采集脐带血的手术配合

目的:探讨脐带血采集的手术配合,以指导临床实践,提高脐血的质量和数量,提高合格率。方法:采用密闭式采集法,胎儿娩出后,在无菌操作下5分钟内完成采集。结果:2009～2010年分别成功采集脐带血样56份(2009)和70份(2010),各个血样脐血无凝集,脐血量足够,脐血无污染。结论:高效的采集技术和无菌观念、合适的供应者,是保证脐带血质量和数量的有效方法,是治疗疾病成功的保证。     

采集脐带血的手术配合

目的：探讨脐带血采集的手术配合,以指导临床实践,提高脐血的质量和数量,提高合格率。方法：采用密闭式采集法,胎儿娩出后,在无菌操作下5分钟内完成采集。结果：2009～2010年分别成功采集脐带血样56份（2009）和70份（2010）,各个血样脐血无凝集,脐血量足够,脐血无污染。结论：高效的采集技术和无菌观念、合适的供应者,是保证脐带血质量和数量的有效方法,是治疗疾病成功的保证。     

脐带血采集方法及质量影响因素的研究进展

脐带血中含有造血干细胞,在治疗如白血病、再生障碍性贫血、淋巴瘤等疾病方面,它是除骨髓及外周血外的另一种造血干细胞来源。由于移植成功与否很大程度上取决于所输入的脐带血中所含造血干细胞数量,因此如何提高脐带血采集质量已成为亟待解决的问题。本文分析了采集方式对采集质量的影响,得出结论,即在经阴道顺产的情况下,体内采集法可比体外采集法获得更多的采集量、有核细胞数、CD3+4细胞数和集落形成单位细胞数(CFUs),但在剖腹产时两种采集方法产生相似的结果。随后分析了一些常见的产科和胎儿因素对采集质量的影响,发现胎盘重量和出生体重是采集质量的最佳衡量标准。     

采集脐血干细胞的健康教育

目的:使孕妇及家人了解脐血干细胞技术,愿意储存捐赠新生儿脐带血。方法:对于孕期在我院产科(门诊)检查和住院待产的孕妇进行形式多样的有关脐血干细胞知识的健康教育。结果:对2006年元月—2007年4月在我院住院分娩的76例自愿要求采集脐带血的孕妇,在分娩时采集了脐带血。结论:有政府和社会的参与支持,对孕产妇及家属加强干细胞相关知识的健康教育是开展此项技术的关键。     

提高脐带血采集质量的策略及意义

自1988年Gluckman等首先进行人类脐血移植,用HLA相和同胞的脐血移植治疗一五岁贫血患儿后,人们又把目光转移到非血缘间脐血移植,经过现代医学的证明脐血造血干细胞在生命科学研究和临床医学方面具有越来越广的应用前景。目前我国各地也都相继建立了脐血库。脐血采集是脐血库供源的重要环节之一,采集工作主要是由助产士或护士承担。由于脐血采集要求高,采集过程易污染,日本医学介绍日本近畿地区脐带血血库脐带血采集报道细菌污染率11．1％,成功率低,采集过程中所涉及的法律伦理问题较多;如何遵照法律伦理避免纠纷,选择何种采集方法对提高脐血采集质量很重要。就这些问题我院采取了一些相应的护理对策。现将我院护理对策介绍如下。     

人脐血间充质干细胞的体外分离、培养

目的:研究脐带血间充质干细胞体外分离、培养条件,探讨脐带血间充质千细胞作为细胞治疗种子细胞的可行性.方法:采用不同的实验方法对36例脐血间充质干细胞分离、培养,并与11份骨髓间充质进行对比,探索脐血间充质干细胞的最适培养条件.结果:采用甲基纤维素分离的间接法显著提高了脐血间充质干细胞分离培养的成功率;增加单个核细胞的接种最和适当的血清浓度促进了脐血间充质干细胞的成功培养.结论:脐血间充质干细胞能在体外分离纯化,但培养成功率明显低于骨髓,受多种因素影响.     

脐血的采集和输注的护理

人类脐血含有丰富的造血细胞，具有不同骨髓及外周血的许多特征，能提供相当数量的造血细胞，用于造血细胞移植[1]，同时还可提供免疫球蛋白，提高机体免疫力[2]。因而近几年来，人类脐血已开始应用于临床，并显示广泛的应用前景。我院于1996年6月至1997年6月共采集脐带血58份，并应用于临床，取得较好效果。现将采集和输往的护理体会报告如下。1脐血的采集1．1采集对象：元急慢性感染及血液系统疾病，经检验无传染性疾病及传染病病原携带者，且其新生儿为足月顺产．出生后皮肤红润，无感染征象的产妇。1．2采集方法：新生儿出生后，立即在…     

6292份脐带血的微生物检测结果分析

目的 探讨脐带血采集和处理过程中微生物污染的概率、种类,并分析脐带血收集相关因素和检测方法对培养结果的影响.方法 抽取2011～2014年脐带血分离后的血浆-红细胞悬液,分别注入需氧和厌氧培养瓶,使用BACTEC9000系列全自动血液培养系统培养5d,结果阳性者做废弃处理.对阳性标本进行病原菌鉴定,同时比较不同生产方式、采集者、采集量、采集方式、处理前时间、培养体积、延迟上机时间及培养瓶种类对微生物污染率的影响.结果 6 292份被检脐带血中阳性标本131份,污染率为2.1％.病原菌以大肠埃希菌最为常见,占23.9％,其次为凝固酶阴性葡萄球菌,占20.9％.自然分娩者脐带血标本、县市级医院采集标本、采集量低于80 mL的标本阳性检出率升高,培养体积由10 mL提高为20 mL后阳性检出率上升,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 脐带血微生物污染率与生产方式、采集者及采集量相关,增加培养体积可提高检测灵敏度.     

脐带血库质量管理体系的持续改进

随着脐带血干细胞移植日益增多,脐血库中脐带血的保存质量已成为移植成功与否的一个重要环节。运用过程管理的方法,完善和改进脐带血库的质量管理体系,能够使脐带血库的整个过程处于受控状态,提高脐带血制备、储存质量,为脐带血干细胞临床移植的成功提供了保障。     

脐带血造血干细胞移植的伦理问题

脐带血造血干细胞移植 (脐血移植 )是治疗遗传性疾病和恶性肿瘤的重要治疗方法之一。我国首例脐血移植始于 1991年 ,经过一段时间的沉寂之后 ,近年来又成为临床应用的热点。为了更广泛地应用这一新技术 ,各地相继建立脐带血库 ,如广东省就有 4家脐带血库采集和贮存新生儿的脐带血。然而我们也要看到脐带血移植存在一些伦理上的问题。大部分医务人员及脐带血库代表在热心推广与应用这一新技术过程中 ,往往忽视医学伦理学问题。1　脐带血移植仍是试验阶段的治疗方法1989年以来 ,全世界进行了 10 0 0余例脐血移植 ,为肿瘤患者、遗传性疾病患者…     

人脐血基质细胞自发分泌多种造血生长因子的实验研究

目的探讨体外培养的人脐血基质细胞分泌血小板生成素(thrombopoietin,TPO)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、干细胞生长因子(stem cell factor,SCF)的能力.方法留取不同培养时相点的培养液上清,ELISA法检测上清中TPO、GM-CSF、SCF的浓度,并与骨髓基质细胞的培养上清液对照比较其特点.结果人脐血基质细胞和骨髓基质细胞均可分泌TPO、GM-CSF和SCF等造血生长因子,二者造血生长因子的分泌随着培养时间的延长而逐渐下降,其中人脐血基质细胞分泌TPO和SCF的高峰期出现在第7天,而GM-CSF的分泌则无高峰期的出现;通过与骨髓基质细胞分泌三种造血生长因子量进行对比发现,人脐血基质细胞SCF和GM-CSF的分泌量低于骨髓基质细胞,而TPO的分泌高于同期培养的骨髓基质细胞.结论人脐血基质细胞与骨髓基质细胞一样具有分泌造血生长因子,支持调控造血的作用.     

人骨髓间充质干细胞体外优化条件的研究

目的通过比较5种不同体外培养人骨髓问充质干细胞（hMSCs）条件，找到一种能在质和量上均能满足需要的体外培养条件。方法使用Percoll-Paque液（1．073g／ml）分离人骨髓血，采用DMEM＋15%的小牛血清、人体白蛋白、人血清、脐带血清及MesenCult培养基，在相同培养条件下，动态观察hMSCs的生长状况、细胞数量变化，通过流式细胞仪检测细胞的纯化状况。结果5种培养条件在一定时相内均能获得较为纯化的hMSCs，但在生长速度和纯化率上存在一定的差异。结论Mesen Cult是一种较为优秀的hMSCs培养基．胎儿脐带血清培养也能在短期内获得足量纯化的hMSCs．人血清的使用还需要做进一步的研究。     

骨髓基质细胞与人脐血基质细胞表达造血生长因子的实验研究

目的在分子生物学水平上探讨体外培养的骨髓基质细胞与人脐血基质细胞表达TPO、GM-CSF、SCF的mRNA的能力的差异.方法收集培养28d的骨髓基质细胞与人脐血基质细胞,采用RT-PCR方法在mRNA水平上分析其造血生长因子GM-CSF、SCF、TPO的表达,比较二者表达TPO、GM-CSF、SCF等造血生长因子的mRNA能力的差异.结果体外培养的人脐血基质细胞与骨髓基质细胞均能表达:(1)TPO的mRNA,人脐血基质细胞表达能力强于同期培养的骨髓基质细胞,二者积分光密度量化比为1.57;(2)SCF的mRNA,人脐血基质细胞表达能力弱于同期培养的骨髓基质细胞,二者积分光密度量化比为0.83;(3)GM-CSF的mRNA,人脐血基质细胞表达能力弱于同期培养的骨髓基质细胞,二者积分光密度量化比为0.68.结论人脐血基质细胞和骨髓基质细胞均可以表达造血生长因子TPO、GM-CSF、SCF的mRNA,具有支持调控造血的物质基础.     

人脐血单个核细胞的体外培养观察

目的对脐血间充质干细胞进行体外培养，以进一步阐明其生物学特性，为今后的基础研究和临床应用打好基础。方法采用DMEM培养基培养脐血单个核细胞，流式细胞仪检测细胞表面标志。结果脐血单个核细胞在体外培养24d时，细胞表面CD11b、CD34、CD44和CD45表达阴性，GFAP和nestin表达也为阴性。结论培养所得的单个核细胞区别于脐血中的造血干细胞。     

人脐血干细胞对裸小鼠移植的实验研究

目的　探讨脐血干细胞移植到小鼠体内的增殖、分化以及维持情况。方法　将人脐血单个核细胞注入经致死量照射后的免疫缺陷小鼠— BAL B/C nu 小鼠。观察小鼠的生存、造血重建和植入指标情况。结果　移植组小鼠生存、造血重建及植入指标表达明显优于对照组 (P<0 .0 5 ) ,人脐血中的 CD34 细胞可植入且定居于小鼠骨髓中 ,并可在其中增殖、分化。结论　人脐血干细胞移植入裸鼠显示脐血的造血干 /祖细胞在体内具有长期重建造血的能力     

重组人Jagged 1蛋白促进细胞因子对脐血干细胞的扩增

目的 探讨重组人Jagged 1蛋白对脐血干细胞体外扩增的促进作用。 方法 利用免疫磁珠法分离人脐带血CD34+细胞,并将其分为4组,分别在 ① 不加入任何生长因素、② Jagged 1蛋白、③ TPO、SCF和Flt-3以及④ Jagged 1蛋白、TPO、SCF和Flt-3条件下进行培养;培养6 d后,通过台盼蓝染色和MTT等方法检测各组细胞的生长状况;同时采用RT-PCR方法检测干细胞表面标志物CD34的表达情况。结果 以上4组细胞在体外增殖6 d后的细胞浓度分别为0.4±0.1、1.3±0.5、5.0±0.8和10.2±1.5（x104/ml）;RT-PCR检测显示,各组细胞扩增6 d 后均有CD34表达。结论 Jagged 1蛋白能够促进细脐血干细胞的体外扩增,而且Jagged 1蛋白与其他促进细胞增殖的因子配伍对脐血干细胞在体外的扩增作用更加明显。     

产科因素对脐血心肌酶学的影响

目的了解产科因素对脐血心肌酶学的影响。方法采集2003年4月-6月间118例正常新生儿脐血,测定心肌酶学值。结果正常新生儿脐血心肌酶学值高于成人标准值,平均为SGOT54．88U／L、LDH543．5U／L、CK245．55U／L和CK—MB 92.73U／L。产程长短、羊水混浊、胎儿体重增加和分娩方式等因素对心肌酶学无影响。结论脐血心肌酶学的测定不受妊娠分娩等产科因素的影响,可以作为胎儿和新生儿心肌受损的监测指标,但其正常值不同于成人,需重新制定标准。     

维甲酸联合脑源性神经生长因子体外诱导人脐血间充质干细胞向神经样细胞定向分化的实验研究

目的探讨脐血间充质干细胞（MSCs）向神经样细胞定向诱导分化的条件及方法,以明确其神经分化潜能。方法将人脐血MSCs体外培养扩增、保存后,取第5代的MSCs分别用维甲酸（RA,RA组）、维甲酸联合脑源性神经生长因子（BDNF,RA＋BDNF组）诱导方法向神经样细胞诱导,诱导分化期间观察细胞形态变化,同时设对照组,对照组不加任何诱导分化剂,比较3组巢蛋白（nestin）、神经元特异性烯醇化酶（NES）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达差异。结果两种不同诱导方法均能诱导细胞发生典型变化,对照组未发现神经样细胞生长。免疫组化法显示3组诱导后均表达nestin、NSE、GFAP,BDNF＋RA组的表达量多于RA组。Real-time RT-PCR显示诱导组及对照组均有NSE mRNA、GFAP mRNA表达,但RA组、RA＋BDNF组诱导后表达上调（P〈0.05）,且RA＋BDNF组较单纯RA组上调明显（P〈0.05）。结论脐血MSCs经两种神经营养因子诱导均可分化为神经样细胞,并表达神经元特异性标志物,其中添加BDNF后较单纯应用RA诱导效果好。     

脐血AFABP、瘦素与非妊娠期糖尿病巨大儿发生的相关性分析

目的：探讨脐血脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白（AFABP）、瘦素与非妊娠期糖尿病（GDM）巨大儿发生的关联性。方法：采用病例对照研究设计,在温州医科大学附属第二医院育英儿童医院产科选择46例非GDM巨大儿（巨大儿组）和46例正常出生体质量儿（对照组）,用自行设计的调查表收集产妇和新生儿的基本信息。分别采用酶联免疫法和放射免疫法测定脐血AFABP和瘦素浓度,运用Logistic回归分析非GDM巨大儿发生的影响因素。结果：脐血中AFABP浓度在2组间差异无统计学意义（P＞0.05）,但脐血瘦素浓度在巨大儿组高于对照组（P＜0.05）。分层分析发现,在高孕周层及孕期增重过多层,巨大儿组脐血AFABP浓度均低于对照组（均P＜0.05）;在男性胎儿层、低孕周（孕周≤39）层及孕期增重正常层,巨大儿组脐血瘦素浓度均高于对照组（均P＜0.05）。多因素Logistic回归分析表明,脐血低浓度的AFABP会增加非GDM巨大儿的发生风险（OR=3.792,95%CI：1.266～11.359,P＜0.05）,且与胎儿性别、孕周、孕期增重共同影响非GDM巨大儿的发生。结论：脐血中低浓度的AFABP可能会增加非GDM巨大儿的发生风险。