一个纤维蛋白原α链Arg19 Gly突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症家系

目的对一个遗传性异常纤维蛋白原血症家系进行表型和基因型分析。方法采集先证者及其父母外周血进行常规出凝血检查,用Clauss法和免疫比浊法分别检测纤维蛋白原（Fbg）活性和抗原。抽提DNA,PCR扩增纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG所有外显子及其侧翼序列,DNA测序并与基因文库比对确定基因异常。结果先证者活化部分凝血酶原时间（aPTT）、凝血酶原时间（PT）正常,凝血酶时间（TT）为28．10S,Fbg活性明显下降,抗原在正常范围内,活性显著低于抗原;其父表型检测结果与之相似。基因分析发现,先证者及其父亲F魄、FGA基因第2外显子均存在A1211G杂合碱基置换,导致Arg19Gly错义突变。结论鉴定该病例为遗传性异常纤维蛋白原血症,Fbgd链Arg19Gly杂合错义突变是致病原因。     

一种新型纤维蛋白原β链错义突变导致的遗传性低纤维蛋白原血症

目的：对临床发现的1例遗传性低纤维蛋白原血症进行基因及表型分析,探讨其分子发病机制。方法：采集先证者及其家系成员共2代6人的外周血,采用STAGO自动化血凝仪检测凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、D-D二聚体（D-D）和纤维蛋白降解产物（FDPs）;凝血酶凝固法（Clauss法）与免疫比浊法分别测定血浆纤维蛋白原活性（Fg:C）和抗原水平（Fg:Ag）。PCR扩增纤维蛋白原FGA、FGB和FGG基因的所有外显子和侧翼序列,PCR产物纯化后直接测序进行基因分析。分别用Swiss-PDViewer、在线分析系统对突变蛋白的结构、突变位点的保守性进行预测分析。结果：先证者PT和TT均延长,Fg:C（0.82 g/L）和Fg:Ag（1.19 g/L）明显降低;基因分析发现先证者FGB基因存在c.425T＞G杂合突变,导致纤维蛋白原Bβ链上121位亮氨酸突变为精氨酸（Leu121Arg）。其父亲及儿子也存在该突变位点。蛋白模型分析显示Leu121突变为Arg121后,氨基酸极性发生改变,并且新增与Try117、Met118、Trp125之间的氢键;蛋白同源性分析显示：Leu121在脊椎动物间有较高的保守性。结论：纤维蛋白原Bβ链Leu121Arg杂合突变是引起该家系遗传性低纤维蛋白原血症的主要原因。     

1例由p.Arg35Cys引起遗传性异常纤维蛋白原血症家系的研究

目的 分析武鸣壮族地区1例FGA基因杂合突变引起的遗传性异常纤维蛋白原血症的表型和基因型,探讨其发病机制。方法 对先证者家系三代5人进行外周血采集,使用凝血分析仪检测PT、APTT、FIB、TT等凝血项目,FIB采用PT演算法和Clauss法检测;采用DETA抗凝管收集全血,通过NGS筛选,用Sanger测序验证FGA、FGB、FGG基因编码区突变。结果 先证者及其父亲表现出FIB-Clauss法水平降低和凝血酶时间延长,而其妹妹和两个女儿均正常。高通量基因测序显示先证者及其父亲检测到FGA c.103C>T杂合错义突变,而先证者的妹妹和两个女儿未检测到该突变。结论 导致该家系成员遗传性异常纤维蛋白原血症的分子机制是FGA c.103C>T杂合错义突变,该突变导致蛋白质中第35位氨基酸由精氨酸变为半胱氨酸(p.Arg35Cys),从而导致遗传性异常纤维蛋白原血症。     

一个遗传性无纤维蛋白原血症家系的基因分析

目的 对一例遗传性无纤维蛋白原血症家系进行基因分析。方法 用PCR法对该家系先证者纤维蛋白原基因FGA、FGB和FGG的所有外显子及其侧翼序列进行扩增,PCR产物纯化后直接测序,检测其基因突变。结果 先证者呈纤维蛋白原FGA基因g.1892-1899位AGTA／GTAA 4bp和g.1978-3215位1238bp复合杂合缺失。结论 纤维蛋白原FGA基因复合杂合缺失是引起该家系先证者无纤维蛋白原血症的原因。     

FGA基因c.104G＞A杂合突变导致的先天性低纤维蛋白原血症家系的基因分析

目的通过对1例先天性低纤维蛋白原血症患者家系的基因分析,探讨先天性纤维蛋白原血症的发生机制。方法采集先证者及其家系成员的外周血,进行凝血相关项目以及肝肾功能的检测,PCR扩增先证者FGA、FGB、FGG的全部外显子及其侧翼序列、5''和3''非翻译区及家系成员相应的突变位点区域,PCR产物纯化后直接测序,寻找突变位点,以反向测序验证所发生的突变;采用生物信息学工具分析该突变对蛋白质的影响。结果先证者及其父亲Fg：C、TT明显异常,而Fg：Ag水平均在正常参考范围,家系其他成员凝血指标均正常;基因测序结果显示本家系存在FGA基因第2外显子c.104G＞A的错义突变（密码子CGT→CAT,即精氨酸突变为组氨酸）,生物信息学软件预测结果表明,该突变的发生具有致病性。结论导致本家系成员低纤维蛋白原血症的分子机制是FGA基因Arg16His杂合突变。     

两个遗传性异常纤维蛋白原血症家系分析

目的对两个因FGG基因杂合突变导致的遗传性异常纤维蛋白原血症（CD）家系进行表型和基因型分析,探讨CD的分子发病机制。方法检测两个先证者及其家系成员PT、APTT、纤维蛋白原活性（Fa）、Fib、TT、D-二聚体（D-D）、纤维蛋白（原）降解产物（FDPs）等凝血功能指标。采用PCR法扩增先证者编码Fib的FGA、FGB、FGG等3个基因,纯化产物后测序,寻找突变发生位点;采用反向测序法验证突变,同时检测其他家系成员相同基因位点;使用PolymorphismPhenotypingv2和Muta-tionTaster生物信息学软件预测突变位点对Fib功能的影响,利用PyMOL软件构建Fib的蛋白空间模型,预测突变对Fib结构的影响。结果两个先证者PT、APTT和TT均正常或略高于正常值,Fa明显降低（分别为0.60、0.61g/L）,Fib基本正常（分别为2.31、1.97g/L）,D-D、FDPs均在正常范围内。基因分析显示家系1先证者FGG基因存在c.952G>A杂合突变,导致292位甘氨酸突变为丝氨酸（Gly292Ser）,其姐姐同样存在此基因突变;家系2先证者FGG基因存在c.902G>A杂合突变,导致275位精氨酸突变为组氨酸（Arg275His）,其父亲和祖父存在相同的基因突变。PolymorphismPhenotypingv2和MutationTaster分析提示该两种突变会引起Fib功能变化,有致病性。PyMOL突变模型提示,家系1中Fib的γ链发生Gly292Ser,突变氨基酸与周围氨基酸相互作用的氢键数量增加;家系2中Fib的γ链发生Arg275His,突变氨基酸与周围氨基酸相互作用的氢键数量减少,蛋白结构的空间稳定性均发生改变。结论家系1FGG基因存在c.952G>A杂合突变,家系2FGG基因存在c.902G>A杂合突变,导致翻译的Fib分子结构与功能发生致病性变化,是引起CD的主要分子机制。     

α链Gly36Ser突变致异常纤维蛋白原血症家族的纤维蛋白原功能分析

目的 分析一个由α链Gly36Ser突变引起、患病成员症状有差异的遗传性异常纤维蛋白原血症家族的纤维蛋白原（fibrinogen, Fg）功能。方法 收集该遗传性异常纤维蛋白原血症家族患者外周血样本，常规凝血功能试验筛查家族成员凝血功能；NGS法筛查Fg基因（FGA、FGB、FGG）突变位点，Sanger法验证以确认突变；生物信息软件预测突变Fg功能；血栓弹力图（TEG）和功能性Fg TEG试验对家族所有患病者进行Fg凝聚功能评价；Fg动态凝聚试验和纤维蛋白溶解试验检测患病成员纤维蛋白聚集和溶解功能。结果 该家族共有突变基因携带者11名，常规凝血实验和基因突变检测均符合异常纤维蛋白原血症的诊断；11名突变基因携带者经Sanger法验证为同一突变位点；Uniprot和SWISS-MODEL等预测软件均表明该突变为影响纤维蛋白原聚合的有害突变；家族突变基因携带者中5名有症状者TEG相关参数与无症状者相比明显变化，Fg凝集试验显示该5名有症状者凝固曲线起峰时间明显延长且峰值降低；纤维蛋白溶解试验表明家系中多数（7/11）突变基因携带者纤维蛋白在限定时间中不能完全溶解。结论 α链Gly36Se...     

His348Gln杂合突变伴hrg353Gln杂合多态性导致的遗传性凝血因子Ⅶ缺陷症家系分析

目的：对1例遗传性凝血因子Ⅶ（FVH）缺陷患者进行基因分析和家系调查,初步探讨其发病的分子机制。方法：检测先证者及其家系成员凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、凝血酶原活性（FII：C）、凝血因子V活性（FV：C）、FVII活性（FVII：C）和凝血因子x活性（FX：C）及FVII抗原（FVII：Ag）等进行表型诊断;用DNA直接测序法分析先证者Ⅳ基因的全部外显子、侧翼、5’和3’非翻译区及家系成员相应的突变位点区域,用反向测序证实所发生的突变。结果：先证者PT延长为22．4s,FVII：C和FVII：Ag明显降低,分别为7％和10％;父亲、母亲、姐姐及儿子的PT正常或稍延长,FVII：c分别为63％、54％、57％和46％,FVH：Ag分别为67％、53％、61％和49％;先证者和所有家系成员的APTT及其他凝血指标均在正常参考范围内。测序发现先证者Ⅳ基因第8号外显子存在g．11482T〉G（His348Gln）杂合突变和g．11496G〉A（Arg353Gln）杂合多态性;其母亲、姐姐、儿子均存在F7基因g．11482T〉G杂合突变;父亲存在,7基因g．11496G〉A杂合多态性。结论：肜基因His348Gln杂合突变协同Arg353Gln杂合多态性是导致该先证者FVII缺陷症的分子机制。     

肝硬化患者凝血功能四项指标及血小板测定的临床意义

①目的探讨肝硬化患者凝血功能变化以及血小板计数变化及其意义。②方法 测定56饲肝硬化患者和40例健康体检寿活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fg）以及血小板（PKT）。③结果肝硬化患者存在凝血功能障碍，APT、FT、TT、Fg以及PLT与对照组比较有显著差异。④结论肝硬化患者APTT、PT、TT延长，Fg、PUF值降低。     

ACL-7000血凝仪测定纤维蛋白原的方法学比较及临床应用

目的比较ACL-7000血凝仪测定纤维蛋白原的2种方法和探讨其临床应用。方法ACL-7000血凝仪的Von Clauss法和PT—der法分别检测不同纤维蛋白原含量的病人血浆。结果纤维蛋白原小于2．00g／L或在2．00～4．00g／L之间，2种方法没有差异显著性（P〉0．05），纤维蛋白原大于4．00g／L时，PT—der法所得结果明显高于Von Clauss法（P〈0．02）。结论纤雏蛋白原小于2．00g／L或在2．00～4．00g／L之间时，可以使用PT—der法替代Von Clauss法检测纤维蛋白原；纤维蛋白原大于4．00g／L时，不能用PT—der法替代Von Clauss法。因此，在临床工作中，应根据疾病的需要及纤雏蛋白原的含量，选择不同的检测方法。     

孕妇产前凝血四项检测结果分析及临床意义

目的：探讨临产孕妇凝血四项（PT、APTT、TT、Fib）检测结果的临床意义。方法：采用自动血凝分析仪对123例临产孕妇和95例健康非妊娠妇女进行凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（Fib）、凝血时间（TT）进行检测。结果：实验组PT、APTT均较对照组缩短（P〈0.05）,Fib高于对照组（P〈0.01）。结论：临产孕妇体内凝血、抗凝血成分及纤维蛋白溶解活性均发生明显改变,血液处于高凝状态。在产前及分娩过程中及时监测各项凝血指标对预防产科意外有重要意义。     

妊娠晚期孕妇凝血四项检测分析

目的：探讨妊娠晚期孕妇血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fg）检测对临床的参考价值。方法：对妊娠晚期孕36～40周（孕妇324例）与正常非妊娠妇女104例（对照组）的凝血四项检测结果进行比较。结果：妊娠晚期组与对照组比较,PT,APTT和Fg值比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,TT值比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：妊娠晚期孕妇的凝血功能较正常非孕妇女有明显变化,因此在临产前、分娩过程中及产后,都应监测其各项凝血指标的变化,对预测和治疗产妇异常出血,降低DIC的发生率有着重要的意义。     

凝血酶原时间衍算法测定纤维蛋白原的差异性分析

目的了解纤维蛋白原Clauss法与PT衍算法测定结果之间的可比性,判定其临床应用价值。方法在Sysmex CA-1500凝血仪上分别以两种方法测定137例患者的血浆纤维蛋白原（Fbg）浓度,以Clauss法测定值为基础分成〈1.99g/L、2-2.99g/L、3-4g/L、〉4g/L四组,用相关性分析和配对t-检验进行分析。结果两种方法测定的四组纤维蛋白原的差异有统计学意义,PT衍算Fbg值明显高于Clauss法（P〈0.05）。结论PT衍算法不适于代替Clauss法在临床筛查中进行Fbg测定、临床诊断和治疗监测。     

连续性血液净化治疗心肺复苏术后凝血功能障碍的临床疗效观察

目的 探讨连续性血液净化（CBP）治疗心肺复苏术（CPR）后凝血功能障碍的临床疗效。方法 选取2010年10月-2013年5月承德市中心医院经急诊院前、院内行CPR的心搏骤停患者56例,采用随机数字表法分为对照组20例和治疗组36例。对照组采用常规治疗,治疗组入重症监护室（ICU）后予以CBP联合常规治疗,记录两组患者治疗前（T1）及治疗后24 h（T2）、48 h（T3）及72 h（T4）凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fg）水平及72 h 存活率、多器官功能障碍综合征（MODS）发生率。结果 对照组和治疗组不同时间PT、APTT、TT、Fg水平比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;T1 时治疗组与对照组PT、APTT、TT、Fg水平比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）;T2、T3、T4 时治疗组与对照组PT、APTT、TT比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;T4 时治疗组Fg水平较对照组升高（P＜0.05）;治疗组PT、APTT和TT在T2、T3、T4时较T1时降低,T3、T4时较T2时降低,T4时较T3时降低（P＜0.05）;治疗组Fg水平T3、T4时较T1时升高,T4时较T2、T3时升高（P＜0.05）。治疗组患者72 h后存活率高于对照组,MODS发生率低于对照组（P＜0.05）。结论 早期应用CBP可使CPR后凝血功能障碍患者短期内临床获益,CBP是治疗CPR后凝血功能障碍、防治MODS和改善预后的一种有效手段。     

依达拉奉对血塞通治疗急性脑梗死患者凝血纤溶系统的影响

目的探讨依达拉奉联合血塞通对急性脑梗死患者凝血纤溶系统的影响。方法将79例急性脑梗死患者随机分为治疗组和对照组,对照组39例,给予注射用血塞通每日0．4g静脉滴注,治疗组40例,在对照组用药基础上加用依达拉奉注射液每日30mg静脉滴注,疗程14d。治疗前及治疗后第14天分别测定患者的凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）和纤维蛋白原（Fg）,并进行美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分。结果治疗第14天,治疗组血赡浓度及NIHSS评分较对照组明显降低（P〈0．05）,血浆PT、APTT和TT值两组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论依达拉奉对血塞通治疗急性脑梗死患者血浆胛、APTT和TT值无明显影响,但能够降低患者血浆Fg的浓度,进一步改善神经功能缺损症状。     

凝血指标和D-二聚体及FDP水平检测对骨折病人的临床意义

目的探讨凝血指标和D-二聚体（DD）及血浆纤维蛋白原降解产物（FDP）水平检测对骨折病人的临床意义。方法选取骨折病人57例作为观察组,同期健康体检者68名作为对照组,比较2组凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fg）和DD、FDP水平,并比较观察组不同类型骨折病人Fg、DD、FDP阳性率,以及发生深静脉血栓（DVT）与未发生DVT病人的Fg、DD、FDP水平。结果观察组Fg、DD、FDP水平均明显高于对照组（P < 0.01）,TT低于对照组（P < 0.05）,2组PT和APTT差异均无统计学意义（P>0.05）。观察组中不同类型骨折病人Fg、DD阳性率差异均无统计学意义（P>0.05）,FDP阳性率差异有统计学意义（P < 0.05）。术前1 d,观察组中发生DVT与未发生DVT病人的Fg、DD、FDP水平差异无统计学意义（P>0.05）;术后7 d,发生DVT病人Fg、DD和FDP水平均明显高于未发生DVT病人（P < 0.01）,且发生DVT病人Fg、DD、FDP水平均较术前1 d明显升高（P < 0.01）。结论凝血指标和DD、FDP水平可有效反映骨折病人凝血功能,灵敏度较高,对预防病人DVT形成具有一定的指导价值。     

一个遗传性纤溶酶原缺陷症家系的表型与基因突变分析

目的：对一个遗传性纤溶酶原（PLG）缺陷症家系进行表型和基因变异分析,探讨其发病的分子机制。方法：检测先证者及其家系成员（共3代4人）的凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（FIB）、D-二聚体（D-D）、纤维蛋白（原）降解产物（FDP）、纤溶酶原活性（PLG:A）、纤溶酶原抗原（PLG:Ag）、抗凝血酶活性（AT:A）、蛋白C活性（PC:A）及蛋白S活性（PS:A）等指标以明确诊断。用DNA直接测序法分析先证者PLG基因的所有外显子及侧翼序列、5’和3’非翻译区及家系成员相应的突变位点区域,用反向测序予以证实。应用ClustalX-2.1-win软件将突变氨基酸进行同源物种序列保守性分析;利用PolyPhen-2、PROVEAN、SIFT和MutationTaster 4个在线生物信息学软件分析突变氨基酸对蛋白质功能的影响;用Swiss-PdbViewer软件对突变位点进行蛋白质模型和氨基酸相互作用分析。结果：先证者和其祖父、父亲PLG:A均降低为正常值的50%左右,PLG:Ag含量正常,结果分别为45%、95%,64%、94%和64%、104%;基因分析发现先证者PLG基因第15号外显子存在c.1858G＞A杂合错义突变导致p.Ala601Thr;其祖父和父亲具有同样的基因突变。Ala601在其11个同源物种间高度保守;4个在线生物信息学软件预测结果一致,均为有害突变,可引起相应疾病。结论：该先证者的PLG基因第15号外显子存在c.1858G＞A（p.Ala601Thr）杂合错义突变;祖孙三代均为Ala601Thr杂合子,突变符合孟德尔遗传规律,且与该家系PLG活性降低有关。     

老年2型糖尿病患者凝血指标变化探讨

目的：研究老年2型糖尿病患者凝血指标的变化，及其与血管并发症的关系。方法：选取病史5年以上老年2型糖尿病患者75例，其中血糖控制良好、无血管并发症组31例（男18，女13），血糖控制不佳、有血管并发症组44例（男27，女17）；相应年龄健康对照人群30例（男、女各15例）。分别测定血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fg）、空腹血糖（Glu)、糖化血红蛋白（HbA1c)水平。结果：无论有无血管并发症，老年2型糖尿病患者的血浆Fg水平均较健康对照组升高，有血管并发症组Fg水平高于无并发症组，且同组内女性患者Fg水平高于男性；老年2型糖尿病组PT、APTT较对照组缩短，且有并发症组PT、APTT低于无并发症组；上述参数的变化与空腹血糖或糖化血红蛋白水平无关。结论：老年2型糖尿病患者存在凝血功能的紊乱，凝血功能紊乱是患者血管并发症的重要因素，并且可能是导致女性患者较男性患者有较高的血管病变风险的因素之一。     

早产低体重儿凝血功能的监测及临床意义

目的探讨早产低体重儿凝血功能的特点及监测意义。方法对45例早产低体重儿和45例足月儿进行凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fg）检测。结果与足月儿相比,早产低体重儿PT、APTT延长,Fg降低,具有显著性差异（P〈0.05）。结论早产低体重儿出生后处于低凝血因子状态,有出血倾向,应及早监测凝血指标,采取有效预防措施,纠正凝血障碍。     

大量输血后纤维蛋白原和血小板的临床观察

目的 24h内输血量〉3500mL后纤维蛋白原（the fibrinogen,FIB）和血小板（the platelet,PLT）的临床观察。方法选择择期手术的患者25例,在24h内输血量〉3500ml,监测输血前和输血后纤维蛋白原（FIB）和血小板（PLT）、凝血酶原时间（prothrombin time,PT）、活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time,APTT）、凝血酶时间（thrombin time,TT）。结果 24h内输血量〉3500mL后血小板（PLT）和纤维蛋白原（FIB）明显下降（P〈0.01）,凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）延长（P〈0.05）。结论患者大量输血后极易出现稀释性血小板减少,纤维蛋白原溶解,应及时动态监测并解决相应问题,防止严重并发症的发生。