血清氨基肽酶测定法的探讨

氨基肽酶是水解酶,可作用于多种氨基酸衍生物。如用亮氨酰-β-萘胺为底物的固定时间法或用亮氨酰对硝基苯胺为底物的连续监测法。本文分别以亮氨酰对硝基苯胺和丙氨酰对硝基苯胺为底物测血中氨基肽酶活性,建立了适合于临床应用的方法和正常值。     

阶段梯度胶电泳分离血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶同工酶

阶段梯度胶电泳分离血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶同工酶肖明兵，张弘，姚登福，朱薇，黄介飞（南通医学院附院，江苏南通２２６００１）关键词甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶，同工酶，电泳，原发性肝癌，血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（Ｇｌｙｃｙｌｏｒｏｌｉｎｅｄｉｐｅｐ...     

血清GPD—A测定及其在临床诊断中的初步应用

1966年Hopsu-Havu和Glenner首次在鼠的肝肾中发现了一种的二肽氨基肽酶,即甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)。它存在于人体唾液腺、颌下腺等组织及唾液、血液中,具有水解甘氨酰脯氨酸及其他氨基酸之间肽键的作用。国外学者测定了在不同种类动物及人体中的血清酶活性,发现肝脏疾病,尤其肝癌患者     

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的研究进展

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的研究进展张抗万雄萍（上海海员医院中心实验室，上海２０００８０）关键词甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶临床应用测定甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（Ｇｌｙｃｙｌ－ｐｒｏｌｉｎｅ－ｄｉｐｅｐｔｉｄｙｌａｍｉｎｏｐｅｐｔｉｄａｓ，ＧＰＤＡ）从发现...     

血清GPDA活力测定对若干癌肿诊断的临床观察

用甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺作底物，２％的Ｔｗｅｅｎ－２０作ＧＰＡ的表面活性剂，对４６例肝癌，４２例胃癌和５２例白血病患者血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶活力进行测定，发现６９．６％的肝癌患乾血清ＧＰＤＡ活力高于正常参考价值＋２个标准差，７８．５７％的胃癌和７０．５９％的白血病患者血精ＧＰＤＡ活力低于正常参考值均值－２个标准差。     

血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶连续监测法测定

血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶连续监测法测定南京市钟阜医院（２１０００３）王念跃，常伟甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（Ｇｌｙｃｙｌｐｒｏｌｉｎｅｄｉｐｅｐｔｉｄｙｌａｍｉｎｏｐｅｐｔｉｄａｓｅ，ＧＰＤＡＥＣ３·４·１·４５）１９６６年首次被发现［１］。生化特...     

肾病患者尿中二肽基-氨基肽酶Ⅳ的变化

二肽基-氨基肽酶IV(DAP-IV)能使X-脯氨酰-Y-肽分解,产生X-脯氨酸,对氨基端第二位的脯氨酸有高度特异性。作者以7-甘氨酰脯氨酸-4-甲基香豆素酰胺(甘氨酰-脯氨酸-MCA)为底物,用荧光法测定尿中DAP-IV的活性。取试管1支加入pH 8.7的0.15mol/L甘氨酸/氢氧化钠缓冲液40μl,2mmol/L甘氨酰-脯氨酸-MCA水溶液25μl及人尿35μl。另取试管1支以35μl蒸馏水代替人尿作为对照管。将各管置于37℃水浴中保温30分钟,加入1mol/L醋酸盐缓冲液1.0ml     

尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶诊断肝硬化早期肾损害的临床价值

目的：探讨尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶检测在肝硬化早期肾损害诊断中的临床价值。方法将2011年5月至2013年5月郑州市第二人民医院收治的80例肝硬化早期肾损害患者作为观察组,根据患者血清白蛋白浓度、血清胆红素、食管静脉出血情况、凝血酶原时间、腹水情况等指标将患者随机分为代偿组（45例）与失代偿组（35例）,选取同期40名健康体检人员作为对照组,观察两组的尿甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（GPDA）及尿-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）。结果观察组患者GPDA及NAG水平均明显高于对照组,P<0.05;代偿组患者GPDA及NAG水平均明显高于失代偿组,P<0.05。结论采用GPDA检测对肝硬化早期肾损害患者进行诊断,敏感性较高,能够为肝硬化早期肾损害临床诊断及治疗提供有效依据。     

甘氨酰脯氨酰二肽氨基肽酶动力学测定方法探讨及初步临床应用

目的建立甘氨酰脯氨酰二肽氨基肽酶(GPDA)自动化分析方法。方法用甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺对甲苯磺酸盐为底物,在Tris-HCl-双甘肽缓冲系统下,在405nm处测定产物吸光度的变化,得出GPDA活性。结果最适pH值为8.6,基质浓度为2.0mmol/L。批内、批间平均变异系数分别为3.01%、5.04%。米氏常数(Km)为1.89mmol/L。标本存于4℃冰箱10d内稳定性良好。参考值为(102.8±26.0)U/L。肝癌组该酶范围为(139.9±71.8)U/L,与正常组比较差异有显著性(P<0.05)。胃癌组和慢性胃炎组该酶范围分别为(58.83±18.18)U/L和(61.5±15.8)U/L,与正常组比较差异均有显著性(P<0.001、P<0.005)。结论该法简便、快捷、精确,可用于自动化分析,并可作为评价肝癌、胃癌及慢性胃炎的血清学指标。     

甘氨酰脯氨酰二肽氨基肽酶动力学测定方法探讨及初步临床应用

目的建立甘氨酰脯氨酰二肽氨基肽酶(GPDA)自动化分析方法.方法用甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺对甲苯磺酸盐为底物,在Tris-HCl-双甘肽缓冲系统下,在405 nm处测定产物吸光度的变化,得出GPDA活性.结果最适pH值为8.6,基质浓度为2.0 mmol/L.批内、批间平均变异系数分别为3.01%、5.04%.米氏常数(Km)为1.89 mmol/L.标本存于4 ℃冰箱10 d内稳定性良好.参考值为(102.8±26.0) U/L.肝癌组该酶范围为(139.9±71.8) U/L,与正常组比较差异有显著性(P<0.05).胃癌组和慢性胃炎组该酶范围分别为(58.83±18.18) U/L和(61.5±15.8) U/L,与正常组比较差异均有显著性(P<0.001、P<0.005).结论该法简便、快捷、精确,可用于自动化分析,并可作为评价肝癌、胃癌及慢性胃炎的血清学指标.     

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的方法学研究

本文研究了甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)的最佳测定条件。最适pH8.6,Km 值为1.91±0.08mmol/L,选用158mmol/L Tris、64mmol/L 双甘氨肽、10 mmol/L 底物。酶促反应速度在70分钟内呈线性,酶活力在600U/L 内呈线性。高、中,低活力标本批内变异1.7～3.1%,批问变异3.8～6.7%,标本置4℃一周,结果无明显变化。168例健康者GPDA 为150.1±49.8(2SD)U/L,同时研究了测定管、底物空白、对硝基苯胺的光学吸收特性,观察了GPA 试剂在不同pH 和不同时间的变化规律。     

尿液甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定及临床应用

目的　探讨尿液甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶 (GPDA)测定及临床应用价值。方法　用连续监测法以甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺为底物检测尿液GPDA ,并对检测条件及干扰因素进行试验探讨 ,同时对 334名正常人 ,5 5例糖尿病和 36例高血压患者尿液GPDA进行检测分析。结果　尿GPDA在 35 0U/L以下线性良好 ,低、高值尿液标本的批内变异系数 (CV)分别为 1 2 7%、0 6 1% ,批间CV为 1 33% ,尿液标本 4℃存放 7dGPDA活性没有变化 ,胆红素、葡萄糖、维生素C及糖尿病治疗药物二甲双胍、格列苯脲对GPDA测定无干扰 ,血红蛋白在 5 0 0mg/L以下时对GPDA测定无干扰 ,>5 0 0mg/L产生负干扰 ,334名正常人尿GPDA活性为 (12 9± 4 1)U/g·Cr,参考值范围 4 9～ 2 0 9U/g·Cr;糖尿病、高血压病合并肾损害组尿GPDA明显高于正常对照组和未发生肾损害组 ,差异有非常显著意义 (P <0 0 0 1)。结论　甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶操作简单、快速、稳定性好 ,干扰因素少 ,结果准确 ,是诊断早期肾小管损伤的敏感而特异的检验项目。     

甘氨酰脯氨酰-对-硝基苯胺酶与肝胆疾病

甘氨(酰)脯氨酰-对-硝基苯胺酶(GPN)是一种肽酶.根据以往有关肝硬变、肝癌时血中GPN活性升高的报告,作者测定了健康对照、肝胆疾病、心肌梗塞和肠道慢性炎症患者血清     

绍兴地区14岁以下健康儿童血清GPDA参考范围调查

甘氨酰脯氨酸二肽酶（GPDA）能特异性水解肽链氨基末端第2位为脯氨酸所形成的肽键。GPDA在体内的生理功能至今未明,但由于胶原分子中含有丰富的甘氨酰脯酰结构,提示此酶与胶原蛋白的肽链降解及更新有关。GPDA主要分布于肝、肾、结缔组织、唾液腺及血清、唾液等体液中,以颔下腺含量最为丰富。在临床工作中我们发现儿童的GPDA测定值明显高于成人水平,但迄今为止未见有儿童参考范围的报道。为此我们对绍兴地区0—14岁健康儿童进行GPDA检测,以建立绍兴地区儿童GPDA的参考范围。     

原发性肝癌患者血清肿瘤标志物的测定及临床意义

目的:探讨原发性肝癌患者血清肿瘤坏死因子、肿瘤特异性生长因子、α-1,岩藻糖苷酶及甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的测定及其临床意义.方法:采用双抗体夹心酶联免疫法、化学法及速率法检测80例原发性肝癌患者(肝癌组)治疗前、后血清中上述指标的含量.并检测同期健康体检者30例(对照组)及良性肝病患者36例(良性肝病组)上述指标.并进行对比分析.结果:肝癌组治疗前血清中肿瘤坏死因子,肿瘤特异性生长因子、α L-岩藻糖苷酶和甘氨酰脯氨酸二肽氡基肽酶含量明显高于对照组和良性肝病组(P<0.01);肝癌组治疗后上述指标较治疗前明显降低(P<0.01),但仍高于对照组(P<0.05).结论:检测原发性肝癌患者血清中肿瘤坏死因子、肿瘤特异性生长因子、α-L岩藻糖苷酶和甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶含量变化,对原发性肝癌的诊断、疗效观察和预后判断有重要意义.     

血清GPDA测定在癌症中应用价值的探讨

１９６６年Ｈｏｐｓｕ -Ｈａｒｕ和Ｇｌｅｎｎｅｒ发现了甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（ＧＰＤＡ） ,它存在人体唾液腺、颌下腺等组织及唾液、血液中 ,具有水解甘氨酰脯氨酸及其它氨基酸之间肽键的作用。ＧＰＤＡ活力在肝脏疾病 ,尤其肝癌患者显著增高 ,并与ＡＦＰ没有明显相关 ［２］。胃癌患者显著减低［３］。我院使用全自动生化分析仪 ,采用动力学法测定了部分肝癌、胃癌、胃癌肝转移、肺癌、直肠癌及肝良性病变患者的ＧＰＤＡ活性 ,以进一步探讨血清ＧＰＤＡ活性在癌症诊断、鉴别、监测中的应用价值。１材料与方法１．１材料 (１)样本来源…     

血清GPDA-F免疫电泳酶呈色法的建立

[目的]建立血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶同工酶（GPDA-F）免疫电泳测定法。[方法]分离纯化血清GPDA-F，免疫新西兰兔，制备GPDA-F抗体，建立GPDA-F免疫电泳法，以GPDA酶呈色测定免疫沉淀峰的酶活性。[结果]成功制备获得GPDA-F抗体，并建立GPDA-F免疫电泳检测法。免疫电泳法检测血清GPDA-F对肝癌的诊断敏感性为83．8％。[结论]成功建立血清GPDA-F免疫电泳检测法，且有重复性好、成本低、省时、操作简便等优点。     

氨基肽酶的测定及临床意义

目的测定氨基肽酶中的一种酶(亮氨酸氨基肽酶,LAP)作为临床肝胆疾病的诊断指标并探讨氨基肽酶的临床意义,以便于系统探讨此类酶的临床应用价值。方法以亮氨酰对硝基苯胺为底物,在405 nm下进行连续监测并对健康体检者及患者标本进行测定。结果线性范围至少为0-180 U.L-1,批内不精密度为2.9%,批间不精密度为5.6%;适用于各种自动生化分析仪。测定亮氨酰氨基肽酶的最适条件:选用浓度为125 mmol.L-1的Tris-Hcl缓冲液,最适pH为7.2,温度取37℃,得出在此实验条件下的米氏常数Km为0.15 mmol.L-1,亮氨酰对硝基苯胺浓度取6.0 mmol.L-1,取健康体检者血清157例(男81例,女76例),测得x—±s为35.7 U.L-1+8.2 U.L-1,建立了适合于临床应用及自动生化分析仪的方法和参考值。结论本法是检测肝胆疾病的可靠、稳定、快速的方法之一,对肝胆疾病的早期诊断和治疗起一定的作用;氨基肽酶可以作为多种疾病的临床诊断和监测指标。     

甘氮酰脯氨酸二肽氨基肽酶测定及其应用

本文介绍速率法测定血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的方法，并应用于自动生化分析仪，测定的最适ｐＨ为８．６，酶活力在１３０Ｕ／Ｌ以下成线性，三份高、中、低值酶活力标本批内ＣＶ０．７％～１．４％，批间ＣＶ１．２％～４．４％。１３２例正常人ＧＰＤＡ为１８５．２±２８．６（ｘ±ｓ）Ｕ／Ｌ，６５例原发性肝癌组为４０８．０±２１６．１Ｕ／Ｌ（ｘ±ｓ），明显高于正常组（ｐ＜０．００１），且与ＡＦＰ水平无相关意义（ｒ     

血清GPDA活性测定在胃癌诊断及治疗中的应用

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（Ｇｌｙｃｙ－ＰｒｏｌｉｎｅＤｉｐｅｐｉｄｙｌＡｍｉｎｐｅｐｔｉｄａｓｅ，ＧＰＤＡ）是ＨＯＰＳＵ等人在鼠的肝肾中发现。胃癌患者血清中ＧＰＤＡ活性明显降低。本次实验测定胃癌术前、术后及正常人血清ＧＰＤＡ活性，进行比较，探讨血清Ｇ...