基础研究cdc2基因在多种人类肿瘤细胞中的表达及意义

目的通过检测人表皮细胞Hacat和不同组织来源的6种肿瘤细胞的增殖能力以及cdc2基因在这些细胞中的表达情况,探讨cdc2基因与肿瘤发生、发展、增殖能力之间的关系。方法体外培养人表皮细胞Hacat和不同组织来源的6种肿瘤细胞(宫颈癌细胞Caski、神经胶质瘤细胞U87、肝癌细胞Hepg2、膀胱癌细胞T24、骨肉瘤细胞MG63、肺癌细胞A549)。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法和免疫印迹(Western blot)法测定细胞中cdc2在mRNA和蛋白质水平的表达情况;采用四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞增殖速度。结果 cdc2基因在Hacat中表达较低,在Caski、U87、Hepg2、T24、MG63和A549中表达较高。MTT法显示:Hepg2、U87、T24、A549、MG63增殖能力较强,Caski次之,Hacat最差。结论 cdc2基因可能参与了肿瘤的发生过程,并与肿瘤的增殖有关。     

Expression and Significance of Cyclooxygenase 2 Gene in Lung Cancer

Cyclooxygenase (COX)istheenzymecatalyzingtherate limitingstepinprostaglandin (PG)synthe sis .RecentstudieshaverevealedthatCOX 2isover expressedintumorsandCOX 2inhibitorscaninhibitthe growthoftumorbothinvivoandinvitro .Manyinvestigationshaveconcentratedond…     

COX-2基因在食管癌中的表达及临床意义

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)基因在食管癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测食管癌组织及癌周正常食管组织中的COX-2基因表达水平,分析其在食管癌中的表达及临床意义。结果(1)食管癌组织中COX-2基因呈弱阳性、阳性及强阳性表达例数均分别显著高于癌旁组织中的表达例数(P<0.001或P<0.01);(2)低分化组中COX-2基因强阳性表达例数显著高于中分化组和高分化组(P<0.01或P<0.05),低分化组中COX-2基因阴性表达显著低于高分化组(P<0.05)。结论 COX-2基因的表达与食管癌的发生、发展及分化程度密切相关。     

抑癌基因maspin在胃癌细胞株SGC-7901中的表达及意义

目的探讨抑癌基因maspin在胃癌细胞株SGC-7901生长和凋亡过程中的生物学作用。方法构建重组质粒pCD-NA3.1-maspin,转染胃癌细胞株SGC-7901,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学检测maspin基因表达,MTT法检测细胞增殖,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果重组质粒pCDNA3.1-maspin导入SGC-7901细胞株后,maspin的mRNA和蛋白表达明显增强(P<0.05),胃癌细胞株SGC-7901增殖受到抑制,并出现明显的细胞凋亡。结论 maspin基因可以抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,并诱导细胞凋亡。     

前列腺癌组织EZH2基因的表达及其意义

目的:探讨EZH2基因在列腺癌组织中的表达意义. 方法:采用半定量RT-PCR检测前列腺癌、前列腺上皮内瘤(PIN),良性前列腺增生中EZH2表达状况并对其扩增产物进行测序. 结果:前列腺癌40例组织中,EZH2表达率(100%). 良性前列腺增生组织无表达, PIN 20例中仅有1例有表达. 晚期前列腺癌组织表达明显高于早期前列腺癌(P＜0.05);低分化前列腺癌表达高于中高分化前列腺癌(P＜0.05);激素依赖性前列腺癌表达高于激素非依赖性前列腺癌(P＜0.05). EZH2表达高低与前列腺血清总PSA浓度无关(P＞0.05). 结论:EZH2基因表达状况与前列腺癌分期、分级有关,其表达对判断前列腺癌病理生物学特性和前列腺癌治疗有重要意义.     

Rb和MCM2蛋白在前列腺癌中的表达及临床意义

目的：探讨视网膜母细胞瘤易感基因（Rb）和微染色体维持蛋白2（MCM2）在前列腺癌发病机制中的作用及其临床意义。方法：应用免疫组化EliVision^TMplus二步法,检测49例前列腺癌（PCa）组织,20例良性前列腺增生（BPH）及10例正常前列腺组织（NP）中pRb蛋白与MCM2的表达。结果：pRb在PCa,BPH与NP组织中的阳性表达率分别为44．90％,80％,90％,PCa中pRb的水平明显低于BPH（P〈0．05）及NP（P〈0．05）,且与PCa病理分级（P〈0．05）和临床分期（P〈0．05）呈负相关。MCM2在PCa,BPH与NP组织中的阳性表达率分别为67．35％,25％和10％,PCa中MCM2的水平明显高于BPH（P〈0．05）及NP（P〈0．05）,且与PCa病理分级（P〈0．05）和临床分期（P〈0．05）呈正相关。MCM2表达与pRb表达呈负相关（rs=-0．596,P〈0．01）。结论：Rb基因参与了前列腺癌的发生、发展过程,检测Rb基因和MCM2有助于判定前列腺癌恶性程度及预后。     

免疫球蛋白样转录子2在胃癌细胞中的表达及临床意义

目的检测免疫球蛋白样转录子2(ILT2)在胃癌组织及胃癌细胞系中的表达,分析其表达与胃癌生物学行为和临床特征的关系。方法采用免疫组织化学方法检测50例胃癌病理组织中ILT2蛋白的表达,并结合临床病理指标进行分析。采用实时荧光定量PCR和FACS流式细胞术检测6株高(MKN1)、中(SGC-7901,AGS)、低(MGC-803)及未分化(HGC-27,BCG-823)人胃癌细胞株ILT2的mRNA和蛋白表达。MTT法检测自然杀伤细胞(NK-92)和外周血淋巴细胞(PBMCs)对HGC-27、MKN1两种胃癌细胞的杀伤活性。结果 50例胃癌病理组织中ILT2表达阳性率为62.0%(31/50),正常胃组织不表达ILT2。在低分化型胃癌组织中ILT2表达阳性率为73.3%(22/30),在分化型组织中表达阳性率为45%(9/20),差异有统计学意义(χ2=4.089,P<0.05);肿瘤直径>5 cm时胃癌组织中ILT2表达阳性率为84.2%(16/19),明显高于肿瘤<5 cm时患者阳性率48.4%(15/31),差异有统计学意义(χ2=6.417,P<0.01)。6株人胃癌细胞均表达ILT2,ILT2在低分化和未分化胃癌细胞中表达阳性率高于中分化和高分化细胞(P<0.05)。在不同效靶比下人PBMC及NK-92细胞对MKN1细胞(ILT2低表达)的杀伤能力高于对HGC-27细胞(ILT2高表达)的杀伤(P<0.05)。结论胃癌组织细胞ILT2的表达与细胞分化程度和胃癌临床病理特征显著相关,PBMC和NK-92细胞对高表达ILT2的胃癌细胞的杀伤能力降低。提示ILT2可能参与肿瘤的免疫逃逸并可作为胃癌诊断和治疗的新靶点。     

高血脂兔髂-股动脉成形术后平滑肌细胞中c-myc和cdc2基因的表达

目的 :探讨 c- myc和 cdc2基因在高血脂兔髂 -股动脉成形术后平滑肌细胞中的表达。方法 :2 4只新西兰白兔均饲以高脂饲料 ,于高脂饲喂 2周时用球囊导管扩张髂 -股动脉 ,造成动脉内膜损伤 ,6～ 8周行血管造影检查 ,对狭窄 >5 0 %的动脉段行球囊扩张术 ,术后 2 4 h和 2周分别用 RT- PCR和免疫金银法检测 c- myc、cdc2 m RNA和相应蛋白质的表达。结果 :c- myc和 cdc2 m RNA在球囊扩张术后 2 4 h表达增加 ,其相应蛋白质在扩张术后 2周时表达增加 ,阳性颗粒主要位于新内膜层平滑肌细胞的胞核 ,少量位于胞质。结论 :动脉损伤后可致 c- myc、cdc2 m RNA和相应蛋白质表达增加 ,提示 c- myc和 cdc2表达增加在动脉损伤后平滑肌细胞增殖中起一定作用     

生物节律基因NPAS2在结直肠癌组织中的表达及意义

目的检测生物节律基因NPAS2在结直肠癌组织及相应癌旁组织中的表达情况;明确NPAS2的表达与患者临床病理学参 数之间的相关性,分析NPAS2表达与结直肠癌患者5年生存率之间的相关性,明确其在判断结直肠癌患者预后中的作用。方 法采用RT-qPCR检测NPAS2 mRNA在40例结直肠癌及癌旁新鲜组织中的表达;采用免疫组织化学SABC法检测NPAS2蛋白 在120例肿瘤及癌旁石蜡标本中的表达;利用其中78例随访患者资料,K-M生存法分析NPAS2蛋白表达水平与患者生存率之 间的相关性。结果RT-qPCR结果提示,结直肠癌中NPAS2 mRNA表达显著低于相对应的癌旁组织（P<0.01）;免疫组织化学结 果提示,NPAS2蛋白表达在结直肠癌组织中的阳性率为19.2%,显著低于癌旁中的62.5%（P<0.05）。NPAS2的低表达与结直肠 癌的肿瘤大小、淋巴结转移及TNM分期密切相关（P<0.05）,而与患者年龄、性别、分化、浸润深度及远处转移无显著相关性（P> 0.05）。K-M生存分析结果表明,NPAS2 高表达组患者5 年生存率显著高于低表达组,差异具有统计学意义（P<0.01）。结论 NPAS2在结直肠癌组织中低表达,且与肿瘤部分恶性生物学行为及患者5年生存率密切相关,提示检测NPAS2的表达对预测结 直肠癌患者预后具有重要意义。     

bcl—x基因在白血病细胞中的表达及意义

目的：探讨ｂｃｌ－ｘ基因在白血病中的表达及意义，方法：采用免疫组织化学方法检测１９例白血病及４株白血病细胞中Ｂｃｌ－ｘ的表达，并用Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹法确定白血病细胞株中Ｂｃｌ－ｘ表达形式。结果：白血病中Ｂｃｌ－ｘ阳性率为７３．７％（１４／１９），４株白血病细胞均表达Ｂｃｌ－ｘ－１形式。结果：白血病细胞中Ｂｃｌ－ｘ１表达可能与白血病发病有关。     

bag-1及bcl-2基因产物在乳腺癌组织中的表达及意义

目的 :研究抗凋亡基因bag 1和bcl 2在乳腺癌组织中的表达及其相互关系 ,探讨肿瘤细胞增殖与凋亡的特点 .方法 :采用免疫组化SABC法观察了 10 0例乳腺癌与 10例乳腺良性肿瘤及 10例正常乳腺组织的石蜡标本切片中bag 1和bcl 2的表达 ,并进行统计研究 .结果 :bag 1在乳腺癌组织中 ,乳腺良性肿瘤中 ,正常乳腺组织中阳性表达率分别为85 .0 % ,10 .0 %和 10 .0 % ,差异明显 (P <0 .0 5 ) .但其表达与不同病理类型及临床分期无关 (P >0 .0 5 ) ;bcl 2在乳腺癌组织中 ,乳腺良性肿瘤中 ,正常乳腺组织中阳性表达率分别为 4 6.0 % ,2 0 .0 %和 2 0 .0 % ,差异明显 (P <0 .0 5 ) .其表达与不同病理类型及临床分期亦无关 (P >0 .0 5 ) .结论 :bag 1在乳腺癌组织中高表达 ,bcl 2在乳腺癌组织中低表达 ,bag 1,bcl 2在乳腺癌组织中的表达与肿瘤的临床分期 ,病理分型等无关 .因此 ,bag 1,bcl 2可以作为早期诊断乳腺癌的一种生物标记 .     

Igf2r及Mest印迹基因在供核细胞中的表达及意义

目的：探讨细胞传代培养对胰岛素样生长因子Ⅱ受体（insulin-like growth factor Ⅱ receptor,Igf2r）和Mest基因表达的影响,以及它们在不同部位来源的成纤维样细胞（fibroblast-like cells）中的表达。方法：利用实时定量PCR法检测印迹基因Igf2r和Mest在来源于鼠耳和尾尖的成纤维样细胞中的表达。结果：在鼠尾成纤维样细胞的传代培养中,随着培养代数的增加,Igf2r的表达减弱,Mest的表达无明显变化;Igf2r在鼠尾成纤维样细胞中的表达高于鼠耳。结论：传代培养影响Igf2r基因的表达,Igf2r在不同部位来源的成纤维样细胞中的表达具有差异,为供核细胞的选择及后续的基因印迹研究奠定了基础。     

LRP16在肝硬化组织、癌旁组织及癌组织中的表达及意义

目的:探讨白血病相关蛋白16(LRP16)在肝癌中的表达规律,寻求其作为肝癌早期诊断及判断临床预后指标的可能性。方法:用Western印迹杂交法检测42例肝癌标本或新鲜组织中LRP16的表达情况,分析其与病理因素的关系。结果:LRP16在肝硬化组织、癌旁组织及癌组织中均有表达,但表达量依次减少。LRP16高表达者一般肿瘤直径较小,具有完整的包膜,一般无血管侵犯,多为中低分化腺癌。结论:LRP16高表达者具有较好的生物学特性。LRP16可能在判断肝癌生物学特性方面具有一定前景。     

凋亡抑制基因survivin在乳腺癌中的表达及其意义

目的：探讨凋亡抑制基因survivin在乳腺癌中的表达及其意义。方法：收集47例经病理证实的乳腺癌组织和26例正常乳腺组织,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测了47例乳腺癌组织和26例正常乳腺组织中survivinmRNA的表达。结果：Survivin基因在正常乳腺组织中不表达,47例乳腺癌组织中,29例survivin表达阳性,占61.7%。Survivin基因表达随乳腺癌的病理分级和临床分期的升高而升高,在不同病理分级乳腺癌中survivin基因表达阳性率分别为：Ⅰ级36.4%,Ⅱ级65.0%,Ⅲ级75.0%;Ⅰ级与Ⅱ级、Ⅲ级之间存在显著性差异（P〈0.05）,在不同临床分期中survivin基因表达阳性率分别为：非浸润型33.3%,浸润型71.4%,两者之间存在显著性差异（P〈0.05）。结论：Survivin基因的异常表达引起细胞凋亡抑制,对乳腺癌的发生和发展起重要作用,异常表达提示乳腺癌预后不良。     

卵巢癌组织KLK11基因的表达意义

目的: 探讨卵巢癌KLK11基因中的表达及临床意义. 方法: 采用RT-PCR和免疫组化技术检测48例卵巢癌组织中KLK11 mRNA及其蛋白的表达,并分析其与临床病理资料的关系. 结果: KLK11蛋白表达位于细胞质. KLK11 mRNA及蛋白的表达与临床分期有关,晚期(Ⅲ, Ⅳ期)KLK11 mRNA及蛋白的表达水平明显高于早期(Ⅰ, Ⅱ期,P＜0.05),中低分化癌KLK11 mRNA及蛋白的表达明显高于高分化癌(P＜0.05),但KLK11 mRNA及蛋白的表达与组织学类型无关. 结论: KLK11基因表达可能与卵巢癌的恶性程度有关.     

蛋白翻译起始因子C2在结、直肠癌中表达的意义

目的　研究C2基因在结、直肠癌中的表达、分布及意义 .方法　用免疫组化方法检测C2基因在 6 2例结肠癌及其4 6例癌旁组织、4 6例直肠癌及其 30例癌旁组织中蛋白水平的表达 .结果　结肠癌 6 2例中C2蛋白阳性率为 4 1.9% (2 6 /6 2 ) ,4 6例其癌旁组织中 ,C2蛋白阳性率为 82 .6 % (38/46 ) .C2蛋白在结肠癌组织中表达明显低于其癌旁组织 (P <0 .0 5 ) ,且与结肠癌组织的浆膜浸润、淋巴结转移有明显的相关性 (P <0 .0 5 ) .直肠癌 4 6例中C2蛋白阳性率为 4 3.5 % (2 0 /46 ) ,30例其癌旁组织中 ,C2蛋白阳性率为 73.3% (2 2 /30 ) .C2蛋白在直肠癌及其癌旁组织中的表达无明显差异(P >0 .0 5 ) .结论　C2基因表达缺失及突变可能与大肠癌的发生、发展有关 .     

抑癌基因PTEN在原发性乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义

目的 研究乳癌PTEN蛋白表达水平与临床病理因素的关系,探讨其临床意义.方法 检测40例乳癌组织、40例癌旁组织和20例乳腺囊性增生病PTEN蛋白表达水平(免疫组织化学SP法).结果 PTEN 蛋白高表达,乳癌组织9例、癌旁组织22例、乳腺囊性增生病19例,3组差异有统计学意义(P＜0.01).对于PTEN蛋白表达水平,乳癌组织学级别高者显著高于级别低者,腋淋巴结阳性者显著低于阴性者,雌激素阳性者显著高于阴性者(均P＜0.05).PTEN蛋白表达水平与年龄、肿瘤大小、孕激素水平、Cerb-2水平和临床分期无关,但随年龄增长和肿瘤增大,呈下降趋势.结论 PTEN低下或丢失与乳腺的癌变有关,乳癌组织PTEN蛋白失表达与组织学分级、腋淋巴结转移及雌激素水平密切相关.     

凋亡抑制基因Survivin在乳腺癌组织中的表达与意义

目的探讨凋亡抑制基因Survivin在乳腺癌组织、癌旁乳腺组织中的表达及意义.方法用免疫组化S-P法检测80例乳腺癌组织、20例癌旁乳腺组织中Survivin的表达,分析不同病理组织间的表达关系.结果Survivin基因在乳腺癌中阳性表达率为68.75%(55/80),明显高于癌旁腺体组织(15%、3/20)的表达(P＜0.05).结论Survivin基因的抑制凋亡作用可能在乳腺癌的发生、发展过程中起重要作用,提示其可作为乳腺癌一种新的预后判断指标.     

己糖激酶-Ⅱ基因在人结肠癌细胞中的表达及其治疗意义

目的检测己糖激酶-Ⅱ基因（HK-Ⅱ）在人结肠癌细胞中的表达,探讨抑制HK-Ⅱ对结肠癌的治疗效应及机制。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western印迹检测4种人结肠癌细胞HK-Ⅱ基因的表达情况。在HK-Ⅱ抑制剂（3-BrPA）诱导下,通过MTT法观察结肠癌细胞增殖和化疗敏感性变化;用琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡DNA片段;底物比色法测定半胱氨酸蛋白水解酶（caspase-3）活性;流式细胞术和紫外分光光度仪分别检测线粒体膜电位（△Ψm）、线粒体膜通透转换孔（PFP）开放的变化。结果HK-Ⅱ基因在4种人结肠癌细胞中明显表达。抑制HK-Ⅱ（3-BrPA）能明显控制结肠癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。300μmol／L 3-BrPA刺激LOVO、HCT-116、HT-29、SW480细胞48h后,细胞增殖抑制率分别为83．7％±2．0％、83．4％±4．1％、89．7％±3．7％和80．6％±0．9％。与小剂量3-BrPA（25μmol／L）联合作用LOVO细胞48h,低剂量表阿霉素（0．05、0．1μg/ml）的细胞增殖抑制率由5．1％±1．3％和10．5％±2．0％分别增至46．5％±3．2％和57．9％±3．3％（P〈0．01）;而低剂量L—OHP（0．5、1．0μg/ml）的细胞增殖抑制率则由19．2％±6．1％和32．2％±2．2％分别提高到48．4％±3．2％和60．5％±4．6％（P〈0．01）。50、100、150μmol／L 3-BrPA诱导LOVO细胞24h后,caspase-3活性分别为1．13±0．11、1．60±0．20和3．03±0．11（P=0．000）。3-BrPA作用LOVO细胞线粒体20min后,PTP开放程度为40．0％±3．5％,而对照组（CaCl2）为37．4％±2．3％,两者相比,差异无统计学意义（P=0．348）。100μmol／L 3-BrPA刺激LOVO细胞1、3、5h后,△Ψm下降率分别为12．7％、15．4％、26．8％。结论HK-Ⅱ基因可望成为结肠癌的有效治疗靶点。     

抗凋亡基因bag-1在乳腺癌组织中的表达及意义

目的 讨论抗凋亡基因bag-1在乳腺癌组织中的表达及意义，了解肿瘤细胞凋亡的特点。方法 采用免疫组化SABC法观察了100例乳腺癌与10例乳腺良性肿瘤及10例正常乳腺组织的石蜡标本切片中bag-1的表达。结果 Bag-1在乳腺癌组织中，乳腺良性肿瘤中，正常乳腺组织中阳性表达率分别为85．0％，10．0％和10．0％，差异明显（P＜0．05）。在I期，Ⅱ期和Ⅲ期的乳腺癌组织中Bag-1阳性表达率分别为87．5％，82．4％和88．2％。三无明显差异（P＞0．05）。在导管癌、小叶癌及特殊型癌中Bag-1阳性表达率分别为85．5％，84．8％和80．0％。无明显差异（P＞0．05。结论 bag-1在乳腺癌组织中高表达,bag-1在乳腺癌组织中的表达与肿瘤的临床分期，病理分型等无关。Bag-1可以作为早期诊断乳腺癌的一种生物标记。