精神分裂症患者血浆MicroRNA异常表达的对照研究

目的检测microRNA（miRNA或miR）在精神分裂症患者中的异常表达,探究miRNA能否作为精神分裂症的生物标记物。方法连续入组64例精神分裂症患者和64例配对正常对照,使用实时荧光定量RT—PCR技术检测病例组和对照组血浆10种miRNA（miR-30e、miR一34a、miR一181b、miR一195、miR一346、miR一432、miR一7、miR一132、miR一137andmiR一212）的相对表达水平。结果病例组血浆miR一30e、miR一18lb、miR一346、miR一34a和miR一7表达水平（2．99±1．59,2．29±0．77,4．24±1．51,9．94±1．52,11．08±2．24）较对照组（3．74±1．28,2．87±0．90,4．65±0．99,10．90±1．99,12．00±1．95）显著上调（P〈0．05—0．001）。ROC曲线分析显示,5种miRNA作为联合生物标记物对精神分裂症具有较高诊断价值（AUC为0．705,敏感度和特异度分别为34．5％和90．2％）;Logistic回归分析显示miR-181b具有最高相对危险度（OR=2．483）。结论miR一30e、miR一181b、miR一346、miR一34a和miR．7可能成为精神分裂症的联合生物标记物。     

血清 miR-141和 miR-143联合检测非小细胞性肺癌的诊断价值

目的：探讨血清中 microRNA 作为非小细胞性肺癌生物标志物的诊断价值。方法采用定量 RT-PCR 检测训练组中30例非小细胞性肺癌患者血清、30例健康对照者血清中差异表达的 microRNA,采用受试者工作曲线和曲线下面积来筛选作为候选标志物的 microRNA,建立诊断模型,再用15例非小细胞肺癌和15例健康对照者中的候选 miRNA 的表达情况去验证模型（验证组）的诊断效能,计算灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值等诊断价值。结果训练组中 miR-141和 miR-143表达与对照组比较差异有统计学意义（P ＜0．05）,在验证组中二者联合的诊断效能分别为：灵敏度为99％（95％CI ：0．94～1．0）,特异度为85％（95％CI ：0．75～0．93）,阳性预测值为87％,阴性预测值为99％。结论血清 miR-141和 miR-143是非小细胞性肺癌潜在的诊断标志物。     

结核性胸膜炎患者外周血miR-365a-3p、miR-29a-3p的表达及意义

目的 探讨外周血微小RNA （miRNA）在结核性胸膜炎患者和健康对照者之间的差异表达.方法 选取30例结核性胸膜炎患者为实验组,30例健康者为对照组,采集外周血,Trizol法抽提外周血总mRNA,RT-PCR合成cDNA,荧光定量PCR检测外周血miR-365a-3p、miR-29a-3p的表达.结果 结核性胸膜炎组患者外周血miR-365a-3p表达（0.66±0.60）明显高于健康对照组（0.33±0.29）,差异有统计学意义（P＜0.05）,而结核性胸膜炎组患者外周血miR-29-3p表达（0.74±0.65）与健康对照组（0.75±0.31）相似,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 外周血miR-365a-3p可能与结核性胸膜炎发生密切相关,并可能成为诊断结核性胸膜积液的靶点之一.     

卵巢癌患者血浆miRNA水平与顺铂化疗敏感性的相关性研究

目的探讨卵巢癌患者血浆miRNA分子标志物水平与铂类化疗敏感性的相关性。方法应用实时定量PCR方法检测48例卵巢癌患者化疗前后血浆中miRNA的表达,13例体检正常者为内参对照,观察卵巢癌患者铂类化疗药物的疗效及预后的关系。结果初检的11种miRNA中,仅有5种miRNA（miR-124,miR-145,miR-22,miR-106a,miR-142）能够在外周血中检测出。其中3种miRNA（miR-22,miR-106a,miR-142）在正常人和卵巢癌患者的外周血中表达水平比较差异有统计学意义（P＜0．01）。患者化疗后外周血中仅miR-22水平显著升高（约3．2倍）,且miR-22水平高者对化疗反应多数敏感,反之不敏感。患者外周血miR-22的表达水平与其预后呈正相关（P＜0．05）。结论血浆中miR-22,miR-106a,miR-142水平升高可能参与了卵巢癌的发生发展,化疗患者敏感者仅miR-22呈高表达,不敏感者miR-22呈低表达,提示其可作为预测化疗敏感性及预后的指标之一。     

唾液及血浆中微小RNA-21水平应用于早期食管癌的诊断价值

目的：研究唾液及血浆中的微小RNA‐21（miRNA‐21）水平应用于早期食管癌的诊断价值。方法选取2011年2月至2014年2月河南省南阳市中心医院收治的112例早期食管癌患者作为观察组,同期来该院进行健康查体的100例患者作为对照组,比较两组查体者miRNA‐21的表达水平,比较唾液和血浆miRNA‐21的诊断价值;研究miRNA‐21水平与肿瘤分期、病理类型和分化的相关性。结果观察组唾液miRNA‐21水平为（6．08±2．22）,对照组为（0．64±0．09）,差异有统计学意义（P＜0．05）;观察组的血浆miRNA‐21表达水平为（20．91±10．59）,对照组为（1．69±0．17）,差异有统计学意义（P＜0．05）。唾液中的miRNA‐21水平ROC曲线下面积（AUC）为0．8665,灵敏度为88．24％,特异度为69．97％;血浆中的miRNA‐21 AUC为0．8820,灵敏度为90．20％,特异度为70．69％,二者诊断价值差异无统计学意义（P＞0．05）。唾液与血浆中的miRNA‐21水平与早期食管癌的分期和病理类型无明显的相关性（P＞0．05）,与分化程度相关性较强（P＜0．05）。结论唾液及血浆中的miRNA‐21水平应用于早期食管癌具有较高的诊断价值,唾液可能代替血浆应用于早期食管癌的诊断。     

微小RNA在急性脑出血患者血清中的表达及其临床意义

目的 探讨脑出血患者急性期外周血微小RNA (miRNA)表达水平及其与患者预后的关系.方法 检测45例脑出血患者发病48h时外周循环血液中miRNA-16、miRNA-223、miRNA-19b、miRNA-107、miR-NA-92a和miRNA-124的表达量,病后3个月所有患者以改良Rankin量表评分进行预后判断.另选45例健康人员设为对照组.结果 病例组miRNA-16、miRNA-223、miRNA-19b、miRNA-107、miRNA-92a和miR-124表达水平均高于对照组(均P＜0.05);预后不良组与预后良好组miRNA-16、miRNA-223、miR-NA-19b、miRNA-107、miRNA-92a表达水平差异均无统计学意义(均P＞0.05),而两组miR-124差异有统计学意义(P＜0.05).结论 早期检测外周血miR-124表达水平对脑出血患者预后的判断具有重要意义.     

MicroRNA在非特异性精神发育迟滞患者外周血中的异常表达

目的 研究非特异性精神发育迟滞患者外周血中miRNA的异常表达.方法 采用基因芯片筛查技术对3例非特异性精神发育迟滞儿童和健康儿童外周静脉血的miRNA进行筛查,进行生物信息学分析,并选取其中10个感兴趣miRNA,运用实时定量PCR技术在34例非特异性精神发育迟滞患者与32例正常个体之间进一步验证芯片筛查的结果.结果 经筛查27个miRNA的表达差异具有统计学意义（上调或者下调倍数变化值≥2.0,P≤0.05）,其中22个表达上调,5个表达下调.经实时定量PCR验证miR-664a-5p,miR-1207-5p,miR-3141,miR-1228-5p,miR-4505在病例组（3.93±3.82,2.48±3.45,2.75±3.62,10.03±3.59,5.35±3.44）中表达较对照组（5.47±3.59,3.95±1.3.57,4.14±3.68,13.23±5.05,6.85±3.22）上调,差异有统计学意义（P＜0.05 ～ 0.01）.结论 多种miRNA在非特异性精神发育迟滞患者外周血中有异常表达.     

精神分裂症患者血清差异 microRNA 谱的检测

目的：目前精神分裂症的临床诊断缺乏统一的标准。文中研究精神分裂症患者血清中差异miRNA表达谱,为该病的临床诊断提供依据。方法采用FlashTag TM Biotin RNA芯片技术和SAM软件筛选精神分裂症患者与健康受试者血清中差异表达的miRNA,用实时荧光定量逆转录PCR（RT-PCR）进行验证。结果筛选出3个差异表达的miRNA,其中hsa-miR-1281上调,表达倍数变化为1．50881;hsa-miR-2861、hsa-miR-638下调,表达倍数变化分别为0．64193和0．51624。实时定量PCR结果证实,精神分裂症患者较健康受试者hsa-miR-2861与hsa-miR-638表达下调,分别为[（0．037±0．037） vs （3．159±2．761）,χ2＝4．089, P＜0．05]及[（0．006±0．006） vs （0．689±0．314）,χ2＝4．083, P＜0．05],hsa-miR-1281在精神分裂症患者组呈高表达[（1．221±0．041） vs （0．145±0．036）,χ2＝5．333,P＜0．05）。结论精神分裂症患者血清中存在差异表达的miRNA谱,miR-1281、miR-2861和miR-638可作为诊断精神分裂症的一个新的血清标志物。     

miRNA表达谱在缺氧缺血性脑病新生儿血浆中的变化及意义

目的筛选新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）相关的miRNA,探讨miRNA在HIE诊断、治疗和预后中的指导意义。方法选择HIE新生儿117例,根据病情分为轻度组69例和中重度组48例;选择同期分娩的健康足月新生儿30例为健康对照组。利用miRNA芯片检测3组新生儿血浆miRNA表达谱的差异,从中挑选6个miRNA进行Real-timePCR验证,比较各组血浆miRNA表达并分析与HIE诊断、治疗和预后的关系。结果miRNA芯片检测HIE组共有55种miRNA表达有明显差异,有29种miRNA表达上调,26种表达下调。与健康对照组比较,HIE组血浆中miR-4472、miR-5195-3p、miR-6794-5p表达明显上调,let-7b-5p表达明显下调,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。HIE中重度组miR-4472、miR-5195-3p、miR-6794-5p表达显著高于轻度组,而let-7b-5p表达显著低于轻度组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。与治疗前比较,治疗后HIE轻度组和中重度组miR-4472、miR-5195-3p、miR-6794-5p表达量下降,let-7b-5p表达量上升,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。ROC曲线分析显示miR-4472、miR-5195-3p、miR-6794-5p和let-7b-5p4种miRNA的AUC分别为0.958、0.938、0.986和0.969。miR-4472、miR-6794-5p高表达组后遗症发生率明显高于低表达组（均P＜0.05）,而miR-5195-3p、let-7b-5p与HIE预后无相关性（均P＞0.05）。结论HIE患儿血浆中miR-4472、miR-5195-3p、miR-6794-5p表达水平显著升高,而let-7b-5p表达水平显著下降,其中miR-4472、miR-6794-5p可能是预测HIE预后的生物标志物。     

miRNA-34甲基化与卵巢癌临床病理特征及预后的关系

目的：探讨miR-34a和miR-34b／c基因启动子区甲基化水平与卵巢癌临床病理特征的关系。方法：采用特异性甲基化PCR分别检测80例卵巢癌患者卵巢癌组织及血浆中的miR-34a和miR-34b／c基因甲基化水平,分析其表达与临床病理特征及预后之间的关系。结果：80例卵巢癌组织中有58例miRNA-34a甲基化阳性,血浆阳性31例;有69例miRNA-34b／c基因甲基化阳性,血浆阳性40例。联合检测血浆和组织miRNA-34甲基化具有一致性。miRNA-34基因甲基化与FIGO分期、淋巴结转移有关（P＜0．05）,与患者年龄、肿瘤有无包膜及病理类型无关（P＞0．05）。术后76例随访3年,有45例复发（59．21％）,复发组癌组织和血浆miRNA-34甲基化阳性率分别为95．6％（43例）、62．2％（28例）,明显高于无复发病例组[77．4％（24／31）和35．5％（11／31）,P均！0．05];发生转移的36例患者癌组织和血浆miRNA-34甲基化率亦明显高于无转移组（40例）。结论：miRNA-34甲基化异常表达可作为晚期卵巢癌预后不佳的分子标志物。     

重症肺炎肺泡灌洗液miR-127-5p、miR-3686、sTREM-1的表达及与病情、预后的关系

目的:探讨重症肺炎(SP)肺泡灌洗液微小RNA-127-5p(miR-127-5p)、微小RNA-3686(miR-3686)、可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)表达及与病情、预后关系.方法:选取2017年3月—2019年8月68例SP患者为观察组,同期68例肺炎患者为对照组.比较两组、观察组不同预后(28 ...     

血清胱抑素C、β2-微球蛋白及肌酐在多发性骨髓瘤诊断中的价值

目的 探讨血清胱抑素C（cystatin C,Cys-C）、β2-微球蛋白（β2-microglobulin,β2-MG）及肌酐（creatinine,Cr）在多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）中的诊断意义.方法 使用日立7600全自动生化分析仪检测2010年2月-2014年1月海南农垦那大医院及南方医院住院的43例初诊MM患者和30例健康体检者血清Cys-C、β2-MG、Cr、尿酸（uric acid,UA）及尿素的水平.应用受试工作特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）评价Cys-C、β 2-MG和Cr在MM诊断中的价值.结果 MM患者Cys-C水平（2.06±0.82） mg/L明显高于健康对照组（0.71±0.18） mg/L（P＜0.01）;并且与β2-MG呈明显正相关（r=-0.523,P＜0.05）.Durie-Salmon分期中,Ⅲ期CysC水平（3.14± 1.38） mg/L明显高于Ⅱ期（1.35±0.16） mg/L和Ⅰ期（0.97±0.18） mg/L（P＜0.01）;Ⅲ期与Ⅰ期、Ⅱ期血清Cr和β2-MG水平比较差异有统计学意义（P＜0.05）.不同免疫分型中,轻链型血清Cys-C水平（2.75±1.01） mg/L明显高于不分泌型（1.49±0.53） mg/L（P＜0.05）;IgA型血清β2-MG水平（7.48±4.52） mg/L明显高于不分泌型（5.37±2.64） mg/L（P＜0.05）.ROC分析显示,CysC的曲线下的面积（area under curve,AUC）及其95％置信区间（0.912,95％CI：0.891～0.960）高于β2-MG（0.853,95％CI：0.821 ～ 0.894）和Cr（0.741,95％CI：0.702 ～ 0.795）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 Cys-C可以作为诊断MM患者肾功能早期损害的指标之一,且优于β2-MG和Cr,对临床分期、肿瘤负荷及判断预后有一定的帮助.     

microRNA-146a与冠心病患者斑块稳定性的相关性

  目的  探讨microRNA-146a（miR-146a）与冠心病斑块稳定性的相关性。  方法  共收集胸痛患者324例。采用实时聚合酶链反应（Real-time PCR）检测miR-146a的表达。ELISA法检测hs-CRP、IL-6、IL-8水平。采用冠脉造影评价冠状动脉狭窄程度。应用血管内超声（IVUS）评价冠状动脉狭窄病变斑块稳定性。  结果  （1）UAP组和AMI组hs-CRP、IL-6、IL-8水平较CPS组明显升高（P < 0.01）；（2）冠心病患者外周血单个核细胞（PBMCs）和血浆miR-146a表达明显高于非冠心病组（P < 0.05，P < 0.001）；（3）miR-146a在SAP组、UAP组和AMI组的表达高于CPS组（P < 0.01，P < 0.001，P < 0.001），miR-146a在血浆中的表达模式与PBMCs一致；（4）易损斑块组外周血单个核细胞和血浆miR-146a的表达明显高于稳定斑块组（P < 0.05）；（5）软斑块组PBMCs和血浆miR-146a水平显著高于纤维斑块组和钙化斑块组（P < 0.05）。  结论  miR-146a的表达与冠状动脉狭窄病变斑块稳定性密切相关。     

肝豆状核变性患者的记忆监测研究

目的 研究肝豆状核变性病（H LD）患者记忆监测的情况,同时探讨HLD患者记忆障碍的可能机制.方法 建立情景记忆（EM）及语义记忆（SM）的知道感（FOK）实验范式,对30例HLD患者及30例年龄及教育程度相匹配的健康对照者（HC）进行研究.结果 与HC组的FOK-EM的线索回忆率[（64.17±29.21）％]以及FOK-SM的线索回忆率[（84.72±11.44）％]比较,HLD患者组FOK-EM的线索回忆率[（26.55±20.92）％]、FOK-SM的线索回忆率[（53.93±28.42）％]显著降低,差异有统计学意义（t=-5.140,P＜0.01;t=-5.123,P＜0.01）;FOK-EM的肯定判断/正确再认成绩[（50.64±29.43）％]、否定判断/正确再认成绩[（12.80±18.32）％]与HC组的肯定判断/正确再认成绩[（75.15±31.73）％]、否定判断/正确再认成绩[（1.81±5.41）％]之间差异有统计学意义（t=-2.693,P＜0.05;t=3.026,P＜0.01）;且stroop效应与FOK-EM的否定判断/正确再认成绩呈正相关（r=0.601,P＜0.01）.结论 HLD患者在情景记忆FOK中表现为对自身再认能力的低估,低估程度与执行功能的损害相关,提示前额叶功能损伤可能是导致HLD患者情景记忆障碍的重要因素,同时相对保留的语义记忆FOK提示二者可能依赖不同的神经机制.     

Th1、Th2、Th17 细胞变化及环境因素与习惯性流产的关系研究

目的 探讨Th1、Th2和Th17细胞的变化、转录因子T-bet、GATA-3和STAT-3 mRNA的表达及环境因素与习惯性流产的关系.方法 选取2011年6月～2012年9月河南省开封市妇产医院就诊的50例习惯性流产非孕期患者作为病例组（HA组）,同期某社区50例正常非孕妇女为健康对照组（NNP组）,分别抽取抗凝静脉血5 mL,应用聚多糖密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（PBMC）,采用流式细胞仪检测三种亚群细胞的比例,酶联免疫吸附法（ELISA）检测IFN-γ、IL-4和IL-17的含量,实时荧光定量PCR检测T-bet 、GATA-3和STAT-3 mRNA的表达.同时进行环境因素问卷调查,比较两组各环境因素的差异.结果 ①HA组患者Th1、Th17细胞百分比[（11.66±3.45）％、（3.65±0.75）％]均明显高于NNP组[（7.05±1.83）％、（0.72±0.11）％],差异有统计学意义（P＜0.05）,Th2细胞的百分比[（1.15±0.33）％]低于NNP组[（3.59±0.62）％],差异有统计学意义（P＜0.05）.②HA组IFN-γ和IL-17在的含量分别为（1163.27±45.25）μg/L和（162.26±25.28）μg/L,明显高于NNP组[（736.25±44.32）、（57.45±11.26） μg/L],差异有统计学意义（P＜0.05）,而IL-4的含量[（118.45±26.75） μg/L]低于NNP组[（220.45±24.63）μg/L],差异有统计学意义（P＜0.05）.③与NNP组比较,HA组T-bet和STAT-3 mRNA表达均明显升高,而GATA-3 mRNA的表达明显降低,差异均有统计学意义（均P＜ 0.05）.④HA组BMI≥24.0 kg/m2者所占比例为58％,明显高于NNP组（28％）,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 习惯性流产患者IFN-γ、IL-17的水平较高,而IL-4的水平较低,提示习惯性流产患者体内存在T细胞亚群分化失衡,且此种失衡可能与转录因子T-bet、GATA-3和STAT-3 mRNA的调控有关,同时肥胖可增加习惯性流产发生的可能性.     

MiRNA-107在注意缺陷多动障碍儿童外周血中表达的初步研究

目的 探讨miRNA-107、miR-34c-3p在注意缺陷多动障碍(ADHD)儿童中的表达意义。方法 选取2018年1月—2019年9月就诊于杭州市儿童医院儿童保健发育行为专科门诊的ADHD儿童共37名,设为ADHD组,74例杭州市儿童医院同期健康体检儿童设为健康对照组。用定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测外周循环血中miRNA-107、miR-34c-3p相对表达量;根据ROC曲线分析miRNA-107在诊断ADHD中的灵敏度及特异度;分析miRNA-107表达量与ADHD核心症状之间的相关性。结果 ADHD儿童外周循环中miRNA-107的相对表达量降低,与健康对照组比较差异有统计学意义(4.06±1.57 vs. 4.62±1.30,t=1.994,P=0.049),miR-34c-3p相对表达量与健康对照组比较差异无统计学意义;miRNA-107的AUC为0.609,灵敏度为97.3%,特异度为67.6%;相关性分析显示,ADHD女童的miRNA-107表达水平与注意缺陷程度呈负相关关系(r=-0.861,P<0.05)。结论 MiRNA-107可能是潜在...     

急性冠状动脉综合征患者早期冠状动脉病变的评估

  目的  探讨血浆miR-30a与冠状动脉血管内超声（IVUS）在急性冠状动脉综合征（ACS）患者早期冠状动脉病变评估中的作用。   方法  随机入选88例ACS患者，包括稳定性心绞痛组（SA组，42例）和ACS组（46例）。用IVUS检测斑块负荷和重构指数（RI），用Real-time PCR法检测血浆miR-30a的含量。研究ACS组斑块负荷、RI和血浆miR-30a的变化。用Pearson相关性分析斑块负荷、血浆miR-30a和RI的关系。  结果  与SA组比较，ACS组患者斑块负荷增加[（62.82±4.40）%比（68.32±4.59）%]；RI增加（0.90±0.03）比（1.15±0.05）；血浆miR-30a升高[（8.10±1.09）2-ΔΔct*104比（11.66±1.19）2-ΔΔct*104]（P < 0.05）。RI和斑块负荷（r = 0.482，P = 0.000）、血浆miR-30a水平（r = 0.817，P = 0.000）呈正相关。  结论  ACS患者早期已发生冠状动脉正性重构，血浆miR-30a可以作为ACS早期冠状动脉病变的评估指标。     

微小RNA-132转染对体内外肝癌生长和凋亡的作用

目的 观察转染微小RNA-132(miR-132)对体内外人肝癌细胞株MHCC97H生长和凋亡的影响,初步探讨其作用机制。方法 采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测45例肝癌组织及癌旁正常组织中miR-132的表达,CCK-8法、流式细胞术、裸鼠体内成瘤实验和TUNEL实验检验转染miR-132后对体内外MHCC97H细胞生长和凋亡的作用,Western blot法检测体外MHCC97H细胞中p-AKT、Survivin和Caspase 3蛋白的表达,免疫组织化学法检测体内肿瘤组织中Ki-67、Survivin和Caspase 3的表达。结果 miR-132在肝癌组织中的表达明显低于癌旁正常组织(P＜0.05)。在体外实验中,与空白对照组和阴性对照组相比,转染组细胞中miR-132的表达明显升高,细胞増殖明显被抑制,G₀/G₁期细胞比例明显上升,S期细胞比例明显下降,凋亡细胞显著增加(P均＜0.05)。转染组细胞中Survivin和p-AKT的表达下调,Caspase 3的表达上调,与空白对照组和阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P均＜0.05)。在体内实验中,转染组裸鼠皮下移植瘤生长明显被抑制,凋亡肿瘤细胞明显增加,Survivin和Ki-67蛋白表达下调,而Caspase 3表达增加(P均＜0.05)。结论 转染miR-132对体内外肝癌细胞有增殖抑制和凋亡诱导作用,miR-132有望成为肝癌治疗的新靶点。