干血点采样技术和干血浆采样技术在麦考酚酸药动学分析中的应用

目的 探讨干血点采样技术（dried blood spots,DBS）和干血浆采样技术（dried plasma spots,DPS）在麦考酚酸药代动力学分析中的应用。方法 色谱柱为Ecosil C₁₈（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为0.01 moL/L甲酸水（0.1%甲酸）- 乙腈-甲醇（25∶45∶30）,体积流量为0.4 mL/min,柱温为30 ℃,进样量10 μL;质谱检测采用ESI离子源,正离子MRM方式检测;考察可能的影响因素并进行临床研究。结果 DBS法和DPS法方法学和临床实验数据均良好。结论 DBS方法和DPS法较一般处理方法简便,用血量少,储存运输方便,在一些药物的药动学分析中能代替一般的处理方法。     

HPLC法测定脂溶性维生素注射液中维生素A棕榈酸酯的有关物质

目的 建立测定脂溶性维生素注射液中维生素A棕榈酸酯有关物质的反相高效液相色谱法。方法 Diamond C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相A为甲醇-异丙醇-水（60∶32∶8）,流动相B为甲醇-异丙醇（70∶30）,梯度洗脱, 体积流量1.0 mL/min,检测波长324 nm,柱温30 ℃。结果 维生素A棕榈酸酯与维生素D₃、维生素E、维生素K₁及其有关物质分离度好,在质量浓度0.206～5.14 mg/L时,维生素A棕榈酸酯的质量浓度与峰面积线性关系良好,检测限为0.041 mg/L。结论 该方法准确可靠,专属性好,可用于脂溶性维生素注射液中维生素A棕榈酸酯的质量控制。     

芪苈强心胶囊中酚酸类成分在大鼠体内药动学研究

[目的]建立高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）的方法,考察大鼠灌胃给药后,芪苈强心胶囊中酚酸类成分（丹酚酸A、丹酚酸B、丹参素、紫草酸、迷迭香酸、原儿茶酸）的药动学特征。[方法]采用Agilent ZOBRAX XDB-C₁₈色谱柱（4.6 mm×50 mm,3.5 μm）,柱温40℃,流动相[0.1% 甲酸水溶液（A）]-[含0.1% 甲酸的乙腈溶液（B）]梯度洗脱,流速0.45 mL/min,进样量 10 μL;采用电喷雾离子源（ESI）,多反应监测（MRM）负离子模式下测定血药浓度。[结果]方法学结果符合要求。大鼠灌胃芪苈强心胶囊后,血浆中6种酚酸类活性成分的达峰时间（T_max）在10~40 min内,半衰期（t_1/2）在3.34~8.38 h间;血药达峰浓度（C_max）和血药浓度-时间曲线下面积（AUC_0-∞）从大到小排序依次为丹酚酸B > 丹参素 > 紫草酸 > 迷迭香酸 > 原儿茶酸 > 丹酚酸A。[结论]该检测方法专属性强,重复性好,可用于芪苈强心胶囊中酚酸类成分的药动学研究。     

HPLC法测定复方酸枣仁软胶囊中阿魏酸和五味子甲素

目的 研究采用HPLC法测定复方酸枣仁软胶囊中阿魏酸和五味子甲素的方法。方法 阿魏酸定量测定的色谱条件：色谱柱为迪马公司C₁₈柱（200 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-1%醋酸水溶液（35∶65）,检测波长为320 nm,体积流量为1 mL/min,柱温为室温,进样量为10 μL;理论塔板数按阿魏酸峰计不低于3 000;五味子甲素定量的色谱条件：色谱柱为迪马公司C₁₈柱（200 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为甲醇-水（77∶33）,检测波长为254 nm,体积流量为1 mL/min,柱温为室温,进样量为10 μL。结果 阿魏酸的线性范围9.8～49.0 μg/mL（r＝0.999 6）;加样回收率试验RSD为1.98%;五味子甲素的线性范围8.8～44.0 μg/mL（r＝0.999 9）;加样回收率试验RSD为0.98%。结论 本方法准确、简便、可靠,可作为复方酸枣仁软胶囊质量控制的方法。     

HPLC法测定心可舒分散片中原儿茶醛

目的 建立HPLC法测定心可舒分散片中原儿茶醛的方法。方法 色谱条件：色谱柱为Kromtek C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为1%冰醋酸溶液-甲醇-乙腈（92∶3∶5）,检测波长279 nm,体积流量1.0 mL/min,柱温30 ℃。结果 原儿茶醛的线性范围在4.32～19.4 μg/mL（r＝0.999 6）,加样回收率为99.78%,RSD为1.05%。结论 该方法可行、重现性好,能有效控制心可舒分散片的质量。     

HPLC法测定银黄滴丸中绿原酸和黄芩苷

目的 采用HPLC法建立银黄滴丸的质量标准。方法 绿原酸色谱条件：色谱柱为ZorBax SB-C₁₈（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.4%磷酸（10∶90）,体积流量1 mL/min,柱温35 ℃,检测波长327 nm;黄芩苷色谱条件：色谱柱为Kromatek C₁₈柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）,体积流量1 mL/min,柱温35 ℃,检测波长280 nm。结果 绿原酸线性范围为0.143～2.288 μg,平均加样回收率为99.3%,RSD为1.54%;黄芩苷线性范围为0.067 5～1.080 μg,平均加样回收率为99.9%,RSD为1.07%。结论 该方法简便、灵敏、专属性强、重复性好,可作为银黄滴丸的质量控制方法。     

HPLC法测定丁丙诺啡纳洛酮舌下片中两种主药的量

目的：建立梯度洗脱HPLC法同时测定丁丙诺啡纳洛酮舌下片中两种主药的量。方法：采用梯度洗脱,用Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱;以甲醇-乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液（48∶32∶20）（用磷酸调pH 4.0）为流动相A,甲醇-乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液（6∶4∶90）（用磷酸调pH 4.0）为流动相B;体积流量1.0 mL/min;检测波长为230 nm。结果：纳洛酮在5.0～30.0 μg/mL线性关系良好（r = 0.999 8）,回收率为99.68%（RSD＝0.92%）;丁丙诺啡在20.0～120.0 μg/mL线性关系良好（r = 0.999 9）,回收率为99.74%（RSD＝0.53%）。结论：采用梯度洗脱HPLC法同时测定丁丙诺啡纳洛酮舌下片中两主药的量,方法简便、灵敏、专属,重现性好,该方法可以监控药品质量。     

冠脉通片质量控制研究

目的 建立冠脉通片的质量控制方法。方法 采用TLC法,分别以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（15∶2∶1）、乙酸丁酯-甲酸-水（1.3∶1∶1）10 ℃下放置的上层溶液为展开剂对何首乌及淫羊藿进行薄层色谱鉴别;采用气相色谱法,以水杨酸甲酯为内标物,安捷伦DB-WAX毛细管柱（30 m×0.53 mm,1 μm）,FID检测器,载气为氮气,柱温为140 ℃,测定冠脉通片中的冰片;采用高效液相色谱法,Dikma-C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,甲醇-0.5%乙酸（88∶12）为流动相,体积流量1.0 mL/min,检测波长281 nm,柱温25 ℃,测定冠脉通片中的丹参素。结果 薄层鉴别中样品色谱斑点清晰,分离较好;气相色谱中,冰片中龙脑及内标物水杨酸甲酯均得到良好的分离,冰片的平均回收率为96.72%（RSD为0.67%）;HPLC测定丹参素在0.100 8～0.604 8 μg与峰面积值线性关系良好（r＝0.999 8）,平均回收率为100.22%（RSD为1.15%）。结论 本实验建立的方法简便、准确、可靠,可用于冠脉通片的质量控制。     

自动采样技术研究梓醇的药动学

目的 应用自动采样技术和传统采样方法对梓醇在大鼠体内的药动学进行研究,比较两种采样方法对梓醇药动学参数的影响。方法 成年Wistar大鼠12只,随机分为2组,ig给予大鼠100 mg/kg梓醇供试品后不同时间点分别采用自动采样技术与传统手动采样方法收集大鼠血样,经LC-MS/MS方法分析测得不同时间的血药浓度,应用DAS 2.0计算程序、非隔室模型计算药动学参数并以单因素方差分析法对两种方法所得的药动学参数进行评价。结果 大鼠ig给予梓醇供试品100 mg/kg后,两组试验的血药浓度数据的变化趋势高度一致,两条平均药–时曲线趋势接近,达峰时间分别为1.5、1.0 h,C_max相差10%左右,计算所得各药动学参数单因素方差分析结果显示两组的各个参数均无显著差异。结论 采用两种方法收集的血样分析计算所得的梓醇在大鼠体内药动学特征基本相同。     

茯苓三萜成分RP-HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的 利用RP-HPLC-ELSD技术建立不同菌株茯苓三萜的指纹图谱,为评价不同菌株培育茯苓药材的质量品质提供理论依据,以期规范培育茯苓的菌株,提高茯苓资源品质。方法 色谱柱为Kromasil 100-5 C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为0.2%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）,采用梯度洗脱法;体积流量为1.0 mL/min;柱温为30 ℃;蒸发光检测条件：雾化温度为40 ℃,压力为350 kPa,gain值为7;进样量为20 μL。结果 建立的指纹图谱中有18个共有峰,且方法学考察符合规定的标准。结论 该方法简便快速、准确可靠,可作为评价不同菌株茯苓药材质量的有效手段。     

干血斑点样品在庆大霉素浓度测定中的应用

本文将滤纸干血斑点作为检测样品,应用于荧光偏振免疫分析法测定庆大霉素血浓度。经方法学考核,得该法灵敏度为0.5mg/L,平均回收率103%(CV=2.8%),浓度为7.0和15.0mg/L 的批内、批间 CV 均低于7%。浓度为2.0mg/L 的 CV 小于12%,滤纸干血斑点中庆大霉素浓度和相应的血浆中庆大霉素浓度比较,相关良好(r=0.9768)。家兔肌注庆大霉素药物动力学符合一室模型,平均药物动力学参数:Ka=3.93h~(-1),K=0.81h~(-1),Vd=2.33 L,t 1/2=0.86 h。     

干血片用于HCV抗体及RNA检测的评价

目的 研究干血片在用于检测HCV抗体及RNA的性能评价.方法 采集191例血标本制成血浆和干血片样本,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HCV抗体以及用RT-PCR检测HCV-RNA;并将血浆检测HCV抗体和HCV-RNA阳性标本的干血片分别在不同温度条件下保存不同时间检测.结果 干血片检测HCV抗体和HCV-RNA的灵敏度分别为97.8％、94.9％,特异度分别为100％、99.1％,与血浆比有很好的一致性;干血片在-20℃或4℃可以保存1年以上、25℃保存3个月HCV抗体结果稳定;干血片-20℃或4℃保存6个月、25℃保存1个月HCV-RNA结果稳定.结论 用干血片样本检测HCV抗体及RNA与血浆样本检测结果差异无统计学意义,是血浆检测的可靠替代品,而且它在低温下保存时间长、常温也较稳定,方便保存、运送,比血浆适用范围更广范.     

干血点采样技术及其在药动学研究中的应用

干血点采样（dried blood spot,DBS）,即将全血样品收集在卡纸上,在血样采集方法上比传统方法有一定的优势。它需求较少的血量,可减少动物使用,方便血样采集、存储运输,简化样品前处理。到目前为止,DBS与LC-MS/MS技术联用在小分子定量分析中已成为一个重要的方法,将在药动学研究中得到越来越多的应用。概述DBS样品收集,储存、前处理以及分析方法。     

干血滤纸片试剂盒和水煮法提取间日疟原虫DNA用于PCR检测的比较

目的：比较水煮法和干血滤纸片基因组DNA分离试剂盒提取间日疟原虫DNA用于PCR检测及克隆研究的差异。方法：采集间日疟患者末梢血制备干血滤纸片,分别用水煮法和QIAamp DNAmini kit试剂盒提取间日疟原虫基因组DNA10份。PCR扩增LDH基因,并克隆质粒pGEM-PvLDH。分析比较2种提取方法的差异。结果：水煮法和试剂盒法提取的间日疟原虫gDNA,均扩增出LDH基因特异条带,但试剂盒提取的gDNA目的条带亮于水煮法。结论：水煮法操作简便、快速、经济,在等量血源条件下,所得DNA量较少、纯度较低;试剂盒提取可获得较高的得率,在定量检测和复合扩增时受到的影响因素较少,成功率较高。     

微生物发酵炮制对红花抗氧化活性的影响

目的研究地衣芽孢杆菌C2-13发酵炮制对红花抗氧化活性的影响。方法邻二氮菲-Fe^2 氧化法测定羟自由基清除率，比色法测定红细胞的溶血作用、肝脂质过氧化物含量，HPLC法分析发酵产物。结果红花经C2-13的发酵炮制其抗氧化功效显著提高。HPLC分析还观察到红花中一些成分发生了改变。结论红花中一些有效成分可能是经C2-13的生物转化提高了其抗氧化功效。     

HPLC测定万寿菊干花和万寿菊颗粒中叶黄素含量

目的：建立叶黄素含量测定的高效液相色谱方法,测定万寿菊干花和万寿菊颗粒中叶黄素含量,从而为工业生产叶黄素产品选择原料提供依据。方法：采用Waters C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱;以甲醇：乙腈为40∶60（v∶v）为流动相;流速为1 mL.min-1;柱温为30℃;检测波长为445 nm;进样体积为5μL;外标法定量。结果：此色谱条件下,叶黄素含量在8.96～44.70μg·mL-1范围内时,与峰面积呈良好线性关系;样品平均回收率为99.15%;相对标准偏差（RSD）为0.78%（n=9）。结论：该方法灵敏、准确、专属性强,适合于叶黄素的含量测定;万寿菊干花中叶黄素含量明显高于万寿菊颗粒中含量。     

桂西笋干中微量元素的测定

采用原子吸收分光光度法测定桂西笋干、福建笋干和桂西１６种蔬菜中Ｍｎ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｍｇ、Ｃａ等６种微量元素,结果发现,桂西和福建两地笋干中Ｍｇ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｃａ等微量元素含量均较高,桂西笋干中的Ｍｇ、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｃｕ含量均高于福建笋干,而Ｃａ、Ｍｎ含量略低于福建笋干。桂西笋干中的Ｆｅ、Ｚｎ、Ｍｇ含量远远高于桂西１６种蔬菜中微量元素的含量,Ｃｕ、Ｃａ、Ｍｎ含量高于部分蔬菜含量。提示桂西笋干含有丰富的人体所需微量元素,作为天然营养补充物质,具有极高的营养价值     

基于文献计量学的家庭照顾者相关研究现状及热点分析

目的：通过文献计量学方法探究近年来家庭照顾者相关的研究现状与热点。 方法：计算机检索PubMed中与家庭照顾者研究相关的文献,检索范围为2011年1月1日-2016年7月1日,采用BICOMB和图形聚类工具gCLUTO对文献进行关键词词篇矩阵、双向聚类分析,形成主题词聚类曲线图、主题词聚类矩阵及主题词聚类树状图。 结果：共4 945篇文献纳入分析,抽取出现频次≥36次的主题词82个,聚类分析获得家庭照顾者相关研究的6个研究热点：脑卒中患者家庭照顾者的社会心理干预、精神疾病患者家庭照顾者的干预研究、家庭照顾者心理健康状况、阿尔茨海默病患者家庭照顾者心理健康干预、艾滋病患者家庭照顾者心理健康状况、肿瘤患者家庭照顾者心理健康干预。 结论：近年来国外学者重视家庭照顾者相关的研究,研究的重点主要集中在对家庭照顾者心理健康状况的调查和干预方面。     

起搏器治疗中选择不同部位电极起搏对心肌运动协调性的影响

目的：观察起搏器治疗中选择不同部位电极起搏对心肌运动协调性的影响.方法：对接受起搏器治疗的48例患者,其中右室流出道起搏（RVOTP）28例,右室心尖部起搏（RVAP）20例,利用组织多普勒速度图对接受起搏器置入的患者,采集左室八个节段的心肌运动情况,测得各段心肌收缩运动达峰时间、心肌收缩时间和舒张期快速充盈达峰时间.从而了解不同部位电极起搏,对心肌运动协调性的影响.结果：RVOTP组与RVAP组患者比较,起搏器置入前收缩运动协调性的达峰时间无统计学差异,置入3～6mo后,RVOTP组协调性明显提高（P〈0.01）,而RVAP组协调性有所降低（P〈0.01）; 置入后RVOTP组协调性明显高于RVAP组（P〈0.01）.代表舒张运动协调性的Q-E时间：置入3～6mo后,RVAP组舒张协调性明显低于RVOTP组（P〈0.01）.并且RVAP组置入后协调性有所降低（P〈0.01）.结论：使用螺旋电极选择理想部位起搏有利于心肌收缩运动的协调性.