复方鳖甲软肝方对肝星形细胞胶原表达及降解的影响

目的:观察复方鳖甲软肝方药物血清对离体肝星形细胞(hepaticstellatecell,HSC)中Ⅰ,Ⅲ型胶原及组织金属蛋白酶抑制物(tissueinhibitorofmetalloproteinases,TIMPs)表达的影响,以探讨防治肝纤维化作用机制。方法:将成年健康雄性SD大鼠75只,随机分为正常对照组、模型组、高、中、低剂量药物组共5组,并制备各组血清。采用SD大鼠肝星形细胞分离、培养,药物血清制备,免疫组化检测实验各组肝星形细胞中Ⅰ,Ⅲ型胶原及TIMPs的表达经图像分析系统定量分析。结果:培养72h,高、中、低剂量药物组Ⅲ型胶原的表达犤Ⅲ型胶原反应物吸光度(A值)为178.36±5.82,182.27±20.32,220.38±19.32犦早于Ⅰ型胶原(I型胶原反应物A值为300.23±25.80,329.37±45.98,425.38±19.32),与模型组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。高、中剂量药物组均可有效抑制Ⅰ,Ⅲ型胶原的表达,并呈药物量效关系;培养24h,实验各组均无TIMPs的表达,培养48h后TIMPs开始表达,培养72h时,高、中、低药物组与模型组比较,差异有显著性意义(P<0.05),可显著抑制TIMPs的表达。结论:复方鳖甲软肝方药物血清能有效抑制肝纤维化时肝星形细胞中Ⅰ,Ⅲ型胶原及TIMPs的表达,其抗肝纤维化作用机制可能与减少细胞外基质生成的同时,加速已生成的细胞外基质降解有关。     

复方鳖甲软肝方对活化肝星形细胞细胞因子分泌的影响

目的：观察复方鳖甲软肝方药物血清对离体肝星形细胞(hepatic stellate cell，HSC)活化时分泌转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)和血小板源性生长因子(platelet derived growth factor，PDGF)的影响，以探讨其抗肝纤维化作用机制。方法：将成年健康雄性SD大鼠75只，随机分为对照组、模型组、高、中、低剂量药物组共5组，并制备各组血清。采用SD大鼠肝星形细胞分离、培养、药物血清制备，免疫组化检测各实验组血清对肝星形细胞分泌TGF-β1。PDGF的影响，并经图像分析系统作定量分析。结果：培养48h模型组TGF-β1，PDGF阳性反应物A值分别为733．58&;#177;189．73和659．45&;#177;76．56；72h分别为1509．87&;#177;77．50和1208．02&;#177;132．21。与对照组(48h：570．78&;#177;57．61和479．65&;#177;38．49；72h：1279．30&;#177;147．78和805．30&;#177;121．04)比较，差异显著有显著性意义(F=5．833～21．250，P&;lt;0．05)。培养48，72h。高、中剂量药物组与模型组TGF-β1，PDGF表达比较，差异也有显著性意义(F=5．833～21．250，P&;lt;0．05)，可显著抑制TGF-β1。PDGF表达。并呈量效关系。结论：复方鳖甲软肝方药物血清能有效抑制肝纤维化时活化肝星形细胞分泌TGF-β1和PDGF。从而达到抑制肝星形细胞增殖、活化的抗肝纤维化防治作用。     

复方鳖甲软肝方对肝星形细胞中细胞核因子κB活化的影响

目的：观察复方鳖甲软肝方药物血清对离体肝星形细胞(hepatic stellate cells，HSC)中细胞核因子κB(nuclear factor kappa B，NF—κB)活化的影响，以探讨其防治肝纤维化作用机制与核转录因子之间的相关性。方法：实验选用成年健康雄性SD大鼠75只，随机将75只大鼠分为正常对照组、模型组、高、中、低剂量药物组共5组，并制备各组血清。采用SD大鼠肝星形细胞分离、培养，药物血清制备，免疫组化检测实验各组血清对肝星形细胞中NF—κB活化的影响，并经图像分析系统定量分析。结果：HSC培养24，48，72h，模型组NF—κ表达的速率(NF—κB阳性染色A值分别为：217．36&;#177;29．02，429．23&;#177;25．48，627．31&;#177;37．68)与正常对照组(127．30&;#177;15．31，240．65&;#177;38．49，321．27&;#177;121．04)比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。高、中剂量药物组NF—κB表达的速率与正常对照组比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。表明HSC培养24h，NF—κB即可在核内发生活化并表达；而复方鳖甲软肝方高、中剂量药物血清物均可有效抑制HSC中NF—κB的活化和表达。结论：复方鳖甲软肝方能有效抑制HSC中NF—κB的活化和表达。     

复方鳖甲软肝方对肝星形细胞结蛋白、突触素表达的影响

目的观察复方鳖甲软肝方药物血清对离体SD大鼠肝星形细胞(hepaticstellatecells,HSC)结蛋白、突触素表达的影响,以探讨其抗肝纤维化作用机制。方法将成年健康雄性SD大鼠75只,随机分为正常对照组、模型组、高、中、低剂量药物组共5组,并制备各组血清。采用大鼠HSC分离技术,将分离得到的HSC分别添加各组血清培养24,48,72h后,免疫组化检测各组HSC的结蛋白、突触素表达,并经图像分析系统作定量分析。结果培养24h正常对照组、高、中、低剂量药物组大鼠HSC结蛋白、突触素的表达(A值)(78.93±18.56,396.29±78.56;58.95±5.21,138.92±20.21;63.83±12.97,190.87±52.97;75.46±26.72,284.54±66.72)与模型组(119.69±23.84,528.79±26.84)比较,差异有显著性意义(P<0.05);培养48,72h各组结蛋白、突触素的表达(A值)与模型组比较,差异也有显著性意义(P<0.05)。除低剂量药物组外的其余各组大鼠HSC结蛋白、突触素表达与正常对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论复方鳖甲软肝方能显著抑制HSC结蛋白、突触素的表达,其抗肝纤维化作用机制可能与药物抑制HSC活化有关。     

复方鳖甲软肝方对活化肝星形细胞细胞因子分泌的影响

目的:观察复方鳖甲软肝方药物血清对离体肝星形细胞(hepaticstellatecell,HSC)活化时分泌转化生长因子-β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)和血小板源性生长因子(plateletderivedgrowthfactor,PDGF)的影响,以探讨其抗肝纤维化作用机制。方法:将成年健康雄性SD大鼠75只,随机分为对照组、模型组、高、中、低剂量药物组共5组,并制备各组血清。采用SD大鼠肝星形细胞分离、培养、药物血清制备,免疫组化检测各实验组血清对肝星形细胞分泌TGF-β1,PDGF的影响,并经图像分析系统作定量分析。结果:培养48h模型组TGF-β1,PDGF阳性反应物A值分别为733.58±189.73和659.45±76.56;72h分别为1509.87±77.50和1208.02±132.21,与对照组(48h:570.78±57.61和479.65±38.49;72h:1279.30±147.78和805.30±121.04)比较,差异显著有显著性意义(F=5.833～21.250,P<0.05)。培养48,72h,高、中剂量药物组与模型组TGF-β1,PDGF表达比较,差异也有显著性意义(F=5.833～21.250,P<0.05),可显著抑制TGF-β1,PDGF表达,并呈量效关系。结论:复方鳖甲软肝方药物血清能有效抑制肝纤维化时活化肝星形细胞分泌TGF-β1和PDGF,从而达到抑制肝星形细胞增殖、活化的抗肝纤维化防治作用。     

复方鳖甲软肝方对离体肝星形细胞增殖的影响

目的:观察复方鳖甲软肝方药物血清对离体肝星形细胞(hepaticstellatecells,HSC)增殖的影响,以探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法:将成年健康雄性SD大鼠75只,随机分为正常对照组、模型组、高、中、低剂量药物组共5组,并制备各组血清。采用大鼠CCl4造模后肝星形细胞分离、培养,药物血清制备,MTT法检测法各组血清对HSC不同时相增殖的影响,酶标仪波长为450nm。结果:培养24h,各组HSC增殖比较,差异无显著性意义(P>0.05);培养48,72h,高、中、低剂量药物组HSCA值(0.47±0.02,0.55±0.07;0.46±0.02,0.58±0.08;0.51±0.03,0.69±0.07)与模型组(0.66±0.05和0.96±0.05)比较,差异有显著性意义(P<0.05);高、中剂量组药物组与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:不同剂量的复方鳖甲软肝方药物血清作用48,72h后均能降低或抑制HSC的增殖,尤以高、中剂量作用明显。     

复方鳖甲软肝方对肝星形细胞中细胞核因子κB活化的影响

目的:观察复方鳖甲软肝方药物血清对离体肝星形细胞(hepaticstellatecells,HSC)中细胞核因子κB(nuclearfactorkappaB,NF-κB)活化的影响,以探讨其防治肝纤维化作用机制与核转录因子之间的相关性。方法:实验选用成年健康雄性SD大鼠75只,随机将75只大鼠分为正常对照组、模型组、高、中、低剂量药物组共5组,并制备各组血清。采用SD大鼠肝星形细胞分离、培养,药物血清制备,免疫组化检测实验各组血清对肝星形细胞中NF-κB活化的影响,并经图像分析系统定量分析。结果:HSC培养24,48,72h,模型组NF-κB表达的速率(NF-κB阳性染色A值分别为:217.36±29.02,429.23±25.48,627.31±37.68)与正常对照组(127.30±15.31,240.65±38.49,321.27±121.04)比较,差异有显著性意义(P<0.05)。高、中剂量药物组NF-κB表达的速率与正常对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。表明HSC培养24h,NF-κB即可在核内发生活化并表达;而复方鳖甲软肝方高、中剂量药物血清组均可有效抑制HSC中NF-κB的活化和表达。结论:复方鳖甲软肝方能有效抑制HSC中NF-κB的活化和表达。     

复方鳖甲软肝方对肝星形细胞结蛋白、突触素表达的影响

目的：观察复方鳖甲软肝方药物血清对离体SD大鼠肝星形细胞(hepatic stellate cells，HSC)结蛋白、突触素表达的影响，以探讨其抗肝纤维化作用机制。方法：将成年健康雄性SD大鼠75只，随机分为正常对照组、模型组、高、中、低剂量药物组共5组，并制备各组血清。采用大鼠HSC分离技术，将分离得到的HSC分别添加各组血清培养24，48，72h后，免疫组化检测各组HSC的结蛋白、突触素表达，并经图像分析系统作定量分析。结果：培养24h正常对照组、高、中、低剂量药物组大鼠HSC结蛋白、突触素的表达(A值)(78．93&;#177;18．56，396．29&;#177;78．56；58．95&;#177;5．21，138．92&;#177;20．21；63．83&;#177;12．97，190．87&;#177;52．97；75．46&;#177;26．72，284．54&;#177;66．72)与模型组(119．69&;#177;23．84，528．79&;#177;26．84)比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)；培养48，72h各组结蛋白、突触素的表达(A值)与模型组比较。差异也有显著性意义(P&;lt;0．05)。除低剂量药物组外的其余各组大鼠HSC结蛋白、突触素表达与正常对照组比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：复方鳖甲软肝方能显著抑制HSC结蛋白、突触素的表达，其抗肝纤维化作用机制可能与药物抑制HSC活化有关。     

复方鳖甲软肝方对离体肝星形细胞向肌成纤维细胞转型的影响

目的：观察复方鳖甲软肝方药物血清对离体肝星形细胞(hepatic stellate cells，HSC)转型的影响，以探讨该药物血清防治肝纤维化作用的机制。方法：将成年的健康雄性SD大鼠75只随机分为对照组、模型组、高、中、低剂量药物组共5组，并制备各组血清。采用大鼠HS分离技术，将分离得到的HSC分别添加各组血清培养24，48h后，免疫组化ABC法检测各组HSC的α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin，α-SMA)表达，经图像分析系统定量分析。结果：培养24，48h各药物血清组血清对HSC中α-SMA阳性染色不同时相吸光度(A值)(24h：高、中、低剂量分别为110．95&;#177;45．21，243．82&;#177;62．97，417．46&;#177;126．72；48h分别为：333．71&;#177;57．90，345．08&;#177;51．85，675．35&;#177;202．20)与模型组(24h：778．93&;#177;190．26；48h：1032．69&;#177;106．6_4)比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)；模型组、高、中剂量药物血清组与正常组比，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：高、中剂量复方鳖甲软肝方药物血清能抑制HSC的α-sMA表达，其抗肝纤维化作用机制可能与药物能抑制HSC向α-SMA的转型有关。     

复方鳖甲软肝方对离体肝星形细胞增殖的影响

目的：观察复方鳖甲软肝方药物血清对离体肝星形细胞(hepatic stellate cells，HSC)增殖的影响，以探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法：将成年健康雄性SD大鼠75只，随机分为正常对照组、模型组、高、中、低剂量药物组共5组，并制备各组血清。采用大鼠CCl4造模后肝星形细胞分离、培养，药物血清制备，MTT法检测法各组血清对HSC不同时相增殖的影响，酶标仪波长为450 nm。结果：培养24h，各组HSC增殖比较，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；培养48，72h，高、中、低剂量药物组HSCA值(0．47&;#177;0．02，0．55&;#177;0.07：0．46&;#177;0．02,0．58&;#177;0．08；0．51&;#177;0．03，0．69&;#177;0．07)与模型组(0．66&;#177;0．05和0．96&;#177;0.05)比较。差异有显著性意义(P&;lt;0．05)；高、中剂量组药物组与对照组比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)。结论：不同剂量的复方鳖甲软肝方药物血清作用48，72h后均能降低或抑制HSC的增殖，尤以高、中剂量作用明显。     

复方鳖甲软肝方对离体肝星形细胞向肌成纤维细胞转型的影响

目的:观察复方鳖甲软肝方药物血清对离体肝星形细胞(hepaticstellatecells,HSC)转型的影响,以探讨该药物血清防治肝纤维化作用的机制。方法:将成年的健康雄性SD大鼠75只随机分为对照组、模型组、高、中、低剂量药物组共5组,并制备各组血清。采用大鼠HSC分离技术,将分离得到的HSC分别添加各组血清培养24,48h后,免疫组化ABC法检测各组HSC的α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscleactin,α-SMA)表达,经图像分析系统定量分析。结果:培养24,48h各药物血清组血清对HSC中α-SMA阳性染色不同时相吸光度(A值)(24h:高、中、低剂量分别为110.95±45.21,243.82±62.97,417.46±126.72;48h分别为:333.71±57.90,345.08±51.85,675.35±202.20)与模型组(24h:778.93±190.26;48h:1032.69±106.64)比较,差异有显著性意义(P<0.05);模型组、高、中剂量药物血清组与正常组比,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:高、中剂量复方鳖甲软肝方药物血清能抑制HSC的α-SMA表达,其抗肝纤维化作用机制可能与药物能抑制HSC向α-SMA的转型有关。     

复方鳖甲软肝方对自发性高血压大鼠心肌纤维化的抑制作用

目的：评价复方鳖甲软肝方对自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化、左室重构及血浆中血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ，AngⅡ)、醛同酮的效应。方法：实验选用12周龄SHR50只，随机将其分为5组，即空白对照组、依那普利组、小、中、小剂量复方鳖甲组(小、中、大剂量药物组)，每组各10只。另取正常SD大鼠10只作为正常对照组。测定治疗10周后各组大鼠收缩压、心脏质量指数(heart weight index，HWI)、左室质量指数(left ventricular mass index，LVMI)、胶原蛋白含量，血浆中血管紧张素Ⅱ、醛固酮含量，心肌胶原容积分数(collagen volume fraction，CVF)和血管周围胶原面积(perivascular circuferential area，PVCA)。结果:治疗10周后，空白对照组大鼠收缩压，HWI，LVMI，胶原蛋白含量【(195&;#177;9)mmHg，(5．38&;#177;0．25)，(3．81&;#177;0．09)，(6．13&;#177;0．93)mg／g，1mmHg=0．133kPa】均明显高于正常对照组【(127&;#177;10)mmHg．(3．88&;#177;0．28)，(2．57&;#177;0．17)，(4．19&;#177;0．72)mg／g】(P&;lt;0．01)。依那普利组大鼠收缩压明显低于与空白对照组(P&;lt;0．01)，而复方鳖甲软肝方各组收缩压比较，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；依那普利组大鼠HWI，LVMI明显低于空白对照组(P&;lt;0．01)，而复方鳖甲软肝方各组差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；依那普利组，复方鳖甲软肝方中、大剂量组大鼠心肌组织胶原蛋白含量明显低于空白对照组(P&;lt;0．05-0.01)。空白对照组AngⅡ，醛固酮和CVF，PVCA均明显高于正常对照组(P&;lt;0．01)。依那普利、中、大剂量药物组AngⅡ明显低于空白对照组(P&;lt;0．01)；依那普利组醛固酮明显低于空白对照组(P&;lt;0．01)，小剂量药物组有所降低(P&;lt;0．05)，中剂量药物组，大剂量药物组亦有明显降低(P&;lt;0．01)，且各复方鳖甲软肝方组比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．05)；依那普利组CVF明显低于空白对照组(P&;lt;0．01)，中、大剂量药物组亦有明显低于空白对照组(P&;lt;0．01)；依那普利组、各剂量复方鳖甲软肝方组大鼠PVCA明显低于空白对照组(P&;lt;0．05-0．01)。结论：复方鳖甲软肝方无明显降压、逆转左室肥厚等功能，但可能通过影响肾素血管紧张素-醛固酮系统的机制，抑制心肌纤维化。     

复方鳖甲软肝方对自发性高血压大鼠心肌纤维化的抑制作用

目的:评价复方鳖甲软肝方对自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化、左室重构及血浆中血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、醛固酮的效应。方法:实验选用12周龄SHR50只,随机将其分为5组,即空白对照组、依那普利组、小、中、小剂量复方鳖甲组(小、中、大剂量药物组),每组各10只。另取正常SD大鼠10只作为正常对照组。测定治疗10周后各组大鼠收缩压、心脏质量指数(heartweightindex,HWI)、左室质量指数(leftventricularmassindex,LVMI)、胶原蛋白含量,血浆中血管紧张素Ⅱ、醛固酮含量,心肌胶原容积分数(collagenvolumefraction,CVF)和血管周围胶原面积(perivascularcircuferentialarea,PVCA)。结果:治疗10周后,空白对照组大鼠收缩压,HWI,LVMI,胶原蛋白含量犤(195±9)mmHg,(5.38±0.25),(3.81±0.09),(6.13±0.93)mg/g,1mmHg=0.133kPa犦均明显高于正常对照组犤(127±10)mmHg,(3.88±0.28),(2.57±0.17),(4.19±0.72)mg/g犦(P<0.01)。依那普利组大鼠收缩压明显低于与空白对照组(P<0.01),而复方鳖甲软肝方各组收缩压比较,差异无显著性意义(P>0.05);依那普利组大鼠HWI,LVMI明显低于空白对照组(P<0.01),而复方鳖甲软肝方各组差异无显著性意义(P>0.05);依那普利组,复方鳖甲软肝方中、大剂量组大鼠心肌组织胶原蛋白含量     

羟苯磺酸钙对糖尿病大鼠肾小球中基质金属蛋白酶-2/组织金属蛋白酶抑制物-2及Ⅳ型胶原表达的影响

[目的]观察羟苯磺酸钙对糖尿病大鼠肾小球基质金属蛋白酶-2/组织金属蛋白酶抑制剂-2以及Ⅳ型胶原表达的影响.[方法]采用单肾切除及单次腹腔注射1%STZ(65 mg/kg体重)制作大鼠DM模型,大鼠经羟苯磺酸钙或蒸馏水灌胃12周后,观察各组大鼠肾脏超微结构的改变以及BG、Upro、Cc 、BUN和肾重/体重的变化;免疫组化检查肾小球基质金属蛋白酶/组织金属蛋白酶抑制剂以及Ⅳ型胶原表达的变化.[结果]12周时,糖尿病模型(DM)组与单肾切除对照组(NC)组相比,肾重/体重、BG、BUN、Cc及Upro显著增高(P＜0.05), 羟苯磺酸钙治疗组(DD组)与DM组相比,除Cc变化不明显外, 肾重/体重、BG、BUN及Upro均不同程度降低;电镜显示NC组大鼠肾小球细胞外基质与系膜细胞分布正常,毛细血管腔开放;DM组肾小球系膜区基质增多及系膜细胞增生,同时毛细血管部分塌陷,肾小囊部分粘连;DD组上述病理改变均有不同程度的减轻;肾脏免疫组织化学显示DD组MMP-2、TIMP-2和Col-Ⅳ明显低于DM组,但DD和DM组MMP-2、TIMP-2和Col-Ⅳ均显著高于NC组.[结论]羟苯磺酸钙能改善糖尿病大鼠肾功能,通过抑制Col-Ⅳ的过度积聚来改善糖尿病微血管病变,并且可能与抑制糖尿病大鼠肾脏TIMP-2表达有关.     

螺内酯对肝星状细胞表达基质金属蛋白酶及其抑制剂的影响

目的研究螺内酯干预肝星状细胞（HSCs）后基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-9、MMP-13和其组织抑制剂1（TIMP-1）的变化。探讨螺内酯对胶原代谢影响的机制。方法应用不同浓度螺内酯（1×10^-4）mol／L-（1×10^-7）mol／L干预HSCs 48小时,采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测MMP-2、MMP-9、MMP-13 mRNA和TIMP-1 mRNA的表达。结果①螺内酯组的MMP-13基因表达强度上调,螺内酯（1×10^-4）mol／L-（1×10^-5）mol／L浓度组MMP-13基因表达强度（0．91±0．13、0．80±0．01、0．67±0．15）均明显高于对照组（0．53±0．10）（P〈0．01）。1×10^-4mol／L浓度组MMP-13基因表达强度接近对照组的2倍。②螺内酯干预HSCs48小时后,TIMP-1基因表达减少,螺内酯（1×10^-4）mol／L-（1×10^-6）mol／L浓度组（0．15±0．05、0．28±0．15、0．37±0．03）明显低于对照组（0．47±0．04）（P〈0．01或〈0．05）。③螺内酯不同浓度干预HSCs 48小时后,HSCs MMP-2、MMP-9基因表达无明显变化（P〉0．05）。结论螺内酯可抑制HSCs TIMP-1基因的表达,增加间质胶原酶MMP-13 mRNA的含量。螺内酯可能通过对MMPs及TIMP-1影响而促进胶原降解。     

复方鳖甲软肝片对慢性乙型肝炎患者肝纤维化指标的影响

我们将复方鳖甲软肝片用于慢性乙型肝炎患者，观察肝纤维化指标的改善，取得较好效果，现报告如下。     

前列腺癌组织及细胞中MMPs／TIMPs表达的研究

[目的] 通过对前列腺癌组织及不同前列腺癌细胞系中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)和金属蛋白酶的组织抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases，TIMPs)蛋白表达的研究，探讨MMPs／TIMPs与前列腺癌及其转移之间的相互关系。[方法] 1．采用免疫组化方法，检测前列腺癌患者肿瘤组织中MMP-2、TIMP-2的表达。2．采用ELISA方法，检测前列腺癌细胞系LNCaP细胞、C4-2B细胞、DU145细胞和PC3细胞培养上清中MMP-2、MMP-9以及TIMP-1、TIIVEP-2的分泌水平。3．采用MTS掺入试验，检测在rhMMP-2，或抗MMP-2中和抗体的作用下，四种前列腺癌细胞的增殖水平。[结果] 1．前列腺癌组织中均能表达MMP-2、TIMP-2蛋白，骨转移的组织中TIMP-2的表达明显低于原位癌，MMP-2的表达明显高于原位癌。2．四种前列腺癌细胞均能自发的分泌-定水平的MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2。在这些指标当中MMP-2与TIMP-2的比值对于前列腺癌的转移具有重要的意义。3．MMP2对四种前列腺癌细胞均有明显的促增殖作用，抗MMP-2中和抗体能够明显的抑制前列腺癌细胞的生长。[结论] 肿瘤的转移与MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2表达水平的改变密切相关。MMP-2与TIMP-2的比值有望作为前列腺癌发生转移、预后判定的一项有效指标。     

已酮可可碱对血管损伤后血管重构的影响

目的：观察已酮可可碱对球囊成形术后兔血管重塑和基质金属蛋白酶1及其抑制剂表达的影响。方法：①实验于2004-03／09在汕头大学第一附属医院动物实验中心和汕头大学医学院第二附属医院病理科完成。选用新西兰大白兔36只。随机将动物分为2组，对照组（n=18）造成血管球囊损伤模型，不给予其他干预措施；用药组（n=18）行造模并于术前3d开始腹腔注射已酮可可碱[42mg／（kg&;#183;d）]，持续至处死。分别于术后2，4，12周各处死6只。②随机选取对照组6只白兔另一侧未行球囊损伤侧的髂总动脉做为正常组。采用病理图像分析系统H-100进行图像分析，计算血管腔面积和外弹力膜围绕面积（平均动脉面积）。计算高倍镜视野下基质金属蛋白酶1和组织型基质金属蛋白酶1抑制剂的阳性细胞率。③计量资料差异比较采用t检验。结果：大白兔36只均进入结果分析。①球囊成形术后4和12周对照组兔髂动脉的管腔面积和外弹力膜围绕面积均明显小于正常组（P〈0．01）；而用药组兔髂动脉的管腔面积和外弹力膜围绕面积均明显大于对照组（P〈0．05）。②球囊成形术后2和4及12周用药组基质金属蛋白酶1表达与对照组相近（P〉0．05）。组织型基质金属蛋白酶1抑制剂表达明显少于对照组（P〈0．01）。结论：已酮可可碱可抑制血管损伤后血管负性重构，减轻血管的狭窄，对冠状动脉球囊损伤术后的后期管腔丧失和病理性血管重塑方面有一定作用，可能与抑制组织型基质金属蛋白酶1抑制剂表达，恢复基质金属蛋白酶1与组织型基质金属蛋白酶-1抑制剂的平衡有关。     

复方鳖甲软肝方对家兔心室肌细胞钙通道的影响

目的研究复方鳖甲软肝方对家兔单个心室肌细胞L-型钙通道(ICa-L)的电生理作用.方法采用改良的中药血清药理学方法及全细胞膜片钳技术观察不同浓度的复方鳖甲软肝方药物血清干预心肌细胞后对心肌细胞ICa-L电流的影响.结果含0.7 g/L和1.4 g/L的复方鳖甲软肝方药物血清使兔心室肌细胞ICa-L峰值电流密度(ICa-L max)由(6.90±0.52)pA/pF分别下降至(3.40±0.28)pA/pF和(2.30±0.18)pA/pF(P＜0.01).复方鳖甲软肝方使ICa-L的电流-电压曲线上移,但不改变其激活电位、电位峰值和反转电位,同时还抑制ICa-L的激活过程.结论复方鳖甲软肝方对ICa-L具有浓度依赖性阻滞作用,这可能是其抗心肌纤维化的部分机制.     

DMN肝纤维化模型肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原和TIMP-1 mRNA表达及复方861的干预作用

目的研究二甲基亚硝胺(DMN)肝纤维化模型Ⅰ型胶原(CoL-1)、Ⅲ型胶原(CoL-Ⅲ)和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1) mRNA表达以及复方861的干预作用.材料和方法采用1%DMN 1ml/kg腹腔注射模型组大鼠,复制DMN诱导的大鼠肝纤维化模型,同时复方861灌胃3g/kg,共8周,以RT-PCR法观察肝纤维化模型肝组织CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA表达水平.结果DMN大鼠肝纤维化模型组CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA分别为0.827±0.094、0.953±0.033及0.924±0.110,明显高于正常对照组(P＜0.01);复方861治疗组CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA为0.497±0.057、0.851±0.065和0.648±0.107,明显低于模型对照组(P＜0.01或P＜0.05).结论DMN肝纤维化模型肝组织CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA表达水平增高,复方861能够抑制肝组织CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ及TIMP-1 mRNA的表达,从而发挥其抗肝纤维化的作用.