千金藤素通过PI3K-AKT信号通路抑制前列腺癌细胞DU145增殖、侵袭和迁移北大核心CSCD

目的:探讨千金藤素(CEP)对前列腺癌细胞株DU145增殖、侵袭和迁移的影响及作用机制。方法:CCK-8测定药物浓度对细胞增殖的影响,细胞免疫荧光测定上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白荧光强度,迁移实验及划痕实验测定细胞转移能力,Western blot检测EMT相关蛋白及PI3K-AKT信号通路蛋白表达。结果:CEP≥10μmol/L时,可抑制DU145细胞增殖(P<0.05),Vimentin和Snail表达下降,E-cadherin表达增加(P<0.05),Vimentin荧光强度减弱,E-cadherin荧光强度增强(P<0.05),细胞侵袭迁移能力均被抑制(P<0.05),p-PI3K及p-AKT蛋白表达降低(P<0.05)。结论:CEP可能通过PI3K-AKT信号通路抑制前列腺癌细胞DU145增殖、侵袭和迁移。     

GPC3通过PI3K/AKT通路参与肺鳞状细胞癌的发生发展

目的 通过生物信息学分析GPC3在肺鳞状细胞癌(LUSC)中的差异表达情况并探讨GPC3对LUSC细胞增殖的影响。方法 从GEO数据库下载LUSC的表达谱数据，采用R-studio分析差异表达基因，通过免疫组化方法检测GPC3在LUSC组织和癌旁正常组织的表达情况。构建稳定GPC3高表达及沉默的NCI-H226细胞系，CCK-8法和克隆形成实验检测GPC3对LUSC细胞增殖的影响；Western blot法检测GPC3变化对PI3K/AKT信号通路关键蛋白的影响。结果 GPC3在LUSC中存在差异表达(P<0.01);免疫组化结果发现GPC3在正常组织中不表达，在LUSC组织中表达率为70%。GPC3高表达可促进LUSC细胞的增殖，上调PI3K及pAkt表达。结论 GPC3可能通过调节PI3K/Akt信号通路促进LUSC的细胞增殖。     

miR-let-7a调节PI3K/Akt信号通路抑制人系膜细胞增殖和炎症反应

为探究miR-let-7a对LPS诱导的人系膜细胞(human mesangial cell, HMC)增殖和炎症反应的影响及其通过调节PI3K/Akt信号通路发挥作用的机制,体外条件下用0.1μg/mL LPS处理HMC, CCK-8法检测各时间点细胞活性;Western blotting检测HMC增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、凋亡相关蛋白BAX及信号通路蛋白PI3K、p-Akt的表达情况;qPCR检测细胞中miR-let-7a及炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6和Ⅳ型胶原蛋白mRNA的表达。转染miR-let-7a mimic或inhibitor改变HMC中miR-let-7a的表达,或使用抑制剂LY294002阻断HMC中PI3K/Akt信号通路,观察不同处理对HMC增殖、炎症反应及PI3K/Akt信号通路激活的影响。结果显示,LPS处理可诱导HMC增殖和炎症反应,抑制miR-let-7a的表达(均P<0.05)并激活PI3K/Akt信号通路(均P<0.01);与LPS组相比,过表达miR-l...     

氯喹对人宫颈癌细胞系HeLa增殖、凋亡及自噬的影响

目的 探讨氯喹(CQ)对人宫颈癌细胞系HeLa增殖、凋亡及自噬的影响,并初步探讨其作用机制。方法 将HeLa细胞分为对照组(不加药物)和实验组(氯喹-1组至氯喹-5组,分别用25、50、75、100、150μmol/L CQ处理)。细胞均培养24和48 h; CCK-8法和集落形成实验检测细胞增殖;活性氧检测试剂盒检测细胞内ROS产生;流式细胞测量术检测细胞凋亡率。蛋白免疫印迹检测自噬蛋白p62、LC3和Beclin1,凋亡蛋白Bax、Bcl-2和PARP以及PI3K/AKT/MDM2通路蛋白的表达水平。结果 CQ呈时间和浓度依赖性抑制细胞增殖(P<0.05);CQ显著抑制细胞自噬活性,诱导胞内ROS的产生,诱导细胞凋亡(P<0.05)。与对照组相比,CQ可明显抑制PI3K/AKT/MDM2信号通路的激活(P<0.05)。结论 氯喹可能通过PI3K/AKT/MDM2通路抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖,诱导细胞凋亡。     

BEZ235体内外抑制人乳腺癌细胞系增殖

目的探讨BEZ235体内外抑制乳腺癌细胞的作用。方法选用人三阴乳腺癌细胞系MDA-MB-231及三阳乳腺癌细胞系MCF-7,用MTT检测细胞增殖;用裸鼠荷瘤实验分析乳腺癌细胞系体内增殖;用Western blot法检测PI3K/Akt相关信号通路蛋白的表达。结果 BEZ235对乳腺癌细胞具有明显的增殖抑制作用(P0.01),尤其是对三阴性乳腺MDA-MB-231细胞具有较强的体内外抑制作用(P0.01)。结论 BEZ235可体内外抑制乳腺癌细胞,其机制可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路蛋白的磷酸化修饰而实现的。     

阿糖胞苷通过调控miR-126表达抑制急性髓系白血病细胞增殖及诱导细胞凋亡的分子机制研究北大核心CSCD

目的:探讨阿糖胞苷是否可通过调控微小RNA-126(miR-126)表达抑制急性髓系白血病细胞增殖及诱导细胞凋亡。方法:体外培养急性髓系白血病细胞HL-60,分别加入不同浓度的阿糖胞苷处理;采用甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-126的表达量;分别将miR-126 mimics、antimiR-126转染至HL-60细胞,采用上述方法检测细胞增殖及凋亡;Western blot检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原67(Ki67)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved-caspase-3)与磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路相关蛋白磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的表达量。结果:阿糖胞苷可显著降低细胞增殖率(P<0.05),增高细胞凋亡率(P<0.05),抑制Ki67、p-PI3K、p-AKT表达(P<0.05),促进miR-126、Cleaved-caspase-3表达(P<0.05);转染miR-126 mimics后,细胞增殖率显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),Ki67蛋白水平显著降低(P<0.05),Cleavedcaspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05),而转染anti-miR-126的作用与之相反;转染anti-miR-126可降低阿糖胞苷对HL-60细胞增殖及凋亡的作用,并可促进p-PI3K、p-AKT的表达(P<0.05)。结论:阿糖胞苷可能通过上调miR-126表达及抑制PI3K/AKT信号通路的活化从而抑制急性髓系白血病细胞增殖及诱导细胞凋亡。     

乌骨藤提取物通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制黑色素瘤细胞的活力并诱导细胞凋亡

目的:探究乌骨藤提取物(Marsdenia tenacissima extract,MTE)对黑色素瘤细胞活力及凋亡的作用及机制。方法:用不同浓度(0、50、100和200 mg/L) MTE处理小鼠皮肤黑色素瘤B16-F10细胞24 h或不同浓度MTE处理不同时间(0、24、48、72和96 h),MTT法检测细胞活力。流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞增殖、凋亡和PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白的表达,同时检测通路激动剂胰岛素样生长因子1(IGF-1)处理细胞后p-PI3K及细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达。结果:根据预实验结果,选择MTE作用时间为72 h。MTE浓度为100 mg/L和200 mg/L时能明显抑制B16-F10细胞活力及增殖相关蛋白Ki67和PCNA的表达,并且还可诱导B16-F10细胞凋亡,提高凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的蛋白水平;同时,MTE还可显著降低p-PI3K、p-AKT和mTOR的蛋白水平;此外,激动剂IGF-1可明显减弱MTE抑制细胞活力及诱导细胞凋亡的作用。结论:MTE可通过下调PI3K/AKT/mTOR通路活性抑制黑色素瘤细胞活力,诱导细胞凋亡。     

miRNA-7通过EGFR/PI3K/Akt通路抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖

 目的:探讨过表达微小RNA（microRNA-7,miRNA-7）对鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,NPC）5-8F细胞增殖能力的抑制作用及其与表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）/磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,PKB,也称Akt）通路的关联情况。方法:利用脂质体试剂Lipofectamine 2000将miRNA-7模拟物转染入人鼻咽癌5-8F细胞中;采用real-time PCR法检测转染后各组细胞中miRNA-7的表达情况;CCK-8法检测细胞增殖能力变化;细胞平板克隆形成实验观察转染后细胞克隆能力变化情况;real-time PCR法检测EGFR/PI3K/Akt通路各mRNA表达水平的变化;Western blotting法检测EGFR/PI3K/AKT通路各蛋白表达水平的变化。结果:real-time PCR结果显示,转染miRNA-7模拟物组细胞中的miRNA-7表达水平显著高于无关序列组和空白对照组（P<0.01）;5-8F细胞转染miRNA-7模拟物后,细胞增殖和平板克隆能力均呈明显下降（P<0.01）;real-time PCR及Western blotting结果显示,转染组的5-8F细胞中EGFR/PI3K/Akt通路中各主要成员的mRNA及相应蛋白表达水平均有明显降低(P<0.01)。结论: 过表达miRNA-7可以显著降低鼻咽癌5-8F细胞中EGFR/PI3K/Akt通路各主要成员mRNA和蛋白的表达水平,进而显著抑制其增殖和平板克隆形成能力。     

胃癌中TRIM11的表达及其对PI3K/Akt信号通路的影响

目的 探讨胃癌组织中三结构域蛋白11(tripartite motif containing 11, TRIM11)的表达及其对胃癌细胞PI3K/Akt信号通路的影响。方法 收集120例行手术切除的胃癌组织和对应癌旁组织,采用qRT-PCR和免疫组化法检测胃癌组织和癌旁组织中TRIM11 mRNA和蛋白的表达水平,并分析TRIM11 mRNA表达与胃癌临床病理特征的相关性。体外培养胃癌细胞系AGS,转染TRIM11-siRNA 24 h后,EdU检测胃癌细胞增殖情况,流式细胞仪检测胃癌细胞凋亡情况,Western blot法检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达变化。结果 癌旁组织中TRIM11阳性率为11.7%(14/120),胃癌组织中TRIM11阳性率为80.8%(97/120),差异有统计学意义(P<0.01),且TRIM11表达与胃癌临床分期、浸润深度、淋巴结转移相关(P<0.05)。与正常胃黏膜上皮细胞相比,胃癌细胞中TRIM11 mRNA表达升高(P<0.01)。与Control组相比,TRIM11-siRNA组胃癌细胞的增殖显著降低(P<0.0...     

PI3K-AKT信号通路及其在类风湿性关节炎滑膜细胞增殖和凋亡中的作用

PI3K-AKT信号通路是重要的细胞内信号转导通路,与类风湿性关节炎(RA)的发生发展密切相关。该信号通路的活化状态受到严密调控:包括负调控因子PTEN、SHIP和正调控因子TNF-α、TGF-β、TRAIL等。RA患者滑膜细胞中此信号通路处于异常激活状态,导致下游抗凋亡基因高表达并且影响下游多种效应分子,在RA患者关节滑膜细胞增殖和凋亡失衡中发挥关键作用。过度增生的滑膜细胞向关节软骨和骨组织浸润生长,导致患者关节畸形和功能障碍。因此,使用PI3K-AKT信号通路抑制剂或上调该信号通路中的内源性负性调节蛋白的表达可逆转RA滑膜细胞的过度增殖,为治疗此疾病提供新靶点。     

慢病毒介导的RNA干扰沉默Slug基因对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术沉默Slug基因,观察对结肠癌HCT116细胞增殖和周期的影响。方法:构建Slug基因特异性siRNA慢病毒载体,感染结肠癌HCT116细胞,设立空白对照组、阴性对照组及SlugsiRNA三组,应用Real-time PCR和Western blot方法分别从基因和蛋白质水平检测各组干扰质粒对Slug基因的干扰效果,MTT法检测Slug基因在siRNA作用下的细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞凋亡周期变化情况。结果:转染Slug siRNA后,结肠癌HCT116细胞中Slug基因mRNA和蛋白表达明显受到抑制(P<0.05);MTT检测,干扰组细胞增殖水平明显低于阴性对照组;流式细胞仪检测细胞G1期细胞百分比(52.3±0.6)高于阴性对照组(45.1±0.3,P<0.05)。结论:Slug siRNA能明显下调靶基因Slug的表达,在体外可抑制结肠癌HCT116细胞的生长并促进其凋亡。     

lncRNA HOXB-AS3 通过激活 PI3K-AKT 通路加剧急性髓样白血病 患者细胞的增殖、 凋亡、 迁移和侵袭

目的 探究 lncRNA HOXB-AS3 对急性髓样白血病 (acute myeloid leukemia, AML) 的增殖、 凋亡 和侵袭的影响和机制。 方法 RT-qPCR 检测 AML 患者骨髓单核细胞 (BMMCs) 和细胞系中 lncRNA HOXB-AS3 相对表达量。 慢病毒转染建立稳定表达 shRNA-HOXB-AS3-01, shRNA-HOXB-AS3-02 和 shRNA-HOXB-AS3-03 的 THP1 和 HL60 细胞系。 CCK-8 实验、 EdU 实验、 流式细胞术实验和 Transwell 实验分别检测 THP1 和 HL60 细胞活力、 增殖、 凋亡和侵袭能力, Western 印迹检测蛋白相对表达量。 建立裸鼠 AML 移植瘤模 型, 体内验证 HOXB-AS3 低表达对肿瘤生长的影响。 结果 lncRNA HOXB-AS3 在 AML 患者 BMMCs 和细胞 系中的表达量显著增加。 在细胞实验中, HOXB-AS3 低表达显著抑制 THP1 和 HL60 细胞活力、 增殖和侵 袭, 增加细胞凋亡率, 上调 cleaved caspase-3、 cleaved caspase-9 和 E-cadherin 蛋白的表达, 下调 N-cadherin、 VEGF、 PI3Kp85α 和 p-AKT 蛋白的表达。 在体内实验中, HOXB-AS3 低表达显著抑制肿瘤生长, 下调 PI3Kp85α 和 p-AKT 蛋白表达。 结论 lncRNA HOXB-AS3 通过激活 PI3K-AKT 通路加剧 AML 细胞的增殖、 凋亡和侵袭。     

Dasatinib suppresses invasion and induces apoptosis in nasopharyngeal carcinoma

Dasatinib, an orally available tyrosine kinas inhibitor (TKI), potently inhibits SRC which was found to activate RTKs that induce trastuzumab de novo and acquired resistance. To evaluate the potential of Dasatinib in the treatment of Nasopharyngeal Carcinoma, we used a variety of assays to measure its effects on cell proliferation, apoptosis, and migration. This work aimed to test the antitumor effects of the inhibitor in vitro to determine whether in vivo analyses were warranted. Cell growth rate and 50% inhibitory concentration was calculated by MTT assay. Dasatinib-induced apoptotic cells were investigated by Annexin V/PI staining. Proteins from cell extracts were analyzed by Western blot. Cell motility was investigated by Transwell. Our study showed that Dasatinib significantly inhibited CNE2 proliferation and induced apoptosis in vitro. Phospho-AKT, phospho-MEK, phospho-ERK expression was significantly reduced when treated with dasatinib which means the downregulated RAS/RAF/MEK/ERK and PI3K/AKT pathway activity. Dasatinib significantly inhibited the motility of CNE2 as well as Phospho-FAK expression. Dasatinib exhibit antitumor effects of nasopharyngeal carcinoma by downregulating MAPK and PI3K/AKT pathways activity and FAK phosphorylation. This suggests that dasatinib would have therapeutic activity against NPC.     

ITIH4基因沉默对人肝癌细胞HepG2增殖、迁移及侵袭的影响

目的:探讨沉默间-α-胰蛋白酶抑制剂重链H4(inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H4,ITIH4)基因对人肝癌细胞系HepG2增殖、迁移及侵袭的影响.方法:将4个ITIH4基因沉默载体分别转染HepG2细胞,用2 mg/L嘌呤霉素筛选获得稳定表达细胞株.Western印迹评价沉默效率,并选择效率最高的细胞株(si-ITIH4)用于后续实验.转染无意义序列的细胞株(si-Control)作为对照组.分别用细胞计数及CCK-8细胞计数试剂盒评价两组细胞增殖.用Transwell小室评价两组细胞的迁移及侵袭.结果:成功获得ITIH4基因沉默的HepG2细胞株si-ITIH4,与si-Control组相比,si-ITIH4组沉默效率达到86%.与si-Control组相比,si-ITIH4组细胞增殖显著降低、细胞迁移及侵袭均显著减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论:ITIH4基因沉默可显著抑制HepG2的增殖、迁移及侵袭,提示其可能是参与肝细胞癌发生发展的重要基因之一.     

上调GDF-15 表达对H2O2 诱导的H9C2 心肌细胞生物学特性及PI3K/ AKT 信号通路的影响

目的：探讨上调生长分化因子-15（GDF-15）的表达对H₂O₂诱导的H9C2心肌细胞增殖、凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法：CCK8法检测不同浓度的H₂O₂处理H9C2心肌细胞后的细胞增殖情况;H9C2心肌细胞分为Control组、NC组、H₂O₂组、GDF-15+H₂O₂组,各组细胞处理24 h后收集细胞,RT-PCR及Western blot分别检测各组细胞中GDF-15的mRNA及蛋白表达;CCK8法及流式细胞术分别检测细胞的增殖和凋亡情况;2′,7′-二氯二氢荧光素黄二乙酸酯（DCFH-DA）探针检测细胞活性氧簇（ROS）水平;Western blot检测Ki67、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、PI3K、p-AKT蛋白表达。10 μmol/L的PI3K/AKT信号通路抑制剂LY294002处理H9C2心肌细胞,通过CCK8法及流式细胞术分别检测GDF-15+H₂O₂组及PI3K/AKT信号通路抑制剂组细胞活力及凋亡率,Western blot检测Ki67、Bcl-2、Bax、PI3K、p-AKT蛋白表达。结果：不同浓度H₂O₂处理H9C2心肌细胞后,细胞活力均受到抑制,且有浓度依赖性（P<0.05）,由于200 μmol/L的H₂O₂处理H9C2心肌细胞后可抑制将近一半的细胞增殖,选择200 μmol/L的H₂O2作为研究对象;与Control组比较,H2O2组GDF-15的mRNA及蛋白表达均显著升高,细胞增殖显著降低,凋亡率增加,ROS水平升高,Ki67、Bcl-2、PI3K、p-AKT蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高（P<0.05）;与H₂O₂组比较,GDF-15+H₂O₂组细胞GDF-15的mRNA及蛋白表达均显著升高,细胞增殖显著增加,凋亡率降低,ROS水平降低,Ki67、Bcl-2、PI3K、p-AKT蛋白表达升高,Bax蛋白表达降低（P<0.05）。PI3K/AKT信号抑制剂组细胞活力及Bcl-2、PI3K和p-AKT的蛋白表达均显著低于GDF-15+H₂O₂组,细胞凋亡率及Bax蛋白表达显著高于GDF-15+H₂O₂组（P<0.05）。结论：上调GDF-15表达可促进H₂O₂诱导的H9C2心肌细胞增殖,降低细胞凋亡,其机制可能与调节细胞中ROS水平,Ki67、Bcl-2、Bax表达及PI3K/AKT信号通路有关。     

黑色素瘤与活化B淋巴细胞融合株的建立及体内外的生长特性

以５０％ＰＥＧ为融合剂，将Ｃ５７ＢＬ／６来源的Ｂ１６黑色素瘤与ＬＰＳ活化的Ｃ５７ＢＬ／６小鼠Ｂ淋巴细胞进行融合。融合细胞经ＨＡＴ选择性培养基的筛选，用有限稀释法克隆到一表达Ｈ－２Ｋｂ和Ｂ７的融合瘤株。与Ｂ１６相比，该融合瘤株在体外生长缓慢，接种Ｃ５７ＢＬ／６小鼠发现其体内的致瘤性也有下降。实验结果提示：与活化的Ｂ淋巴细胞融合可以改变瘤细胞的免疫生物学特性。     

LASP-1稳定转染对人结肠癌细胞株SW480细胞增殖及成瘤能力的影响

目的 探讨LIM和SH3蛋白1(LASP-1)对人结直肠癌细胞株体内外增殖能力的影响.方法 用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测LASP-1在结直肠癌细胞株中的表达,筛选LASP-1不/低表达细胞株;将LASP-1 cDNA导入内源性低表达LASP-1基因的人结直肠癌细胞株SW480细胞中,同时构建带绿色荧光蛋白(CFP)的表达载体转染SW480细胞株,G418筛选抗性克降,经鉴定后利用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测LASP-1对细胞体外增殖的影响,通过整体成像系统观察LASP-1对细胞在裸鼠体内成瘤能力及肿瘤生长能力的影响.结果 成功构建pcDNA3-LASP-1和pEGFP-LASP-1表达载体,将其稳定转染低表达LASP-1的SW480细胞中.通过7 d连续比较,LASP-1基因的导入明显促进结直肠癌细胞的体外增殖能力.裸鼠皮下注射携带GFP的稳定细胞系,整体成像观察过表达LASP-1的细胞成瘤能力和肿瘤生长速度均强于对照细胞.结论 LASP-1基因具有促进结直肠癌细胞增殖的能力,可能作为结直肠癌发生过程中一个有价值的指标.

Abstract：

Objective To investigate the effect of LIM and SH3 protein 1 (LASP-1)expression on the proliferative ability of human colorectal cancer cells in vitro and in vivo. Methods RT-PCR and Western blot were used to screen cells of the colorectal cancer cell line with no or with minimal endogenous LASP-1 expression. LASP-1 cDNA with or without GFP was transfected into SW480 colorectal cancer cells with minimal LASP-1 expression. Stable transfectants were established after G418 selection. Cell proliferative capacity was assessed by MTT assay. Tumor growth was visualized by whole-body imaging system. Results pcDNA3-LASP-1 and pEGFP-LASP-1 vectors were successfully constructed and transfected into the SW480 cells. After comparative study for 7 days, LASP-1 over-expression was found capable of enhancing signific antly the proliferation of colorectal cancer cells in vitro. Stable transfectants with GFP expression were inoculated subcutaneously into the nude mice. Tumorigenesis and proliferation ability of LASP-1-overexpressed transfectants were higher than those of the control cells. Conclusion LASP-1 gene expression enhances proliferation of colorectal cancer cells and may serve as a useful marker for colorectal cancer progression.     

奥沙利铂调控PI3K/Akt信号通路抑制脑胶质瘤细胞株U87生长的作用研究

目的：研究奥沙利铂（Oxaliplatin,Ox）调控PI3K/Akt信号通路抑制脑胶质瘤细胞株U87生长的作用。方法：培养U87脑胶质瘤细胞,分别利用0、20、40、80 μg/ml的奥沙利铂处理U87细胞24、36、48、72 h,利用MTT检测各处理组细胞增殖情况;利用流式细胞仪检测40 μg/ml的奥沙利铂处理48 h对U87细胞周期及细胞凋亡的影响;Western blot检测40 μg/ml 的奥沙利铂处理48 h对U87细胞凋亡相关蛋白及PI3K/Akt信号通路蛋白表达的影响。结果：奥沙利铂处理抑制U87细胞增殖,与0 μmol/L处理相比,差异显著（P<0.01）,40 μg/ml的奥沙利铂处理48 h差异最显著。40 μg/ml的奥沙利铂处理48 h后,U87细胞周期被阻滞在S期,U87细胞凋亡显著增加（P<0.01）,抑凋亡因子Bcl-2蛋白表达明显下降,促凋亡因子Bax、Cleaved-caspase3蛋白表达明显升高（P<0.01）,PI3K及p-Akt的表达量明显降低（P<0.01）,Akt表达量无明显差异（P>0.05）。结论：奥沙利铂可能通过抑制PI3K/Akt信号通路抑制U87细胞增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡。     

葡萄糖调节蛋白78在宫颈癌细胞衰老过程中的表达研究

目的探讨葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein，GRP78）在顺铂诱导宫颈癌细胞衰老过程中的表达变化情况及相关机制。方法亚凋亡剂量顺铂诱导宫颈癌细胞衰老；β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况；P1染色流式细胞仪检测细胞周期变化；Western blot检测GRP78蛋白表达情况；siRNA反义抑制GRP78表达，western blot检测DNA损伤修复基因ATM（ataxia—telangiectasia mutated）通路相关基因表达情况。结果亚凋亡计量顺铂能够成功诱导宫颈癌细胞衰老，细胞主要阻滞于G2／M期。Western blot检测表明在宫颈癌细胞衰老过程中GRP78蛋白表达明显降低。反义抑制GRP78蛋白表达后ATM通路相关蛋白P53及p-Cdc2表达明显升高，而Cdc2蛋白表达明显降低。结论GRP78蛋白在顺铂诱导宫颈癌细胞衰老过程中起抵抗作用，主要可能通过影响ATM通路相关基因的表达发挥作用。