HIF-1α和CXCR4蛋白在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和趋化因子受体4（CXCR4）蛋白在乳腺癌组织中的表达及与临床病理因素的关系。方法采用免疫组化法检测60例乳腺癌、30例乳腺纤维腺瘤和20例正常乳腺组织中HIF-1α和CXCR4蛋白的表达，分析乳腺癌组织中HIF-1α和CXCR4蛋白表达之间及其与临床病理因素的关系。结果HIF-1α和CXCR4蛋白在正常乳腺组织中无阳性表达；在乳腺纤维腺瘤和乳腺癌组织中，HIF-1α蛋白的阳性表达率分别26．7％和65．0％（P〈0．05），CXCR4蛋白的阳性表达率分别为23．3％和56．7％（P〈0．01）。HIF-1α蛋白表达与淋巴结转移、肿瘤分期、组织学分级和血管内皮生长因子（VEGF）表达密切相关（P〈0．05），与年龄、肿瘤大小、雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）表达无关；CXCR4蛋白表达与淋巴结转移、肿瘤分期以及VEGF、ER和PR表达密切相关（P〈0．05），与年龄、肿瘤大小和组织学分级无关。HIF-1α与CXCR4蛋白表达呈正相关（r=0．346，P=0．007）。结论HIF-1α和CXCR4蛋白在乳腺癌组织中的高表达与乳腺癌发生、发展及淋巴结转移密切相关。联合检测HIF-1α和CXCR4蛋白的表达，有利于评估乳腺癌的生物学行为，提高预后判断的准确性，并对临床治疗有重要的指导意义。     

HIF-1α和CXCR4蛋白在乳腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和趋化因子受体4(CXCR4)蛋白在乳腺癌组织中的表达及与临床病理因素的关系.方法 采用免疫组化法检测60例乳腺癌、30例乳腺纤维腺瘤和20例正常乳腺组织中HIF-1α和CXCR4蛋白的表达,分析乳腺癌组织中HIF-1α和CXCR4蛋白表达之间及其与临床病理因素的关系.结果 HIF-1α和CXCR4蛋白在正常乳腺组织中无阳性表达;在乳腺纤维腺瘤和乳腺癌组织中,HIF-1α蛋白的阳性表达率分别26.7%和65.0%(P<0.05),CXCR4蛋白的阳性表达率分别为23.3%和56.7%(P<0.01).HIF-1α蛋白表达与淋巴结转移、肿瘤分期、组织学分级和血管内皮生长因子(VEGF)表达密切相关(P<0.05),与年龄、肿瘤大小、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)表达无关;CXCR4蛋白表达与淋巴结转移、肿瘤分期以及VEGF、ER和PR表达密切相关(P<0.05),与年龄、肿瘤大小和组织学分级无关.HIF-1α与CXCR4蛋白表达呈正相关(r=0.346,P=0.007).结论 HIF-1α和CXCR4蛋白在乳腺癌组织中的高表达与乳腺癌发生、发展及淋巴结转移密切相关.联合检测HIF-1α和CXCR4蛋白的表达,有利于评估乳腺癌的生物学行为,提高预后判断的准确性,并对临床治疗有重要的指导意义.     

HIF-1α、Survivin与乳腺癌

缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是细胞缺氧适应与应答调节的关键因子,在机体生理及病理过程中起关键作用。HIF-1α对肿瘤生物学特性改变的调控成为近年来肿瘤研究的热点之一。生存素Survivin是凋亡抑制蛋白家族的新成员,参与调控细胞的增殖和凋亡。在人类多种恶性肿瘤中,Survivin高表达并提示预后不良。本文HIF-1α和Survivin与乳腺癌的关系研究进展加以综述。     

HIF-1α表达与乳腺癌分级及分子亚型的关系研究

目的观察不同级别和不同分子亚型乳腺癌中HIF-1α的表达,探讨HIF-1α在乳腺癌中表达的意义。方法收集乳腺癌病例105例和正常对照17例,根据2012 WHO乳腺肿瘤中的标准进行分级,通过免疫组化检测各级中HIF-1α、ER、PR和HER-2的表达并根据常用的四分型法进行分型。结果 HIF-1α在正常乳腺和各级乳腺癌中的表达差异有统计学意义(P0.05),其中Ⅱ级、Ⅲ级乳腺癌中的HIF-1α表达阳性率(76.19%和80.00%)高于正常乳腺和Ⅰ级乳腺癌(17.65%和23.53%)(P0.01),正常乳腺(17.65%)、Ⅰ级(23.53%)之间以及Ⅱ级(76.19%)、Ⅲ级(80.00%)之间的表达无差异(P0.05)。105例乳腺癌中各分子亚型HIF-1α表达的阳性率无差别,且均未检测到HIF-1α的表达与ER、PR和HER-2的相关性(P0.05)。但不同级别乳腺癌中各分子亚型分布情况有差异(P0.05)。结论 HIF-1α可能在恶性度较高的乳腺癌中起着更重要的调控作用,而HIF-1α与乳腺癌分子亚型的关系仍需进一步探讨,为HIF-1α为靶点的个体化治疗奠定基础。     

HIF-1α和CXCR4蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和趋化因子受体4（CXCR4）蛋白在胃癌组织中的表达及与胃癌临床病理因素的相关性。方法采用免疫组化sP法检测44例胃癌组织、44例相应癌旁组织（距癌组织边缘〉5cm）中HIF-1α和CXCR4蛋白的表达,分析胃癌组织中HIF-1α和CXCR4蛋白表达与胃癌临床病理因素的相关性,并分析HIF-1α和CXCR4蛋白表达之间是否相关。结果癌旁组织中HIF-1α和CXCR4蛋白均无表达,胃癌组织中HIF-1α和CXCR4蛋白阳性表达率分别为59．1％和63．6％,与癌旁组织比较差异均有统计学意义（P〈0．01）;HIF-1α蛋白表达与胃癌TNM分期和浸润深度相关（P〈0．01）,与是否淋巴结转移相关（P〈0．05）,与性别、年龄、肿瘤直径和分化程度无关;CXCR4蛋白表达与是否淋巴结转移相关（P〈0．01）,与TNM分期相关（P〈0．05）,与性别、年龄、肿瘤直径、浸润深度和分化程度无关。胃癌组织中HIF-1α与CXCR4蛋白表达呈正相关（r=0．332,P=0．028）。结论HIF-1α和CXCR4蛋白表达可能与胃癌的发生有关,胃癌组织中HIF-1α和CXCR4蛋白的高表达预示胃癌恶性程度高,临床分期较晚,可能存在淋巴结转移。联合检测HIF-1α和CXCR4蛋白的表达,有利于评估胃癌的生物学行为,提高预后判断的准确性,并对临床治疗有重要指导意义。     

HIF-1α对间充质干细胞SDF-1/CXCR4的调控作用研究

[目的]探讨缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）对间充质干细胞基质细胞衍生因子-1（stromal cell-derived factor-1,SDF-1）/CXC趋化因子受体4（chemokine receptor 4,CXCR4）的调控作用。[方法]贴壁法培养ICR小鼠骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）;采用RNA干扰技术用SuperFectinTMⅡ转染HIF-1αsiRNA于MSCs;实验分为五组：常氧组、缺氧组、转染Control siRNA组、转染HIF-1αsiRNA常氧培养组、转染HIF-1αsiRNA缺氧培养组;RT-PCR检测HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA表达水平;Western blotting检测HIF-1α、SDF-1α、CXCR4蛋白表达水平。[结果]同常氧组比较,缺氧组HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平提高（P〈0.05）;同转染Control siRNA组比较,转染HIF-1αsiRNA常氧培养组HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平降低（P〈0.05）;同缺氧组比较,转染HIF-1αsiRNA缺氧培养组HIF-1α、SDF-1α、CXCR4 mRNA及蛋白表达水平降低（P〈0.05）。[结论]缺氧可使MSCs的HIF-1α、SDF-1α、CXCR4的表达提高,常氧与缺氧条件下抑制HIF-1α的表达可使SDF-1α、CXCR4的表达降低,HIF-1α在间充质干细胞中对SDF-1/CXCR4有调控作用。     

HIF-1α调控4-羟基他莫昔芬对乳腺癌MCF-7细胞敏感性的研究

目的 该研究通过建立人乳腺癌4-羟基他莫昔芬(4-OHT)耐药细胞系(MCF-7/TR),探究低氧诱导因子1α(HIF-1α)对乳腺癌MCF-7细胞4-OHT耐药的影响。方法 采用他莫昔芬的体内活性形式4-OHT建立乳腺癌耐药细胞MCF-7/TR。MTT实验检测4-OHT对乳腺癌细胞MCF-7、MCF-7/TR细胞活力的影响,并测定耐药指数(RI);Western blot检测MCF-7、MCF-7/TR细胞中HIF-1α蛋白的表达水平;采用MTT法和流式细胞术AV/PI双染法检测,HIF-1α抑制剂(LW6)或siRNA HIF-1α干预作用后4-OHT对MCF-7/TR细胞的影响以及HIF-1α稳定剂（FG-4592）处理后4-OHT对MCF-7细胞的影响。结果 结果显示,MCF-7/TR耐药细胞株成功构建,其RI为(5.56±0.80);与MCF-7细胞相比,MCF-7/TR细胞中HIF-1α高表达,且4-OHT作用后MCF-7/TR细胞中HIF-1α的表达水平上调;给予LW6或沉默HIF-1α的表达后,HIF-1α的表达下调增强了4-OHT对MCF-7/TR细胞的抑制作用;给予...     

HIF-1α和CXCR4在肾透明细胞癌中的表达

目的 探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及趋化因子受体(CXCR4)在肾透明细胞癌(CCRCC)中的表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学SP法从蛋白水平检测了48例CCRCC和20例远离肾癌的正常组织HIF-1α和CXCR4的表达,并分析其与临床病理分级、分期及淋巴转移的关系.结果 HIF-1α和CXCR4在CCRCC组织的阳性表达率分别为58.3%、77.0%,正常肾组织中HIF-1α及CXCR4蛋白表达阴性,差异有统计学意义(P＜0.01).HIF-1α和CXCR4与不同临床分期、病理分级及淋巴转移有关(P＜0.05),与性别、年龄、肿瘤大小无关(P＞0.05).HIF-1α与CXCR4在CCRCC中的表达呈正相关(P＜0.05).结论 HIF-1α和CXCR4在CCRCC中的高表达可能对CCRCC的发生、发展起促进作用.     

乳腺癌组织HIF-1α和Sema 4D表达及其与淋巴管密度和各临床病理指标的关系

目的通过检测HIF-1α和Sema 4D在乳腺癌组织表达,探讨其与淋巴管密度（LVD）和临床病理指标的关系。方法采用免疫组化SP法检测110例乳腺癌组织标本HIF-1α和Sema 4D表达,检测微淋巴管密度（LVD）,依据不同临床病理特征分组并进行组间比较,并与乳腺纤维腺瘤组织标本对照。结果乳腺癌组织HIF-1α和Sema 4D阳性表达率分别为72.72%（80/110）和77.27%（85/110）;HIF-1α与Sema 4D表达呈正相关性（r=0.691,P〈0.01）。乳腺癌组织LVD显著高于纤维腺瘤组（P〈0.01）,淋巴结转移组LVD显著高于无淋巴结转移组（P〈0.01）;p TNMⅠ~Ⅱ期组、淋巴结无转移组癌组织HIF-1α和Sema 4D表达阳性率明显低于p TNMⅢ期组、有淋巴结转移组（P〈0.05,P〈0.01）,不同年龄、组织学分级、肿块大小组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论乳腺癌组织HIF-1α、Sema 4D高表达,可能与淋巴管的增生、转移侵袭有密切关系。     

芒柄花素抑制乳腺癌细胞HIF-1α/CXCR4信号以及细胞增殖和迁移

目的研究芒柄花素对乳腺癌细胞行为的影响及其作用机制。方法利用不同浓度(5、10、15、20μM)的芒柄花素处理MDA-MB-231细胞,分别处理48 h。应用q RT-PCR法检测细胞中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和CXC趋化因子受体4(CXCR4)m RNA的表达,利用Western blot方法检测细胞中HIF-1α和CXCR4蛋白的表达。构建p Shuttle-HIF-1α过表达载体并转染MDA-MB-231细胞。利用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,利用Transwell法检测细胞体外迁移。结果相比于对照组,芒柄花素显著降低MDA-MB-231细胞中HIF-1α和CXCR4 m RNA和蛋白的表达水平(P<0.05),并且具有剂量依赖性。过表达HIF-1α提高芒柄花素处理后细胞中HIF-1α和CXCR4的表达水平(P<0.05),促进癌细胞增殖(P<0.05),并促进癌细胞体外迁移(P<0.05)。结论芒柄花素可能通过调控乳腺癌细胞中HIF-1α/CXCR4信号转导影响癌细胞增殖和迁移。     

提高间充质干细胞表面CXCR4表达的实验研究

目的：探索提高间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）表面趋化因子受体4（CXCR4）表达的方法。方法：分别对兔骨髓间充质干细胞（Rabbit-MSCs）和人脐带间充质干细胞（HUC-MSCs）进行培养,采用3%低氧环境、不同浓度基质细胞衍生因子-1（SDF-1）（1 ng/mL,10 ng/mL,100 ng/mL）进行预处理,24 h后采用CCK-8试剂盒检测细胞活性,流式细胞仪及免疫荧光染色检测MSCs表面CXCR4表达情况。结果：两种预处理方式对MSCs活性无影响,经低氧和SDF-1预处理后MSCs表面CXCR4表达提高,低氧处理较SDF-1效果更好。结论：低氧环境对提高间充质干细胞表面CXCR4表达具有更好的效果。     

CXCR4抑制性多肽对不同乳腺癌细胞株中CXCR4表达的影响

目的:探讨CXCR4抑制性多肽(NT21MP)对HER-2受体表达不同的乳腺癌MCF-7细胞和SKBR3细胞CXCR4受体表达的影响。方法:免疫组化法和RT-PCR法检测MCF-7、SKBR3细胞中HER-2与CXCR4的表达;分别用1μg/ml和10μg/mlNT21MP处理乳腺癌SKBR3、MCF-7细胞48h后,用RT-PCR法和Western blot法检测CXCR4 mRNA及其蛋白的表达。结果:CXCR4在乳腺癌细胞SKBR3和MCF-7表达水平相似(P>0.05),HER-2表达水平差异有统计学意义(P<0.01);NT21MP显著下调人乳腺癌细胞SKBR3、MCF-7细胞中CXCR4受体的表达,但存在细胞差异性(P<0.01)。结论:NT21MP能不同程度地下调乳腺癌细胞MCF-7和SKBR3 CXCR4受体表达。     

基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4对造血干细胞调控的研究进展

造血干细胞（hematopoietic stemccells，HSCs）通常来源于骨髓，存在于外周血及脐带血，具有较强的自我更新和分化发育能力，可以产生各种类型的血细胞。以往的基础研究和临床实践主要是将HSCs移植作为治疗血液系统疾病、先天性遗传疾病以及多发性和转移性恶性肿瘤疾病的有效方法。现有资料表明，HSCs移植不仅可以被认为是重塑患者造血功能与免疫功能的治疗措施，还可以成为一项全新的与组织修复相关的生物学疗法。     

Inhibitory Effect of HCPT on Expression of HIF-1α and Downstream Genes in Hypoxic Human Cervical SiHa Cancer Cells

The hypoxic model to simulate hypoxic microenvironment in solid tumors was established and the effect of hydrocamptothecin （HCPT） on the hypoxia-induced over-expression of HIF-1α and VEGF genes was explored. Human cervical cancer SiHa cells were cultured in vitro under hypoxic conditions （37℃, 5% CO2, 1%O2） and treated with different concentrations of HCPT for 24 h. The mRNA and protein expression levels of HIF-1α, VEGF and Glutl in SiHa cells were detected by semi-quantitative RT-PCR and Western blot respectively. Normoxic control groups were exposed to normoxic conditions for 24 h. Under normoxic conditions, HCPT had no obvious effects on the HIF-1α and VEGF gene expression. Hypoxia induced the up-regulation of HIF-1α protein and downstream VEGF gene, and HCPT showed a dose-dependently inhibitory effect on the hypoxia-induced over-expression of HIF-1α protein and VEGF gene expression in SiHa cells, whereas HCPT had no significant effect on the HIF-1α mRNA expression. No difference in HCPT cytotoxic- ity was observed between hypoxic groups and normoxic control groups. It was suggested that HCPT could inhibite the expression of HIF-1α protein and downstream VEGF gene in hypoxic SiHa cells in a dose-dependent manner, and the inhibitory effect was not related with HCPT cytotoxicity.     

青年乳腺癌组织中缺氧诱导因子-1α的表达与其生物学特征的关系

目的:研究青年乳腺癌组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达与其生物学特征的关系。方法:采用SP法检测手术切除80例乳腺癌标本HIF-1α的表达,分析30例青年乳腺癌组织中HIF-1α的表达与其生物学特征的关系。结果:35岁以下乳腺癌(青年乳腺癌)组织HIF-1α、VEGF的阳性率高于35岁以上者,差异有显著意义。HIF-1α的表达在不同分化程度、肿瘤大小、腋淋巴转移状况、ER及PR状况间差异无显著意义。结论:青年乳腺癌组织HIF-1α的高表达可能是其预后不良的重要原因之一,检测HIF-1α在青年乳腺癌组织中的表达水平,并进行针对性的治疗有望提高青年乳腺癌的诊断与治疗水平。     

CXCR4/SDF-1对乳腺癌细胞MCF-7增殖作用的影响

目的:探讨CXCR4/SDF-1生物学轴对人乳腺癌细胞MCF-7生长与增殖的影响. 方法:采用Western Blot免疫印迹法检测MCF-7细胞CXCR4蛋白的表达. 以CXCR4单克隆抗体(CXCR4 mAb)作用MCF-7细胞,通过MTT比色法、软琼脂克隆形成实验和细胞周期检测观察MCF-7细胞的生长情况;通过流式细胞仪检测MCF-7细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)表达. 结果:MCF-7细胞表达CXCR4蛋白;CXCR4 mAb作用后,MCF-7细胞生长能力明显降低,并且PCNA蛋白含量由对照组的(91.6±5.3)%降为(78.1±3.6)%(P＜0.05). 结论:CXCR4 mAb可明显抑制MCF-7细胞的增殖.     

CXCR4-siRNA重组腺病毒载体沉默人卵巢癌细胞株CXCR4基因表达的研究

目的:研究CXCR4-siRNA重组腺病毒载体对人卵巢癌细胞株SKOV3的CXCR4基因表达的影响.方法:Pac Ⅰ酶切CXCR4-siRNA重组腺病毒载体使其线性化,应用HEK293细胞大量包装扩增病毒,收集病毒液,转染人卵巢癌细胞株SKOV3.细胞分为3组:siRNA组,转染空病毒载体的阴性对照组,细胞不做任何处理的空白对照组.通过PCR、Western blot、免疫组化检测CXCR4基因沉默效果.结果:包装扩增后病毒滴度为6×108 PFU/ml,荧光显微镜下可观察到SKOV3细胞中绿色荧光蛋白的大量表达,重组腺病毒能够有效抑制SKOV3细胞中CXCR4的表达.结论:CXCR4-siRNA重组腺病毒载体可高效转染靶细胞和沉默CXCR4基因的表达,为RNA干扰技术应用于卵巢癌的临床基因治疗奠定基础.     

CXCR4/SDF-1对鼻咽癌细胞增殖与迁移能力的影响

目的 观察鼻咽癌不同恶性程度的细胞中趋化因子受体CXCR4的表达,检测CXCR4/SDF-1反应轴对鼻咽癌细胞的增殖作用,SDF-1对CXCR4阳性肿瘤细胞的趋化作用,探讨CXCR4/SDF-1生物学轴对人鼻咽癌细胞增殖与迁移能力的影响.方法 以鼻咽癌成瘤高转移细胞株5-8F及成瘤不转移细胞株6-10B为研究对象,采用Western blot免疫印迹法检测鼻咽癌细胞株CXCR4蛋白的表达情况,SDF-1及CXCR4阻断剂AMD3100作用于两种细胞后,MTT法检测细胞的增殖能力,体外迂徙实验检测CXCR4/SDF-1反应轴对鼻咽癌细胞的趋化作用.结果 5-8F细胞株CXCR4蛋白的表达明显高于6-10B细胞株;SDF-1能明显增强5-8F细胞增殖与迁移能力,CXCR4阻断剂AMD3100作用后,5-8F细胞增殖与迁移能力明显降低;SDF-1对6-10B细胞的迁移及增殖能力无明显影响.结论 CXCR4/SDF-1生物学轴与鼻咽癌细胞株的增殖与迁移有一定的关系,AMD3100可明显抑制鼻咽癌细胞的增殖与迁移能力.     

Rab5A与CXCR4在乳腺癌组织中的表达及其相关性

目的探讨乳腺癌组织中Rab5A与CXCR4蛋白的表达及其相关性.方法应用免疫组织化学S-P法检测106例术后乳腺癌标本、30例乳腺良性肿瘤标本Rab5A与CXCR4蛋白的表达.结果 Rab5A与CXCR4蛋白在乳腺癌组的表达率显著高于良性肿瘤组;Rab5A和CXCR4蛋白在有淋巴结转移的乳腺癌组中的表达率显著高于在无淋巴结转移组中的表达率,并且二者的表达程度均与淋巴结状态相关,二者的表达程度增强,发生淋巴结转移的概率增加.结论 Rab5A和CXCR4蛋白在乳腺癌的发生发展、侵袭转移中可能起到协同作用.两者联合检测对于早期诊断乳腺癌及判断其预后有重要的临床意义.     

CXCR4在食管鳞形细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨食管癌中趋化因子受体CXCR4的表达和患者临床病理特征、预后的关系。方法收集2005年1月至3月在我院胸外科行手术治疗的57例食管鳞形细胞癌患者病史及随访资料。利用免疫组化技术检测食管癌组织中CXCR4的表达,根据染色面积和染色强弱判断CXCR4的表达水平。结果CXCR4表达阳性率为73.7%。单因素分析显示,CXCR4的表达与肿瘤细胞分化、大小、浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期具有相关性(P<0.05)。多因素分析显示肿瘤分期和分化是食管癌复发、转移以及生存的独立危险因素;但是CXCR4的表达与2年内肿瘤复发、转移和生存无关。结论CXCR4表达和食管癌的临床病理特征有明显相关性,推测CXCR4在食管癌发展过程中起到非常重要的作用。