脑外伤大鼠脑组织及外周血中ET-1、VEGF表达对脑水肿及微血管变化的影响及意义

目的观察脑外伤早期大鼠脑组织及外周血中内皮素(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达变化,探讨两者的相关性及两者与脑水肿、微血管动态变化的关系。方法 70只Wistar大鼠随机分为对照组和外伤组,采用自由落体打击法制做大鼠脑外伤模型。按伤后处理时间不同各组再分为7个亚组,每组5只,分别于1 h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d、14 d不同时间点处死大鼠。采用干湿重法检测损伤侧脑组织含水量;免疫组化法检测大鼠损伤灶周围皮层、海马区脑组织中ET-1、VEGF的表达,并采用ESLA法检测外周血中ET-1、VEGF的水平变化;CD34标记损伤灶周围脑皮层区微血管,所得结果进行统计学处理。结果脑外伤组各时间点损伤侧脑组织含水量及损伤灶周围皮层、海马区脑组织以及外周血中ET-1、VEGF的表达均高于对照组(P0.01);并且外伤早期ET-1、VEGF的表达与脑组织含水量呈正相关(P0.05),与微血管面密度变化呈负相关(P0.05)。结论脑外伤后外周血及脑组织内存在ET-1、VEGF的过量表达,并且参与调控微血管变化及脑水肿的发生,测定外周血中ET-1、VEGF的含量可成为判断外伤性脑水肿中微血管变化以及脑组织含水量的指标及治疗依据。     

CtBP2在大鼠创伤性损伤脑中的表达及意义

目的:研究C-末端结合蛋白2(C-terminal binding protein 2,CtBP2)在创伤性脑损伤(traumatic brain in-jury,TBI)后脑中的表达变化。方法:建立大鼠TBI模型,采用Western Blot、免疫组织化学和免疫荧光检测CtBP2在损伤脑中的表达变化。结果:CtBP2在TBI后脑组织中的表达水平增加,以损伤后3~5 d最为明显(P<0.05),免疫组织化学检测发现在损伤侧大脑皮层中CtBP2表达水平较假手术组和损伤对侧增高,并且CtBP2与星形胶质细胞有共定位。结论:CtBP2在TBI后与星形胶质细胞活化增殖有一定的关系。     

瘦素在大鼠学习记忆中枢的分布

目的 观察瘦素在大鼠中枢神经系统的分布。方法 采用HE和免疫组化SABC染色方法。结果 在SD大鼠的大脑皮质、海马、下丘脑、杏仁体、丘脑、胼胝体、缰核和内囊等处可观察到瘦素免疫反应阳性细胞。结论 瘦素广泛存在于大鼠大脑皮质、海马及杏仁体等与学习记忆密切相关部位。提示瘦素可能参与学习记忆活动。     

大鼠脑部胰岛素的分布特点

目的 对脑胰岛素的含量进行确认，探讨脑胰岛素的来源。方法 用放射免疫法测定Wistar产各脑区胰岛素含量及血浆中胰岛素的含量。结果 嗅球胰岛素含量最高，嗅球、海马、下丘脑胰岛素含量明显高于血浆胰岛素含量。脑胰岛素含量由高到低依次为：嗅球、海马、下丘脑、桥脑、中脑、延髓、大脑皮层、小脑。结论 脑可能自身产生胰岛素。     

p53诱导死亡结构域蛋白在大鼠创伤性脑损伤中的表达变化

目的:探索创伤性脑损伤病理过程中p53诱导死亡结构域蛋白(PIDD)的表达变化。方法:建立大鼠脑损伤模型,采用免疫印迹法和免疫组织化学法检测损伤后的大鼠皮层组织中PIDD的表达和定位变化。结果:(1)在假手术脑组织中,PIDD表达很低,脑损伤后其表达逐渐增加,在3天左右达到最高峰,之后表达下降;(2)免疫组织化学法和免疫荧光实验表明,PIDD在损伤后的脑组织中表达明显上升,并且主要定位于神经元之中。     

Nestin在EAE大鼠脑中的表达及意义

目的研究神经干细胞标记蛋白——神经巢蛋白（Nestin）在实验性变态反应性脑脊髓炎（Experimental allergic encephalomyelitis，EAE）大鼠脑中的表达及意义。方法以豚鼠脑脊髓匀浆加完全福氏佐剂作为抗原，给予Wistar大鼠四足皮内注射，建立EAE模型。应用免疫组织化学技术检测EAE大鼠脑中Nestin的表达，与对照组比较，并做成组f检验分析其表达是否具有统计学意义。结果Nestin在EAE大鼠脑室管膜下区和皮质中表达增多，与正常对照组比较有显著性差异（P〈0.01）。结论Nestin表达显著性增强，表明神经干细胞在EAE大鼠脑中有增殖，增殖的神经干细胞可以为神经系统的结构和功能修复提供一定的物质基础。     

弥漫性脑损伤合并二次脑损伤脑组织谷氨酸及环核甘酸的改变

目的　探讨弥漫性脑损伤 (DBI)及其合并二次脑损伤 (SBI)脑组织谷氨酸 (Glu)及环核甘酸代谢改变及意义 .方法　在 Marm arou大鼠 DBI模型的基础上 ,制成低血压及脑缺血模型 .通过氨基酸分析仪与放免法测定伤后不同时间脑组织 Glu,c AMP,c GMP含量 .结果　 DBI后 10 min Glu明显增加 [(19.0± 6 0 .9)μm ol· g- 1 ,P<0 .0 1],随后逐渐下降并于 2 4～ 72 h间达最低点 ,为 (6 .5± 1.0 )μmol· g- 1 ,72 h组出现回升趋势仍维持低水平 ;DBI后 2 4h c AMP下降至(5 .7± 1.9) nmol· g- 1 (P <0 .0 5 ) ,c GMP则升高为 (1.1±0 .3) nmol· g- 1 (P<0 .0 1) ,c AMP/ c GMP比值下降 (5 .0±1.0 ,P<0 .0 5 ) ;SBI后上述指标变化愈加明显 .结论　在DBI及合并 SBI后脑组织 Glu,c AMP,c GMP含量发生变化 ,所引起的细胞兴奋毒性和代谢应急是加重脑损害的关键因素 ;这在合并 SBI时尤为严重     

The expression of TRPA1 mRNA in the rat brain

Objective： To investigate the distribution of TRPA1 （one kind of the TRP-like ion channel family） channel in the hippocampus and cerebral cortex of rat. Methods： RT-PCR was used to amplify the fragment of TRPA1 in the DRG （dorsal root ganglion）, hippocampus and cerebral cortex of adult SD rat. In situ hybridization staining was used to show the distribution of TRPA1 mRNA in the hippocampus and cerebral cortex of adult rat brain. Results： Both RT-PCR and in situ hybridization staining showed that TRPA1 mRNA was expressed in hippocampus and cerebral cortex of the adult rat brain. Conclusion： Our results suggest that there is expression of TRPA1 mRNA both in the hippocampus and cerebral cortex of the adult rat brain.     

缺氧缺血新生鼠脑组织Ng-R含量变化

目的观察Ng-R在缺氧缺血新生鼠脑组织中含量变化,探讨Ng-R抑制神经再生的作用。方法将7日龄新生SD大鼠(rt=64)随机分为8组：4个不同时段的缺氧缺血后脑损伤组(HIBD后6h,24h,72h,7d组)和4个相对时段的假手术对照组,采用Ng—R(N-20)多克隆抗体免疫组织化学SP法观察Ng—R的表达变化。结果Ng-R在HIBD后6h组新生鼠脑组织中含量明显升高,24h组持续升高达到峰值,72h组开始降低,但与假手术组仍有统计学差异,7d组继续降低,与假手术组无统计学差异。结论Ng-R在实验性缺氧缺血脑损伤后含量升高,可能抑制了中枢神经系统的再生。     

Effects of different fixatives on the TrkB-immunoreactivity in rat brain

Objective: To find out an effective fixative in immunohistochemistry for high-affinity neurotrophin receptor-tyrosine kinase (Trk) B. Methods: Comparing the results from four groups of adult rats which were fixed by different fixatives before the brain sections were processed for TrkB immunohistochemistry. Results: In the four groups, TrkBcells were observed throughout the whole brain, but the intensity of immunoreactive cells and the back-ground staining exhibited a marked difference among the groups. Conclusion: Using 0.3% -0.5% paraformaldehyde in 75% saturated picric acid 0.1 mol/L di-sodium hydrogen phosphate buffer as the fixative may yield the best quality of TrkB immunoreactivity.     

改良大鼠弥漫性脑损伤实验模型

目的 改良弥漫性脑损伤动物模型,建立一种简单实用的闭合性弥漫性颅脑损伤动物模型.方法 改良marmarou打击装置建立大鼠弥漫性颅脑损伤动物模型,脑组织的病理学改变使用渡银染色及HE染色法检测.结果 损伤呈全脑局部弥漫性分布,有出血、神经细胞肿胀、胶质细胞嗜酸性变、脑组织疏松、神经细胞变性坏死、嗜神经现象.结论 改良的marmarou闭合性大鼠颅脑损伤模型可作为闭合性弥漫性颅脑损伤研究的病理实验基础.     

大鼠脑和肌肉组织ATP含量的生物发光测定

目的：应用热处理法对大鼠脑组织和肌肉中ＡＴＰ含量进行生物发光测定。方法：用沸重蒸水制备组织匀浆，再经煮沸和离心提取后测定ＡＴＰ。结果：此法可有效地防止ＡＴＰ降解，且不影响发射光谱，灵敏度可达１０－１２ｍｏｌ／Ｌ水平。结论：本方法较其他方法简便、快捷、易掌握，具有实用价值。     

促红细胞生成素对新生鼠缺氧缺血性脑损伤后学习记忆功能的影响

目的动态观察促红细胞生长素（erythropoietin,EPO）早期对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后（hypoxic ischemicbrain damage,HIBD）学习记忆功能的影响,从神经行为学方面探索不同剂量EPO早期对新生鼠HIBD的保护作用,为临床早期应用EPO治疗新生儿缺氧缺血性脑病选择合适的治疗剂量提供实验参考。方法新生7日龄Wistar大鼠40只随机分为HIBD生理盐水对照组、假手术组、EPO治疗Ⅰ组、EPO治疗Ⅱ组、EPO治疗Ⅲ组,每组8只,通过结扎并剪断7日龄新生大鼠右侧颈总动脉,吸入8%O2＋92%N2的低氧气源2小时制备新生鼠HIBD模型。EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别于缺氧缺血完成后即刻注射rhEPO5u/g、10u/g、15u/g,HIBD对照组即刻注射生理盐水0.5mL/只,连续14天,通过Morris水迷宫实验观察五组大鼠的学习记忆功能。结果①学习能力：五组大鼠逃逸伏期总体比较差异有统计学意义（〈0.05）,其中假手术组最短,EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组次之,HIBD对照组最长。②记忆能力：HIBD对照组穿环指数与假手术组、EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组间差异均有统计学意义（〈0.05）,而假手术组与EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组间比较,差异无统计学意义（〉0.05）,EPO治疗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组间相互比较,差异亦无统计学意义（〉0.05）。结论①EPO早期治疗可改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后的学习和记忆功能;②通过对本试验的选择的三种EPO实验剂量对新生大鼠HIBD的影响结果表明,随着EPO剂量的增加并不能增强脑保护作用。     

新生大鼠缺氧缺血后不同脑区神经元变性的动态观察

目的：观察新生大鼠缺氧缺血（HI）后不同脑区神经元变性的动态变化,探讨其与星形胶质细胞反应的关系。方法：采用Fluoro-Jade B（FJB）染色法及免疫组化法分别观察变性神经元荧光染色强度及胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达的动态变化。结果：正常新生大鼠各脑区内均未见FJB阳性细胞,GFAP呈弱表达。HI后1d即可见FJB阳性细胞,3d阳性细胞增多,5d达高峰,以纹状体受累最重,皮质次之,海马各区易损顺序为CA1、CA4、CA2、CA3、齿状回。GFAP表达的强度与FJB阳性细胞数密切相关。结论：新生大鼠HI后脑易损部位为纹状体、皮质、海马,FJB染色是一种标记变性神经元的有效方法,反应性胶质细胞增生是应答神经元损伤的结果。     

Sodium cyanide and energetic parameters in rat brain synaptosomes

ＳｏｄｉｕｍｃｙａｎｉｄｅａｎｄｅｎｅｒｇｅｔｉｃｐａｒａｍｅｔｅｒｓｉｎｒａｔｂｒａｉｎｓｙｎａｐｔｏｓｏｍｅｓＭｅｎｇＦａｎｐｉｎｇ，ＹａｎｇＫａｎｇｉｕａｎ，ＪｏｈｎＢｏｔｈｍｅｒＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｙａｎｂｉａｎ...     

胰岛素受体及胰岛素受体底物-1、2在大鼠脑中的分布

目的:观察胰岛素受体(insulin receptor,InsR)及胰岛素受体底物-1、2(insulin receptor substrate-1、2,IRS-1、2)在正常成年大鼠大脑中的分布,为脑内胰岛素信号传导途径的研究提供理论依据。方法:应用免疫组织化学染色的方法观察正常成年大鼠脑中InsR、IRS-1、IRS-2的分布。结果:InsR、IRS-1、IRS-2在正常成年大鼠脑中广泛分布,在与学习记忆和能量代谢相关的脑区如大脑皮质、海马、丘脑和下丘脑的部分核团均有表达。结论:InsR及IRS-1、IRS-2在正常成年大鼠脑中广泛表达,但表达部位不完全一致,提示它们在大鼠中枢神经系统的正常功能活动中可能发挥不同的作用。     

促红细胞生成素及其受体在脑外伤后的表达及意义

目的观察促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)在急性重型脑外伤后大脑皮质内的动态表达规律,并探讨其意义。方法将130只Wistar大鼠分为3组:正常组10只、对照组60只(仅行开颅术)和脑损伤组60只(Feeney法)。分别在伤后5、12、24h及3、5、7d断头取脑。采用RT-PCR、免疫荧光法检测EPO和EPOR的mRNA及蛋白的表达。结果正常组和对照组各时间点有微量EPO及EPOR的表达,脑损伤组在伤后5h见少量EPOmRNA和蛋白的表达,12h和24h表达升高,至3d(mRNA0.691±0.035,免疫阳性细胞78.4±6.32)达到高峰,5d时下降,7d时降至正常水平。而EPORmRNA和蛋白在伤后5h见少量表达,12h时表达升高,至24h(mRNA0.736±0.017,免疫阳性细胞70.2±6.31)达到高峰,3d(mRNA0.641±0.027,免疫阳性细胞74.8±5.49)、5d(mRNA0.656±0.011,免疫阳性细胞69.5±7.21)和7d(mRNA0.771±0.017,免疫阳性细胞70.2±6.59)时仍维持在高表达水平,未见减弱。结论大鼠急性重型颅脑损伤后大脑皮质内EPO短暂升高,而EPOR持续高水平表达且呈时间依赖性,提示颅脑损伤后外源性EPO能与持续高表达的EPOR结合产生神经保护作用。