能明显降低患者辐射剂量。为了保证扫描的一次成功,高心率组患者应用回顾性门控扫描模式仍是胸痛三联症扫描的可行性方案。     

320排CT容积扫描法与螺旋扫描法在低心率冠状动脉成像中的对比研究

目的 比较320排CT 容积扫描法（volume法）与螺旋扫描法（helical法）在低心率冠状动脉成像中的应用价值。 方法 128例患者分为两组：容积扫描组（n=72）和螺旋扫描组（n=56）,分别采用CT容积扫描法及螺旋扫描法进行冠状动脉成像扫描（检查时患者心率均低于65次/min）,对比分析两组患者的图像质量、辐射剂量及对比剂用量。 结果 容积扫描组和螺旋扫描组患者升主动脉根部CT值分别为（492.08±58.51）HU、（522.72±56.91）HU,图像噪声分别为（19.64±3.51） HU、（22.66±5.33）HU,差异无统计学意义;两组冠状动脉节段优秀率分别为97.5%（632/648）、96.8%（488/504）,合格率分别为99.7%（646/648）、99.2%（500/504）,差异无统计学意义。容积扫描组、螺旋扫描组有效辐射剂量分别为 （3.21±0.23） mSv、（13.27±2.39） mSv,差异有统计学意义（P<0.001）;对比剂用量分别为50～60 mL、80～90 mL。 结论 低心率时320排CT容积扫描法与螺旋扫描法均可获得满意的冠脉图像,但容积扫描法辐射剂量更低、造影剂用量更少,具有一定优势。     

双能CT降低腹部CT扫描辐射剂量可行性研究：体模实验

目的 探讨双能CT降低腹部CT扫描辐射剂量可行性,及低剂量下最佳的双能CT扫描参数组合。方法 在Force CT通过腹部常规单能120 kV扫描模式和不同双能组合模式对Catphan 500体模进行扫描,并采用高级模型迭代(ADMIRE)重建方式重建图像,双能扫描模拟常规单能120 kV重建图像。分析常规扫描模式下和不同双能组合模式对腹部CT图像空间分辨力、密度分辨力和CT值的影响,计算不同扫描模式的CT值准确性误差,记录不同扫描模式CT剂量长度乘积(DLP)。结果 单能120 kV扫描模式及不同双能组合模式CT图像空间分辨力均为7 LP/cm。双能1亚组的密度分辨力最低为7 mm/1%,单能120 kV扫描及双能5亚组的密度分辨力最高为4 mm/1%。不同扫描模式下CT值差异有统计学意义(P<0.05),CT值准确性误差双能2亚组最高,双能5亚组最低。常规腹部单能扫描模式的辐射剂量为(117.58±6.18)mGy.cm,双能1~5亚组的辐射剂量分别为(32.41±1.52)、(44.94±2.54)、(32.58±1.70)、(38.14±1.86)和(57.33±3.38)mGy.cm,双能1组最低(P<0.05)。结论 双能5 (100/sn150 KV)组合CT值准确性误差小,空间分辨力及密度分辨力高,可降低患者51.24%的辐射剂量,可作为腹部CT常规检查使用。     

血府逐瘀口服液的高效液相色谱指纹图谱研究

目的 研究血府逐瘀口服液的HPLC指纹图谱。方法 采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent HC C₁₈ (150 mm×4. 6 mm, 5 μm);流动相：0.2%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min;柱温为25 ℃;检测波长为254、320、400 nm;进样量：10 μL。计算10批样品指纹图谱的数量相似度和程度相似度。结果 确定了20个共有峰,10批样品指纹图谱的数量相似度在0.80以上,程度相似度在0.57以上。结论 程度相似度比数量相似度更能反映样品的内在差异。     

正常和慢心率CT冠状动脉低剂量扫描对比研究

目的 探索正常和慢心率患者128层螺旋CT冠状动脉低剂量扫描方案。方法 入选临床疑似冠脉疾病患者300例,按心率分为60~75次/分和60次/分以下两大组,分别采用回顾性心电门控和前瞻性心电门控扫描模式,其中每组再随机分为3小组(各50例),分别采用常规扫描技术(默认管电流)、CARE Dose4D技术(实时动态调节技术)及低剂量技术进行扫描,记录各组图像质量评分和辐射剂量并比较分析。结果 回顾性心电门控常规组、4D组及低剂量组的有效辐射剂量分别为6.08±0.91、5.69±0.80、2.74±0.51mSv,前瞻性心电门控常规组、4D组及低剂量组的有效辐射剂量分别为1.63±0.27、1.58±0.23、0.82±0.22mSv。两常规组间、4D组间及低剂量组间的有效辐射剂量差异有统计学意义(P<0.01)。结论 128层螺旋CT冠状动脉检查应尽量降低患者心率,根据心率选择不同扫描方案,心率在60~75次/分者宜采用回顾性心电门控低剂量扫描方案,心率在60次/分以下者宜采用前瞻性心电门控低剂量扫描方案,以最大限度降低患者所接受的辐射剂量。     

Exploration of an Efficient Simultaneous Molecular Detection Method of HIV,HCV, and Syphilis from a Single Dried Blood Spot

ObjectiveThe aim of the present study was to evaluate the performance of the simultaneous detection of HIV-1 RNA, HIV-1 DNA, and HCV RNA using one dried blood spot (DBS) as an alternative sample to plasma.MethodA total of 571 paired DBS/plasma samples were collected from men who have sex with men (MSM) and injection drug users (IDUs), and serological and molecular assays were performed. Using plasma results as the reference standard, the performance of DBS tests for HIV-1 RNA, HIV-1 DNA, and HCV RNA was evaluated. Pearson's correlation coefficients and Bland-Altman analysis were performed to assess the correlation and concordance between DBS and plasma.ResultsAmong paired plasma/DBS samples with detectable HIV-1 RNA and HCV RNA, five samples (5/32) were not detectable in DBS, while measurable HIV-1 RNA levels were present in plasma (1.44 to 3.99 log¹⁰ copies/mL). There were two samples (2/94) with undetectable HCV RNA in DBS, while measurable HCV RNA levels were present in plasma (?5 to 5.99 log¹⁰ copies/mL). The correlation between HIV-1 RNA light chain variable region (VL) values obtained from plasma and DBS showed that r = 0.683 (P < 0.01), n = 27 and r = 0.612 (P < 0.01), n = 89 in HCV RNA. Bland-Altman analysis revealed that in HIV-1 RNA, the mean (± SD) difference between HIV-1 RNA in plasma and DBS was 1.00 ± 1.01 log¹⁰ copies/mL, and all samples were within ± 1.96 SD (?0.97 to 2.97 log¹⁰ copies/mL) for DBS. The mean difference (± SD) in HCV RNA was 0.15 ± 1.08 log¹⁰ copies/mL, and 94.38% (84/89) were within ± 1.96 SD (?1.96 to 2.67 log¹⁰ copies/mL). Overall, HIV-1 RNA and HCV RNA levels obtained from a DBS were lower than those obtained from plasma. HIV-1 DNA in a DBS showed concordant results with HIV-1 RNA in plasma. HIV-1 DNA RT-PCR using a DBS showed acceptable performance.ConclusionThe performance of the simultaneous detection of HIV-1 RNA, HIV-1 DNA, and HCV RNA using one DBS was acceptable. DBS, as an alternative sample to plasma, may be a viable option for the simultaneous detection of HIV-1 RNA, HIV-1 DNA, and HCV RNA in resource-limited settings or for individuals living in areas that are difficult to access.     

γ射线辐照对淋巴细胞杀伤效果的探讨

目的:探讨不同剂量的γ射线辐照对淋巴细胞的杀伤效果,确定抑制淋巴细胞增殖的最佳剂量。方法:分别用15 Gy、25 Gy、35 Gy的137Csγ射线对血液进行辐照处理,并进行PHA刺激试验,测定3H掺入量。结果:淋巴细胞增殖反应抑制率随照射剂量的增加而增加,15 Gy、25 Gy、35 Gy的辐照剂量淋巴细胞的增殖反应抑止率分别为(82.4±4.5)%、(96.3±1.4)%、(98.7±1.1)%。结论:25 Gy是一个比较适合的辐照剂量,可起到预防输血相关移植物抗宿主病发生的效果。     

反复冻融对血浆抵抗素和内脂素测定水平的影响

目的 探讨反复冻融对血浆抵抗素和内脂素测定水平的影响。方法 抽取-70℃保存的血浆标本22份,化冻后用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆抵抗素和内脂素水平（冻融1次标本）,同时将每份标本分装2管,一管放入-20℃冷冻后取出,室温融解,重复3次（冻融4次标本）;另一份按相同方法重复5次（冻融6次标本）,用同一试剂盒、在同一批内检测血浆抵抗素、内脂素水平。比较3种冻融方式间的差异。结果 标本在冻融1次、4次和6次的情况下,抵抗素测定水平分别为2.24±0.99、2.01±1.05、1.89±1.01ng/ml,内脂素测定水平分别为16.3±7.6、13.4±6.3、12.1±5.6ng/ml,后两次检测抵抗素水平较第1次分别下降10.3%（t=5.05,P=0.000）和15.6%（t=10.65,P=0.000）;内脂素水平较第1次检测分别下降17.8%（t=5.19,P=0.000）和25.8%（t=6.58,P=0.000）。结论 反复冻融对血浆标本中抵抗素和内脂素的水平有显著影响,提示在血标本贮存运输、测定和分析中要注意这一现象对研究结果的影响,避免标本的反复冻融。     

Isolation and Characterization of an Algicidal Bacterium Indigenous to Lake Taihu with a Red Pigment able to Lyse Microcystis aeruginosa

Objective To isolate and characterize indigenous algicidal bacteria and their algae-lysing compounds active against Microcystis aeruginosa, strains TH1, TH2, and FACHB 905. Methods The bacteria were identified using the Biolog automated microbial identification system and 16S rDNA sequence analysis. The algae-lysing compounds were isolated and purified by silica gel column chromatography and reverse-phase high performance liquid chromatography. Their structures were confirmed by Nuclear Magnetic Resonance (NMR) and Fourier Transform Infrared (FT-IR) spectroscopy. Algae-lysing activity was observed using microscopy. Results The algae-lysing bacterium LTH-2 isolated from Lake Taihu was identified as Serratia marcescens. Strain LTH-2 secreted a red pigment identified as prodigiosin (C 20 H 25 N 3 O), which showed strong lytic activity with algal strains M. aeruginosa TH1, TH2, and FACHB 905 in a concentration-dependent manner. The 50% inhibitory concentration (IC 50 ) of prodigiosin with the algal strains was 4.8 (±0.4)×10 -2 μg/mL, 8.9 (±1.1)×10-2 μg/mL, and 1.7 (±0.1)×10 -1 μg/mL in 24 h, respectively. Conclusion The bacterium LTH-2 and its pigment had strong Microcystis-lysing activity probably related to damage of cell membranes. The bacterium LTH-2 and its red pigment are potentially useful for regulating blooms of harmful M. aeruginosa.     

苦参总生物碱及其单体在Caco-2细胞模型的吸收特征研究

目的 建立同时测定Caco-2细胞模型中苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱的HPLC方法,探讨苦参总生物碱在Caco-2细胞模型的吸收机制。方法 利用人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞单层模型,研究苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱由细胞绒毛膜面供给侧（AP）→基底外侧（BL）和BL→AP侧两个方向的转运过程;HPLC-UV法测定上述3个生物碱的量;计算转运参数和表观渗透系数（P_app）。结果 苦参总碱给药后,苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱由AP→BL侧的P_app分别为（1.098±0.092）×10^?5、（1.434±0.098）×10^?5、（3.87±0.64）×10^?6cm/s,由BL→AP侧的P_app分别为（1.104±0.098）×10^?5、（1.034±0.079）×10^?5、（2.75±0.33）×10^?6 cm/s,与文献报道的单体化合物给药相比,氧化槐果碱和氧化苦参碱双向转运的P_app明显增大。苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱的表观渗透率值分别为1.01、0.72、0.71。结论 苦参总生物碱中苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱仍主要以被动吸收方式进入体内,但比各单体给药吸收更好。     

新藤黄酸纳米脂质载体制备及其药剂学性质研究

目的 制备新藤黄酸纳米结构脂质载体并表征其药剂学性质。方法 采用乳化蒸发-低温固化法制备新藤黄酸纳米脂质载体（GNA-NLC）,正交试验设计优化最佳工艺处方,并对其包封率、平均粒径及Zeta电位等性质进行考察。结果 优化后处方制备的GNA-NLC多为圆整、实体的类球形,平均粒径为（144.07±1.44）nm,多分散系数为0.24±0.01,Zeta电位为（?28.03±0.29）mV,包封率为（84.65±0.98）%,载药量为（4.21±0.05）%;DSC显示GNA纳米粒确已形成,并且GNA以非晶态分布在基质中。结论 乳化蒸发-低温固化法能成功制备GNA-NLC,工艺简单,易于控制。     

Er:YAG激光对口腔黏液腺腺泡组织形态学的影响

目的 观察Er：YAG激光对口腔黏液腺腺泡组织细胞形态学的影响。方法 收集行外科手术治疗的口腔黏液腺囊肿患者32例,留取每例患者囊肿旁体积均匀的腺泡组织3块,随机分为空白对照组、1.0W激光能量照射组、2.0W激光能量照射组。对照组不做处理,两激光组均采用德国Fotona牙科双波长激光中的Er：YAG激光进行处理。将以上3组组织在离体10min内进行固定,经包埋、切片、HE染色后光镜下观察细胞形态学改变。结果 光镜下观察显示,对照组未见明显腺泡细胞的萎缩及坏死;两个激光组均见有腺泡细胞萎缩,且2.0W激光组腺泡细胞萎缩数目较空白对照组及1.0W激光组增多,甚至出现腺泡细胞坏死,坏死细胞体积变小,胞核可见固缩及碎裂,胞质深蓝染或蓝黑染。两个激光组腺泡萎缩数量及萎缩率均高于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。1.0W激光组腺泡萎缩率达51.6%±4.0%,2.0W激光组腺泡萎缩率达88.4%±2.6%,两组间比较差异有统计学意义（F=1930.4,P=0.000）。结论 激光照射腺泡后出现了腺泡萎缩的形态学改变,且升高激光能量照射腺泡后可使腺泡萎缩数量增加。     

Identification of Two Novel Mitochondrial DNA Deletions Induced by Ionizing Radiation

ObjectiveWe identify ionizing radiation-induced mitochondrial DNA (mtDNA) deletions in human lymphocytes and their distribution in normal populations.MethodsLong-range polymerase chain reactions (PCR) using two pairs of primers specific for the human mitochondrial genome were used to analyze the lymphoblastoid cell line following exposure to 10 Gy ⁶⁰Co γ-rays. Limited-condition PCR, cloning and sequencing techniques were applied to verify the mtDNA deletions detected with long-range PCR. Human peripheral blood samples were irradiated with 0, 2 and 6 Gy ⁶⁰Co γ-rays, and real-time PCR analysis was performed to validate the mtDNA deletions. In order to know the distribution of mtDNA deletions in normal population, 222 healthy Chinese adults were also investigated.ResultsTwo mtDNA deletions, a 7455-bp deletion (nt475-nt7929 in heavy strand) and a 9225-bp deletion (nt7714 -nt369 in heavy strand), occurring between two 8-bp direct repeats, were identified in lymphoblastoid cells using long-range PCR, limited-condition PCR and sequencing. These results were also observed for ⁶⁰Co γ-rays irradiated human peripheral blood cells.ConclusionTwo novel mtDNA deletions, a 7455-bp deletion and a 9225-bp deletion, were induced by ionizing radiation. The rate of the mtDNA deletions within a normal population was related to the donors' age, but was independent of gender.     

不同的冻存方法对1型糖尿病患者胰岛抗原特异性T细胞反应的影响

目的:明确何种冻存方案更利于保持1型糖尿病患者的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcells,PBMCs)对胰岛抗原特异性的T细胞反应,更接近于新鲜细胞的状态。方法:本研究系国际免疫学协会-T细胞工作组(IDS-TCW)牵头的国际标准化研究Freezing Study I。中南大学糖尿病中心选取5例新发的T1D患者和年龄、性别相匹配的5例正常对照。所有对象新鲜分离的PBMCs分为3份,一份进行亚型细胞的流式细胞分析和酶联免疫斑点实验(enzyme linked immunospot assay,ELISPOT),另两等份分别采用低温和室温冻存方案冻存;1个月后分别按低温和室温方案复苏,以台盼蓝染色判定细胞活力;并行流式细胞分析术和ELISPOT 检测。ELISPOT中4种抗原[包括人GAD65、内对照、Pediacel(巴斯德五合一疫苗)和PMA]均由IDS-TCW中心化实验室盲法标记,盲法测定。以新鲜PBMCs为参照,比较两种冻存方案下PBMCs的复苏率和活力、各亚型细胞比例和ELISPOT检测结果。结果:1) 室温冻存下的PBMCs复苏率和细胞活力均略高于低温冻存方案,但二者差异无统计学意义(分别为61.2% vs 60.1%,77.5%vs 74.9%;P>0.05);2) 相比新鲜细胞,两种冻存方案均会造成一定程度的单核细胞的损失[(3.2±1.1)% (低温)和(3.0±0.9)%(室温) vs (7.0±1.1)% (新鲜);P<0.05];而CD4⁺T,CD8⁺T,B细胞,NK细胞和NKT细胞比例均无明显变化(P>0.05);3)ELISPOT检测结果显示:对多克隆刺激物PMA诱发的T细胞分泌IFN-γ的反应,在新鲜和冻存复苏细胞间无明显差异;记忆性抗原Pediacel和胰岛抗原GAD65刺激下的特异性T细胞反应在冻存复苏细胞均明显差于新鲜细胞,T1D患者新鲜细胞的GAD特异性T细胞反应的SI为5.1,均高于低温(1.3)和室温(1.4)冻存复苏的刺激指数(SI)(均P<0.05);而且仅新鲜细胞的GAD-反应性T细胞的SI和斑点数均明显高于正常对照(5.1 vs 0.9和8.1 vs 0.1,P<0.05),而两种方案下的冻存细胞的SI在患者和对照未发现差异。结论:需要开展更多的研究,在T1D患者中鉴定出一种更接近于新鲜PBMCs反应的冻存方案和T细胞测定方法。