酒肝平胶囊对动物酒精性及药物性肝损伤病理组织学的影响

目的 探讨多种病理染色条件下,酒肝平胶囊对酒精性和药物性肝损伤模型动物肝脏病理组织学的影响,为临床功能主治提供病理学依据。方法 分别采用常规 HE 染色、脂肪特殊染色的方法,通过光镜下阅片观察和病理图像系统分析,观察酒肝平胶囊对大鼠酒精性脂肪肝模型、小鼠 CCl₄ 肝损伤模型肝脏病理组织学改变的结果。结果 酒肝平胶囊对酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂肪变性、颗粒变性、纤维组织增生有显著的改善作用;酒肝平胶囊对 CCl₄ 肝损伤小鼠肝细胞脂肪性变、嗜酸性变和肝细胞坏死、炎细胞浸润有显著的改善作用。图像分析可见：酒肝平胶囊对酒精性脂肪肝和 CCl₄ 肝损伤小鼠肝损伤模型有降低脂肪变细胞面积百分比,提高正常肝细胞面积百分比的作用;降低脂肪变细胞/肝细胞面积百分比比值。酒肝平胶囊高、中、低剂量之间的药效作用强度有一定的剂量依赖关系。结论 酒肝平胶囊对酒精性肝损伤大鼠和 CCl₄ 肝损伤小鼠肝脏病理组织学损伤有显著的改善作用。     

褐藻多糖硫酸酯对H2O2诱导皮层神经元氧化应激损伤保护作用

目的 研究褐藻多糖硫酸酯对H₂O₂诱导小鼠皮层神经元氧化损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法 以含有B-27的Neurobasal培养基无血清体外原代培养新生小鼠大脑皮层神经元,H₂O₂（50 μmol/L）诱导氧化应激损伤模型,MTT法检测不同质量浓度（0.01、0.1、1 g/L）褐藻多糖硫酸酯对细胞存活的影响,生化法测定乳酸脱氢酶（LDH）释放量和丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）的活性。结果 与H₂O₂处理组比较,0.1、1 g/L褐藻多糖硫酸酯能显著提高H₂O₂诱导损伤皮层神经元的存活率（P＜0.05）,并且降低培养液中LDH的漏出量,抑制细胞内MDA的生成,提高细胞内SOD的活性。结论 褐藻多糖硫酸酯对H₂O₂损伤皮层神经元具有显著的保护作用,其机制与抗氧化作用有关。     

灵芝孢子糖肽对小鼠肝损伤的保护作用

研究灵芝孢子糖肽对小鼠肝损伤的保护作用。分别建立四氯化碳（CCl₄）、乙醇致小鼠急性、慢性肝损伤,灌胃给予灵芝孢子糖肽65,130,260 mg/kg,测定小鼠肝指数,血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）,ELISA法检测肝组织炎症因子白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）含量,HE染色观察肝组织病理损伤。结果表明,灵芝孢子糖肽可显著降低急性、慢性肝损伤小鼠肝指数、血清AST和ALT含量。在CCl₄致慢性肝损伤模型中,灵芝孢子糖肽显著降低小鼠肝组织IL-6、TNF-α及iNOS的含量,改善肝组织病理损伤。上述结果表明,灵芝孢子糖肽可以显著减轻小鼠急、慢性肝损伤,并且具有一定的抗炎活性。     

六月雪水提取物对小鼠实验性肝损伤的保护作用

目的：研究六月雪水提取物对小鼠实验性肝损伤的保护作用。方法：采用四氯化碳（CCl6）、硫代乙酰胺（TAA）、扑热息痛（AAP）致小鼠急性肝损伤模型，测定小鼠血清ALT、AST活性。结果：六月雪水提取物可明显降低四氯化碳、硫代乙酰胺、扑热息痛致小鼠急性肝损伤模型血清ALT、AST活性。结论：六月雪水提取物对四氯化碳、硫代乙酰胺、扑热息痛所致小鼠实验性肝损伤有明显保护作用。     

制备低剂量四氯化碳诱导小鼠慢性肝损伤模型的探讨

目的 通过注射低剂量四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl₄）建立B/C小鼠肝损伤模型。方法 正常B/C小鼠随机分为正常对照组、油对照组、CCl₄模型组。正常对照组常规饲养;油对照组腹腔注射鲁花花生油（10 μL/g,1次/3天,连续6周）;CCl₄模型组腹腔注射0.5% CCl₄（10 μL/g,1次/3天,连续6周）。第6周,各组小鼠检测血清AST、ALT浓度,HE及Masson染色后观察小鼠肝脏结构、细胞形态及纤维化程度。结果 第6周CCl₄模型组小鼠血清ALT（P=0.00）、AST（P=0.00）浓度极显著性增高,HE及Masson染色显示CCl₄模型组小鼠肝上皮细胞呈广泛性空泡样变及大量坏死,肝小叶内出现明显的条索样纤维增生,其纤维化程度评分显著性升高（P =0.00）,纤维显色积分光密度值极显著性增高（P =0.00）。结论 注射低剂量CCl₄可以诱导B/C小鼠肝损伤模型,实验模型具备肝损伤和肝纤维化病理特征。     

补骨脂素对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的改善作用

研究补骨脂素（psoralen，PSO）对四氯化碳（CCl₄）致小鼠急性肝损伤的改善作用及其机制。雌性C57BL/6J小鼠连续灌胃补骨脂素或阳性对照药烯丙基化硫（DAS） 4 d，第4天腹腔注射CCl₄，建立CCl₄致急性肝损伤小鼠模型。检测血清生化指标丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平；HE染色观察肝脏病理学变化；Western blot检测细胞色素P450 2E1（CYP2E1）的蛋白水平；免疫组织化学染色（IHC）检测CYP2E1的蛋白水平；RT-PCR检测CYP2E1以及炎症因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6 （IL-6）的基因水平。与模型组相比，补骨脂素能够改善CCl₄引起的炎性细胞浸润以及肝细胞坏死情况，显著降低血清ALT、AST水平，下调炎症因子TNF-α和IL-6的水平，抑制CYP2E1的蛋白表达。结果表明，补骨脂素对CCl₄致小鼠急性肝损伤具有改善作用，其机制可能是通过抑制CYP2E1的蛋白表达发挥药效作用。     

蓝莓花青素对由H2O2诱导人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的保护作用

目的 通过建立人脐静脉内皮细胞株（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）氧化应激损伤细胞模型,探讨蓝莓花青素是否能够对H₂O₂引起的细胞损伤具有保护作用。方法 采用过氧化氢（H₂O₂）创建ECV304氧化应激损伤细胞模型,实验分为正常对照组、H₂O₂组、蓝莓花青素低、中、高剂药物组,药物组中加入蓝莓花青素培养2h后,再加入H₂O₂继续培养6h,采用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期变化情况及细胞凋亡率。结果 细胞活力与H₂O₂浓度及其作用的时间呈相关性下降趋势,在一定浓度范围内蓝莓花青素对细胞具有保护作用。结论 蓝莓花青素对由H₂O₂引起的氧化应激损伤具有一定保护作用。     

氨甲环酸对体外人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的 研究氨甲环酸（tranexamic acid, TXA）对H₂O₂诱导人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）损伤的保护作用及给药时机选择。方法 体外培养HUVECs,加入100μmol/L的H₂O₂作用12h,在H₂O₂作用开始后30min和60min以及H₂O₂作用结束前1h和2h这4个时间点加入TXA （150μmol/L）;Hoechst 33258染色法观察HUVECs形态;Western blot法检测细胞内细胞间黏附分子（intercellular cell adhesion molecule, ICAM）的表达;酶联免疫吸附双抗体夹心法（ELISA） 检测细胞上清液多配体聚糖、tPA和PAI-1含量。结果 HUVECs经H₂O₂作用后,可显著诱导细胞凋亡,上调ICAM、多配体聚糖和tPA的表达,同时抑制PAI-1的表达;TXA在H₂O₂作用60min内给药可抑制H₂O₂对HUVECs的凋亡诱导作用,同时下调ICAM、多配体聚糖和tPA的表达,并上调PAI-1的表达,TXA在60min后给药无上述保护作用。结论 早期TXA给药对H₂O₂诱导HUVECs损伤有明显抗纤维蛋白溶解和保护作用,从而表明临床应用TXA需早期给药。     

保肝汤对小鼠四氯化碳致慢性化学性肝损伤的保护作用

[目的] 研究保肝汤对四氯化碳（CCl₄）致慢性化学性肝损伤的保护作用。[方法] 将84只昆明小鼠随机分为正常组、模型组、护肝片组、保肝汤高、中、低剂量组共6组,每组14只。除正常组外,其余各组分别在实验第1、3、10、16、22、25、28天腹腔注射0.5% CCl₄;于造模后第10天开始灌胃,其中正常组和模型组给予蒸馏水灌胃,护肝片及保肝汤高、中、低剂量组给予灌胃药液。第30天灌胃2 h后称质量、处死,并收集各组肝组织及血清标本,检测指标含量,计算肝脏指数并进行肝组织病理学检查。[结果] 与正常组比较,模型组丙氨酶转氨酶（ALT）、天门冬氨酶氨基转移酶（AST）、丙二醛（MDA）明显升高（P<0.05）。模型组肝组织病理学,可见多处大片肝细胞脂肪变性,并见多处灶状坏死;与模型组比较,保肝汤高、中、低剂量组ALT、AST降低,AST/ALT升高（P<0.05）,保肝汤中、低剂量组MDA降低（P<0.05）;保肝汤各剂量组明显改善肝组织及形态结构。[结论] 保肝汤能够减轻CCl₄对肝细胞的损伤程度,以保肝汤中剂量组作用最优;作用机制与抑制肝损伤后脂质过氧化反应有关。     

人参皂苷Rb1对小鼠T淋巴细胞体外活化、增殖及凋亡的影响

目的 研究人参皂苷Rb₁对小鼠T淋巴细胞体外活化及增殖的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨。方法 分离制备小鼠淋巴结细胞悬液;以双色荧光抗体染色技术结合流式细胞术检测在刀豆蛋白A（ConA）的刺激下,人参皂苷Rb₁对早期活化标志CD3/CD69和调节T淋巴细胞标志CD4/CD25表达的影响;用羧基荧光素乙酰乙酸（CFDA-SE）染色结合流式细胞术和MTT法检测在ConA的刺激下,人参皂苷Rb₁对T淋巴细胞增殖的影响;DIOC/PI双染技术检测在H₂O₂作用下,人参皂苷Rb₁对淋巴细胞凋亡进程的影响。结果 终浓度为5、10、20 μmol/L的人参皂苷Rb₁对ConA刺激的调节T淋巴细胞CD4^＋/CD25^＋的表达具有促进作用,而CD3^＋/CD69^＋的表达明显下调（P＜0.01）;对ConA刺激的T淋巴细胞增殖具有明显的抑制作用（P＜0.05）,且呈剂量依赖性;人参皂苷Rb₁显著抑制H₂O₂诱导的淋巴细胞的凋亡进程（P＜0.05）。结论 人参皂苷Rb₁对小鼠淋巴细胞的体外活化及增殖均具有明显的抑制作用,是一种潜在的免疫抑制剂。     

青枯菌诱导广藿香防御相关酶同工酶分析

目的 研究青枯菌诱导广藿香的致病过程及防御相关酶同工酶的动态变化。方法 利用青枯菌粗毒素诱导广藿香试管苗,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对诱导植株中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）同工酶谱带的变化进行分析。结果 青枯菌诱导1～7 d后的广藿香植株,表现渐进的发病过程,开始时,植株失绿、少数叶片萎垂;逐渐植株茎杆弯曲、整株叶片萎蔫。同工酶电泳分析表明,SOD同工酶在第1、3天时分别出现了新谱带,与对照共有的谱带,强度先增后减;CAT同工酶在第3、5天时分别出现新谱带,第6天时强度达到最大;POD同工酶在第1、4天时分别出现了新谱带,强度先增后减,第7天时所有谱带消失。结论 青枯病的发生呈现渐进的过程。青枯菌诱导1～7 d,广藿香SOD、CAT和POD同工酶谱带在数目和强度上均有所不同,呈动态变化,表明SOD、CAT和POD在广藿香抵抗青枯菌入侵时可能起到较为重要的作用。     

4040半自动生化分析仪检测ALT性能验证及应用

目的 验证4040半自动生化分析仪检测ALT正确度、精密度、检测可报告范围及正常值参考范围等指标.方法 4040半自动生化分析仪与全自动生化分析仪分别检测ALT平行比对实验;4040半自动生化分析仪分别重复检测ALT低值、高值血清标本,观察精密度;取ALT低值、高值二份血清标本稀释六种不同血清标本分别检测ALT,观察其检测可报告范围.结果 4040半自动生化分析仪与全自动生化分析仪比对实验,线性回归Y=1.003X+0.271,r2=0.998;低值、高值批内不精密度分别2.86％、2.17％,低值、高值批间不精密度分别4.07％、3.51％,6种不同血清标本检测ALT,线性回归Y=570.3X+29.2,r2=0.9996.结纶 4040半自动生化分析仪检测ALT正确度、精密度、检测可报告范围及正常值参考范围等指标经性能验证符合血站操作技术规程(2012版)文件要求.     

姜黄属药用植物的3种同工酶分析

目的 探讨姜黄属Curcuma L. 6种郁金类药用植物的种间及其种内不同居群间的亲缘关系。方法 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）,分析超氧化物歧化酶（SOD）、多酚氧化酶（PPO）、细胞色素氧化酶（COD）的酶带,并采用UPGMA法对数据进行分析。结果 SOD、PPO和COD的酶谱能较好地区分6种郁金类药用植物;PPO和COD还能够对种内不同居群的材料进行区分。结论 同种植物不同居群间亲缘关系的远近与地理来源有关;能够通过聚类分析区分姜黄和川郁金;姜黄属郁金类植物的栽培型和野生型产生了分化。     

3种挥发油对马钱子总碱透皮贴片体外经皮渗透的影响

目的 研究砂仁、草果、白豆蔻挥发油对马钱子总碱贴片中马钱子总碱（主要含马钱子碱和士的宁）体外经皮渗透的影响。方法 以小鼠离体皮肤为实验材料,采用改良Franz扩散池法,以HPLC法测定马钱子总碱贴片中马钱子总碱（马钱子碱和士的宁）的累积渗透量（Q_n）,考察3%、5%、7%、10%砂仁、草果、白豆蔻挥发油对马钱子总碱（马钱子碱和士的宁）的促渗效果。结果 不同质量浓度挥发油中,以5%砂仁挥发油、3%草果挥发油、10%白豆蔻挥发油渗透速率（J_SS）最大,分别为1.039、0.951、0.907 mg/(cm²·h);与不加促渗剂的阴性对照组相比,增渗倍数（ER）分别为1.212、1.230、1.383,其中5%砂仁油的ER大于阳性对照10%氮酮。结论 5%砂仁油、3%草果油、10%白豆蔻油均能明显促进马钱子总碱贴片中马钱子总碱（马钱子碱和士的宁）的透皮吸收。     

大鼠体内彗星试验方法的建立与应用研究

目的 建立大鼠肝细胞和外周血淋巴细胞的体内彗星试验方法,并应用该方法对遗传毒性阳性物甲磺酸乙酯（EMS）和环磷酰胺（CPA）进行检测。方法 选择SD雄性大鼠为实验动物,分别给予不同剂量EMS和CPA。给药结束后,采集外周血样本和摘取动物左侧肝叶组织样本,铺制成单细胞凝胶玻片。玻片经裂解、解旋、电泳、中和、脱水等步骤后,得到可观察的实验标本。染色标本,并在40×荧光显微镜下观察拍照,使用专业分析软件对单细胞电泳图像进行分析和测定。结果 成功建立了基于大鼠肝细胞和外周血淋巴细胞的体内彗星试验方法。经该方法检测,EMS结果为阳性,CPA结果为阴性,EMS适合作为本方法的阳性对照。结论 成功建立大鼠体内彗星试验方法,并可应用于遗传毒性检测。     

药用杭菊扦插育苗技术研究

目的 探索适合杭菊扦插繁殖的条件。方法 考察质量浓度分别为250、500、750、1 000 mg/L的吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）对杭菊2个不同部位的插穗扦插的影响。结果 嫩梢和茎段扦插的生根数分别为13.63和5.96,根系效果指数分别为3.13和1.4。采用激素处理过的插条生根效果显著好于对照,其中以750 mg/L IBA处理后的生根效果最好,生根效果指数为17.8。结论 本研究为杭菊的扦插繁殖提供参考。     

苍耳子不良反应研究进展

苍耳子是传统的鼻科要药,具有散风除湿、通鼻窍的功效,被认为无毒或有小毒。然而近年来不断有正常剂量或是过量服用苍耳子出现肾脏、肝脏、心脏损伤或是腹痛、恶心、呕吐等不良反应报道,其中肾脏和肝脏损伤引起了大量的关注和研究。从临床报道和动物实验两方面对服用苍耳子出现的以肾脏损伤为主的不良反应进行综述,总结了引起多器官损伤的毒性物质、毒性机制、量毒关系、炮制方法对毒性的影响等,为进一步研究苍耳子安全用药提供依据。     

5857例健康体检者血清谷丙转氨酶与代谢综合征的相关性探讨

目的 探讨血清谷丙转氨酶(ALT)在正常值范围内轻度升高对代谢综合征(MetS)的预警作用.方法 收集2011年3月至2011年10月在南京南钢医院体检中心进行健康体检的企业职工健康体检资料.体检项目包括体重指数、腰围、血压、空腹血糖、谷丙转氨酶、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇等.依据改良的NCEP-ATPⅢ定义的MetS诊断标准,比较不同ALT值MetS的发病率.结果 符合入组标准的研究对象共5 857例,其中男性4 379例(74.8％),女性1 478例(25.2％).该人群代谢综合征患病率为13.1％,(男16.5％,女2.9％).MetS组ALT异常者(＞40 U/L) 258例占33.9％,非MetS组ALT异常者(＞40 U/L) 503例占9.88％,两组比较差异有统计学意义.健康体检人群中MetS组患者个体ALT水平升高为(39.30±26.91) IU/L,而非MetS组ALT水平为(22.51±16.77) IU/L,两组比较差异有统计学意义.随着ALT值的增加,Mets发病率增加.结论 ALT异常者中MetS发病率明显增高；ALT值在正常值范围内,随着ALT值的增加,Mets的发病率也逐渐增加.通过ROC曲线获得ALT截止值为23.55 IU/L,较现行临床正常参考值对Mets有更好的预警效果.     

地榆总皂苷促造血细胞增殖效应研究

目的 观察地榆总皂苷对3种造血细胞Baf3/Mpl、UT-7和NSF-60的促增殖效应。方法 分别培养依赖血小板生成素（TPO）、红细胞生成素（EPO）和粒细胞集落生长因子（G-CSF）生长的Baf3/Mpl、UT-7和NSF-60细胞,在加或不加细胞因子条件下,用不同质量浓度地榆总皂苷处理细胞72 h后,采用MTT法检测3种细胞的增殖;采用RT-PCR法检测3种细胞因子受体表达水平的变化。结果 地榆总皂苷单独处理细胞72 h,明显促进Baf3/Mpl细胞和NSF-60细胞增殖,但不影响UT-7细胞生长;在TPO和G-CSF存在条件下,地榆总皂苷能分别增强两种细胞因子的促细胞增殖作用。此外,地榆总皂苷能明显增强Baf3/Mpl细胞TPO受体表达,对NSF-60细胞G-CSF受体表达没有影响。结论 地榆总皂苷具有单独或协同细胞因子的促造血细胞增殖作用,其促增殖作用与上调TPO受体的表达有关。     

软肝化纤丸对CCl4致大鼠慢性肝纤维化的影响

目的 观察软肝化纤丸对CCl₄致大鼠慢性肝纤维化的治疗作用。方法 采用每周2次sc 10%～40% CCl₄油溶液2 mL/kg造成大鼠慢性肝纤维化模型,并同时ig给予1.5、3 g/kg受试药物,以联苯双酯滴丸为阳性对照,观察药物对模型大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、总胆红素（TBIL）、白蛋白/球蛋白（A/G）及肝组织中羟脯氨酸（Hyp）的影响,并进行肝脏病理切片,光镜下观察肝脏组织学改变。结果 在造模同时,连续8周ig给予3 g/kg软肝化纤丸对CCl₄所致慢性肝纤维化大鼠血清ALT、AST及肝组织中Hyp量的升高均有明显抑制作用;且能明显减轻动物肝细胞变性、坏死及纤维化等损伤程度。结论 软肝化纤丸对CCl₄所致慢性肝纤维化模型动物具有很好的保肝降酶、改善肝纤维化程度的作用。