The effect of nasal polyp epithelial cells on eosinophil activation

OBJECTIVES/HYPOTHESIS: Eosinophil infiltration into an inflammatory site is a characteristic histological finding in patients with chronic rhinosinusitis and nasal polyps. Most of the eosinophils in chronic rhinosinusitis are activated in the nasal cavity, but the exact activation mechanism of eosinophils is unknown. The study was designed to investigate the effect of human nasal epithelial cells on the activation of eosinophils. STUDY DESIGN: Peripheral blood eosinophils were isolated from healthy volunteers and incubated in human nasal polyp epithelial cell conditioned media (HPECM). Superoxide production and eosinophil-derived neurotoxin were measured to determine eosinophils activation. HPECMs were assayed by ELISAs for interleukin-8 (IL-8), granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF), eotaxin, and regulated on activation normal T expressed and secreted (RANTES). To identify the chemical mediators involved in the activation of eosinophils. RESULTS: HPECM (n = 7) contained 31.48 ng/mL interleukin-8, 533.43 pg/mL GM-CSF, 5.90 pg/mL eotaxin, and 11.06 pg/mL RANTES. Eosinophils were activated by HPECM and inhibited only by anti-GM-CSF antibody, not by the other chemical mediators. CONCLUSION: The results suggest that eosinophils in nasal secretions are activated by GM-CSF, which is produced by nasal epithelial cells.     

细胞角蛋白在鼻息肉上皮细胞中的表达

目的 :探讨细胞角蛋白抗体在鼻息肉上皮细胞中的表达及意义。方法 :应用AE1 、AE3、CK7、CK1 4、CK1 9、CK2 0 单克隆抗体 ,采用链霉素蛋白 过氧化酶染色 ,观察其在鼻息肉上皮细胞的表达。结果 :①AE1 、CK7、CK1 9在鼻息肉的各种病理上皮如鳞状上皮、柱状上皮及立方上皮染色均为阳性 ;AE1 、CK1 9在全层上皮细胞染色阳性 ;CK7在假复层上皮细胞中的杯状细胞及基底细胞染色阳性 ;②AE3、CK2 0 在部分单层及复层上皮染色阳性 ;③AE1 、AE3、CK7、CK1 9在过渡性上皮细胞呈现局灶状阳性。结论 :CK7、CK1 9是鼻息肉上皮细胞最基本的角蛋白组合之一 ;在炎症反应过程中 ,鼻息肉粘膜上皮细胞的部分角蛋白亚型表达可出现丢失 ,而出现新的上皮细胞角蛋白构型     

变应性鼻炎鼻分泌物中上皮细胞集落和嗜酸粒细胞的检测

为了观察变应性鼻炎（allesgicrhinitis，AR）患者鼻分泌物中的上皮细胞集落和嗜酸粒细胞，对20例AR患者（AR组）和15例鼻窦炎患者（感染组）鼻分泌物中细胞成分进行了电镜观察，发现AR组鼻分泌物中有大量上皮细胞集落，其特征是数个至数十个上皮细胞成片状脱落，上皮细胞集落的数量和嗜酸粒细胞的数量、嗜酸粒细胞阳离子蛋白（eosinophiliccationicprotein，ECP）的含量呈正相关。感染组中上皮细胞集落和嗜酸粒细胞极少，ECP含量甚微。结果提示嗜酸粒细胞的ECP可能导致AR患者的鼻粘膜上皮呈片状脱落，对上皮结构造成损害。     

Interaction between fibronectin and eosinophils in the growth of nasal polyps

OBJECTIVES: The aim of this study was to determine roles of fibronectin and eosinophils in the etiology of nasal polyposis. STUDY DESIGN: We designed a cohort study of cases with nasal polyposis. Sampled nasal polyps were differentiated by their histopathologic characteristics, and compared by size and computed tomography (CT) stage. METHODS: The size of nasal polyps was determined on the basis of the endoscopic findings, and the extent of sinusitis was evaluated by CT staging. Nasal polyp samples were taken from 82 patients during ethmoidectomy and differentiated by morphologic characteristics, infiltration cell types, or fibronectin positivity. Then their sizes and CT stages were compared. In addition, correlation among these histological characteristics was analyzed. RESULTS: Nasal polyps showing edematous morphology, eosinophil infiltration, or fibronectin expression were significantly large in size. Concerning CT stages, only the infiltration cell type showed a significant difference. Significant correlation among edematous morphology, eosinophil infiltration, and fibronectin expression was also recognized. CONCLUSIONS: These findings suggest that interaction between eosinophils and fibronectin may play a role in edema formation, which contributes to the growth of nasal polyps.     

根据变应性鼻炎患者鼻分泌物嗜酸粒细胞计数调整类固醇治疗的临床意义

目的:探讨根据常年性持续性变应性鼻炎(AR)患者鼻分泌物嗜酸粒细胞(EOS)相对计数调整类固醇治疗的临床意义。方法:选择近3个月内未接受类固醇治疗的常年性持续性AR患者42例,采用酶联免疫荧光法测定鼻分泌物EOS阳离子蛋白浓度,根据鼻分泌物EOS计数将患者分为EOS组23例(EOS≥3%)与非EOS组19例(EOS<3%),均进行AR症状、体征评分、鼻分泌物细胞分类计数。治疗2、4、6个月时进行随访和疗效评价。结果:EOS组鼻分泌物中EOS比值[中位数M(25分位数;75分位数),下同]、EOS阳离子蛋白水平(x珋±s,下同)基线值分别为0.086(0.065;0.176)、(326±145)μg/L,非EOS组分别为0.016(0.005;0.022)、(154±58)μg/L,2组比较差异有统计学意义(t值分别为4.40、3.32,均P<0.01)。治疗2、6个月后,EOS组的EOS比值、EOS阳离子蛋白水平分别为0.038(0.006;0.070)、0.019(0.010;0.060);(175±122)μg/L、(175±153)μg/L,与基线值比较差异均有统计学意义(F值分别为6.73、7.38,均P<0.05);非EOS组分别为0.014(0.004;0.032)、0.015(0.010;0.026);(118±60)μg/L、(112±60)μg/L,与基线值比较,EOS比值差异无统计学意义(F=0.82,P>0.05),而EOS阳离子蛋白水平差异有统计学意义(F=3.78,P<0.05)。平均症状、体征评分EOS组和非EOS组在基线及2、4、6个月时不同时间点比较,差异均无统计学意义。2组鼻用类固醇用量各时间点比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论:对于鼻分泌物EOS增高的AR患者,采用类固醇治疗能够抑制EOS炎症,改善AR患者的症状和体征。非EOS增高的AR患者对类固醇治疗反应性差,症状、体征无改善。临床上可以根据EOS的相对计数决定是否采用类固醇治疗。     

鼻息肉中嗜酸性粒细胞浸润和活化状况的研究

目的 :观察鼻息肉组织中嗜酸性粒细胞浸润和活化状况 ,探讨嗜酸性粒细胞在鼻息肉发病机制中的作用。方法 :16例鼻息肉组织标本 ,采用组织化学染色 Chromotrope 2R染色法 ,标记鼻息肉组织中的嗜酸性粒细胞 ,结合应用嗜酸性粒细胞阳离子蛋白抗体EG2 的免疫组织化学染色结果 ,观察鼻息肉中嗜酸性粒细胞的浸润和活化状况。结果 :①鼻息肉组织中有较多嗜酸性粒细胞浸润 ,且多处于活化状态 ;②变应性患者鼻息肉组织中EG2 阳性细胞密度、Chromotrope 2R阳性细胞的密度及嗜酸性粒细胞活化比率 ,分别与非变应性患者相比较 ,均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :①Chromotrope 2R特染法结合应用EG2 抗体的免疫组化染色法简便易行 ,适合临床应用观察鼻息肉中嗜酸性粒细胞的浸润和活化状况 ;②活化嗜酸性粒细胞在鼻息肉的发病机制中可能起重要作用。     

低氧刺激鼻息肉黏膜上皮细胞炎性因子变化的初探

目的:研究低氧刺激慢性鼻窦炎伴鼻息肉（CRSwNP）与正常鼻黏膜上皮细胞炎性因子的变化与异同,探讨其在CRSwNP发病机制中的作用。方法:选择2015年6月至2018年1月在吉林大学中日联谊医院就诊的68例CRSwNP患者,其中男性36例,女性32例,年龄（45.2±12.5）岁（ xˉ±s,下同）,患者的...     

IL-17对鼻息肉中巨噬细胞炎性蛋白-3α的影响

目的 探讨白介素-17(IL-17)对鼻息肉上皮细胞中巨噬细胞炎性蛋白-3α(macrophage inflammatory protein-3α,MIP-3α/CCL20)的作用.方法 离体培养人鼻息肉上皮细胞,不加刺激因子且用IL-17刺激细胞后,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定上清液中MIP-3α/CCL20的含量,并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测人鼻息肉上皮细胞中MIP-3α/CCL20 mRNA含量的变化.结果 IL-17刺激鼻息肉上皮细胞后,上清液中MIP-3α/CCL20的含量较不加刺激因子时增多,且IL-17对MIP-3α/CCL20的诱导作用具有剂量-时间依从性,同时测定鼻息肉上皮细胞中MIP-3α/CCL20 mRNA的相对表达量,结果 相似.结论 鼻息肉上皮细胞产生MIP-3α/CCL20,而且IL-17对其有诱导作用.MIP-3α/CCL20可能对T细胞和树突状细胞在鼻息肉的聚集中发挥重要的作用.     

鼻腔局部应用激素对鼻息肉中嗜酸粒细胞浸润和活化的影响

目的　探讨鼻腔局部应用激素布地奈德 (budisonide)对鼻息肉组织中嗜酸粒细胞浸润和活化状态的影响。方法　采用免疫组化ABC法和chromotrope 2R染色 ,分别标记鼻息肉组织中的活化嗜酸粒细胞和全部嗜酸粒细胞。观察比较经布地奈德喷鼻治疗 6～ 8周和未经治疗的鼻息肉组织 (各16例 )中 ,嗜酸粒细胞浸润和活化状况。结果　①鼻息肉组织中浸润的嗜酸粒细胞多处于活化状态 ;②激素治疗组与未治组相比 ,前者鼻息肉组织中嗜酸粒细胞的活化比例显著减少 (P <0 0 1) ,而嗜酸粒细胞总数和活化嗜酸粒细胞的浸润程度虽呈下降趋势 ,组间比较差异未见显著性 (P >0 0 5 )。结论　嗜酸粒细胞的浸润和活化程度在鼻息肉的发病机制中可能起重要作用。 6～ 8周布地奈德喷鼻治疗使局部嗜酸粒细胞性炎性反应的严重程度减轻 ,其对嗜酸粒细胞活化水平的抑制作用 ,较其对嗜酸粒细胞数量的影响更为显著。     

飘散蒿属花粉对鼻粘膜上皮细胞间粘附分子表达的影响

为探讨吸入性变应原对变应性鼻炎患者鼻粘膜上皮细胞表达细胞间粘附分子（Ｉｎｔｅｒ－ｃｅｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ－１，ＩＣＡＭ－１）的影响，对１１例蒿属花粉过敏的花粉症患者，采用ＲＴ－ＰＣＲ的方法，测定鼻粘膜上皮细胞ＩＣＡＭ－１的ｍＲＮＡ表达。结果显示：在蒿属花粉飘散期，８例标本全部呈阳性；在蒿属花粉非飘散期，３例标本中２例阴性，１例阳性（该例对屋内尘土皮肤试验也呈阳性反应）。由此提示：当外界环境中的特异性变应原含量增高时，花粉症患者的鼻粘膜上皮细胞表达Ｉ－ＣＡＭ－１，而无致敏原时，ＩＣＡＭ－１的表达为阴性。     

红霉素促进鼻息肉上皮细胞凋亡的实验研究

目的：观察红霉素对上皮细胞凋亡的影响,探讨上皮细胞凋亡在鼻息肉组织形成中的意义。方法：将30例鼻息肉及6例下鼻甲上皮细胞均分成2组,1组加红霉素,培养原代上皮细胞,另1组不加红霉素,1、3、5?d时用TUNUL法检测细胞凋亡。结果：红霉素组培养1、3、5?d的上皮细胞凋亡指数分别为（33.23±6.50）%、（38.21±7.22）%和（52.63±7.86）%,不加红霉素组为（31.02±5.60）%、（32.13±7.15）%和（39.64±7.48）%,培养5?d的上皮细胞凋亡指数两组间差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：红霉素有明显的促鼻息肉上皮细胞凋亡的作用。     

鼻息肉中嗜酸性粒细胞浸润和活化与白细胞介素5表达

目的通过观察鼻息肉中嗜酸性粒细胞的浸润和活化状态,以及白细胞介素5(interleukin-5,IL-5)的表达水平,揭示二者的关系,探索鼻息肉中嗜酸性粒细胞浸润增多调节的机制。方法对30例鼻息肉组织,分别采用chromotrope2R法标记鼻息肉组织中的嗜酸性粒细胞,采用免疫组织化学ABC法,观察嗜酸性粒细胞的活化状态和IL-5的表达水平,然后进行相关性分析。结果①chromotrope 2R染色可特异性地将嗜酸粒细胞的胞浆染成粉红色,活化嗜酸性粒细胞(EG2阳性细胞)和IL-5阳性细胞胞浆中可见棕褐色颗粒。30例鼻息肉中嗜酸性粒细胞的密度为50.7±16.1/0.25mm2,活化嗜酸性粒细胞的密度为20.7±14.3/0.25mm2,IL-5阳性细胞密度为15.9±5.7/0.25mm2,上述三项指标在变应性患者和非变应性患者比较未见显著性差异(P>0.05);②鼻息肉中IL-5阳性细胞密度与chromotrope2R阳性细胞密度密切相关(y=14.723 2.012x,r=0.642,P<0.01),与EG2阳性细胞密度也存在相关关系(y=11.817 1.092x,r=0.602,P<0.05)。结论嗜酸性粒细胞是鼻息肉组织中IL-5的来源之一,IL-5的表达水平是鼻息肉中嗜酸性粒细胞的浸润和活化的调节因素之一。     

双链RNA对人鼻息肉上皮细胞中基质金属蛋白酶mRNA表达的影响

目的 病毒感染经常使慢性鼻-鼻窦炎(chronic rhinosinusitis,CRS)病情加重.病毒感染时,基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)调节机制的破坏是导致病情加重的机制之一.本研究试图更好地了解病毒感染后鼻上皮细胞MMPs的表达.方法 取鼻内镜手术时CRS患者的鼻息肉组织,分离培养鼻上皮细胞,以合成的双链RNA类似物--多聚次黄嘌呤胞嘧啶核苷酸[polyinosinic-polycytidylic acid,poly(I:C)]刺激原代鼻上皮细胞后,检测鼻上皮细胞中MMP-2、MMP-9和组织金属蛋白酶抑制物-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)mRNA的相对表达量.结果 poly(I:C)刺激后,鼻上皮细胞中MMP-9 mRNA的相对表达量((x-)±s,以下同)较同一患者未刺激的细胞增高(22.61±5.47)倍,差异有统计学意义(Z=-2.52,P=0.012).poly(I:C)刺激后,鼻上皮细胞中MMP-2和TIMP-1 mRNA的相对表达量没有明显改变.结论 双链RNA刺激离体培养的人鼻上皮细胞后,MMP-9 mRNA表达显著增高,且不受TIMP-1的调节.由此可能导致CRS患者病情加重.     

地塞米松对人鼻黏膜上皮细胞前炎性因子表达的抑制作用

目的观察地塞米松对脂多糖(lipopolysac-charide,LPS)诱导的人鼻黏膜上皮细胞缺氧诱导因子-1(hypoxic inducible factor-1,HIF-1)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达抑制情况及意义。方法无血清原代培养人鼻息肉和下鼻甲黏膜上皮细胞,以LPS100ng/ml,白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)20ng/ml,LPS100ng/ml加地塞米松13ng/ml,IL-1β20ng/ml加地塞米松13ng/ml作用于对数生长期的上皮细胞3、6、9小时后,采用免疫细胞化学和原位杂交方法检测HIF-1α和VEGF蛋白及mRNA的表达情况。结果①LPS和IL-1β作用于上皮细胞时,HIF-1α及VEGF表达增加具有时间依赖性,以LPS100ng/ml6小时组最明显(P<0.05),且鼻息肉中的表达明显高于下鼻甲(P<0.05);②LPS100ng/ml加地塞米松13ng/ml组和IL-1β20ng/ml加地塞米松13ng/ml组表达强度分别较LPS100ng/ml组和IL-1β20ng/ml组弱(P<0.05)。两抑制组间表达无显著性差异。结论炎性因子及感染性因子可以诱导人鼻黏膜上皮细胞大量表达HIF-1α及VEGF,而地塞米松对其表达有很强的抑制作用。