针刺耳穴对血管性痴呆大鼠学习记忆及海马胆碱乙酰转移酶表达的影响

目的探讨针刺耳穴治疗血管性痴呆(VD)大鼠的机制。方法四血管阻断法建立VD大鼠模型,造模后针刺"肾"、"心"耳穴治疗,用Morris水迷宫检测大鼠空间记忆能力,免疫组织化学法检测其海马胆碱乙酰转移酶(Ch AT)免疫反应阳性细胞表达。结果针刺耳穴后,VD大鼠学习记忆能力明显提高(P0.01,P0.05),海马Ch AT免疫反应阳性神经元明显增多(P0.05)。结论针刺"肾"、"心"耳穴可改善VD大鼠学习记忆功能,可能与其促进Ch AT在脑的表达、保护胆碱能神经元有关。     

促红细胞生成素对慢性脑缺血大鼠认知障碍及海马星形胶质细胞的影响

目的 观察促红细胞生成素干预后慢性脑缺血大鼠的空间学习记忆功能及海马星形胶质细胞的变化.方法 结扎大鼠双侧颈总动脉建立慢性脑缺血模型,治疗组术后给予EP01 000 U/kg腹腔内注射5d.术后第8周时3组大鼠Morris水迷宫测试后断头取脑做免疫组化检测观察CA1区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达.结果 缺血组水迷宫表现同假手术组和EPO治疗组相比有显著差异(P＜0.01).EPO干预能改善慢性脑缺血大鼠的空间学习记忆能力(P＜0.01).缺血组海马CA1区GFAP表达较假手术组相比明显增多,而EPO组海马CA1区GFAP表达同缺血组相比明显降低(P＜0.01).海马CA1区GFAP阳性细胞数与学习记忆能力呈负相关.结论 EPO能显著改善慢性脑缺血大鼠认知障碍,机制可能与减少海马星形胶质细胞增生有关.     

盐酸多奈哌齐对淀粉样蛋白致痴呆树鼩的治疗作用

目的探讨盐酸多奈哌齐对树鼩侧脑室内注射β-淀粉样蛋白(Aβ)后星形胶质细胞及成熟神经细胞的影响。方法采用GFAP和NeuN免疫组织化学方法检测各组树鼩大脑皮质和海马CA1、CA3、DG区星形胶质细胞和成熟神经元的表达。结果模型组树鼩额叶皮质和海马区GFAP阳性星形胶质细胞数明显高于对照组(P<0.01);治疗组海马(P<0.01)和皮质(P<0.05)GFAP阳性细胞数明显低于模型组。模型组树鼩额叶皮质和海马区NeuN阳性成熟神经元数明显少于对照组(P<0.01);治疗组树鼩海马CA1、CA3区(P<0.05)和额叶皮质(P<0.01)NeuN阳性成熟神经元明显多于模型组。结论盐酸多奈哌齐能抑制Aβ_(1~40)引起的树鼩星形胶质细胞的活化,减轻Aβ对成熟神经元的损伤。     

大鼠在空间辨别性学习记忆时海马CA3区星形胶质细胞的变化

目的观察大鼠在空间辨别性学习记忆时海马CA3区星形胶质细胞的变化,从而探讨星形胶质细胞与空间辨别性学习记忆的关系。方法以水迷宫法建立大鼠空间辨别性学习记忆动物模型,用星形胶质细胞GFAP免疫组织化学方法检测星形胶质细胞的数量和星形胶质细胞GFAP反应产物的AOD数值。结果具有空间辨别性学习记忆能力的大鼠海马星形胶质细胞的数量和星形胶质细胞GFAP反应产物的AOD数值均比对照组增加(P0.05)。结论星形胶质细胞参与空间辨别性学习记忆的过程,并与记忆的巩固有关。     

碘过量对成年大鼠海马胶质原纤维酸性蛋白的影响

目的研究碘过量对Wistar成年大鼠海马星形胶质细胞的影响。方法断乳一个月Wistar大鼠，雌雄各半，随机分为4组：适碘组（NI），10倍碘组（10HI），50倍碘组（50HI）和100倍碘组（100HI）。给予不同浓度碘酸钾水喂养6个月后，处死，取大脑，应用免疫组织化学技术观察海马CA，区星形胶质细胞，并对胶质原纤维酸性蛋白GFAP反应阳性细胞进行形态计量学分析。结果各碘过量组海马GFAP阳性细胞的Vv，NA和细胞质的平均灰度值与NI组比较均无明显差异（P〉0．05）。结论碘过量不会造成Wistar成年大鼠海马神经元的明显损伤，其星形胶质细胞Vv，NA和细胞质的平均灰度值无明显改变。     

雌激素对Aβ1-40诱导大鼠星形胶质细胞和NOS阳性细胞变化的影响

目的 探讨雌激素对淀粉样β蛋白诱导大鼠星形胶质细胞及NOS阳性细胞变化的影响.方法 于雄性SD大鼠双侧海马注射Aβ1～40,制作AD大鼠病理模型,颈部皮下植入E2,60 d后取脑行冻切片.采用组化和免疫组化方法,观察大鼠海马GFAP与NOS阳性细胞表达的变化,以及雌激素对上述指标的影响.结果 AD大鼠出现海马星形胶质细胞增生、肥大,数量明显多于正常对照组（P＜0.05）,并出现一氧化氮阳性星形胶质细胞;海马一氧化氮神经元数量较正常对照组显著减少（P＜0.05）.E2处理组星形胶质细胞增生不明显,数量明显少于AD模型组（P＜0.05）,且未见一氧化氮阳性星形胶质细胞;海马一氧化氮神经元数量较AD模型组显著增加（P＜0.05）.结论雌激素可减轻神经系统的损伤,对AD有一定防治作用,但其作用机制尚需进一步探讨.     

姜黄素对Aβ诱导的老年痴呆大鼠海马胶质纤维酸蛋白表达的影响

目的通过观察姜黄素对Aβ1～40诱导的阿尔茨海默病(AD)大鼠空间学习记忆能力及海马区星形胶质细胞胶质纤维酸蛋白(GFAP)表达的影响,探讨姜黄素的作用机制。方法选择健康SD大鼠48只,分为空白对照组、AD对照组、姜黄素给药组,每组16只。Aβ1～40诱导大鼠认知障碍模型,采用Morris水迷宫测定大鼠的学习记忆能力。采用免疫组织化学方法检测GFAP蛋白表达,RT-PCR检测GFAP mRNA表达。结果姜黄素干预后AD大鼠空间学习记忆能力明显改善(P<0.05);与空白对照组相比,AD对照组大鼠脑组织海马区可见星形胶质细胞GFAP表达明显增多(P<0.05),姜黄素给药组大鼠脑组织海马区GFAP mRNA及免疫阳性细胞表达较AD对照组下降(P<0.05)。结论姜黄素能够改善Aβ1～40诱导的AD模型大鼠空间学习记忆障碍,其机制可能与降低GFAP的表达和抑制星形胶质细胞活性有关。     

雌激素对小鼠大脑中动脉缺血后海马星形胶质细胞变化的研究

目的探讨雌激素对小鼠大脑中动脉缺血后海马星形胶质细胞动态变化的影响。方法雄性昆明小鼠108只随机分为雌激素组(术前7d按体质量0.1ml/10g每日定时腹腔注射17β雌二醇)54只和对照组(腹腔注射生理盐水)54只,2组均行永久性右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)术,分别于MCAO术后3、6、12、24、48和72h取材,TTC染色法观察2组小鼠脑缺血部位及范围;苏木精-伊红染色观察海马神经元的变化;免疫组织化学法观察海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达变化。结果雌激素组术后各时间点脑梗死体积明显低于对照组(P0.05,P0.01),以缺血12h最为明显[(31.50±3.36)%vs (54.50±5.68)%,P=0.019]。2组海马神经元损伤程度随缺血时间的延长而加重,且相同时间点,雌激素组缺血侧海马神经元损伤程度均较对照组轻。2组双侧海马各区GFAP阳性细胞表达均随缺血时间延长而增多(P0.05);除CA3区缺血6h时,雌激素组缺血侧GFAP阳性细胞表达均较对照组增多(P0.05),突触增粗延长,树突棘分布较密集。结论雌激素对小鼠局灶性脑缺血具有神经保护作用,可刺激星形胶质细胞突触的发生,减轻缺血后神经元损伤,从而减小脑梗死体积。     

肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β在淀粉样蛋白致阿尔茨海默病大鼠神经元损伤中的作用

目的探讨炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β在淀粉样蛋白(Aβ)致阿尔茨海默病(AD)大鼠中的作用。方法20只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组,双侧海马注射Aβ制作AS模型,水迷宫实验记录大鼠寻找平台潜伏期;硫堇染色观察海马神经元形态、数量;胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化检测胶质细胞;ELISA方法检测大鼠血清中TNF-α、IL-1β含量。结果模型组大鼠寻找平台潜伏期时间较对照组明显延长,模型组大鼠海马神经元数量较对照组明显减少,形态异常;免疫组化显示模型组大鼠海马GFAP阳性细胞数增多,模型组血清中TNF-α、IL-1β较对照组明显升高。结论 Aβ可能激活胶质细胞,后者分泌炎症因子引起神经元损伤,导致学习、记忆能力下降。     

碘过量对仔鼠海马GFAP阳性星形胶质细胞的影响

目的探讨碘过量与甲状腺激素对仔一代Wistar大鼠大脑海马星形胶质细胞的形态学影响。方法将断乳后1个月Wistar大鼠随机分为5组(NI、5HI、10HI、50HI、100HI),饮用不同浓度的KIO3碘水,饲养3个月后雌雄合笼,取60日龄仔鼠大脑,应用免疫组织化学技术观察海马CA1、CA2、CA3、CA4区星形胶质细胞,并进行形态计量学分析。结果与NI组比较,50HI、100HI组的海马各区GFAP阳性星形胶质细胞面数密度、平均灰度值和阳性细胞的强阳性率均明显降低。结论长期严重碘过量会影响仔鼠甲状腺激素水平,阻碍其大脑海马星形胶质细胞发育,其机理可能与碘过量所致的甲状腺功能低下有关,但大鼠对碘过量有极强的耐受力,当碘摄入量为正常摄入量的50倍以内时,不会影响仔鼠大脑海马星形胶质细胞的发育。     

倍美力对去卵巢痴呆模型大鼠行为学及不同脑区胆碱乙酰转移酶的干预作用

目的 观察去卵巢痴呆大鼠行为学及额叶皮质、基底前脑、海马CA1区胆碱乙酰转移酶(ChAT)的变化及倍美力对其影响,探讨倍美力的脑保护机制.方法 采用穹窿海马伞切除术及双侧卵巢切除制备痴呆及雌激素缺乏复合模型鼠,采用Morris水迷宫观察其行为学变化,利用RT-PCR法观察大鼠额叶皮质、基底前脑、海马CA1区ChAT mRNA的变化.结果 倍美力干预组大鼠学习、记忆能力增强,额叶皮质、基底前脑、海马CA1区ChAT mRNA表达增加(均P＜0.01).结论 倍美力可通过增加额叶皮质、基底前脑、海马CA1区ChAT mRNA表达,改善模型鼠学习及记忆能力.     

大鼠脑发育临界期内甲亢和甲减对中枢胆碱能神经元发育的影响

对20日龄的甲亢及甲减大鼠的海马、大脑皮层、前脑基底和小脑中乙酰胆碱转移酶(CHAT)、乙酰胆碱酯梅(ACHE)各亚类的活性进行了测定.结果显示,胆碱能神经元是甲状腺激素的靶神经元.在脑发育临界期,甲亢和甲减均会造成各脑区胆碱能神经元突触发育障碍.甲状腺激素缺乏可使胆碱能神经元的发育和成熟明显落后,而甲状腺激素水平增高对胆碱能神经元成熟的影响在各脑区有差异:在大脑皮层增高,海马降低,前脑基底和小脑无明显变化.由于CHAT和ACHE对甲状腺激素水工的改变在不同脑区反应的差异可能造成乙酰胆碱的代谢紊乱.     

急性心肌损伤后大鼠孤束核的FOS核神经胶质原纤维酸性蛋白表达的变化

目的：观察急性心肌损伤后大鼠延髓孤束核(Nucleus Tractus Solitarii, NTS)神经元和星形胶质细胞的反应。方法：向心肌内注射福尔马林造成急性心肌损伤，免疫荧光染色观察NTS中Fos阳性和GFAP阳性细胞的反应情况。结果：急性心肌损伤后2 h，大鼠NTS中Fos阳性神经元显著升高，4 h达到峰值，然后开始下降。急性心肌损伤后4 h GFAP阳性星形胶质细胞荧光强度明显增强，24 h达到高峰然后下降。结论：急性心肌损伤后，大鼠延髓NTS中神经元和星形胶质细胞被心肌伤害性刺激激活，参与心肌损伤后疼痛的中枢调控。     

双(7)-他克林对慢性脑缺血老龄鼠海马胶质细胞可塑性及学习记忆功能的干预作用

目的探讨双(7)-他克林(B7T)对持续性低血流灌注脑缺血老年大鼠学习记忆损害及海马胶质细胞可塑性的干预作用。方法雄性SD大鼠30只,随机分为缺血组、对照组和干预组,每组10只。Morris水迷宫实验评估大鼠学习记忆功能,免疫组织化学染色及图像分析技术检测海马CA1区胶质细胞的数量、胞质突起长度等可塑性变化。结果缺血组海马CA1区锥体细胞排列稀疏紊乱,凋亡多见;对照组和干预组锥体细胞排列整齐而密集,凋亡细胞少见。缺血组海马CA1区胶质细胞酸性蛋白(GFAP)阳性细胞和胞质突起长度明显少于对照组和干预组。缺血组逃逸时间明显多于对照组和干预组;缺血组在平台象限停留时间和跨越平台区域的次数明显少于对照组和干预组(P<0.05.P<0.01)。缺血组、对照组及干预组海马CA1区GFAP阳性细胞的数量、胞质突起长度与空间记忆改善呈正相关。结论 B7T可通过促进海马胶质细胞的可塑性改变,改善慢性脑缺血所致的学习记忆认知障碍。胶质细胞的可塑性变化是学习记忆功能改善的重要病理修复机制。     

成年大鼠神经元和星形胶质细胞细胞周期蛋白依赖激酶的表达

目的 研究成年大鼠细胞周期蛋白依赖激酶（CDK）在神经元和星型胶质细胞的表达.方法 应用免疫荧光和激光扫描共聚焦显微镜观察成年大鼠生理状态下大脑皮层或海马CA1区神经元和星型胶质细胞CDK1、CDK2、CDK4的表达.结果 成年大鼠大脑皮层和海马CA1区神经元的细胞核和细胞浆均有CDK1、CDK2和CDK4表达,以胞核为主;星形胶质细胞也有CDK1、CDK2和CDK4的表达,但表达细胞数目较少,且表达这些指标的星形胶质细胞多聚集在海马CA1区.结论 成年大鼠大脑皮层和海马区的神经元和星形胶质细胞均表达CDK,而神经元的CDK表达较星形胶质细胞更为普遍.     

脑益康对AD大鼠学习记忆及海马NGF—TrkA mRNA表达的影响

目的 探讨中药复方脑益康对阿尔茨海默病(AD)大鼠学习、记忆能力及海马NGF-TrkA mRNA表达的影响.方法 采用脑立体定位仪自双侧Meynert核(nucleus basalis of Meynert,NBM)注射鹅膏蕈氨酸(Ibotenic acid,IBO)建立AD大鼠模型,分别给予不同剂量脑益康对AD大鼠进行治疗.采用Y-迷宫刺激器分别测试大鼠的学习、记忆能力,尼氏染色法显示基底前脑尼氏小体的变化,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测海马NGF-TrkA mRNA的表达.结果 脑益康能提高IBO损伤双侧NBM、建立AD大鼠模型的学习记忆能力、改善AD大鼠基底前脑病理改变、上调海马NGF-TrkA mRNA表达.结论 脑益康能提高AD大鼠的学习、记忆能力,其机制与增加NGF-TrkA mRNA的表达、保护胆碱能神经元有关.     

穴位埋线联合盐酸甲氯芬酯对血管性痴呆大鼠海马CA1区几种重要蛋白质表达的影响

目的探讨穴位埋线与盐酸甲氯芬酯联合治疗血管性痴呆(VD)大鼠的神经生化机制。方法改良四血管阻断法建立VD大鼠模型;造模后分3个治疗组,分别为盐酸甲氯芬酯治疗组、"肾俞"、"足三里"穴位埋线治疗组(埋线组)及盐酸甲氯芬酯联合穴位埋线组(联合组);免疫组织化学SABC法检测并比较各组大鼠海马CA1区内三种重要蛋白质的表达情况:胆碱乙酰转移酶(Ch AT)、脑源性神经营养因子(BDNF)及半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)。结果经联合治疗后,大鼠海马CA1区Ch AT、BDNF免疫反应阳性神经元数目明显增多,Caspase-3阳性神经元数目明显减少,各项指标与单独治疗组相比,差异明显(P0.05,P0.01)。结论盐酸甲氯芬酯联合穴位埋线治疗法,对VD大鼠海马胆碱能神经元具有良好的保护作用,这可能与其上调海马BDNF及下调Caspase-3密切相关。     

山楂叶总黄酮对血管性痴呆大鼠学习记忆的干预作用及机制

目的探讨山楂叶总黄酮(TFHL)对血管性痴呆(VD)大鼠空间学习记忆障碍的治疗作用及机制。方法健康雄性SD大鼠60只,随机分为假手术组、模型组、TFHLⅠ、Ⅱ、Ⅲ组,每组12只。模型组、TFHL各组采用永久性双侧颈总动脉结扎法制备VD模型,TFHLⅠ、Ⅱ、Ⅲ组分别给予TFHL70、140、280 mg·kg-1·d-1灌胃,连续给药36 d。采用Morris水迷宫评价大鼠学习记忆能力,免疫组化法检测神经胶质酸性蛋白(GFAP)的表达,分光光度比色法检测海马组织内乙酰胆碱酯酶(ACh E)和乙酰胆碱转移酶(Ch AT)活性的改变。结果 TFHLⅠ组可明显改善VD大鼠学习记忆能力,缩短大鼠逃避潜伏期(P0.05),增加大鼠穿越平台次数(P0.05),抑制GFAP的过度活化,降低ACh E活性(P0.05),升高Ch AT活性(P0.05),TFHLⅡ、Ⅲ组优于Ⅰ组(P0.05),且TFHLⅡ、Ⅲ组之间无显著差异(P0.05)。结论 TFHL对VD大鼠学习记忆障碍具有改善作用,可能与其抑制GFAP的过度活化,降低ACh E活性,升高Ch AT活性,提高脑组织乙酰胆碱含量,恢复慢性脑缺血大鼠的胆碱能神经系统功能有关。     

Brn-4基因修饰骨髓间质干细胞移植对老年痴呆鼠学习记忆的影响

目的探讨Brn-4基因修饰大鼠骨髓间质干细胞(MSC)移植后对老年痴呆鼠学习记忆的影响。方法实验分为3组:正常组、模型组和移植组。以单侧切断穹隆海马伞(FF)建立老年性痴呆模型鼠;应用脂质体将表达载体转染到MSC中,荧光显微镜观察该Brn-4基因在MSC中的表达;将成功转染Brn-4基因修饰的MSC植入模型鼠尾静脉,4 w后行Y迷宫测试,并行免疫组化结合图像分析技术观察各组大鼠基底前脑p75阳性神经元数,同时采用电生理技术检测离体海马CA1区长时程增长效应(LTP)的诱导变化。结果 Brn-4基因在MSC中获得成功表达;免疫组化表明模型组大鼠p75阳性神经元数在内侧隔阂和斜角带较正常组明显下降(P<0.01);移植组p75阳性神经元数较模型组有改善(P<0.05)。离体海马CA1区移植组LTP在移植后6 d,12 d,30 d均较模型组有显著增强(P<0.05)。Y迷宫测试结果显示,大鼠的学习记忆能力与基底前脑p75阳性神经元数呈正相关。结论 Brn-4基因修饰MSC移植后提高了老年痴呆鼠学习记忆能力。     

Brn-4基因修饰骨髓间质于细胞移植对老年痴呆鼠学习记忆的影响

目的 探讨Brn-4基因修饰大鼠骨髓间质干细胞(MSC)移植后对老年痴呆鼠学习记忆的影响.方法 实验分为3组:正常组、模型组和移植组.以单侧切断穹隆海马伞(FF)建立老年性痴呆模型鼠;应用脂质体将表达载体转染到MSC中,荧光显微镜观察该Brn-4基因在MSC中的表达;将成功转染Brn-4基因修饰的MSC植入模型鼠尾静脉,4w后行Y迷宫测试,并行免疫组化结合图像分析技术观察各组大鼠基底前脑p75阳性神经元数,同时采用电生理技术检测离体海马CA1区长时程增长效应(LTP)的诱导变化.结果 Brn4基因在MSC中获得成功表达;免疫组化表明模型组大鼠p75阳性神经元数在内侧隔阂和斜角带较正常组明显下降(P＜0.01);移植组p75阳性神经元数较模型组有改善(P＜0.05).离体海马CA1区移植组LTP在移植后6d,12 d,30 d均较模型组有显著增强(P＜0.05).Y迷宫测试结果显示,大鼠的学习记忆能力与基底前脑p75阳性神经元数呈正相关.结论 Brn-4基因修饰MSC移植后提高了老年痴呆鼠学习记忆能力.