Rho/ROCK信号通路与青光眼

青光眼是眼科临床中常见的致盲性眼病之一。目前的治疗方法主要是通过药物或手术降低眼压,对视网膜神经节细胞及其轴突损伤的保护也越来越引起人们的重视。随着对相关卷曲螺旋形成蛋白激酶通路(Rho/ROCK)生物学功能的深入研究,目前发现抑制Rho/ROCK通路可以增加小梁网途径的房水引流,降低眼内压,增加眼部血液供应,促进神经节细胞的存活。本文就Rho/ROCK通路与青光眼关系的研究进展进行综述。     

Rho/ROCK信号通路参与肝纤维化形成机制的研究进展

Rho小G蛋白属于小G蛋白超家族,主要功能是调节细胞骨架。近年研究发现它可以通过激活下游的关键靶效应分子-Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶（Rho associated coiled coil forming protein kinase,ROCK）调节肝星状细胞的多种生物学行为,包括表型、运动、生长分裂、凋亡、基因表达等,     

红景天甙对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞中Wnt信号通路的影响及其意义探讨

目的:通过观察经红景天甙、乙醛处理后的大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSCs)增殖速度的变化以及细胞内Wnt信号通路中主要下游分子及目的基因mRNA表达和蛋白水平的改变,探讨Wnt信号通路在HSCs中的作用,以及红景天甙对大鼠HSCs Wnt通路和细胞增殖的影响.方法:用红景天甙及乙醛处理体外培养传代的大鼠HSCs [1],MTT法绘制细胞生长曲线,采用RT-PCR和Western blot的方法分别观察Wnt信号通路中β-catenin和细胞周期蛋白DI(Cell cycle protein D1,CyclinD1)及相关指标的变化.结果:从各组细胞生长曲线的对比发现:红景天甙处理组细胞的增殖速度相对于单用乙醛组明显降低.单用乙醛刺激的大鼠HSCs中,Ⅰ型胶原(Collagen α1) [2]、β-catenin和CyclinD1的mRNA表达和蛋白合成均明显增强(P＜0.05),红景天组中Cyclin D1和β-catenin的mRNA表达和蛋白合成均出现不同程度的下降(P＜0.05).结论:Wnt信号通路参与了乙醛刺激的大鼠HSCs活化,红景天甙可能是通过降低大鼠HSCs中Wnt信号通路的活性,从而抑制乙醛刺激的大鼠HSCs的增殖.     

Rho/ROCK激酶信号通路在大鼠宫腔粘连中的作用

目的 复制宫腔粘连大鼠模型,探讨Rho/ROCK信号通路相关蛋白的表达及其在宫腔粘连中的作用机制。方法 SD大鼠宫腔注入0.5?ml 95%乙醇,复制宫腔粘连模型;对照组注入等量生理盐水。术后15?d观察两组子宫内膜形态学变化,免疫组织化学法检测子宫内膜角蛋白、波形蛋白、Rho（RhoA、RhoB、RhoC）、Rho激酶（ROCKI、ROCKII）及TGF-β1表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠子宫内膜厚度变 薄（P?<0.05）;两组腺体数目比较,模型组腺体数目减少（P?<0.05）;两组角蛋白比较,模型组表达下降（P?<0.05）;两组波形蛋白比较,差异无统计学意义（P?>0.05）;两组大鼠子宫内膜RhoA、RhoB、RhoC、ROCKI、ROCKII的表达比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,模型组均高于对照组;模型组大鼠子宫内膜TGF-β1的表达高于对照组（P?<0.05）。结论 注射无水乙醇可复制稳定的大鼠宫腔粘连动物模型,其Rho/ROCK信号通路处于激活状态,TGF-β1通过激活Rho/ROCK信号通路促使子宫内膜损伤后组织纤维化,参与宫腔粘连的发生、发展。     

Rho/ROCK通路抑制剂在青光眼中的研究进展

Rho/ROCK通路在细胞骨架的调节方面起到重要作用。Rho/ROCK抑制剂可以通过调节小梁网中肌动蛋白细胞骨架、细胞外基质以及Schlemm's管内皮细胞功能,从而降低眼压。同时,抑制Rho/ROCK途径,可增加视乳头血流量、维持视网膜神经节细胞生存、促进轴突再生,甚至发现在抗青光眼滤过术后能抗瘢痕化。考虑到其眼压调节、抗瘢痕作用和视神经保护特性,Rho/ROCK信号通路是抗青光眼治疗的重要目标,在不久的将来它将用于青光眼的推荐治疗方案。     

阻断Rho/ROCK信号传导通路对大鼠脊髓损伤的治疗效果

目的：探究阻断Rho/ROCK信号传导通路对大鼠脊髓损伤的治疗效果。方法选取大鼠脊髓损伤动物模型150只,分为假手术组、实验组和对照组,各50只。假手术组进行椎板切除术;对照组进行脊髓横断损伤,并对其腹腔注射生理盐水;实验组进行脊髓横断手术,给予腹腔注射Fasudil。结果实验组的RhoA mRNA明显降低。同时还能见到部分纤维以及大量的NF阳性纤维穿过脊髓横断部位,并沿其尾端伸长。结论阻断Rho/ROCK信号传导通路对轴突再生、传导功能恢复以及损伤脊髓运动具有显著的促进作用。     

红景天甙对大鼠肝组织TGF-β1/Smads信号通路的作用

目的:结扎肝动脉(Hepatic artery ligation,HAL)建立急性大鼠肝损伤模型,探讨药物红景天甙对大鼠肝损伤时TGF-β1、Smad2/3、P-Smad2/3、及c-ski表达的影响.方法:66只Wistar大鼠随机分为对照组、肝动脉结扎组和红景天甙干预组,结扎分为1、2、4、6、8h5个时间段,红景...     

桃红四物汤对产后血瘀证大鼠Rho/ROCK通路RhoA、p-RhoA及PAI-1蛋白表达的影响

目的探讨桃红四物汤治疗产后血瘀证的作用机制。方法采用米非司酮(8.3mg/kg)和米索前列醇(0.1mg/kg)灌胃早孕鼠,复制血瘀证产后大鼠模型,将模型复制成功的大鼠随机分为模型组、阳性对照组(法舒地尔,10mg/kg)及桃红四物汤组(9.0g/kg),并设立正常对照组;通过观察大鼠子宫形态及血液流变学指标变化评价桃红四物汤治疗产后血瘀证的疗效,采用免疫印迹法测定ras同源基因A(ras homolog gene,member A,RhoA)、磷酸化RhoA(phospho-RhoA,p-RhoA)蛋白及纤溶酶原激活剂抑制物(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)的表达水平。结果桃红四物汤能够明显减轻模型大鼠子宫的炎性反应及红细胞的渗出和聚集,降低全血黏度和血浆黏度(P0.05,或P0.01),下调p-RhoA及PAI-1蛋白的表达水平(P0.01)。结论桃红四物汤治疗产后血瘀证的机制与下调Rho/ROCK通路相关蛋白的表达水平有关。     

丹参素对肝星状细胞ERK1/2信号转导通路的影响

目的:观察丹参素对血小板衍生生长因子-BB(Platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)刺激大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell,HSC)增殖、Ⅰ型胶原合成、磷酸化细胞外信号调节激酶1,2(Phosphoryhted extracellular signal-regulated kinase 1/2,P-ERK1/2)表达的影响,探讨丹参素抗肝纤维化的分子机制.方法:四甲基偶氮唑盐法检测大鼠HSC增殖活性;免疫细胞化学染色法测定大鼠HSC Ⅰ型胶原合成的表达;Western blot测定大鼠肝星状细胞P-ERK1/2的表达.结果:丹参素有抑制PDGF-BB刺激大鼠HSC增殖,Ⅰ型胶原表达,p-ERK1/2表达的作用.结论:丹参素可抑制PDGF-BB刺激的大鼠HSC增殖,Ⅰ型胶原合成,其机制可能与抑制ERK1/2信号转导通路有关.     

野生型PTEN过表达对体外活化大鼠肝星状细胞ERK信号转导的影响

【摘要】 目的 探讨野生型第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因（PTEN）过表达对体外活化大鼠肝星状细胞（HSC）的细胞外信号调节激酶（ERK）信号转导的影响。方法〓利用瞬时转染技术,以腺病毒为载体,将野生型PTEN基因转染体外培养的活化大鼠 HSC;采用Western blot及实时荧光定量PCR技术检测HSC 的PTEN、ERK1蛋白及mRNA表达;并应用Western blot技术检测HSC 的磷酸化ERK（p ERK）表达。 结果 外源性野生型PTEN基因在活化HSC大量表达,并显著下调HSC的p ERK 表达 (P＜005),而对HSC的ERK1蛋白及mRNA表达均无影响（P＞050）。结论〓野生型PTEN过表达通过抑制ERK的磷酸化负性调控体外活化大鼠HSC的ERK信号转导。     

红景天甙对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞激活后功能的影响

目的:观察红景天甙对乙醛刺激的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)增殖、细胞周期、Ⅰ型胶原蛋白分泌及TGFβ1 mRNA表达的影响.方法:常规细胞培养,红景天甙对乙醛刺激的HSC进行处理;以MTT比色法检测细胞增殖变化,流式细胞仪检测细胞周期,ELISA法检测HSC内Ⅰ型胶原蛋白的分泌,RT-PCR方法检测HSC内TGFβ1 mRNA表达.结果:红景天甙可明显抑制乙醛刺激的HSC增殖;抑制乙醛刺激的HSC由G1→S期转化;抑制HSC内Ⅰ型胶原蛋白分泌和TGFβ1 mRNA表达.结论:红景天甙抗肝纤维化与抑制HSC增殖,Ⅰ型胶原蛋白分泌和TGFβ1 mRNA表达有关.     

从肝星状细胞激活过程中的信号转导途径谈肝纤维化的干预措施

近年来,肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的激活以及由此而产生的一系列复杂生物学效应在肝纤维化发生、发展过程中所处的重要地位已经得到普遍共识。当肝脏受到多种因素如病毒、生物、化学物质等损伤后,由细胞因子、生长因子、氧化活性应激产物以及受损肝细胞的旁分泌刺激等多种因素,通过不同或相同的HSC胞内信号转导途径介导了HSC的激活并使其转化成为肌成纤维细胞(myofibroblastic cell,MFB);一旦HSC活化后,其功能发生诸多变化,直接导致肝纤维化的形成。     

肝星状细胞和胰腺星状细胞的比较

肝星状细胞和胰腺星状细胞在各自纤维化疾病中都发挥着重要作用,两者在诸多方面存在相似之处.文章就两者的生物学特性、凋亡、信号转导通路方面进行总结和比较,以探讨它们之间的关系.     

肝星状细胞和胰腺星状细胞的比较

肝星状细胞和胰腺星状细胞在各自纤维化疾病中都发挥着重要作用,两者在诸多方面存在相似之处。文章就两者的生物学特性、凋亡、信号转导通路方面进行总结和比较,以探讨它们之间的关系。     

瘦素对大鼠肝纤维化星状细胞的作用及相关ERK信号转导机制

目的：探讨瘦素（leptin）对大鼠肝纤维化星状细胞（HSC）的作用及相关信号转导机制。方法采用改良原位灌注、Optiprep密度梯度离心法分离纯化大鼠HSC。通过台盼蓝拒染试验评估细胞存活率,α-平滑肌肌动蛋白（α- SMA）免疫组化鉴定,光镜观察形态学变化。将40只SD大鼠分为4个处理组：对照组、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）组（加入10-7mol/L AngⅡ）、Leptin组（加入100ng/ml Leptin）、Leptin＋AngⅡ组（加入100ng/ml Leptin＋10-7mol/L AngⅡ）。分别采用3H- TdR和3H- Pro掺入法进行HSC增殖和胶原合成的测定。Western blot检测各处理组p- ERK1/ERK1、p- ERK2/ERK2、AngⅡ蛋白表达情况。结果大鼠HSC存活率＞90%,传代1次后HSC纯度＞95%。与对照组相比,AngⅡ组、Leptin组、Leptin＋AngⅡ组的HSC增殖和胶原合成均明显增加（均P＜0.05）;与AngⅡ组、Leptin组相比,Leptin＋AngⅡ组HSC增殖和胶原合成明显增加（均P＜0.05）。Western blot显示,AngⅡ组、Leptin组、Leptin＋AngⅡ组的p- ERK1/ERK1、p- ERK2/ERK2、AngⅡ蛋白水平均较对照组明显升高（均P＜0.05）;与AngⅡ组、Lep-tin组相比,Leptin＋AngⅡ组p- ERK1/ERK1、p- ERK2/ERK2、AngⅡ蛋白水平明显升高（均P＜0.05）。结论瘦素可通过上调AngⅡ水平,激活ERK信号转导通路,刺激HSC增殖和胶原合成,导致肝纤维化。     

红花促进肝星状细胞胶原降解的分子机制

【目的】观察红花对肝星状细胞有关胶原降解基因表达的影响。【方法】ELISA法检测细胞上清液中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原含量,逆转录多聚酶链反应检测间质性胶原酶及金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平。【结果】与对照组比较,红花组细胞上清液中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原含量明显降低(P<0.01),红花组间质性胶原酶基因表达水平明显增强(P<0.01),而金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平明显下降(P<0.01)。【结论】红花的抗肝纤维化作用可能部分是通过增强间质性胶原酶基因表达,同时抑制金属蛋白酶组织抑制因子基因表达而完成的。     

促红细胞生成素对心肌梗死大鼠心肌细胞信号转导通路ERK1/2的影响

目的 研究促红细胞生成素(EPO)对心肌梗死(MI)大鼠心肌细胞凋亡、血管再生及细胞信号转导通路细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的影响.方法 将20只SD大鼠随机分为实验组和对照组,结扎左冠状动脉前降支建立大鼠MI模型,实验组围手术期每天腹腔注射重组人促红细胞生成素5000 u/kg,共3 d,14 d再连续注射3 d,术后4周行血流动力学检查,随后处死大鼠,原位末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡,免疫组化检测缺血区毛细血管密度,免疫印记(Western blot)法检测ERK1/2及磷酸化-ERK1/2(p-ER-K1/2)蛋白表达水平.结果 与对照组相比,术后4周实验组血流动力学指标明显改善(P<0.05),心肌细胞凋亡指数显著降低[分别为(12.3%±1.8%)和(22.3%±2.7%),P<0.05],缺血区毛细血管密度明显增高[分别为(14.6±1.6)/视野和(6.7±0.4)/视野,P<0.05],ERK1/2的磷酸化水平显著增高[分别为(0.89±0.06)和(0.27±0.02),P<0.05].结论 EPO能显著减少心肌细胞凋亡,增加缺血区毛细血管密度,改善心功能,并影响细胞信号通路ERK1/2的活化水平.     

枕大池注入利多卡因对兔SAH后基底动脉Rho/ROCK信号传导的影响

目的 探讨枕大池注入利多卡因对兔蛛网膜下腔出血（SAH）后基底动脉血管Rho/Rho相关激酶（ROCK）信号传导的影响。 方法 24只新西兰大白兔随机分为3组,每组8只,分别为假手术（sham）组、蛛网膜下腔出血（SAH）组、枕大池利多卡因（CD）组。SAH组和CD组动物经枕大池注入非抗凝的自体动脉血（1 mL/kg）复制SAH模型,sham组经枕大池注入37℃的生理盐水（1 mL/kg）;30 min后,CD组经枕大池注入0.3 mL 2%利多卡因,SAH组和sham组注入等量生理盐水。72 h后测定摄食量和神经功能损害分级,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Western blot检测基底动脉中Rho相关激酶2（ROCK2）、肌球蛋白轻链（MLC）及钙调蛋白（CaM）蛋的基因和蛋白表达。 结果 与sham组比较,SAH组和CD组家兔摄食量减少,且出现不同程度的神经功能损害,ROCK2在基底动脉中的mRNA及蛋白表达量增高,MLC和CaM的mRNA和蛋白表达减少（P<0.05）;与SAH组比较,CD组家兔摄食量及神经功能损害差异无统计学意义（P>0.05）,ROCK2在基底动脉中的mRNA及蛋白表达量减少,MLC和CaM的mRNA和蛋白表达增高（P<0.05）。 结论 枕大池注入利多卡因能够抑制兔SAH后基底动脉血管Rho/ROCK信号传导,减轻SAH后基底动脉平滑肌的收缩。