苦参碱对高糖致大鼠腹膜间皮细胞NF-κB p65表达的影响

目的探讨苦参碱对高糖致大鼠腹膜间皮细胞NF-κB p65表达的影响及其在腹膜炎症发病机制中的作用,为临床防治腹膜硬化提供部分实验依据。方法将30只健康雄性SD大鼠随机分成3组:对照组(n=10,NS组):腹腔每天注射生理盐水30 m l;模型组(n=10,HGC组):腹腔每天注射4.25%的葡萄糖腹透液30 m l+每周1次腹腔注射红霉素6.25万单位;治疗组(n=10,HGM组):腹腔每天注射4.25%葡萄糖腹透液+苦参碱溶液30 m l+每周1次腹腔注射红霉素6.25万单位。8周后分别处死每组各10只大鼠,取腹膜组织以链霉亲和素过氧化物酶(SP)免疫组织化学法行NF-κB p65蛋白检测,并取腹膜组织行HE及M asson染色病检。结果 与NS组比较,HGC和HGM组腹膜间皮细胞NF-κB p65表达上调,但HGC组显著高于HGM组(P<0.05)。结论苦参碱能拮抗高糖引起的NF-κB p65表达上调,减轻腹膜慢性炎症,延缓腹膜纤维化的发生。     

KLF-4靶向调控E-cadherin表达对高糖腹膜透析液诱导的大鼠腹膜纤维化的影响

目的探索Kruppel样因子4(KLF-4)与E-钙黏素(E-cadherin)在人腹膜间皮细胞(HPMCs)中的关系,以及二者在高糖腹膜透析液诱导的腹膜纤维化动物模型中的表达及作用。方法在HPMCs中共转染KLF-4及E-cadherin启动子区域结合位点或其突变体质粒,利用试剂盒检测各结合位点及其匹配的突变体的荧光素酶活性,判断KLF-4是否可与E-cadherin启动子区域结合位点相结合;采用染色质免疫共沉淀实验(CHIP)检测KLF-4是否可与E-cadherin启动子区域结合位点相结合;采用Real-time PCR及Western blotting检测b、d、f、g结合位点及其匹配突变体E-cadherin的表达。将30只SD大鼠随机均分为盐水组、腹膜透析液组及实验组,每组10只。盐水组腹腔内注射0.9%NaCl溶液,腹膜透析液组腹腔内注射4.25%高糖腹膜透析液,实验组腹腔内注射4.25%高糖腹膜透析液并经尾静脉注射含有超声微泡的KLF-4质粒混悬液。采用HE染色观察3组大鼠腹膜组织的厚度,Masson染色观察3组大鼠腹膜组织中胶原纤维的沉积情况,免疫组织化学染色观察3组...     

百令胶囊对尿毒症腹膜透析患者腹透液中转化生长因子-β1、纤维连接蛋白表达的影响

目的研究百令胶囊对尿毒症腹膜透析患者腹透液中转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）、纤维连接蛋白（fibronectin,FN）水平的影响。方法将腹膜透析患者60例随机分为对照组和试验组（各30例）,均应用1.5%腹膜透析液、6 000 mL/d,试验组加用百令胶囊5粒、3/d、口服,观察1、3、6个月后2组腹透液中TGF-β1、FN水平的变化。结果对照组TGF-β1、FN水平随透析时间延长逐渐升高;试验组TGF-β1、FN水平无明显变化,与对照组比较明显降低（P＜0.05）。结论百令胶囊可以降低腹透液中TGF-β1、FN水平,能起到抑制腹膜纤维化的作用。     

不同腹膜转运特性对持续性非卧床腹膜透析患者营养状态的影响

目的评价腹膜转运特性与持续性非卧床腹膜透析(CAPD))患者营养状况之间的关系。方法按照腹膜平衡试验(PET)计算结果,将62例稳定的CAPD患者分为高转运(H)组和低转运(L)组。测定血浆和腹透透出液营养指标:总蛋白、白蛋白(Alb)、前白蛋白(PA)、转铁蛋白(TF),并计算蛋白质分解率(nPCR)、标准化总氮出现率相当蛋白(nPNA)、瘦体质量%(LBM%)。同时观察透析充分性指标:每周总肌酐清除率(TCcr/W)与每周尿素清除指数[Kt/(v.W)],进行主观综合性营养评估(SGA)。比较两组营养状态及分析相关因素。结果两组患者一般资料比较:H组患者腹透液与血中肌酐比值(D/Pcr)和TCcr显著高于L组(P<0.05),而血肌酐(Scr)水平较L组显著降低(P<0.01),H组每日经腹透液丢失的总蛋白质、Alb均显著高于L组(P<0.05)。两组患者营养状况指标比较:H组的Alb、TF水平和SGA评分显著低于L组(P<0.05),其他营养指标也低于L组,但差异无统计学意义(P>0.05)。血中及经腹透透出液丢失的白蛋白与转运类型相关。结论高转运腹膜透析患者营养状态较低转运者差,故应加强对高转运CAPD患者的营养管理及饮食指导。     

冷却治疗对劳力性热射病大鼠肾脏AQP2 mRNA及蛋白表达的影响

目的:研究冷却治疗对劳力性热射病(EHS)大鼠血液浓缩程度及水通道蛋白合成的影响,探讨肾脏水通道蛋白基因转录中AQP2 mRNA表达及蛋白表达在机体水代谢稳态中的作用。方法:将51只雄性SD大鼠随机分为6组,常温对照组(C组,n=8)、高温运动即刻组(E组,n=9)、高温运动休息1组(ER1组,n=9)、高温运动冷浸1组(EC1组,n=8)、高温运动休息2组(ER2组,n=9)和高温运动冷浸2组(EC2组,n=8)。参加高温运动的大鼠在36℃高温、75%高湿环境中运动至力竭,依据热射病经典模型测量直肠温度作为核心温度,当直肠温度上升到约42℃时,建立EHS大鼠模型。采用19℃冷水浸泡5 min作为EHS大鼠冷却治疗方法。C组不进行任何处理,E组仅参加高温运动。高温运动后,ER1组常温休息5min;EC1组冷浸5 min,ER2组常温休息5 min+60 min;EC2组冷浸5 min,常温休息60 min。麻醉取血、取肾脏,采用全自动血细胞分析仪测试红细胞压积(Hct)和血红蛋白(Hb),Real Time-PCR法检测肾脏AQP2 mRNA表达,Western Blot法检测肾脏AQP2蛋白表达。结果:(1)高温运动至力竭后,各组大鼠核心温度较运动前显著性升高(P<0.01,P<0.05)。E组与C组相比,Hct升高(P<0.05),而Hb无明显变化;调节水代谢的AQP2 mRNA表达以及AQP2蛋白表达上调(P<0.01)。(2)冷浸后,EC1组与ER1组相比,大鼠核心温度下降(P<0.01);AQP2 mRNA表达下调(P<0.01)。EC2组与ER2组相比,大鼠核心温度下降(P<0.01);AQP2 mRNA表达下调(P<0.05)。EC1组与E组相比,AQP2 m RNA表达和AQP2蛋白表达均下调(P<0.01,P<0.05)。EC2组与E组相比,Hct和Hb下降不明显;AQP2 mRNA表达和AQP2蛋白表达均下调(P<0.01,P<0.05)。结论:冷浸可以有效降低热射病大鼠机体核心温度;冷浸诱导水通道蛋白AQP2mRNA表达及AQP2蛋白表达显著性下调,导致水通道蛋白在肾脏的合成减弱;冷浸对红细胞压积Hct及血红蛋白Hb没有明显影响。     

氧对体外培养的大鼠肾成纤维细胞PEDF和VEGF表达的影响

目的:探讨缺氧对不同浓度葡萄糖培养的大鼠肾成纤维细胞(NRK细胞)血管内皮生长因子(VEGF)与色素上皮衍生因子(PEDF)表达和变化情况.方法:将NRK细胞分为:正常组、甘露醇组、缺氧对照组、高糖A、B组、缺氧A、B组.用四唑盐比色实验法检测各组NRK细胞的数目,用ELISA法测定NRK细胞VEGF与PEDF蛋白的表达情况.结果:与正常对照组相比,高糖组和缺氧组的NRK细胞数目显著减少(P<0.01).在缺氧条件下NRK细胞VEGF蛋白含量明显升高(P<0.01,P<0.05),PEDF蛋白含量明显下降(P<0.01),并呈剂量依赖性;随着时间的延长,各组NRK细胞的VEGF蛋白含量呈上升趋势(P<0.01),PEDF蛋白含量呈下降趋势(P<0.01).结论:缺氧使不同浓度的高糖诱导的肾成纤维细胞VEGF与PEDF的表达失衡,这可能是糖尿病肾病发生的重要机制.     

卡巴胆碱对烫伤大鼠肠内补液时肠黏膜血流量、Na+-K+-ATP酶活性和水通道蛋白-1表达的影响

目的研究卡巴胆碱对烫伤早期大鼠肠内补液时肠黏膜血流量(IMBF)、Na -K -ATP酶活性和水通道蛋白-1(AQP1)表达的影响。方法雄性Wistar大鼠50只,随机分为假烫组、单烫组、肠内卡巴胆碱组、肠内补液组和肠内补液 卡巴胆碱组,每组10只。大鼠经35% TBSA Ⅲ度烫伤后,麻醉状态下进行十二指肠和回肠插管,与输液泵相连形成闭合回路进行小肠补液(灌流)。肠内补液时于烫伤后0.5h开始灌注葡萄糖-电解质溶液,灌注液总量为2ml/(kg.1% TBSA),于3.5h内在智能输液泵控制下匀速输入。卡巴胆碱(60μg/kg)于烫伤后0.5h肠内注射。伤后4h用激光多普勒血流仪测定IMBF,然后处死动物,取肠组织进行Na -K -ATP酶活性和AQP1免疫组化测定。结果IMBF、Na -K -ATP酶活性和AQP1表达肠内卡巴胆碱组和肠内补液组均显著高于单烫组(P<0.01),但低于肠内补液 卡巴胆碱组(P<0.05)。结论35%TBSAⅢ度烫伤肠内补液时给予卡巴胆碱能增加肠黏膜血流量和Na -K -ATP酶活性,促进AQP1表达,有助于肠道对口服液体的吸收。     

腹膜转运特性对非糖尿病腹膜透析患者营养状态的影响

目的探讨尿毒症腹膜转运特性对非糖尿病腹膜透析患者营养的影响。方法根据腹膜平衡试验(PET),将3 l例腹膜透析患者腹膜分为低转运(L)、低平均转运(LA)、高平均转运(HA)、高转运(H)4种类型,比较4种转运特性腹膜透析患者腹透6个月后血清白蛋白(ALB)、血清转铁蛋白(TF)、血红蛋白(Hb)、主观综合性营养评估法(SGA)。结果高转运腹膜组与低转运、低平均转运、高平均转运组比较,ALB、TF、Hb、SGA均显著降低(P<0.05);高转运腹膜组与低转运组比较,ALB、TF、、SGA均显著降低(P<0.05)。结论在溶质清除相同的条件下,腹膜转运性高的腹透患者营养状况明显差于腹膜转运低的腹透患者。     

早期低剂量腹膜透析对改善尿毒症患者生活质量的价值

目的探讨早期低剂量腹膜透析治疗尿毒症患者的疗效。方法选择2007年3月-2010年2月慢性肾功能不全患者38例,分为两组:腹透组(n=19):接受常规药物治疗,并予间歇性腹膜透析,每日4000～6000ml,每周4～5d;对照组(n=19):接受常规药物治疗。随访24周。所有患者在治疗前、后采用症状频率和严重指数、SF-36生活质量量表对临床症状、生活质量进行评价,并监测血常规、肝肾功能、血糖、电解质及尿量。结果腹透组血红蛋白、血肌酐均较对照组明显改善。腹透组患者临床症状评分治疗前为11.80±5.41,治疗后第8周和第12周时分别降低至7.15±3.15(P<0.05)和5.94±3.70(P<0.01),对照组在治疗前、治疗后第8周和第12周时评分分别为11.23±5.35、9.80±4.02和10.11±4.48。两组间的差异持续至随访期结束。腹透组患者生活质量明显改善。结论早期低剂量腹膜透析可有效改善尿毒症患者临床症状和生活质量。     

急性酒精中毒大鼠脑干部DTI与AQP4表达的相关性研究

目的:探讨急性酒精中毒大鼠脑干部水通道蛋白4(Aquaporin 4,AQP4)表达与DTI参数ADC值及部分各向异性(fractional anisotropy,FA)值的相关性。方法:30只SD大鼠随机分为对照组(n=5)和急性酒精中毒组(n=25),急性酒精中毒组于造模后1、3、6、12、24h行MRI扫描。MRI检查序列包括T2WI、T1WI及DTI序列,病理学检查包括HE染色、AQP4免疫组化染色,对DTI及病理结果进行分析。结果:急性酒精中毒组ADC值、FA值、AQP4表达光密度值变化表现为先持续降低后逐步回升趋势,在3h达最低点。1、3、6h的ADC值与对照组之间差异有统计学意义(P<0.01),各实验组FA值与对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05),3、6h的AQP4表达光密度值与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:DTI检查能够反映急性酒精中毒早期的细胞毒性水肿,同时间段AQP4表达下调与ADC值下降的演变趋势表明AQP4在细胞毒性水肿演变过程中具有保护性机制。     

大鼠腹腔巨噬细胞表达促肾上腺皮质激素释放激素的实验研究

目的 观察促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)在大鼠腹腔巨噬细胞的表达变化规律.方法 体外培养大鼠腹腔巨噬细胞,采用RT-PCR及ELISA技术检测正常及脂多糖(LPS)、佛波脂(PMA)刺激后,细胞CRH mRNA转录水平及CRH多肽合成水平.结果 RT-PCR结果显示,正常大鼠腹腔巨噬细胞内有一定水平的CRH mRNA,LPS及PMA刺激后,细胞内CRH mRNA水平均显著增高(P＜0.01).在多肽水平,正常大鼠腹腔巨噬细胞可表达低水平的CRH[约(0.07±0.01)ng/107cells],LPS及PMA促进了CRH多肽的合成(P＜0.01).结论 正常大鼠腹腔巨噬细胞可合成表达CRH,其水平在活化后大鼠腹腔巨噬细胞显著上调.     

腹膜透析在慢性肾衰伴大量腹水患者中的应用

目的探讨腹膜透析(PD)在慢性肾衰(CRF)伴大量腹水患者中的疗效。方法收集1993—2010年期间CRF伴大量腹水的住院患者25例进行回顾性研究。其中原发病:原发性肾小球肾炎7例,病尿病肾病(DN)5例,狼疮性肾炎(LN)6例,ESRD伴肝硬化4例,CRF伴肾病综合征(NS)2例,肾淀粉样变1例。常规PD植管术,先做好荷包结扎线,再切开腹膜植管结扎。术中放腹水1 000~5 000 ml,根据放腹水的数量补充白蛋白或血浆等。此后酌情行间歇腹膜透析(IPD)或不卧床持续腹膜透析(CAPD)。结果经PD后大多数患者自觉症状明显好转,食欲改善,腹胀、浮肿逐渐消退。25例患者腹部切口均无渗漏腹水。患者透析后Scr、BUN显著下降(P<0.05)。其中6例(23.08%)患者转为血液透析(HD)(1例PD 5个月后,1例PD 11个月后,1例PD 2年后,3例PD 5年后转为HD);最长1例患者已存活10年,目前仍在维持性HD中。患者PD后1年内死亡1例,2年及3年后各死亡4例,5年后死亡2例,7年后死亡1例。目前仍在PD5例,失访3例。结论只要做好术前、术中、术后的相应措施,对CRF合并大量腹水的患者进行PD治疗是一种有效、经济、方便的治疗方法。     

腹膜透析患者微炎症状态的相关研究

目的观察腹膜透析(CAPD)患者超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、白介素-6(IL-6)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等相关指标的表达,探讨炎症因子对腹膜透析患者的影响。方法选择74例CAPD患者分别送检hs-CRP、IL-6、TNF-α,同时测定肌酐(Cre)、血钙(Ca)、血磷(P)、血红蛋白(Hb)、胆固醇(Chol)、三酰甘油(TG)、白蛋白(Alb)。根据主观综合性营养评估法(SGA)计算分值,观察腹膜透析患者炎症因子与各生化指标的关系。结果腹膜透析患者血清炎症因子(hs-CRP、IL-6、TNF-α)水平均显著高于正常对照组(P<0.01)。CRP>5 mg/L组血清IL-6和TNF-α水平均显著高于CRP<5 mg/L组;血清Hb、Alb水平及SGA均显著低于CRP<5 mg/L组,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。而两组Ca、P、Chol和Cre水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);腹膜高转运患者血清hs-CRP及IL-6水平高于其他各组,组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论腹膜透析患者存在微炎症状态,腹膜高转运功能患者炎症因子升高明显,炎症与低蛋白血症、营养状态差等因素密切相关。     

MRI visualization of rodent liver structure and peritoneal adhesion with dialyzate enhancement.

This study investigated the use of peritoneal dialysis fluid (dialyzate) as a MR contrast agent to visualize the liver structure and peritoneal adhesion in rats at 7 T. Intraperitoneal injection of dialyzate (approximately 0.1 ml/g) yielded excellent and consistent intraperitoneal enhancement that delineated the liver lobular structure in all rats studied (N = 8). It also allowed the MR detection of peritoneal adhesions that were surgically induced. MR measurements of adhesion surface areas correlated well with the postmortem estimations (R = 0.99; N = 6). Dialyzate persisted in the intraperitoneal cavity for up to 2 days. T(1) and T(2) values of undiluted dialyzate were found to be 3017.5 +/- 35.3 ms and 108.4 +/- 2.0 ms, respectively. These findings demonstrated dialyzate-enhanced MRI as a potentially valuable technique to localize certain activities within liver (such as local tumor metastasis), and to monitor therapeutic interventions (e.g., against peritoneal adhesion) in preclinical research using small animal models.     

持续性非卧床腹膜透析对颈动脉中膜厚度的影响

 目的 探讨持续性非卧床腹膜透析(continuous ambulatory peritoneal dialysis,CAPD)对颈动脉中膜厚度(carotid intima-media thickness, CIMT)的影响。方法 选择2015-01至2019-01医院收治的CAPD患者96例为研究对象,采用彩色多谱勒超声测定CIMT,根据CIMT不同分为两组:增厚组CIMT≥1.0 mm,正常组CIMT＜1.0 mm,观察两组患者血磷(P)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、白介素-6(IL-6)等指标差异。结果 CAPD患者中CIMT增厚的检出率为45.83%。单因素分析显示两组间患者年龄、糖尿病患数、血磷、hs-CRP、IL-6、TNF-α水平差异有统计学意义(P<0.05),多因素回归分析结果显示CAPD患者的血磷(P=0.003, OR=1.113)、hs-CRP (P=0.001, OR=1.148)、IL-6(P=0.016, OR=1.056)是CIMT增厚的独立危险因素。结论 CAPD患者中CIMT增厚与血磷、hs-CRP、IL-6等因子有关,是CAPD患者出现血管钙化,进而出现心血管事件并发症的重要危险因素。     

腹膜透析患者成纤维细胞生长因子23与股动脉内中膜厚度的相关性

 目的 探讨腹膜透析患者成纤维细胞生长因子23(fibroblast growth factor -23,FGF-23)与股动脉内中膜厚度(intima-media thickness,IMT)的关系。方法 将82例持续性非卧床腹膜透析(continuous ambulatory peritoneal dialysis,CAPD)患者根据股动脉壁最大内膜厚度不同分组,观察CAPD患者组间FGF-23与IMT的关系。结果 CAPD患者中股动脉IMT增厚的检出率为45.12%,IMT增厚组患者的年龄、血磷、糖化血红蛋白、甲状旁腺激素、FGF-23水平明显高于IMT正常组,差异具有统计学意义(P＜0.05),以患者IMT值作为因变量进行多元回归分析,结果显示CAPD患者的血磷、iPTH、FGF-23与患者股动脉IMT增厚独立相关(P＜0.05)。结论 FGF-23是慢性肾衰竭(chronic kidney disease, CKD)患者钙磷代谢紊乱、血管钙化等事件的重要生物标志物,是CAPD患者血管钙化的早期重要预警指标。