神经元特异性烯醇化酶与脑损伤

神经元特异性烯醇化酶 ( NSE)为烯醇化酶的γ二聚体同工酶 ,特征性地位于神经元和神经内分泌细胞胞质中 ,血清和脑脊液中亦含有少量 NSE。若神经元发生坏死 ,NSE会漏至胞外 ,使体液浓度升高。在脑损伤性疾病中 ,如脑梗死、脑出血、蛛网膜下腔出血、癫、脑外伤、脑缺氧、脑炎、Creutzfeldt-Jakob病 ,血清和 /或脑脊液 NSE显著升高 ,与脑损伤范围或疾病严重程度密切相关 ,是早期预测预后的重要指标     

人神经元特异性烯醇化酶蛋白表达及抗体制备

目的克隆和表达人的神经元特异性烯醇化酶(HuNSE)基因,制备HuNSE多克隆抗体,以期用于朊病毒病及相关疾病的临床诊断。方法经RT-PCR扩增HuNSE基因和测序验证后,将其克隆于原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中诱导表达HuNSE蛋白,蛋白经Ni-NTA亲和纯化后,免疫兔子,所制备的抗血清用ELISA、Westernblotting和免疫组化鉴定。结果所表达的HuNSE蛋白相对分子质量约为22000,以其为抗原制备的HuNSE特异性抗血清具有良好的免疫反应性。Westernblotting和免疫组化结果显示抗血清可识别重组和不同哺乳动物脑组织中的NSE蛋白。结论NSE基因在大肠杆菌中获得了高效表达,所制备的NSE特异性抗血清可用于朊病毒病及其他神经退行性疾病的诊断和研究。     

神经节苷酯对大鼠颅脑损伤后血清神经元特异性烯醇化酶和学习记忆的影响

①目的探讨神经节苷酯（GM-1）对大鼠颅脑损伤后血清神经元特异性烯醇化酶和学习记忆的影响。②方法采用Marmarou的方法建立大鼠重型闭合性颅脑创伤模型,将120只SD大鼠随机分为创伤组、治疗组、假手术组及对照组,前3组各36只分为伤后6、12、24、48、72 h5个时相组,每亚组6只,进行血清神经元特异性烯醇化酶检测,余6只进行Morris水迷宫测试;对照组12只,其中6只进行血清神经元特异性烯醇化酶检测,另6只进行Morris水迷宫测试。③结果GM-1能够使大鼠颅脑损伤后血清神经元特异性烯醇化酶的高峰明显下调并改善学习记忆功能。④结论GM-1可能是治疗脑损伤的有效药物。     

急性脑梗死患者血清神经元特异性烯醇化酶的变化

神经元特异性烯醇化酶（NSE）是神经元损伤的敏感性标志，具有高度特异性。病理研究表明，急性脑梗死患者梗死病灶中心坏死区及其周围的缺血半暗带神经元大量死亡，导致大量的NSE经血脑屏障入血，使血NSE含量增高。NSE的研究为诊断神经系统疾病提供了新方法。本文就急性脑梗死患者血清神经元特异性烯醇化酶进行了检测，旨在探讨脑梗死患者血清神经元特异性烯醇化酶的含量变化，结果报告如下：     

神经元特异性烯醇化酶在脑胶质瘤的表达意义

目的探讨神经元特异性烯醇化酶(NSE)在大脑胶质瘤病患者的特异性表达及手术前后NSE水平的变化。方法在术前2天及术后3天采用放免法检测42例脑胶质瘤及其中27例肿瘤全切术患者手术前后NSE浓度，并与20例正常对照浓度进行对比研究。结果脑胶质瘤病患者外周血及CSF中NSE浓度明显高于正常对照组(P＜0.05)，分别为16.21±4.32p/μg/L与7.25±1.12p/μg/L及56.27±7.51p/μg/L与30.24±3.79p/μg/L。27例肿瘤全切术患者术后NSE浓度迅速下降至正常。结论NSE作为肿瘤标记物对脑胶质瘤的诊疗、预后判断及复发预测具有重大意义。     

急性脑梗死患者血清神经元特异性烯醇化酶测定意义

目的　探讨急性脑梗死 (CI)患者血清神经元特异性烯醇化酶 (NSE)变化的临床意义。方法　采用放射免疫分析法 (RIA)测定 4 2例急性脑梗死 (CI)患者发生梗死后第 2 ,4 ,7天及 30例健康正常人血清NSE含量。结果　三组脑梗死患者血清NSE浓度均明显高于正常对照组 ,且NSE水平的变化与梗死面积呈明显的正相关关系。在梗死发生的第 2天 ,血清NSE水平达到峰值 ;其后 ,第 4天NSE水平有所下降 ,到第 7天时已明显下降 ,与第 2天相比 ,有非常显著性意义 (P <0 .0 5及P <0 .0 1) ,但仍明显高于正常对照组水平。结论　血清NSE水平较好地反映了急性脑梗死的脑损伤程度 ,可用来判断脑梗死急性期脑损伤程度及观察疗效和判断预后 ,鉴别脑的可复性与不可复性变化。     

急性颅脑外伤血清神经元特异性烯醇化酶变化的研究

目的:探讨急性颅脑损伤后血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)与脑损伤程度及预后的关系。方法:采用ELISA法测定56例颅脑损伤急性期和50例恢复期血清NSE含量,并分别与GCS评分进行相关分析。结果:颅脑外伤患者NSE水平均显著升高,以重型为甚。急性期NSE浓度与GCS评分呈负相关(r=-0.7697,P<0.01)。结论:血清NSE是判断颅脑损伤伤情及预后重要的神经生化指标之一。     

神经元特异性烯醇化酶与神经系统疾病

烯醇化酶普遍存在于生物体内，在糖酵解过程中，它催化α磷酸甘油形成磷酸烯醇式丙酮酸。现已发现五种烯醇化酶同工酶，分别由免疫性质不同的3种亚基α、β、γ组成，即αα、ββ、γγ、αβ、αγ，均为α胞浆二聚体酶。脑组织中存在αα、γγ、αγ三种烯醇化酶同工酶，用免疫组织化学方法研究表明，γγ型特异定位于神经元和神经内分泌细胞，故命名为神经元特异性烯醇化酶(NSE)；     

神经元特异性烯醇化酶测定标本影响因素的研究

目的探讨血液标本放置不同时间后分离血清对神经元特异性烯醇化酶（NSE）水平的影响，以及血清经冰冻后对NSE水平有无影响。方法采用电化学发光法，分别对20例健康体检者的血液标本在室温（24℃）放置30min，1、3、6h后再分离血清，以及将放置1h后离心的血清标本放入-20℃冰箱过夜，将血清标本进行NSE水平测定。结果1h组、冰冻组与30min组比较，结果差异均无统计学意义（P〉0．05），3、6h组同30min组比较，结果差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论血液标本放置时间延长对NSE水平测定有不同程度的影响，血清冰冻后对NSE水平测定无影响。     

外源性胆囊收缩素对大鼠学习记忆的影响及相关机制的研究

目的 探讨大鼠海马注射CCK－8对其光辨别学习记忆的影响。方法 采用核团微量注射和放射免疫分析的方法。结果（1）海马CA3区注射CCK－8,大鼠光辨别学习能力明显提高;海马CA3区注射L－365＋CCK－8,大鼠光辨别学习能力明显减弱;（2）大鼠海马CA3区注射CCK－8,海马谷氨酸转运体功能明显增强;海马CA3区注射L－365＋CCK－8,海马谷氨酸转运体功能明显减弱。结论 CCK－8可促进大鼠的学习记忆,这可能是通过CCK－B受体而实现的;谷氨酸转运体可能参与了这一过程。     

不同间歇低氧频率对大鼠血压以及血管内皮功能的影响

目的观察不同频率间歇低氧对大鼠血压的影响及其血管内皮功能的变化。方法将40只Wistar雄性大鼠随机分为常氧对照组(NC组)及4个间歇低氧组(IH1,IH2,IH3,IH4),其低氧频率分别为10次/h、20次/h、30次/h、40次/h。测定实验前后大鼠动脉收缩压、血清内皮素-1、一氧化氮水平。结果 (1)各组大鼠实验前SBP比较差异无统计学意义。6周实验结束后,各IH组SBP较实验前和NC组均显著升高(P0.05或P0.01);随着间歇低氧频率的增加,各IH组大鼠血压逐渐升高,但IH4组较IH3组比较差异无统计学意义。NC组SBP较实验前差异无统计学意义。(2)各IH组血清ET-1水平较NC组相比明显增高(P0.05),血清NO水平显著降低(P均0.01)。随着间歇低氧频率的增加,血清ET-1水平升高,NO水平显著降低(P0.05或P0.01)。IH4组与IH3组相比,各指标差异无统计学意义。结论血管内皮功能障碍在慢性间歇低氧致高血压过程中起着重要的作用。随着间歇低氧频率增高,血压升高及内皮损伤加重,但并非频率越高,损伤越重。     

尼莫通对缺氧缺血新生大鼠远期学习记忆的影响

目的观察缺氧缺血性脑损伤对远期学习记忆及海马锥体神经元的影响,以及尼莫通治疗的效果。方法选择7日龄Wistar大鼠34只,行右侧颈总动脉结扎后,吸入8%氧气2小时,然后随机取13只立即给予尼莫通160μg/kg腹腔注射,共5天;对照组给予生理盐水。至生后80～90天时进行Y迷宫分辨学习和记忆保持百分率的检测,然后取脑进行神经病理学检查。结果与正常组相比,缺氧缺血显著降低大鼠Y迷宫分辨学习能力(32.86±8.22,P＜0.01)和记忆保持百分数(59.00±21.32%,P＜0.05),并且使海马CA1区锥体神经元数密度显著减少(5.25±1.3×10     

TAT-XIAP融合蛋白对学习记忆障碍大鼠的影响及其机制

目的 探讨TAT-XIAP融合蛋白对学习记忆障碍大鼠的影响及其与大脑海马神经元凋亡的关系,为学习记忆的深入研究提供实验依据.方法 利用基因工程技术制备具有生物学活性的TAT-XIAP融合蛋白,通过D-半乳糖(D-Gal)腹腔注射和Aβ1-42海马注射建立学习记忆障碍大鼠模型,将大鼠随机分为TAT-XIAP组(左侧脑室注射TAT-XIAP融合蛋白,每天80 mg/kg,共3d)和模型组(侧脑室注射等体积PBS)各30只,采用水迷宫评价大鼠的学习记忆能力,TUNEL法检测大鼠海马神经元凋亡.结果 1TAT-XIAP组大鼠在各象限入水至爬上平台的时间均明显缩短,平均值为(48.31±9.44)s,明显低于模型组的(87.80±10.32)s(P＜0.05);TAT-XIAP组大鼠穿越平台的次数、在原平台象限游程百分比、在原平台象限时间百分比均明显增加,分别为(4.78±0.93)次、(47.39±5.84)％、(48.43±5.75)％,与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).2 TAT-XIAP组大鼠海马凋亡神经元明显减少,凋亡神经元计数为(16.37±3.15)个/mm2,模型组为(54.66±7.20)个/mm2,两者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 TAT-XIAP融合蛋白可明显改善学习记忆障碍大鼠学习记忆功能,其机制可能与大鼠海马神经元凋亡减少有关.     

乌司他丁对心肺复苏后大鼠血清神经元特异性烯醇化酶的影响及作用

目的：探讨心肺复苏后大鼠血清神经元特异性烯醇化酶（NSE）的变化、大脑皮层病理改变及乌司他丁的干预作用。方法：成年雄性SD大鼠120只,随机分为假手术对照组、复苏组、乌司他丁组（药物组）,每组按气管切开后（对照组）或自主循环恢复（ROSC）后（复苏组、药物组）0.5、3、6、12h和24h分为5个亚组（n=8）。复苏组和药物组采用窒息致大鼠心脏骤停和心肺复苏模型,药物组于ROSC后2min内经颈动脉推注乌司他丁（100000U/kg）。对照组仅行麻醉、气管切开和血管穿刺。各组分别于各时间点取血和组织标本,以ELISA法检测血清NSE浓度,光镜下观察大脑皮层的病理改变。结果：与对照组比较,复苏组和药物组ROSC后各亚组各时间点血清NSE含量明显升高（P〈0.05或P〈0.01）;与复苏组比较,药物组ROSC后6、12、24h血清NSE含量显著降低（P〈0.05或P〈0.01）。药物组病理损害轻于复苏组。结论：乌司他丁通过降低血清NSE浓度对心肺复苏后脑损伤具有一定的保护作用。     

促智方对老年大鼠学习记忆减退改善作用的研究

目的：研究促智方对老年学习记忆减退大鼠海马突触素的影响。方法:用Morris水迷宫法筛选出老年学习记忆减退大鼠与老年学习记忆正常大鼠（SMN），将筛选出的大鼠分为促智方组（CUZHIFANG）与老年学习记忆减退对照组(SMDc)。用免疫组织化学与图像分析技术，观察各组大鼠海马CA3突触素免疫活性。结果:促智方组突触素免疫活性明显高于SMDc组相应各区（P＜0.01）。结论:促智方可能通过调节海马CA3神经元突触密度，改善学习记忆功能。     

急性低压低氧对小鼠学习记忆能力及海马组织一氧化氮和内皮素-1水平的影响

目的 探讨模拟高原急性低压低氧环境对小鼠学习记忆行为及脑组织含水量、海马组织一氧化氮（Nitric oxide,NO）和内皮素-1（Endothelin-1,ET-1）的影响.方法 将小鼠随机分为常压常氧组和低压低氧组（模拟海拔6000 m 8 h）,用Morrs水迷宫测定小鼠的空间学习记忆能力;用干湿质量法测定脑组织含水量的变化;用酶联免疫吸附法观察其海马组织NO和ET-1的变化.结果 与常压常氧组比较,低压低氧组小鼠寻找平台的潜伏期延长[常压常氧组：（26.39±8.44）s,低压低氧组：（44.60±7.80）s,P＜0.01],目标象限停留时间减少[常压常氧组：（22.98±6.14）s,低压低氧组：（19.78±2.74）s,P＜0.05],脑组织含水量增加（P＜0.05）,海马组织NO[常压常氧组：（2.37± 1.07） μmol/gProt,低压低氧组：（4.48±1.45）μmol/gProt,P＜0.01]和ET-1水平增高[常压常氧组：（38.87±6.17） ng/L,低压低氧组：（52.09±6.75） ng/L,P＜0.01].结论 急性低压低氧环境小鼠学习记忆能力下降,这可能与急性低压低氧所致的脑水肿、海马组织NO和ET-1水平增加有关.     

芹菜素对慢性间歇低氧幼鼠认知损害的保护作用

目的：研究芹菜素对慢性间歇低氧幼鼠认知损害的保护作用。方法：八臂迷宫训练成功的3～4周龄雄性SD幼鼠40只,随机分空气对照组（C组）、间歇低氧组（H组）、间歇低氧二甲基亚砜组（R组）、间歇低氧芹菜素＋二甲基亚砜组（Q组）。间歇低氧2周后八臂迷宫测试全部幼鼠学习记忆能力。以透射电镜观察海马CA1区神经元的超微结构变化。结果：与R组比,Q组参考记忆错误（RME）和总记忆错误（TE）显著降低（P〈0.05,P〈0.01）。与C组比,H组RME、工作记忆错误（WME）和TE显著增高（P〈0.01,P〈0.05,P〈0.01）。电镜下H组和R组海马CA1区神经细胞的形态、胞浆内的细胞器与正常细胞比较有明显变化,Q组和C组无明显变化。结论：芹菜素对于慢性间歇低氧幼鼠海马神经元具有保护作用,从而减轻慢性间歇低氧对幼鼠空间学习记忆能力的损伤。     

液化石油气中毒大鼠神经元特异性烯醇酶的表达及意义

目的研究神经元特异性烯醇酶（Neuron-specific enolase，NSE）的改变，探讨液化石油气（LPG）中毒后脑组织的损坏情况。方法采用大鼠液化石油气中毒模型，动物分别于中毒后1、3、7、14、21、28d处死，苏木精-伊红染色观察脑组织神经细胞的动态变化，免疫组化方法检测脑组织NSE的表达水平。结果大鼠液化石油气中毒后大脑皮层神经元细胞核浓缩，结构不清，随中毒浓度增加，细胞核浓缩更明显，可见神经元坏死迹象。免疫组织化学技术观察显示NSE表达增加，随中毒浓度升高，NSE表达亦明显增加。结论液化石油气中毒后大脑皮层神经元形态学改变是认知功能下降的病理基础之一，脑组织NSE表达的增加是脑组织损伤的一种表现。