蟾酥不同炮制品蟾毒内酯的含量测定

本文对蟾酥及其三种炮制品的蟾毒内酯含量、毒性大小、杂质检查等进行了分析比较.结果从生产周期、炮制成本、有效成分含量考虑,认为滑石粉烫制法为佳,但其毒性也较大.     

HPLC法测定蟾酥中4种蟾毒内酯

目的建立同时测定蟾酥药材中蟾蜍他灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的方法。方法 10批蟾酥药材采用Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.04%三氟乙酸为流动相梯度洗脱;体积流量为1.0 mL/min;柱温为35℃;检测波长为296 nm。结果蟾蜍他灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基分别在0.05～2.61μg(R2=1),0.10～4.96μg(R2=1),0.10～5.03μg(R2=1),0.10～5.18μg(R2=1)范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为97.62%,97.34%,97.23%,97.34%,RSD值均<2.0%。结论此方法简便、准确。10批不同来源的蟾酥样品测定结果表明,药材中蟾蜍他灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基含有量相对稳定,脂蟾毒配基含有量则波动较大。     

差示分光光度法测定蟾酥及其制剂中蟾毒内酯的含量

蟾毒内酯类成分结构相似，乙醇溶液加碱易水解且紫外光谱最大吸收红移至３６０ｎｍ处，利用此性质，在波长３６０ｎｍ处测定蟾毒内酯水解后与水解前的吸光度差值△Ａ。△Ａ与蟾毒内酯的浓度呈很好的线性关系，。以酯蟾毒配基为标准品，对蟾酥及其制剂中蟾毒内酯类成分进行定量分析，并对制剂中其他成分进行水解试验，排队了其它成分对水解的，确定最佳水解条件：碱液浓度为４％，室温下水解３０－８０ｍｉｎ。本法简单、迅速、结果可     

中华大蟾蜍蟾酥中蟾毒内酯类化学成分研究

采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、凝胶柱色谱、制备型高效液相等方法从蟾酥的二氯甲烷萃取部位中分离得到12个蟾毒内酯类化合物,根据化合物的理化性质和波谱数据分别鉴定为脂蟾毒配基（1）、蟾蜍它灵（2）、去乙酰华蟾蜍精（3）、19-氧去乙酰华蟾蜍它灵（4）、华蟾蜍它灵（5）、1β-羟基蟾蜍灵（6）、12α-羟基蟾蜍灵（7）、蟾蜍它里灵（8）、嚏根草配基（9）、远华蟾蜍精（10）、嚏根草醇（11）及华蟾蜍精-3-辛二酰甲酯（12）。化合物 7和12 为首次从蟾酥中分离得到,且为新天然产物。     

华蟾素注射液中蟾毒内酯类成分含量检测

目的 :用高效液相色谱法分离测定华蟾素注射液中蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基等成分含量。方法 :醋酸乙酯分离提取华蟾素中脂溶性成分 ,利用高效液相色谱仪定量检测 ,以Econosphere C1 8柱为分析柱 ,乙腈 水 (50∶50 )为流动相 ,检测波长 2 99nm。结果 :该测定方法准确 ,分离效果好 ,灵敏度高。根据实验结果计算华蟾素注射液中各蟾毒内酯类成分含量分别为蟾毒灵 0 .333μg·mL- 1 ,华蟾酥毒基 0 .1 59μg·mL- 1 ,脂蟾毒配基 0 .1 1 0 μg·mL- 1 。结论 :华蟾素注射液中蟾毒灵浓度从理论上讲已达到有效作用浓度 ,可能是华蟾素注射液抗肿瘤有效成分之一。     

RP-HPLC测定牛黄消炎片中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量

目的:建立牛黄消炎片(牛黄、大黄、珍珠母、蟾酥等)中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的高效液相含量测定方法.方法:Waters Symmetry Shield RP18(3.9mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.5mol·L-1磷酸二氢钾溶液(pH用磷酸调节值至3.2)(42:58);柱温30℃;流速1.0mL·min-1,检测波长为296nm.结果:华蟾酥毒基线性范围为0.0696～0.8352μg,精密度试验RSD为0.72%,稳定性试验RSD为0.56%,重现性试验RSD为4.28%,回收率为100.06%,RSD为1.25%;脂蟾毒配基线性范围为0.1576～0.9456μg,精密度试验RSD为0.43%,稳定性试验RSD为0.84%,重现性试验RSD为4.35%,回收率为100.54%,RSD为1.49%.结论:本方法快速、准确、重现性较好,结果可靠,为牛黄消炎片提供有效的质量评价方法.     

HPLC法测定心宝丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量

目的：建立测定心宝丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基含量的方法。方法：采用反复高效液相色谱法,色谱柱Agilent HC-C18（5μm,4.6 mm&;#215;250 mm）,流动相为0.5%磷酸二氢钾溶液-乙腈（62∶38,用磷酸调节pH值为3.2）,流速1.0 ml/min,柱温35℃,检测波长296 nm。结果：华蟾酥毒基回收率102.9%,RSD=2.0%;脂蟾毒配基回收率100.0%,RSD=1.8%;结论：本法准确,可用于控制药品质量。     

牙痛一粒丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量测定

采用HPLC法测定牙痛一粒丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量。色谱柱为HypersilODS十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱 (2 5 0mm× 4 0mm ,5 μm) ,流动相为乙腈 水 (5 0∶5 0 ) ,柱温为 2 0℃ ,流速为 0 5ml/min ,检测波长为 2 96nm ,华蟾酥毒基线性范围为 0 16 2 6～ 1 35 5 0 μg ,脂蟾毒配基线性范围为 0 15 36～ 1 2 80 0 μg ,本法简便准确     

冠心微丸中脂蟾毒配基的含量测定

冠心微丸由苏合香、冰片、蟾酥等组成 ,用于治疗冠心病、心绞痛有较好疗效 ,其中蟾酥具有解毒、止痛、开窍醒神等功效 [1 ] ,现代药理研究表明有强心、升压、兴奋呼吸、消炎止痛、局部麻醉等药理作用 [2、3 ] 。脂蟾毒配基为蟾酥中含量较多的主要活性与毒性成分 ,有兴奋呼吸、强心、升压等效应 ,同时能改善冠脉流量与肾流量 [2、3 ] 。测定脂蟾毒配基的含量一定程度上能反映冠心微丸的作用与毒性。本文采用 HPL C法测定了冠心微丸中脂蟾毒配基的含量。1　仪器与试药DL C- 2 0　 HPL C仪 ,DVW- 10　 U V- Vis Detector。脂蟾毒配基 :…     

蟾酥中蟾毒配基类成分的提取纯化工艺研究

目的优化蟾酥中脂溶性成分华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的提取及纯化工艺。方法以华蟾酥毒基和脂蟾毒配基总量为考察指标,以乙醇浓度、溶剂倍量、提取时间为考察因素,采用正交试验确定最佳提取工艺参数;通过单因素考察并结合Box-Behnken响应面法,以展开剂比例、柱高与直径比、吸附剂与上样量的比值为考察因素,筛选并确定最佳纯化工艺。结果确定最佳提取工艺为加入10倍量85%的乙醇提取90min;最佳纯化工艺为展开剂环己烷-氯仿-丙酮(4∶3∶3),柱高与直径比为7∶1,吸附剂-上样量为5.5∶1,2种蟾毒配基纯化后的总量可达66.51%。通过3批放大工艺验证,表明模型拟合度良好,采用硅胶柱色谱分离纯化蟾毒配基,具有操作简便、分离速度快、分离效果好等优点。结论所选工艺合理、可行,为以后该产品的产业化应用提供技术参考和依据。     

HPLC测定心力丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量

心力丸具有温阳益气,活血化瘀的作用,用于心阳不振、气滞血瘀所致的胸痹心痛、胸闷气短、心悸怔忡、冠心病、心绞痛等,疗效确切。原标准(WS3-B-3150-98)方中含有蟾酥,为剧毒药,原标准只有鉴别,尚未设含量测定,本文采用HPLC法测定了蟾酥的华蟾酥毒基和脂蟾毒配基,方法简便可行,可以准确控制心力丸的质量。1仪器与试药仪器:SP8800高效液相色谱仪,Spectra100可变波长检测器(美国光谱物理公司),Easy-100色谱工作站(北京历元公司)。试剂:乙腈为色谱纯,水为重蒸水,磷酸二氢钾、磷酸、甲醇均为分析纯。药品:心力丸(批号200409006、200201002、…     

RP-HPLC法测定救心丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量

目的建立救心丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的高效液相色谱含量测定方法。方法WatersSymmetryShieldRP18(3.9mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.5mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值至3.2)(42∶58);柱温30℃;流速1.0mL/min;检测波长为296nm。结果华蟾酥毒基线性范围为0.0696～0.8352μg,精密度试验RSD为0.53%,稳定性试验RSD为0.71%,重现性试验RSD为4.83%,回收率为101.86%,RSD为1.81%;脂蟾毒配基线性范围为0.1576～0.9456μg,精密度试验RSD为0.15%,稳定性试验RSD为0.76%,重现性试验RSD为5.00%,回收率为102.07%,RSD为1.62%。结论本方法快速、简便、准确、重现性较好,结果可靠,可为救心丸的质量评价提供有效手段。     

不同蟾皮提取物中蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基血浆蛋白结合率的研究

目的 研究不同蟾皮提取物中蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的血浆蛋白结合率.方法 采用平衡透析法,以高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定,比较两种蟾皮提取物及不同浓度的蟾毒灵、华蟾酥毒基和脂蟾毒配基对照品溶液的血浆蛋白结合率.结果 建立的LC-MS/MS法线性良好,精密度、准确度、回收率以及稳定性均符合生物样...     

HPLC法测定抗癌胶囊中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基含量

目的：建立抗癌胶囊中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基含量的测定方法。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为Kromasil 5um C18柱（4．6mm×250mm，5um），流动相为0．5％磷酸二氢钾溶液-乙腈（50：50）（用磷酸调pH值为3．2），流速为1．0ml·mim^-1，检测波长为296nm．。结果：华蟾酥毒基进样量在0．0342-0．22μg的范围内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数为0．9998；脂蟾毒配基进样量在0．081-0．540μg的范围内与峰面积也呈良好的线性关系，相关系数为0．9999。平均回收率分别为98．54％、98．76％；RSD分别为0．52％，0．60％．结论：本方法简便快速，分离良好，结果准确可靠。     

RP-HPLC法测定牛黄消炎片中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量

牛黄消炎片是由牛黄、大黄、珍珠母、蟾酥、青黛、天花粉、雄黄共7味中药组成,具有清热解毒、消肿止痛的功效,用于咽喉肿痛、疔、痈、疮等疾病.由于处方中蟾酥为有毒药材,为保证制剂的安全有效,建立含量测定.华蟾酥毒基和脂蟾毒配基是该药的主要有效成分,故以华蟾酥毒基和脂蟾毒配基为指标进行含量测定,控制成品的质量.蟾酥的含量测定方法是在2000年版<中国药典>方法的基础上对其流动相的比例进行调整测定,方法简便,稳定,重现性好.     

蟾酥中蟾毒配基类成分的分离纯化及其体外抗肿瘤活性的研究

目的:研究蟾酥中蟾毒配基类成分的分离纯化方法,并初步考察其体外抗肿瘤活性。方法:采用硅胶柱层析法纯化蟾酥药材粗提物,高效液相法测定三种蟾毒配基含量,以此确定最佳纯化工艺;MTT比色法测定药物对肿瘤细胞的生长抑制作用。结果:用优化工艺制备得到的纯化产物蟾毒配基类成分平均含量为95.98%;纯化产物具有显著的抑制肿瘤细胞生长作用,在0.001～100μg/mL的浓度范围内,药物对人乳腺癌MDA-MB-435细胞和人肺癌A549细胞有很强的抑制作用。结论:硅胶柱层析法适合于蟾酥中蟾毒配基类成分:脂蟾毒配基、华蟾毒基、蟾毒灵的制备,且纯化产物体外抗肿瘤作用显著。     

薄层—分光光度法测定制剂中脂蟾毒配基的含量

蟾酥系蟾蜍科动物中华大蟾酥(Bufo bufo gar-garizans Gantor)耳后分泌的白色浆液经加工制成。性甘,辛温有毒,具有强心,兴奋呼吸,升压,抗炎等药理作用。以蟾酥为主药之一的中成药有喉症丸、六神丸、消炎解毒,喉痛消炎丸等,但蟾酥有一定的毒性,因此控制蟾酥的含量,十分必要。鉴于脂蟾毒配基为蟾酥中含量较多的主要活性成分,测定其含量一定程度上能反映蟾酥的作用与毒性。本实验采用薄层分离一紫外分光光度法,对上述四种丸剂中的脂蟾毒配基的含量进行了分析研究。