乙型肝炎特异性转移因子抗原特异免疫活性的检测

参照 Hoffman 白细胞移动抑制试验,采用琼脂糖法巨噬细胞移动抑制试验(MIT),研究了乙型肝炎特异性转移因子(HBV—TF)对正常人及乙肝病人淋巴细胞转移、诱导产生巨噬细胞移动抑制因子(MLF)的抗原特异免疫活性取得了成功。结果表明 HBV—TF 具有明显的抗原依赖性免疫活性。琼脂糖法MIT 操作简单、结果敏感并且重复性较好,可以作为 HBV—TF 产品的抗原特异活性的检测指标。     

转移因子的免疫学活性及其结构模型

转移因子(TF)被发现以来,一直认为其特征是能够转移特异性细胞免疫反应,但近年来认为,TF具有特异及非特异免疫学活性,后者包括:增强或抑制淋巴细胞转化,诱导循环干扰素产生,刺激巨噬细胞释放淋巴细胞激活因子,增加K细胞活性等。但关于TF特异性免疫学活性的研究,有些结果常相互矛盾,同时临床资料也难以证明特异性TF的疗效优于非特异性TF,故对TF的非特异性免疫学活性的研究更引人重视。本文拟对TF的这两类活性及其结构模型的研究进展,作一简要介绍。     

从单纯高血压患者体内分离出的外周单核细胞中组织因子表达和活性并不升高

背景:系统性高血压是动脉粥样硬化血栓形成的主要危险因素之一。研究发现组织因子(TF)位于血管外膜和粥样斑块的脂质核心,并特异地表达于单核细胞和巨噬细胞膜表面。TF在凝血生理中起到重要作用,同时也参与促炎症过程和粥样硬化斑块失稳定。目的:在本研究中,对从具有动脉粥样硬     

转移因子的免疫学活性及其结构模型

转移因子(TF)被发现二十多年来,一直认为其特征是能够转移特异性细胞免疫反应。但近年来的研究结果提示,TF除具特异性免疫学活性外,还具多种非特异性免疫学活性,如增强或抑制淋巴细胞转化,诱导循环干扰素产生,刺激巨噬细胞释放淋巴细胞激活因子,增加K细胞活性等。     

不同浓度结核特异性转移因子对巨噬细胞呈递抗原作用的影响

目的 :通过研究结核特异性转移因子 (transferfectortuberculosis,TFtb)对巨噬细胞促进BCG预致敏淋巴细胞增殖反应的影响 ,探讨转移因子 (TF)在传递特异性抗原信息过程中的作用机制。方法 :将小鼠腹腔巨噬细胞作为刺激细胞 ,脾脏非贴壁细胞为效应细胞 ,PPD作为抗原 ,以不同浓度的TFtb为刺激剂 ,用MTT法检测T细胞的增殖率。结果 :预致敏鼠的淋巴细胞增殖率随TFtb浓度升高而增高 ,0 .5mg·ml-1 时达到峰值 ,随后浓度升高增殖率反而下降。TFtb促预致敏淋巴细胞增殖是巨噬细胞依赖性和抗原特异性的。对未致敏鼠的淋巴细胞增殖率无明显改变。结论 :TFtb能够增强巨噬细胞促结核抗原预致敏淋巴细胞增殖反应的作用 ,可能与增强巨噬细胞呈递抗原的作用有关 ,且是浓度依赖性的     

急性心肌梗死患者TF、TNF-α的变化及其相关性

目的:观察急性心肌梗死(AMI)患者组织因子(TF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平与TF活性的变化及其相关性,了解其临床意义.方法:选择AMI组患者64例,正常对照组42例,采用酶联免疫双抗体夹心法测定血浆TF、放射免疫分析法测定血清TNF-α水平,采用发色底物法测定TF活性.结果:AMI组TF、TNF-α水平及TF活性均显著高于正常对照组(P<0.01),AMI组患者血浆TF活性与血清TNF-α水平显著正相关(P<0.01).结论:TF、TNF-α水平及TF活性在AMI中可作为反映凝血异常和炎症状态的指标之一.     

冠心病患者单核源巨噬细胞体外分泌的基质金属蛋白酶-9、组织因子临床意义的探讨

目的探讨单核源巨噬细胞分泌的基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、组织因子（TF）在冠心病中的临床意义。方法密度梯度离心法提取12名急性心肌梗死（AMI）、16名不稳定心绞痛（UAP）、12名稳定型心绞痛（SAP）患者和8名冠脉正常者（Norm）的单核细胞，用佛波酯诱导其分化为巨噬细胞，ELISA法测定单核源巨噬细胞上清液MMP-9、TF含量。结果AMI、UAP组单核源巨噬细胞体外分泌MMP-9、TF的含量明显高于SAP、Norm组（P〈0．05和〈0．01），但AMI与UAP组间、SAP与Norm组问均无统计学差异，且MMP-9、TF含量与年龄、冠脉病变积分无统计学相关，在不同冠心病危险因素组间（0、1—2、3—4、4个以上危险因素）亦无统计学差异。结论单核源巨噬细胞体外分泌MMP-9、TF可作为急性冠脉综合征（ACS）病情评估的参考指标。     

反义寡脱氧核苷酸对内皮细胞缺氧再复氧损伤组织因子表达的影响

目的研究反义寡脱氧核苷酸对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧再复氧损伤后组织因子(TF)基因转录和表达的影响。方法培养的HUVEC随机等分成为正常对照组、缺氧再复氧组、反义寡脱氧核苷酸转染组(AS/TF组)、正义寡脱氧核苷酸转染组(S/TF组)和错配寡脱氧核苷酸转染组(Sc/TF组)。设计合成针对人TF的反义寡脱氧核苷酸(AS/TF),同时设计TF的正义寡脱氧核苷酸(S/TF)的错配寡脱氧核苷酸(Sc/TF)作为对照。用SuperFectTransfectionReagent(SF)作载体,将AS/TF、S/TF和Sc/TF分别转染AS/TF组、S/TF组和Sc/TF组HUVEC,正常对照组和缺氧再复氧组HUVEC只加SF,不转染任何寡核苷酸。将缺氧再复氧组、AS/TF组、S/TF组和Sc/TF组HUVEC培养24h后,充入氮气,缺氧条件下培养2h,正常条件下培养1h,完成缺氧再复氧模型的制作。收集各组HUVEC,用发色底物法检测HUVEC表面TF的活性,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测HUVEC中的TF抗原(TF:Ag)。并用膨胀裂解法分离细胞核,进行细胞核连缀反应(Run-onreaction)后,Bio-dot狭线印迹杂交检测HUVEC中的TFmRNA。结果与未经缺氧再复氧的正常对照组HUVEC相比,经过缺氧再复氧的HUVEC表面TF活性明显增强(P<0.001),细胞裂解液中的TF:Ag也显著增多(P<0.001),AS/TF组HUVEC的TF活性和TF:Ag的增加幅度低于缺氧再复氧组、S/TF组以及Sc/TF组(P<0.05-0.01)。体外细胞核连缀反应后,Bio-dot狭线印迹杂交显示,HUVEC缺氧再复氧后TF基因的转录增强,AS/TF组HUVECTFmRNA的转录弱于缺氧再复氧组、S/TF组和Sc/TF组。结论HUVEC缺氧再复氧后,TF基因的转录和表达均显著增强,针对TF的反义寡脱氧核苷酸能够明显抑制HUVEC缺氧再复氧损伤后TF基因的转录和表达。提示TF反义寡脱氧核苷酸对于因TF水平升高所致的血栓性疾病可能有潜在的治疗作用。     

急性白血病患者血浆组织因子及组织因子途径抑制物的测定

目的 :观察急性白血病患者血浆TF ,TFPI的活性变化及其与凝血机能的关系。方法 :用发色底物法测定TF ,TFPI活性。结果 :急性白血病患者血浆TF活性高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,TFPI活性低于对照组 (P <0 .0 1)。 7例初治患者化疗后血浆TF活性较化疗前下降 (P <0 .0 1) ,TFPI活性较化疗前升高 (P <0 .0 5 )。结论 :急性白血病患者凝血紊乱与血浆TF和TFPI活性改变有关。     

口腔鳞癌组织因子与肿瘤发展和转移的关系

目的:了解口腔鳞癌(oral squamous-cell carcinoma,OSCC)组织及转移淋巴结中组织因子(tissue factor,TF)的表达情况,探讨TF在OSCC发展和转移中的作用.方法:应用免疫组织化学SABC方法,检测了42例OSCC、15例转移淋巴结和10例正常口腔黏膜中TF的表达情况,分析TF与OSCC发展和转移的关系.结果:(1)在OSCC组织和淋巴结中TF的阳性表达分别为64.29%和67.78%,显著高于在正常口腔黏膜组织中的表达(10.00%,P＜0.01);(2)TF与肿瘤的淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.01).结论:OSCC中TF的表达上调对肿瘤的生长、发展和转移有促进作用,但其是否可作为反映OSCC生物学行为的客观指标仍有待研究.     

组织因子和基质金属蛋白酶-2在肝细胞癌侵袭转移中作用

目的：研究肝细胞肝癌组织中的组织因子（TF）及基质金属蛋白酶-2（MMP-2）表达,对肝癌侵袭转移的作用及两者之间的关系。方法：用免疫组织化学EnVisionTM法检测肝癌56例及其癌旁肝组织标本中TF和MMP-2的表达。结果：（1）肝癌组织中TF及MMP-2的阳性表达均明显高于癌旁组织（P〈0.05）;（2）癌静脉浸润、肝内外转移、无或包膜不完整组织中TF和MMP-2的表达显著高于相应对照组（P〈0.05）;（3）肝癌中TF表达和MMP-2表达呈正相关。结论：HCC中TF及MMP-2表达明显增高,且与癌侵袭转移有关。     

肿瘤相关巨噬细胞在乳腺浸润性微乳头状癌中的浸润及意义

目的 研究肿瘤相关巨噬细胞（tumor associated macrophages,TAMs）在乳腺浸润性微乳头状癌（invasive micropapillary carcinoma,IMPC）中的浸润及意义.方法 采用免疫组织化学链霉亲和素生物素法（laballad streptavidin biotin method,LSAB）检测68例IMPC和72例浸润性导管癌非特殊型（invasive ductal carcinoma,not otherwise specified,IDC-NOS）中TAMs标记物CD68、CD163的表达,并探讨其与临床病理学特征的关系.结果 CD68、CD163主要表达于IMPC及IDC-NOS间质中浸润的巨噬细胞的胞膜或胞质内,癌巢内偶有表达.IMPC组瘤内间质CD68的表达率（47/68,69.1％）明显高于IDC-NOS组（37/72,51.5％）,差异具有统计学意义（P =0.022）.而瘤内间质CD163在2组间的表达无统计学意义（P =0.682）.IMPC中瘤内间质CD68的表达与病理学分期、组织学分级、淋巴结转移、脉管侵犯及Ki67的表达呈正相关（P＜0.05）,而与ER的表达呈负相关（P =0.037）.Kaplan-Meier单因素生存曲线分析显示,IMPC中瘤内间质CD68表达与无进展生存期（progression free survival,PFS）呈负相关（P =0.027）.结论 IMPC间质中CD68标记的TAMs可能在IMPC高侵袭、高转移的恶性生物学行为中发挥了重要的作用.     

iNOS在口腔鳞状细胞癌中的表达及其预后意义

目的：调查诱导型一氧化氮合酶（iNOS）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达及其预后意义。方法：48例OSCC经外科手术冶疗后被分为两组：接受新辅助化疗24例及另外24例仅接受手术治疗。通过免疫组织化学方法评价了来自48倒OSCC的经福尔马林固定、石蜡包埋预处理标本内的iNOS表达水平。结果：在48例OSCC中有47例被发现有iNOS染色，而在邻近正常口腔粘膜组织内却没有发现。在接受化疗者中，在高iNOS表达与颈部淋巴结转移之间存在一个显著性关系（P〉0．05），而在仅接受手术治疗者中，低iNOS表达却与颈部淋巴结转移之间存在部分显著性关系。而且，高iNOS表达显著地与更高的生存率有关（P〈0．01）。结论：iNOS过表达可能通过生成一氧化氮（NO）对肿瘤的发病起了重要作用。但是，在口腔癌中iNOS表达的临床意义仍然未明。为了全面建立起iNOS与肿瘤生物行为之间的关系，进一步的研究是必要的。     

胸苷磷酸化酶在口腔鳞癌中的表达

目的：了解口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织中胸苷磷酸化酶（TP）的表达情况,并探讨其与肿瘤发展和转移的关系。方法：40例OSCC和14例正常口腔黏膜作为研究对象,采用免疫组织化学SP法检测TP的表达,并分析其表达与临床指标的关系。结果：OSCC组织中TP的表达高于正常口腔黏膜组（P〈0．05）,其阳性表达率分别为65．00％和14．29％;在OSCC中TP的表达Ⅲ～Ⅳ期高于Ⅰ～Ⅱ期病例（P〈0．05）,淋巴结转移组高于无淋巴结转移组（P〈0．05）。结论：OSCC组织中TP的高表达与肿瘤的发展和转移有关,但具体的机制及其在OSCC预后、治疗中的意义还需进一步的研究。     

口腔鳞癌组织中ID-1的表达及其临床意义

目的:探讨分化抑制因子-1(inhibitor of DNA bind-ing,ID-1)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中的表达,并分析ID-1的表达水平与口腔鳞癌患者各临床病理特征及其预后的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测80例口腔鳞癌患者癌组织及20例正常口腔黏膜组织中ID-1的表达。结果:①口腔鳞癌组织中可检测到ID-1的表达,而正常口腔黏膜组中未检测到ID-1表达(P<0.001)。②高、中、低分化口腔鳞癌ID-1表达阳性率分别为50.00%、71.43%、88.89%(P<0.05);ID-1表达与口腔鳞癌的病理分级呈正相关(rs=0.389)。③ID-1表达阳性率在Ⅲ~Ⅳ期组、有颈部淋巴结转移组中分别明显高于Ⅰ~Ⅱ期组、无颈部淋巴结转移组(P<0.05)。④ID-1阴性表达的口腔鳞癌患者3年生存率(64.29%)明显高于阳性者的32.25%(P<0.05)。结论:口腔鳞癌组织中ID-1表达与肿瘤的分期、分化程度、淋巴结转移及预后有关,ID-1阳性表达可以作为判断口腔鳞癌患者预后的指标。     

肿瘤相关巨噬细胞和幽门螺杆菌感染在各部位Ⅲ期胃腺癌患者预后中的意义

目的:分析肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)标志物(抗原CD68和CD163)表达和幽门螺杆菌(Hp)感染对不同部位Ⅲ期胃腺癌患者预后的影响。方法:收集2012年1月—2014年12月天津医科大学肿瘤医院胃部肿瘤科300例确诊为Ⅲ期胃腺癌患者的病例资料（根据发生部位的不同,分为胃底贲门癌组、胃体癌组和胃窦癌组,各100例）。比较3组患者一般资料;免疫组化染色法检测患者的肿瘤组织中有无Hp感染、CD68+TAMs以及CD163+TAMs的分布情况;根据CD68+TAMs的浸润情况将胃腺癌分为Ⅰ型（癌巢边缘浸润数量多于癌巢）和Ⅱ型（癌巢浸润数量多于癌巢边缘）,利用Kaplan-Meier法分析Ⅰ型和Ⅱ型胃腺癌患者预后的关系。然后分析Ⅰ型和Ⅱ型胃腺癌患者的Hp阳性表达率以及两组临床病理特征的关系;分析部位、年龄、饮酒、中性粒细胞、分型和Hp感染之间的相关性;利用Kaplan-Meier法分析Ⅰ型和Ⅱ型不同部位胃腺癌患者Hp与预后的关系。结果:胃底贲门癌组患者肿瘤显著大于胃窦癌组和胃体癌组（t=5.972,P<0.05）;胃窦癌组患者饮酒人数多于胃体癌组（χ2=6.742,P<0.05）;CD68+和CD163+TAMs在胃窦癌癌巢的相对表达水平高于癌巢浸润边缘;在胃底贲门癌癌巢浸润边缘的相对表达高于癌巢;在胃体癌癌巢浸润边缘的相对表达高于癌巢,差异均有统计学意义（H=136.06、124.99、142.17、91.16,均P<0.01）;CD68+和CD163+TAMs在癌巢浸润边缘多者预后不良（χ2=6.289、4.153、5.979,均P<0.05）;Ⅱ型胃腺癌患者累计生存率和无病生存率较Ⅰ型高（χ2=4.950、5.601,均P<0.05）;肿瘤大小与年龄、发生部位有关系（r=-0.162、-0.115,均P<0.05）;分型与发生部位、中性粒细胞显著相关（r=0.745、0.231,均P<0.01）;Hp与发生部位、分型有关（r=0.141、0.110,均P<0.05）;发生在胃体和胃窦部、肿瘤<4 cm、无淋巴结转移、中性粒细胞水平高的Ⅱ型胃腺癌患者Hp阳性表达率高,且预后较好（χ2=20.168、2.365、19.247、18.972,均P<0.05）。结论:TAMs标志物（抗原CD68和CD163）在癌巢浸润数量多对不同部位的Ⅲ期胃腺癌均是有利因素,另外,Hp阳性也是预测胃体癌和胃窦癌的良好指标。     

甲状腺乳头状癌VEGF—C表达、TAMs浸润与淋巴管生成的关系及临床意义

目的探讨甲状腺乳头状癌(PTC)中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的表达、肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)浸润与淋巴管生成的关系及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测72例PTC中VEGF-C、血管内皮生长因子-C受体3(VEGFR-3,标记淋巴管)、CD68(标记TAMs)的表达;在显微镜下计数淋巴管密度(LVD)、TAMs;采用免疫组化双染LAB-SA法观察TAMs中VEGF-C的表达。结果VEGF-C阳性指数(PI)值腺外型(21.4±2.8)高于微癌(10.1±0.8)与腺内型(11.9±1.2)(P均<0.05),有淋巴结转移(23.2±3.8)显著高于无淋巴转移(14.5±2.9)(P<0.01);TAMs计数腺外型(43.2±5.6)高于微癌(18.8±1.9)与腺内型(23.0±2.0)(P均<0.01),有淋巴结转移(41.3±8.4)显著高于无淋巴转移(30.4±4.8)(P<0.01);LVD腺内型(9.9±1.8)高于微癌(6.0±0.8)、腺外型(19.2±3.0)高于腺内型(P均<0.05),有淋巴结转移(19.6±2.5)高于无淋巴转移(12.5±2.8)(P<0.05)。VEGF-C与LVD计数呈正相关(r=0.91,P<0.01),TAMs与LVD呈正相关(r=0.83,P<0.01)。VEGF-C阳性表达的巨噬细胞占总巨噬细胞的21.3%。结论VEGF-C、TAMs及淋巴管生成与PTC的侵袭及淋巴结转移有关;VEGF-C、TAMs参与了淋巴管生成。     

结肠癌组织肿瘤相关巨噬细胞VEGF-C/D的表达及与淋巴结转移的关系

目的 了解结肠癌肿瘤相关巨噬细胞中VEGF-C/D的表达,探讨其对结肠癌淋巴结转移的影响及可能机制.方法 采用特异的巨噬细胞标记物CD68等抗体以免疫组化染色的方法,并用双染、连续切片对比等对45例结肠癌标本中巨噬细胞VEGF-C/D的表达进行检测,同时行巨噬细胞计数,并统计分析两者间存在的关系.结果 在结肠癌相关巨噬细胞中检测到两种淋巴管生成因子的表达.统计分析显示VEGF-C表达与巨噬细胞计数具有相关性.有淋巴结转移者VEGF-C阳性细胞率高于无转移组.结论 结肠癌肿瘤组织中,不仅肿瘤细胞可分泌表达VEGF-C/D,肿瘤相关巨噬细胞也可表达VEGF-C/D.肿瘤相关巨噬细胞可通过诱导结肠癌局部淋巴管生成,对肿瘤的转移可起到一定的作用.     

CD68+和CD163+巨噬细胞在口腔鳞状细胞癌中的浸润及作用

目的 了解CD68+、CD163+巨噬细胞的浸润数量与口腔鳞状细胞癌(OSCC)临床特征的相关性,探讨CD68+、CD163+巨噬细胞在OSCC中的作用及意义.方法 选取贵州医科大学附属口腔医院和贵阳市口腔医院2013-2016年手术切除的,经术后病理确诊,且有完整临床资料的OSCC患者42例,另设12例口腔颌面部正常组织作对照.应用免疫组织化学法检测CD68+、CD163+巨噬细胞在OSCC中的浸润数量,并分析其与OSCC临床特征的相关性.结果 OSCC中CD68+、CD163+巨噬细胞的浸润数量明显高于对照组(P<0.05);CD68+、CD163+巨噬细胞在中低分化的浸润数量明显高于高分化的浸润数量(P<0.05);CD68+巨噬细胞在有淋巴结转移的浸润数量明显低于无淋巴结转移的数量(P<0.05),在有淋巴结转移中CD163+巨噬细胞的浸润数量明显高于CD68+(P<0.05).CD68+和CD163+巨噬细胞在OSCC中的浸润数量呈正相关(r=0.48,P=0.00).结论 肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)、M2型巨噬细胞对OSCC具有一定的作用,TAMs可能抑制OSCC的淋巴结转移,而M2型巨噬细胞可能促进OSCC的淋巴结转移.     

口腔鳞癌患者 Ezrin蛋白与 CD44v6的表达及临床意义

目的：研究Ezrin蛋白和CD44v6在口腔鳞癌中的表达和意义,探讨两者表达的相互关系。方法用免疫组织化学SP法检测Ezrin蛋白和CD44v6在39例口腔鳞癌和28例正常口腔黏膜中的表达。结果1） Ezrin蛋白和CD44v6在口腔鳞癌中的表达水平显著高于正常口腔黏膜组（P＜0．01或 P＜0．05）;2）Ezrin蛋白的表达水平随口腔鳞癌的病理分级增高而增高（ P＜0．01）,CD44v6在口腔鳞癌各病理分级中的表达差异无统计学意义（P＞0．05）;3）在有淋巴结转移的口腔鳞癌中,Ezrin蛋白和CD44v6的表达水平高于无淋巴结转移组（P＜0．01或 P＜0．05）;4）Ezrin蛋白和CD44v6的表达水平与口腔鳞癌患者的年龄、性别无关（P＞0．05）;5）Ezrin蛋白和CD44v6在口腔鳞癌中的表达呈正相关（P＜0．01）。结论 Ezrin蛋白和CD44v6与口腔鳞癌的发生、发展和侵袭转移密切相关,联合检测Ezrin蛋白和CD44v6的表达可作为评估口腔鳞癌恶性程度及转移潜能的有效指标。