β-catenin、CyclinD1、c—myc在脑胶质瘤中的表达及意义蛋白

采用免疫组化二步法检测脑胶质瘤及正常脑组织中β-catenin、CyclinD1、c—myc蛋白的表达。结果三者在正常脑组织中均为阴性表达；在不同病理分级的胶质瘤组织中三者均有表达，且表达程度随肿瘤病级分级增高而增高。相关分析发现三者的表达相互间均有相关性。认为β-catenin在细胞质、核内的集聚可促进cyclinD1、c—myc的表达，与胶质瘤细胞周期调节紊乱、增殖有关。     

β-catenin,c-myc和Cyclin D1在胰腺癌组织中的表达及意义

目的研究β-catenin异常表达、c-myc和 Cyclin D1的高表达与胰腺癌发生、浸润、转移的关系.方法应用免疫组织化学方法检测5例正常胰腺组织和40例胰腺癌及13例相应癌旁组织中β-catenin、c-myc和Cyclin D1的表达.结果 5例正常胰腺组织及13例胰腺癌旁组织中β-catenin为正常表达,c-myc和Cyclin D1阴性表达,40例胰腺癌组织中25例有β-catenin的异常表达(25/40,62.5%),20例(20/40,50%)有c-myc的高表达,23例(23/40,57.5%)有Cyclin D1的高表达.β-catenin的异常表达率与淋巴结转移、浸润及病理分级相关(P < 0.05),c-myc和Cyclin D1的高表达与分化程度,浸润,转移及病理分级无关,β-catenin的异常表达与c-myc的阳性表达不相关,而与Cyclin D1的阳性表达相关.结论β-catenin的异常表达可能主要是通过激活Cyclin D1引起细胞增殖,导致肿瘤的发生.     

β-catenin，c-myc和Cyclin D1在胰腺癌组织中的表达及意义

目的研究β-catenin异常表达、c-myc和Cyclin D1的高表达与胰腺癌发生、浸润、转移的关系。方法应用免疫组织化学方法检测5例正常胰腺组织和40例胰腺癌及13例相应癌旁组织中β-catenm、c-myc和Cyclin D1的表达。结果 5例正常胰腺组织及13例胰腺癌旁组织中β-catenin为正常表达,c-myc和Cyclin D1阴性表达,40例胰腺癌组织中25例有β-catenin的异常表达(25／40,62．5％),20例(20／40,50％)有c-myc的高表达,23例(23／40,57．5％)有Cyclin D1的高表达。β-catenin的异常表达率与淋巴结转移、浸润及病理分级相关(P<0.05),c-myc和Cyclin D1的高表达与分化程度,浸润,转移及病理分级无关,β-catenin的异常表达与c-myc的阳性表达不相关,而与Cyclin D1的阳性表达相关。结论β-catenin的异常表达可能主要是通过激活Cyclin D1引起细胞增殖,导致肿瘤的发生。     

β-catenin，c-myc和Cyclin组织中的表达及意义D1在胰腺癌

目的 研究β-catenin异常表达、c-myc和Cyclin D1的高表达与胰腺癌发生、浸润、转移的关系。方法 应用免疫组织化学方法检测5例正常胰腺组织和40例胰腺癌及13例相应癌旁组织中β-catenin、cmyc和Cyclin D1的表达。结果 5例正常胰腺组织及13例胰腺癌旁组织中β-catenin为正常表达，c-myc和CyclinD1阴性表达，40例胰腺癌组织中25例有β-catenin的异常表达（25／40，62．5％），20例（20／40．50％）有c-myc的高表达，23例（23／10，57．5％）有Cyclin D1的高表达。β-catenin的异常表达率与淋巴结转移、浸润及病理分级相关（P〈0．05），c-myc和Cyclin D1的高表达与分化程度，浸润，转移及病理分级无关，β-catenin的异常表达与c-myc的阳性表达不相关，而与Cyclin D1的阳性表达相关。结论 β-catenin的异常表达可能主要是通过激活Cyclin D1引起细胞增殖，导致肿瘤的发生。     

大肠癌APC、β-catenin、E-cadherin和c-myc的表达及意义

目的探讨腺瘤性息肉蛋白(APC)、β-catenin、E-cadherin和c-myc在大肠癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化法检测正常大肠黏膜、大肠腺瘤、大肠腺瘤恶变及大肠癌组织中上述4种蛋白的表达情况。结果大肠癌和大肠腺瘤恶变APC阳性率显著低于大肠腺瘤和正常大肠黏膜(P<0.01)。大肠癌、大肠腺瘤恶变和大肠腺瘤β-catenin胞质/胞核异位表达率、c-myc阳性率显著高于正常大肠黏膜(P<0.01),大肠癌的β-catenin异位表达率显著高于大肠腺瘤(P<0.01)。大肠癌中β-catenin、E-cadherin膜表达缺失率显著高于大肠腺瘤和正常大肠黏膜(P<0.01)。大肠癌中β-catenin异位表达与c-myc阳性表达、E-cadherin阳性表达呈正相关,与APC阳性表达呈负相关。结论APC失表达和(或)β-catenin异位表达、c-myc过表达与大肠癌的发生相关,β-catenin、E-cadherin膜表达缺失与大肠癌的侵袭、转移有关。     

整合素β1、FN与CD34在脑胶质瘤中的表达及与预后的关系

目的 检测整合素β1、纤维连接蛋白(FN)、血管生成因子CD34在脑胶质瘤中的表达,并探讨它们与胶质瘤患者术后生存率的关系.方法 采用免疫组织化学SP法检测各组病例脑组织中整合素β1、FN和CD34的表达.结果 整合素β1、FN在胶质瘤中表达的总阳性率分别为61.4%、54.3%,二者在不同级别胶质瘤中的表达差异有统计学意义(P均<0.05),并与胶质瘤病理分级呈正相关(P均<0.01);胶质瘤患者CD34标记的肿瘤内平均微血管密度(MVD)为34.7±6.3,其在不同级别胶质瘤中的表达有统计学差异(P<0.01),与胶质瘤病理分级呈正相关(P<0.01);胶质瘤中整合素β1蛋白、FN蛋白以及MVD值3者间两两呈正相关(P均<0.05);随着胶质瘤病理分级的升高及整合素β1、FN、MVD表达的增强,术后生存率下降(P均<0.05).结论 整合素β1、FN和MVD的高表达与胶质瘤的发生及恶性程度有关,联合检测有助于评估预后.     

miR-135b、LZTS1、β-catenin在胰腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨miR-135b、LZTS1及β-catenin在胰腺癌中的表达意义及三者之间的相关性.方法:分别采用锁定核酸原位杂交技术(LNA-ISH)和免疫组织化学法检测miR-135b、LZTS1和β-catenin蛋白在70例胰腺癌及相应癌旁组织中的表达情况.结果:miR-135b在胰腺癌中的表达率高于癌旁正常组织(71.4%vs 42.9%,P=0.001),LZTS1、β-catenin蛋白在胰腺癌中的表达率均低于癌旁正常组织(34.3%vs 68.6%、34.3%vs 74.3%,P0.05).在胰腺癌组织中miR-135b与LZTS1的表达水平呈负相关(r=-0.61,P0.05),与β-catenin无相关性(r=0.06,P0.05);LZTS1与β-catenin呈正相关(r=0.37,P0.05),且miR-135b、LZTS1和β-catenin的阳性表达水平与胰腺癌的临床分期及淋巴结转移密切相关(P0.05),与胰腺癌患者年龄、性别、肿瘤部位及组织学分级无关(P0.05).结论:miR-135b在胰腺癌中表达升高,LZTS1与β-catenin在胰腺癌中表达减少,并且表达升高的miR135b可能通过下调LZTS1基因表达而参与了胰腺癌的发生发展.     

hTERT、Sp1、c-myc在良恶性胰岛β细胞瘤中的表达差异

目的检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)、刺激蛋白1(Sp1)和原癌基因转录因子(c-myc)在良、恶性胰岛β细胞瘤和正常胰岛β细胞组织中的表达,探讨三者与胰岛β细胞瘤的关系,为临床鉴别良、恶性胰岛β细胞瘤和判断预后提供理论依据。方法用免疫组化方法检测hTERT、Sp1、c-myc在27例良性、16例恶性胰岛β细胞瘤和20例正常胰岛β细胞组织中的表达,并行相关性分析。结果 hTERT、Sp1、c-myc在恶性胰岛β细胞瘤中的阳性表达率分别为81.2%、75.0%、87.5%,在良性胰岛β细胞瘤中的阳性表达率分别为25.9%、29.6%、14.8%,在正常胰岛β细胞组织中没有表达。hTERT、Sp1和c-myc在良、恶性胰岛β细胞瘤的表达差异均有统计学意义(P均<0.05),且在恶性胰岛β细胞瘤的表达明显高于良性胰岛β细胞瘤和正常胰岛β细胞组织;hTERT与Sp1、c-myc的表达呈明显正相关(r分别为0.992、0.893,P均<0.01)。结论端粒酶的激活在良、恶性胰岛β细胞瘤的发生发展中起重要作用。联合检测hTERT、Sp1和c-myc的表达可作为鉴别良、恶性胰岛β细胞瘤的手段。     

脑动脉瘤壁和脑胶质瘤组织中TGF-β1及VEGF的表达及意义

目的 观察人脑动脉瘤壁和脑胶质瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达,并分析其意义.方法 选择脑动脉瘤患者15例、脑胶质瘤患者15例及正常脑动脉的颅脑外伤患者2例,用免疫组织化学方法检测不同标本VEGF及TGF-β1的表达.结果 TGF-β1和VEGF在脑动脉瘤壁、脑胶质瘤组织中的阳性表达高于正常脑动脉壁或脑组织(P均＜0.05).结论 脑动脉瘤壁和脑胶质瘤组织中TGF-β1、VEGF阳性表达较高,正常脑动脉壁或脑组织中几乎不表达;TGF-β1和VEGF在血管壁获得性损害过程中起了重要作用,并与脑动脉瘤和脑胶质瘤的形成有关.     

Neuropilins-1和Neuropilins-2在人脑胶质瘤中的表达

目的探讨人脑胶质瘤组织中Neuropilins-1、2(NRP-1、2)的表达情况。方法采用免疫组织化学染色的方法检测不同病理分级的脑胶质瘤及5例正常脑组织中NRP-1及NRP-2的表达情况,并结合细胞学观察进行两者的相关性分析。结果 NRP-1及NRP-2在正常脑组织中均不表达,而在脑胶质瘤组织中的表达均明显增高(P<0.05);不同病理级别脑胶质瘤中NRP-1及NRP-2的表达不同,并随肿瘤级别的升高,其表达也明显升高(P<0.05)。结论 NRP-1/NRP-2的表达强度随脑胶质瘤恶性程度的增加而增强,与脑胶质瘤的发生发展密切相关。     

不同病理类型子宫内膜组织中β-catenin、YAP-1、Survivin 表达观察

目的观察不同病理类型子宫内膜组织中β-链蛋白(β-catenin)、Yes相关蛋白1(YAP-1)和生存素(Survivin)的表达变化,并探讨三者与子宫内膜样腺癌发病的关系。方法采用免疫组化法分别检测增殖期、单纯性增生、复杂性增生子宫内膜组织及子宫内膜样腺癌组织中的β-catenin、YAP-1、Survivin。结果β-catenin、YAP-1、Survivin在增殖期、单纯性增生、复杂性增生子宫内膜组织及子宫内膜样腺癌组织中的阳性表达依次增多(P均<0.05);β-catenin在高分化、中分化、低分化子宫内膜样腺癌组织中的阳性表达依次减少(P均<0.05)。子宫内膜样腺癌组织中β-catenin与YAP-1、YAP-1与Survivin阳性表达均呈正相关关系(r分别为0.378、0.700,P均<0.05)。结论子宫内膜样腺癌组织中β-catenin、YAP-1、Survivin阳性表达增高,三者可能协同参与了子宫内膜样腺癌的发病。     

胶质瘤组织中EGFR、p27^kip1的表达变化及意义

目的观察胶质瘤组织中表皮生长因子受体（EGFR）和p27kip1的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测60例胶质瘤组织、5例正常脑组织中EGFR和p27kip1。结果 60例胶质瘤患者中有39例表达EGFR,20例表达p27kip1。EGFR在正常脑组织中无表达,在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为52.4%、60.9%、87.5%（P〈0.05）;p27kip1在正常脑组织中表达率为80.0%,在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为57.1%、26.1%、12.5%（P〈0.05）。EGFR表达与胶质瘤病理分级呈正相关（r=0.426,P〈0.05）,p27kip1表达与胶质瘤病理分级呈负相关（r=-0.325,P〈0.05）。结论 EGFR、p27kip1表达与胶质瘤的恶性程度有关,其表达异常可能在肿瘤形成中起促进作用。     

脑胶质瘤细胞polβ基因突变及其与Fas、p53基因mRNA水平表达的研究

目的研究脑胶质瘤细胞中DNA聚合酶β(polβ)基因突变及其与Fas、p53基因mRNA 水平表达的关系.方法应用RNA提取、逆转录、PCR扩增、基因克隆及 DNA序列分析法,对2 2例脑胶质瘤、7例良性脑肿瘤及1例肺部转移性鳞状细胞癌标本中的polβ基因进行检测 ;半定量分析法对脑胶质瘤和良性脑肿瘤标本及其周围正常脑组织中的polβ、Fas、p53基因进行mRNA水平检测及对比.结果 30例脑肿瘤标本中,polβ基因突变7例,其中胶质瘤6例,突变率为2 7.3%(6/22),肺部转移性鳞状细胞癌1例.2例polβ基因二级结构图有明显变异.脑胶质瘤组织中均存在polβ和Fas基因mRNA水平高表达及p53基因低表达,有显著性差异(P＜0. 01),良性脑肿瘤与正常脑组织p53基因表达无显著性差异(P＞0.05);各种脑肿瘤中pol β与Fas基因表达具有正相关性,而polβ、Fas与p53基因表达呈负相关性.结论脑胶质瘤细胞存在polβ基因突变,其突变率为27.3%.脑胶质瘤组织中均存在polβ和Fas基因mRNA 水平高表达及p53基因低表达,提示脑胶质瘤的发生和发展可能与polβ基因突变有关,且恶性程度越高,突变越明显;另外,p53基因低表达及polβ、Fas基因高表达可能与脑胶质瘤的发生发展及恶性程度相关.     

人脑胶质瘤中CXCR4、hTERT的表达及意义

目的 探讨趋化因子受体4(CXCR4)和端粒酶逆转录酶(hTERT)在胶质瘤恶性转变中表达的变化及意义.方法 用免疫组织化学、原位杂交技术检测60例胶质瘤手术切除患者标本中CXCR4、hTERT的表达,6例正常脑组织作对照.结果 60例胶质瘤中有35例表达CXCR4(58.3%),36(60.0%)例表达hTERT,随着胶质瘤级别的升高,CXCR4、hTERT表达增强(P＜0.05).正常脑组织均不表达CXCR4、hTERT.CXCR4与hTERT表达呈正相关(r=0.6358,P＜0.05).结论 CXCR4、hTERT的表达与胶质瘤的分级有关,联合检测CXCR4、hTERT有助于胶质瘤恶性程度的判断.     

解旋酶RECQ1和细胞核相关抗原Ki-67在脑胶质瘤组织中的表达及相关性

目的分析解旋酶RECQ1和细胞核相关抗原Ki-67在脑胶质瘤组织中的表达及其相关性。方法选取该院神经外科收治的脑胶质瘤手术治疗患者80例,根据病理学分级分为Ⅰ~Ⅱ级44例,Ⅲ~Ⅳ级36例,另外选取正常脑组织20例,利用免疫组化法检测RECQ1、Ki-67的表达情况,计算RECQ1、Ki-67表达的相关性。结果 1RECQ1、Ki-67在正常脑组织中表达呈阴性,在胶质瘤组织表达呈阳性;RECQ1、Ki-67在Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤组织中多为低表达,在Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组织中多为高表达;2RECQ1在正常脑组织中无表达,Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤组织RECQ1表达率与Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组织比较明显降低(P0.05);3Ki-67在正常脑组织组织中无表达,Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤组织RECQ1表达率为75%,与Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组织比较明显降低(P0.05);4胶质瘤组织中RECQ1和Ki-67表达均为阳性的有57例(71.3%),均为阴性的有14例(17.5%)。RECQ1阳性但Ki-67阴性的有4例(5%),RECQ1阴性但Ki-67阳性的有5例(6.2%),RECQ1和Ki-67表达呈正相关(r=0.768,P0.01)。结论 RECQ1和Ki-67的表达随着脑胶质瘤组织恶性程度的增高而升高,且两者正相关。     

大肠癌组织中β-catenin和APC的表达及临床意义

目的探讨β-catenin和APC在大肠癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测78例大肠癌、20例正常大肠黏膜中β-catenin和APC的表达情况。结果 20例正常大肠组织中β-catenin蛋白呈正常表达,大肠癌组织中β-catenin蛋白异常表达率为92.3%;正常大肠组织中APC蛋白表达为100.0%,大肠癌中APC蛋白表达率为46.2%,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。在大肠癌中β-catenin蛋白异常表达和APC蛋白失表达均与大肠癌病理分级、临床病理分期以及淋巴结转移有关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论β-catenin异位表达和APC的失表达与大肠癌发生关系密切,联合检测β-catenin蛋白与APC蛋白的表达情况可能有助于早期诊断大肠癌。     

Graves病患者甲状腺肿组织中原癌基因h-ras和c-myc的表达研究

目的 以β-actin为内参照物,研究原癌基因h-ras和c-myc在Graves病(GD)患者甲状腺肿组织中的表达.方法 Trizol法提取26例GD和31例正常甲状腺组织标本中的mRNA,逆转录-PCR法获取cDNA,多重PCR法分别同时扩增h-ras和β-actin或c-myc和β-actin,扩增产物行1.5%琼脂糖凝胶电泳,用GelBase/GelBiot-Pro软件分析获得各标本的h-ras或c-myc和β-actin的密度值.结果 h-ras在GD组中的表达较正常组有增高趋势(P=0.082),两组h-ras/β-actin的比值分别为(-x±s):0.457±0.102和0.413±0.051.c-myc在GD组的表达显著高于正常组(P＜0.01),两组c-myc/β-actin的比值分别为(-x±s):0.599±0.080和0.367±0.044.在GD组和正常组中h-ras和c-myc的表达均无显著相关关系(P＞0.05).结论 h-ras和c-myc在GD患者甲状腺肿组织中的表达均有不同程度的增高且两者间无显著相关关系.     

Toll样受体4激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞增殖

目的探讨Toll样受体(TLR)4激活后调控Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖及其相关机制。方法体外培养BMSCs,应用流式细胞术鉴定BMSCs,用脂多糖(LPS)剌激BMSCs,应用CCK-8法检测BMSCs的增殖能力;采用Western印迹检测大鼠BMSCs中TLR4蛋白表达;实验分为对照组、LPS组、TLR4阻断剂+LPS组、Wnt通路经典抑制剂(DKK-1)+LPS组。应用实时荧光定量PCR法检测BMSCs中β-catenin、c-myc及细胞周期蛋白(cyclin)D1 mRNA表达,应用Western印迹检测蛋白表达。结果与对照组相比,LPS组BMSCs的细胞增殖能力明显增强,TLR4呈高表达(均P<0.01);LPS组β-catenin、c-myc和cyclin D1表达显著增加(P<0.01)。与LPS组相比,加入TLR4阻断剂后,β-catenin、c-myc和cyclin D1表达显著下调(P<0.05,P<0.01),加入DDK-1后,β-catenin、c-myc和cyclin D1表达显著降低(均P<0.01)。结论 TLR4促进BMSCs的增殖,其机制可能与调节Wnt/β-catenin信号通路有关。     

MGMT、TopoⅡα、P-g p在胶质瘤组织中的表达变化及意义

目的探讨胶质瘤中存在与耐药性相关的基因蛋白O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、拓扑异构酶(TopoⅡα)、P-糖蛋白(P-g p)在组织内发生的表达变化。方法以100例人脑胶质瘤患者及20例人正常脑组织为研究对象,运用免疫组化法检测研究对象脑组织中MGMT、TopoⅡα、P-g p蛋白含量,并对比其相关性。结果在健康人脑组织中未检出MGMT、TopoⅡα、P-g p,MGMT、TopoⅡα、P-g p蛋白表达呈阳性的患者比例分别为71.93%、47.37%、66.67%,胶质瘤Ⅰ^Ⅱ级患者中三者表达比例分别为27.91%、32.56%、37.56%;胶质瘤分级与MGMT基因蛋白的表达不存在相关性(P>0.05),而TopoⅡα、P-g p与胶质瘤分级相关性较高(P<0.05)。结论依据耐药相关基因蛋白MGMT、TopoⅡα、P-g p在人体胶质瘤组织表达率不同,可以针对性的进行个体化治疗胶质瘤方案。     

Wnt/β-catenin信号通路可能调节胰腺癌细胞TBX2基因表达

目的探讨Wnt／β-catenin信号途径是否参与胰腺癌细胞中TBX2基因的表达调节。方法运用免疫细胞化学sP法，检测胰腺癌细胞株SW1990中是否有Tbx2和β-catenin蛋白表达；以不同浓度的糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）的特异性抑制剂氯化锂作用于SW1990，应用RT-PCR检测TBX2基因及Wnt／β-catenin信号通路的已知靶基因c-myc的mRNA表达变化；Western印迹法检测β-catenin、Tbx2蛋白的表达变化。结果在SW1990细胞中有Tbx2和β-catenin蛋白表达；氯化锂作用于SW1990细胞后，TBX2、c-myc、β-catenin表达水平均升高（P〈0．05）；Tbx2蛋白随着β-catenin表达水平的升高而升高（r=0．583，P〈0．05）。结论Wnt／β-catenin信号通路可能参与了胰腺癌细胞中TBX2基因表达的调节。