戊酸雌二醇对去势大鼠骨折愈合影响的实验研究

目的 探讨戊酸雌二醇在骨质疏松性骨折愈合过程中的作用,为绝经后骨质疏松性骨折的治疗提供理论依据.方法 选用6月龄雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠54只,实验分为SHAM组(假手术组)、OVX组(去势组)、补佳乐组.除SHAM组外,其余各组均切除双侧卵巢建立骨质疏松动物模型.去势后8周各组行右股骨骨折建立骨折模型,同时补佳乐组按0.104(mg·kg-1·d-1)灌胃.3组均在骨折后第2、4、6、8周处死大鼠后行放射学观察骨痂变化,骨痂HE染色及成骨细胞、破骨细胞计数.结果 ①放射学:OVX组骨痂密度影低,8周时OVX组骨折线仍然存在,SHAM组和补佳乐组骨折线模糊甚至消失.②骨痂组织学:OVX组骨小梁表面破骨细胞明显增多,成骨细胞也较多,呈骨高转换状态.8周时骨小梁变细、中断,软骨成分仍较多,软骨性骨痂向骨性骨痂转化缓慢;SHAM组和补佳乐组随骨折愈合骨小梁逐渐增加成熟,小梁骨粗大,排列紧密,骨小梁表面成骨细胞体积大,胞浆丰富,破骨细胞减少.③成骨、破骨细胞指数:2、4周OVX组破骨细胞指数大于补佳乐组和SHAM组.成骨细胞指数在3组间差异无显著性.结论 戊酸雌二醇对于促进绝经后骨质疏松性骨折早期愈合有效.     

雄性激素减少对骨折愈合过程中骨痂显微结构变化的影响

目的探讨雄性激素减少对骨折愈合过程中骨痂显微结构变化的影响。方法清洁级SD大鼠40只,6月龄,随机分为骨折组（A组）及睾丸切除＋骨折组（B组）,建立骨折模型,造模后第3、7、14、21d,每组随机选取5只大鼠,切取骨痂标本,在显微镜下观察骨痂显微结构并拍片观察。结果A组毛细血管侵入时间、成纤维细胞、成软骨细胞、成骨细胞出现时间早于B组,且功能较B组活跃。结论睾丸切除后雄性激素下降对骨折愈合的影响,主要发生在骨折中后期,表现为软骨骨痂向骨性骨痂演变缓慢和骨改建期间骨吸收加剧。     

针灸对实验性骨质疏松性骨折愈合影响的研究

目的 探讨针灸对骨质疏松性骨质愈合的作用。方法 采用12月龄雌性大鼠60只,摘除双侧卵巢法建立骨质疏松,模型3个月后作右股骨中段闭合骨折,随机分为对照组、模型组、雌二醇组、针刺组、艾灸组,分别于骨折后7、14、28天处死,并进行血清生化、骨痂BMP和组织学的观察。结果 骨折后第14天S－E2、S－BGP含量及BMP光密度值,针刺组和艾灸组较模型组之间的差别有显著性意义（P＜0.05）,至28天接近对照组;14天时软骨细胞及破骨细胞数量模型组较针刺组、艾灸组和雌二醇组稍多;28天时,各组骨痂均较成熟,但模型组呈疏松比表现。结论 针灸具有促进骨质疏松性骨质愈合的作用。     

骨质疏松性骨折愈合的细胞超微结构观察

目的观察骨质疏松性骨折愈合过程中的细胞超微结构改变,阐明骨质疏松性骨折的细胞学愈合机制。方法8月龄雌性SD大鼠80只,体重290～340g,随机分为骨质疏松性骨折模型组(OPFM)与一般性骨折模型组(CFM),每组40只。麻醉后,OPFM组经双侧腰背侧切口进入腹腔,行双侧卵巢切除;CFM组行腰背部伪手术。术后3个月,两组均经股外侧切口切断股骨中段后行克氏针髓腔逆行内固定,建立骨质疏松性骨折与一般性骨折实验模型。实验模型建立后分别于第5d、1、2、4、6、8、12、16周每组各处死4只动物,于骨痂外取2mm×2mm组织(含连接骨痂与外骨痂),分别进行透射与扫描电镜观察。结果透射电镜观察显示,OPFM组与CFM组相比软骨细胞数目较多,但功能较低,分泌的胶原纤维数量低且排列紊乱;成骨细胞数目与功能状态均降低,胞周分泌的胶原纤丝稀疏、紊乱;破骨细胞功能状态活跃。扫描电镜观察显示,CFM组与OPFM组相比,胶原纤维致密,排列方向较为规则。结论骨质疏松性骨折愈合时,成骨细胞的成骨能力降低,破骨细胞的骨吸收能力增强,骨折愈合质量差。     

骨质疏松性骨折愈合的细胞学观察

目的为了解骨质疏松性骨折愈合的过程及期问的细胞学变化情况。方法切除成年雌犬双侧卵巢，造成绝经后骨质疏松症模型，并人为造成胫骨骨折用螺钉内固定，以观察骨折愈合情况。结果发现骨质疏松性骨折后两周左右，骨折骨小梁表面及周围有大量大小不等的圆形细胞增殖，骨吸收陷窝内有胶原纤维形成，但比较稀疏、紊乱。在骨折塑形改造期，破骨细胞性骨吸收活动显得异常活跃，而成骨细胞性骨形成显得异常微弱。结论骨质疏松性骨折的治疗，不但要使骨折良好复位，坚强固定，而且在骨折塑形改造期，更应该促进成骨细胞的活性，降低破骨细胞活性，使骨形成增加，骨吸收减少。     

雷洛昔芬对OVX大鼠骨质疏松性骨折愈合的影响

目的 探讨骨质疏松性骨折愈合的特点以及雷诺昔芬对骨质疏松性骨折愈合的影响.方法 健康12 周龄雌性SD大鼠54只,随机分成假手术组(SHAM),卵巢切除+生理盐水组(OVX),卵巢切除+雷诺昔芬组(OVX+RAL),每组18只大鼠.卵巢切除术后8周,骨密度检测确认大鼠骨质疏松模型成功.选择开放性右侧股骨中段骨折模型,以克氏针行髓内固定股骨;骨折后8周,CR片记录大鼠骨痂的连续性以及骨折愈合情况,三点弯曲试验检测股骨的最大弯曲应力和最大弯曲载荷.取骨折术后4周和8周时骨痂,行HE染色,并记录骨小梁或小梁状骨所占体积比(BV/TV)表示.免疫组化染色检测骨痂中血管内皮生长因子(VEGF)表达.结果 CR摄片显示骨折后8周各组大鼠骨折连续性都较好,骨折对位对线好.大鼠骨折8周时最大弯曲应力和最大弯曲载荷,SHAM组和OVX+RAL组都明显优于OVX组,差异显著,有统计学意义.骨折4周时骨痂的HE染色中,OVX组原始小梁状骨中新生软骨细胞较多.OVX+RAL组和SHAM组8周时骨痂中BV/TV值明显高于OVX组.骨折4周时骨痂VEGF染色中,各组大鼠的骨痂内软骨细胞或骨细胞上存在一定量的VEGF表达,SHAM组和OVX+RAL组的细胞上VEGF表达量略高于OVX组;骨折8周时各组骨痂中的VEGF几乎无明显表达.结论 OVX大鼠骨痂成熟缓慢和早期骨痂内VEGF低表达,可能是骨折愈合能力下降的重要因素.雷诺昔芬可以促进骨痂成熟和早期骨痂中VEGF的表达,有利于OVX大鼠骨折愈合.     

卵巢切除对SD大鼠骨折骨痂形态的影响

目的研究卵巢切除对SD大鼠骨折骨痂形态的影响。方法雌性SD大鼠56只,随机分为两组,每组28只。实验组大鼠3月龄时切除双侧卵巢建立绝经后骨质疏松症模型,另一组行假手术对照。4周后建立双侧股骨骨折模型。分别在骨折前、骨折后6周、16周采用QCT及自动图像分析仪检测两组大鼠骨折区域骨痂情况,指标包括骨痂面积、骨痂组成成分、骨含量、骨密度、骨矿化面积、骨矿化率及骨生成率等。结果卵巢切除导致在不同时期大鼠股骨骨密度均降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。骨折后6周实验组骨生成率、骨痂面积较对照组大,而骨矿化面积、骨矿化率与对照组无显著差异。实验组骨痂成分以编织骨为主,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。骨折后16周实验组骨痂面积及骨痂成分与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);而破骨细胞表面及数量较对照组增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,实验组股骨髓腔面积增大,骨皮质面积减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论卵巢切除导致的高骨转换可能会加快骨痂改建速度,从而促进骨折愈合。     

骨痂中多核巨细胞与破骨细胞的组织学及超微结构观察

本文通过光镜与透射电镜对家兔桡骨标准分析模型骨痂内多核巨细胞与破骨细胞形态进行了观察。观察显示，两种细胞均参与骨吸收，但多核细胞主要在分析早期吸收死骨和骨碎屑，吸收方式包括吞噬和细胞外降解；破骨细胞主要吸收钙化软骨骨痂和新生骨小粱，通过细胞外吸收方式完成骨痂改建。作者认为，多核巨细胞表面的丝状伪足和破骨细胞表面的皱折缘与骨矿物质细胞外降解有关，但其降解机理的差别尚有待揭示。     

乳基蛋白在预防骨质疏松中的保护功能

研究发现乳类中所含的乳清蛋白,尤其是乳清蛋白的基本成分——乳基蛋白(MBP),可抑制骨吸收。应用老年卵巢切除大鼠作为骨质疏松的动物模型,来观察MBP是否能够预防骨量丧失及骨吸收;同时应用兔破骨细胞体外培养来探讨可能的机制。取28只51周龄的雌性SD大鼠,21只切除卵巢(ovx),7只接受假手术(sham组)。术后4周,卵巢切除大鼠分为三组,分别喂以对照饮食(ovx-control组)、含0.01％MBP饮食(ovx-0.01％MBP组)及含0.1％MBP饮食     

低强度超声波促进骨折愈合过程中I、X型胶原蛋白的基因表达

目的 研究低强度超声波刺激下骨折处I、X型胶原的基因表达规律,从分子水平探索低强度超声波促进骨折愈合的作用机制.方法 应用兔双侧桡骨骨折模型,采用左右自身对照.36只新西兰雄性大白兔,分为6组.右侧骨折处每日行超声刺激20rain,左侧不行刺激.分别于术后3、7、10、14、21、28d取骨折处骨痂及纤维组织,进行骨痂厚度的测量和组织学观察.RT-PCR方法半定量分析I、X型胶原mRNA的表达规律.结果 自术后10d开始至28d,实验侧的骨痂厚度明显高于对照侧.术后10、14、21、28d HE染色显示成软骨细胞及成骨细胞提早出现而且量多,细胞外基质合成增加.I型胶原mRNA表达于术后14、21d含量明显高于对照侧,软骨内细胞外基质蛋白合成增加,增加新骨基质的含量.X型胶原mRNA表达于术后14d明显高于对照侧,术后21d达高峰,然后下降.结论 低强度超声波作用可以增加骨折处骨痂含量,其加快骨折愈合通过刺激骨痂增生,使矿化过程提前发生所致.低强度超声波刺激可以增加I、X型胶原的mRNA含量,促使软骨内成骨过程中软骨细胞的增多和细胞外基质的钙化.     

Early period of fracture healing in ovariectomized rats

Objective. To evaluate the effect of osteoporosis on fracture healing through observing the hlstomorphological changes, bone mineral density of callus and expression and distribution of transforming growth factor beta 1 (TGF-β1 ), basic fibroblast growth factor (bFGF)and bone morphogenetic protein.2 (BMP-2) in ovariectomized rats. Methods. Sixty female Sprague-Dawley rats ( aged 12 weeks and weighing 235 g on average ) were randomly divided into an ovariectomized (OVX) group (n =30) anda sham-operated (SO) group ( n = 30). Ovariectomy was performed in the OVX rats and same incision was made in the SO rats. Three months later, fracture of femoral shaft was made on all the rats. Then they were killed at different time points. Callus formation was observed with histological and imethods. Results: A reduction in callus and bone mineral density in the healing femur and a decrease of osteoblasts expressing TGF-β1 near the bone trabecula were observed in the OVX rats 3-4 weeks after fracture.Histomorphological analysis revealed a higher content of soft callus in the OVX rats than that in the SO rats.Immunohistochemistry results showed that no remarkable difference in expression and distribution of BMP-2 and bFGF between the OVX and SO groups was found. Conclusions: Osteoporosis influences the quantity and quality of callus during the early period of fracture healing. The effect of osteoporosis on fracture healing has no relationship with the expression of BMP-2 or bFGF. The decreased expression of TGF-I31 in osteoblasts may cause a decrease in quality of facture healing after osteoporosis.     

Effects of calcitonin and ultimobranchialectomy (UBX) on calcium and bone metabolism in the eel,Anguilla anguilla L.

Prolonged administration of synthetic salmon calcitonin (SCT) to immature female silver eels, maintained in sea water, provoked a decrease of the serum calcium concentration and an increase of both the osteoblastic apposition and of the degree of mineralization of the intercellular matrix in the vertebral bone. The osteoclastic resorption and osteocytic osteolysis were not significantly affected, however the osteoclastic index was reduced. The ultimobranchial body, site of CT secretion, was cauterized in immature female silver eels mainained in Ca⁺⁺ rich tap water. This operation resulted in a rise in serum calcium levels with a maximal response after two weeks. After UBX, the vertebral bone osteoblastic apposition stopped completely but the osteoclastic resorption was not modified. The degree of osteocytic osteolysis did not vary. We also observed a significant decrease in the degree of mineralization of the bone organic matrix. The observations made after UBX confirm those obtained after exogenous CT treatment SCT administered preventively to immature female eels (maintained in sea water), before experimental maturation, inhibited, at least partially, the acute osteoclastic resorption and completely inhibited the bone demineralization induced by carp pituitary extract. The increase of osteocytic osteolysis, usually observed, did not appear.     

前交叉韧带切断对卵巢切除大鼠股骨骨折愈合的影响

目的观察前交叉韧带切断(OA动物模型)对双侧卵巢切除大鼠(OVX绝经后骨质疏松模型)股骨骨折愈合的影响。方法12周龄SD大鼠共70只，分成基础对照组(Basal)、假手术组(Sham)、双侧卵巢切除术组(OVX)、卵巢切除 前交叉韧带切断术组(OVX OA)、假手术 骨折组(Sham F)、卵巢切除术 骨折组(OVX F)、卵巢切除 前交叉韧带切断 骨折组(OA OVX F)，每组10只大鼠。所有受试大鼠在处死前第10d天和第4d天分别皮下注射盐酸四环素和钙黄绿素行双荧光标记。基础对照组在实验开始时杀死，其余6组在术后6W杀死，取大鼠右侧股骨标本。然后，分别进行CR摄片、组织形态学染色，以及应用Norland-XR36双能X线骨密度仪(DXA)测量右股骨远段骨密度和中段骨密度，并将股骨远段及骨折段骨痂进行硬组织包埋、切片，作骨组织形态计量学测量。结果①OVX OA组与OVX组比较，股骨远段。BMD和BWTV显著增加；②OVX F组与Sham F组比较，骨痂(股骨中段)BMD和BV／TV显著降低：③OVX OA F组与OVX F组比较，骨痂(股骨中段)BMD利BV／TV无统计学差异。结论①骨质疏松不仅延缓骨折愈合过程，而且降低骨折愈合质量；②在此动物模型中，骨性关节炎延缓股骨骨质疏松的发生，但是，对骨质疏松性骨折的愈合没有确切的促进作用。     

补正续骨丸对去卵巢大鼠骨量及其相关骨折的作用机制研究

目的探索中药复方补正续骨丸对去卵巢大鼠骨量及相关骨折的影响。方法雌性大鼠卵巢切除法(OVX)造PMOP模型,分组给药6周后DXA行大鼠股骨BMD检测; HE染色测量股骨骨小梁密度; ELISA检测法检测大鼠血清中P1NP、β-CTX; Western blot法检测大鼠股骨中4EBP-1、p70S6K蛋白表达;同时比较不同处理组大鼠骨折愈合时间及相同时间骨痂密度,观察补正续骨丸对OVX大鼠骨折愈合时间及骨痂密度的影响。结果补正续骨丸可增加OVX大鼠股骨BMD、减少骨小梁断裂、降低去卵巢大鼠血清中β-CTX水平、抑制mTOR1信号通路中p70S6K、4EBP1的蛋白表达,补正续骨丸可促进OVX大鼠骨折处骨痂密度增加及减少骨折愈合时间。结论中药复方补正续骨丸通过抑制mTOR1信号通路中p70S6K、4EBP1蛋白的表达抑制骨吸收、促进OVX大鼠骨折的愈合。     

骨吸收抑制剂对卵巢切除骨折大鼠脂类代谢及骨钙素的影响

目的 研究骨吸收抑制剂对卵巢切除大鼠脂类代谢及骨钙素的影响.方法 雌性SD大鼠共140只,随机分为5组,每组28只.3月龄时选取其中4组大鼠行双侧卵巢切除建立绝经后骨质疏松症模型(OVX组、OVX+ EE2组、OVX+ Rlx组、OVX+ Aln组),另一组行假手术(Sham组).OVX组及Sham组皮下注射生理盐水,余下3组分别注射阿仑膦酸钠(Aln)、雷洛昔芬(Rlx)、雌激素(EE2),每周注射5次.分别在卵巢切除术后4周、10周及20周测定大鼠血脂、骨钙素及相关生化指标.结果 OVX组与Sham组相比体重增加,总胆固醇升高,甘油三脂降低,差异有统计学意义.应用雌激素及雷洛昔芬可有效调节卵巢切除导致的脂代谢紊乱,表现为体重下降及总胆固醇水平降低,差异有统计学意义(P＜0.05).不同时期OVX组骨钙素水平高于Sham组,差异有统计学意义(P＜0.05),其中阿仑膦酸钠组血清骨钙素水平最低.随着时间推移,Sham组及OVX组骨钙素呈现先上升再下降趋势,而OVX+EE2组、OVX+ Rlx组及OVX+ Aln组骨钙素表现为持续降低.结论 骨吸收抑制剂能够降低骨钙素水平,从而降低卵巢切除导致的高骨转换率,防止骨量丢失.此外,雌激素及雷洛昔芬在预防骨丢失的基础上还能够有效调节卵巢切除引起的脂类代谢紊乱.     

雌激素对骨折愈合过程中骨形态发生蛋白4 mRNA表达的影响

目的：探讨骨折愈合过程中雌激素对骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein-4，BMP—4)基因表达的影响，了解BMP—4在骨折愈合过程中的作用。方法：180只雌性SD大鼠随机分成4组。OVXE1组为卵巢切除后1d开始雌激素替代治疗；OVXE2组为骨折后雌激素替代组；OVX组为雌激素缺乏组；SO组为正常对照组。所有动物在一侧胫骨中段造成骨折模型；各组动物分别在骨折后1、2、3、4、5、6、7、14、28d处死取材；标本制成石蜡切片，用地高辛标记的BMP-4 cDNA探针进行原位核酸分子杂交；实验结果经计算机图像处理系统分析并作统计学处理。结果：各组动物骨折后1—3d，骨折周围血肿及组织内BMP—4 cRMA检测为阳性，从第4d开始为阴性。OVX组的BMP—4 mRNA表达较任何一组都明显增多(P＜0．05)；SO组及OVXE1组最少。结论：BMP—4主要在骨折愈合早期起作用。雌激素对BMP-4基因的表达有抑制作用，将BMP—4基因的表达控制在一定程度内可能是雌激素调节骨折愈合的一种方式。     

Strontium Ranelate Enhances Callus Strength More Than PTH 1-34 in an Osteoporotic Rat Model of Fracture Healing

Treatment of an underlying disease is often initiated after the occurrence of an osteoporotic fracture. Our aim was to investigate whether teriparatide (PTH 1-34) and strontium ranelate affect fracture healing in ovariectomized (OVX) rats when provided for the first time after the occurrence of an osteoporotic fracture. We combined the model of an OVX rat with a closed diaphyseal fracture. Sixty Sprague Dawley rats were randomly assigned to four groups. Fracture healing in OVX rats after treatment with pharmacological doses of strontium ranelate and PTH 1-34 was compared with OVX and sham-treated control groups. After 28 days, the femur was excised and scanned by micro computed tomography and the callus evaluated, after which biomechanical torsional testing was performed and torque and toughness until reaching the yield point were analyzed. Only treatment with strontium ranelate led to a significant increase in callus resistance compared to the OVX control rats, whereas both PTH 1-34 and strontium ranelate increased the bone volume/tissue volume ratio of the callus. The PTH 1-34–increased trabecular bone volume within the callus was even higher compared to sham. As for the callus tissue volume, the increase induced by strontium ranelate was significant, contrary to the changes induced by PTH. Callus in strontium ranelate–treated animals is more resistant to torsion compared with OVX control rats. To our knowledge, this is the first report of the enhancement of fracture healing by strontium ranelate. Because both treatments enhance bone and tissue volume within the callus, there may be a qualitative difference between the calluses of PTH 1-34– and strontium ranelate–treated OVX rats. The superior results obtained with strontium ranelate compared to PTH in terms of callus resistance could be the consequence of a better quality of the new bone formed within the callus.     

麝香乌龙丸对卵巢切除大鼠股骨骨折愈合的实验研究

目的研究麝香乌龙丸对卵巢切除大鼠股骨干骨折愈合的作用。方法将30只雌性、12周龄Sprague-Dawley大鼠分成3组假手术组(Sham F V)、卵巢切除 骨折 生理盐水对照组(OVX F V)、卵巢切除 骨折 麝香乌龙丸给药组(OVX F M),每组10只大鼠。所有需制造骨折的大鼠均采用右股骨中段横行骨折,髓内针固定;麝香乌龙丸给药组采用大鼠灌胃给药(1.2g.kg-1.d-1),于术后4周杀死,取大鼠右侧股骨标本;分别进行CR摄片、组织形态学染色,并应用双能X线骨密度仪(DEXA)测量右股骨整体骨密度(tBMD)、远段骨密度(dBMD)和中段骨密度(mBMD)以及BMP-2免疫组化观察,并应用病理图像分析仪对BMP-2免疫组化进行光密度测定。结果麝香乌龙丸给药组与OVX F V比较,前者骨痂mBMD和BMP-2的表达显著增高,骨小梁增宽、排列较整齐,板层骨形成,软骨组织可见。结论麝香乌龙丸对OVX大鼠股骨骨折有明显促进骨折愈合的作用,并加快编织骨向板层骨的演变过程,这与BMP-2的表达有明显相关性。     

有机镓促进卵巢切除大鼠骨折愈合及生长的实验研究

目的 本研究的目的 是证实有机镓对卵巢切除大鼠骨折愈合的作用.方法 40只雌性Wistar大鼠被分为2组:(1)假手术组(对照n=10只),(2)卵巢切除组(n=30只),无菌条件下腹侧入路行完整双侧卵巢摘除;假手术组摘除与卵巢重量相同的卵巢周围脂肪组织各1块.12w后对40只大鼠制造开放性骨折并予克氏针内固定.术后分为假手术组(n=10)和一个卵巢切除组(n=15)用PBS治疗,另外一个卵巢切除组(n=15)用有机镓治疗.治疗共持续4w,取骨折愈合的大鼠股骨分别进行micro-CT测定骨小梁组织结构;组织形态学测定骨组织愈合面积;生物力学测定愈合股骨的最大负荷载力;骨矿含量检测评价钙盐含量.结果 经过4w治疗,micro-CT显示有机镓治疗组平均骨小梁厚度(Tb.Th)、平均骨小梁数目(Tb.N)均明显高于对照组(P<0.05).卵巢切除组的愈合组织骨面积较假手术组降低9.2%,有机镓治疗组比卵巢切除组高34.9%(P<0.05).有机镓治疗组股骨骨折愈合强度显著高于卵巢切除组,最大负荷载力增加50.6%,结构强度增加36.5%,能量吸收增加90.9%,但是均低于假手术组.与卵巢切除组相比,有机镓治疗组显著提高愈合组织的骨矿含量.结论 有机镓能够抑制骨折后的骨量丢失,促进骨折愈合组织的生长,改善骨小梁三维结构及骨组织的力学性能,可用来促进骨质疏松性骨折的愈合并改善骨质量,预防再骨折.