Ames试验与MLA试验检测两味含马兜铃酸中药的致突变性

背景与目的:检测单味马兜铃及复方龙胆泻肝丸的遗传毒性.材料与方法:鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames test)检测含马兜铃酸的两味单、复方中药的细菌回复突变率;采用96孔微孔板接种法进行小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变试验(mouse lymphoma assay,MLA),经单、复方含马兜铃酸浓度5 μg/ml对L5178Y/tk(+/-)-3.7.2c细胞进行染毒,分别测定其接种效率(PE),相对总增长率(RTG)和突变频率(MF).结果:Ames试验结果为阴性,而小鼠淋巴瘤试验显示单味马兜铃具有一定细胞毒性并诱导tk基因突变,产生突变集落;而复方龙胆泻肝丸未诱发tk基因突变.结论:受试的单味马兜铃具有一定的遗传毒而复方龙胆泻肝丸具有对马兜铃的减毒效应.     

Genotoxicity of di-phenyl-di-(2, 4-chlorobenzohydroxamato) tin

目的:研究二-(2,4-二氯苯甲酰异羟肟酸)二苯基合锡[di-phenyl-di-(2,4-chlorobenzohydroxamato) tin,DPDCT]是否存在遗传毒性.方法:应用Ames试验、中国仓鼠肺细胞(Chinese hamster lung,CHL)染色体畸变试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验,研究DPDCT的遗传毒性.结果:Ames试验中,DPDCT在每皿500、5 000μg剂量时,诱发TA97(±S9)、TA98(±S9)、TA100(±S9)及TA1535(+S9)菌株产生的回变菌落数明显高于阴性对照组(P＜0.01);染色体畸变试验中,DPDCT在4.00μg/ml浓度时,在-S9条件下作用24 h后,CHL细胞染色体畸变率明显高于溶剂对照组(P＜0.01);微核试验中,DPDCT在12.5～50.0 mg/kg浓度范围内,无致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成作用.结论:DPDCT在体外试验中,具有遗传毒性,但在小鼠体内试验中,未发现遗传毒性.     

五味子水煎剂的遗传毒性研究

背景与目的: 采用小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA)和小鼠骨髓微核试验(MNT)研究五味子水煎剂的遗传毒性。 材料与方法: 在MLA中,设五味子0.97、1.94、3.88、7.77 mg/ml (生药)等4个浓度组,在非代谢活化(-S9)和代谢活化(+S9)条件下处理L5178Y细胞3 h;表达2 d,制备基因突变频率平板并培养12 d,计数含大、小突变细胞集落的孔数,计算基因突变频率(MF)和小集落突变百分率(SC%);在MNT中,设3.13、6.25、12.50 g/kg (生药)3个剂量组,每组10只ICR小鼠,雌雄各半,间隔24 h 实施2次小鼠灌胃给予五味子水煎剂,制作骨髓涂片,计数每只小鼠2 000个嗜多染红细胞中含微核的嗜多染红细胞数(MNPCE),计算每组动物嗜多染红细胞微核率。 结果: 在-S9条件下,7.77 mg/ml (生药)浓度组诱发的MF是阴性对照组的2倍以上(P<0.01), SC%随五味子浓度增加而升高。 +S9条件下的各浓度组诱发的MF存在剂量-反应关系,7.77 mg/ml (生药)浓度组的MF明显增加(P<0.01),其MF、SC%与阳性对照组相近;五味子水煎剂各剂量组未显示骨髓抑制作用,所诱发的微核率与阴性对照组比较未见明显增加(P>0.05)。 结论: 五味子水煎剂在+/-S9条件下均可诱发L5178Y细胞tk位点突变并导致染色体损伤,提示对人体具有潜在的遗传毒性;但对小鼠骨髓细胞染色体无损伤,经体内代谢活化后未显示遗传毒作用。     

极替沙星遗传毒性及致突变作用的研究

目的与方法: 采用Ames试验,小鼠骨髓嗜多染红细胞(PEC)微核试验及中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变试验,检测受试物极替沙星是否具有潜在的遗传毒理学效应.结果:TA97、TA100、TA102 3株菌的Ames试验结果为阴性;TA98菌株的4 μg/ml和3 μg/ml剂量组在非活化法(-S9 )和活化法(+S9)试验中诱发的回变菌落数均高于自发回变菌落数10倍以上.PEC微核试验在中低剂量组试验均为阴性,而高剂量组与各自对照组相比,差异均具有显著性.在CHL染色体畸变试验中:无S9时,药物组在0.05 mg/ml～0.025 mg/ml范围内染色体畸变率在正常范围,在0.4 mg/ml～0.1 mg/ml范围内染色体畸变率为40.5%～69.0%;有S9时,药物组在0.1 mg/ml～0.025 mg/ml范围内染色体畸变率在正常范围,在0.4 mg/ml～0.2mg/ml范围内染色体畸变率为61%～91%.结论:极替沙星具有一定的遗传毒性及致突变作用.     

多遗传学终点的遗传毒性试验组合的建立

目的：建立Ames波动试验、中国仓鼠肺成纤维（CHL）细胞体外微核试验和小鼠淋巴瘤细胞基因突变试验（MLA）方法,探讨其作为一套新的遗传毒性试验组合检测化合物诱变性的可能性。方法：在Ames波动试验中,用TA100沙门氏菌进行96孔板的Ames波动试验,非活化条件下以叠氮钠（SA）、活化条件下以环磷酰胺（CP）染毒处理,计数阳性孔数并进行卡方检验。在CHL细胞体外微核试验中,非活化条件下用丝裂霉素C （MMC）分别染毒处理4和24 h,活化条件下用CP染毒4 h,计数2000个细胞中含微核的细胞数,并进行卡方检验。在MLA中,小鼠淋巴瘤细胞经清除自发突变后,非活化条件下用MMC、活化条件下用CP分别染毒处理3 h,计算相对存活率（RS）、相对悬浮增长率（RSG）、相对总增长率（RTG）、平板效率PE0、PE2、突变率（MF）、小集落比例（SC）。2结果：Ames波动试验中SA和CP在各自试验条件下阳性孔数均较对照组显著增加（χ^2＞6.63,P＜0.01）,量效关系明显。CHL细胞体2外微核试验中,MMC和CP在各自试验条件下均引起微核率显著升高（χ^2＞6.63,P＜0.01）,量效关系明显。MLA中MMC和CP在各自＋/-试验条件下均引起L5178Y 3.7.2C-tk^＋/- 细胞的PE、RS、RSG和RTG呈剂量依赖性下降,MF呈剂量依赖性升高,高出溶剂对照的2倍以上。结论：此3种短期遗传毒性试验方法可互为补充、相互验证,其组合应用可提高检出化合物遗传毒性的准确性,有望得到进一步推广应用。     

41种中药的诱变和抗诱变作用的研究

对人参等41种常用中药水前提取物以Ames试验检测了其诱变性,结果表明41种中药水前提取物5.3-83.5mg/ml五个浓度点试均未见有诱发TA98和TA100回变作用。抗诱变试验表明8.4-33.4mg/皿的山楂、首乌、丹参、女贞子、大黄、松针和中华弥猴桃根等7种中药水前提取物有明显的抑制2-氨基芴诱发TA98和TA100回变的作用,且抗诱变作用与中药水前提取物浓度呈正相关。     

盐酸苯海拉明咖啡因复方的遗传毒性评价

目的：研究盐酸苯海拉明咖啡因复方(盐酸苯海拉明/咖啡因质量比为1/2.4)是否具有遗传毒性。方法：采用鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验),体外培养中国仓鼠肺(CHL)细胞染色体畸变试验和ICR小鼠骨髓微核试验检测盐酸苯海拉明咖啡因复方的遗传毒性。Ames试验选用TA97、TA98、TA100、TA102及TA1535为指示菌株,设0.5、5、50、500、5 000 mg/皿共5个受试剂量组;CHL细胞染色体畸变试验设低、中、高(分别为8.45、16.9、33.8 mg/mL)3个剂量组;小鼠骨髓微核试验采用ICR小鼠经口灌胃的方式一次给予盐酸苯海拉明咖啡因复方,设低、中、高3个剂量组,分别为21.59、43.17和86.35 mg/kg。结果：与对照组相比,Ames试验结果提示在0.5、5、50、500、5 000 mg/皿剂量下,在加和不加代谢活化系统S9时对鼠伤寒沙门氏菌均无致突变性(P>0.05)。CHL细胞染色体畸变试验结果提示在终浓度8.45、16.9和33.8 mg/mL剂量组,在加与不加S9代谢活化系统培养CHL细胞24 h和4 h的条件下均未诱发染色体畸...     

Evaluation of genetic toxicity of bryostatin

目的:检测草苔虫内酯的遗传毒性.方法:采用Ames试验、体外培养中国仓鼠卵巢(chinese hamster ovary,CHO)细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验检测草苔虫内酯的遗传毒性.结果:Ames试验显示在每皿100、10、1、0.1g受试剂量下,在加或不加S9代谢活化系统时对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102及TA1535所诱发的回复突变菌落数均与溶剂对照的突变菌落数相近.体外培养CHO细胞染色体畸变试验结果显示,在3.75、1.88和0.94 g/ml 3个剂量组,在加S9条件下培养24 h和不加S9培养24、48 h的CHO细胞染色体畸变率与溶剂对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).小鼠骨髓微核试验,在12.5、25、50 g/kg 3个剂量下对ICR小鼠的微核诱发率呈剂量反应关系,与溶剂对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01).结论:在本实验条件下,草苔虫内酯对鼠伤寒沙门氏菌无致突变性,对哺乳动物培养细胞染色体的致畸变作用为可疑阳性,对ICR小鼠有诱发骨髓嗜多染红细胞微核的效应,提示草苔虫内酯对人体具有潜在的遗传毒性.     

环磷酰胺和异环磷酰胺致突变作用比较研究①

目的与方法:本文通过Ames试验和SOS显色试验比较了环磷酰胺(CP)与异环磷酰胺(IFO)的致突变作用.结果:CP和IFO在有S9活化的情况下,均可显著增加碱基置换型检测菌株TA100的回变菌落数,并呈现明显的剂量--效应关系,但两药的作用强度不同,同等剂量时IFO诱发的回变菌落数均少于CP,1 000μg/皿的剂量下CP诱发回变菌落数为空白对照的12倍以上,IFO仅为空白对照的5倍左右;在无S9活化时两药对TA100菌株菌落回变均无影响,而对移码突变型检测菌株TA97、TA98、TA102,两药无论有无S9活化均对菌落回变无显著影响.SOS显色试验则表明,即使在有S9活化条件下,两药对大肠杆菌PQ35、PQ37菌株SOS修复系统均无诱导性.结论:CP和IFO都是通过引起DNA碱基置换诱发突变,且等剂量条件下IFO的致突变作用弱于CP,提示对生产和操作人员应采取必要的防护措施.     

用细菌回复突变试验检测两种高效光诱导剂的致突变性

【摘要】 背景与目的： 检测高效光诱导剂4,4＇ˊ-二甲基二苯基碘　盐六氟磷酸盐[Bis(p-toly)iodonium hexaflurophosphaye,IHT-PI 820]和2-异丙基硫杂蒽酮(2-Isopropylthioxanthone,IHT-PI ITX)是否存在致突变性。材料与方法： 采用细菌回复突变试验平板掺入法,鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)TA98、TA100、TA1535、TA1537及大肠杆菌(E.coli)WP2 uvrA,在非代谢活化(－S9)与代谢活化(＋S9)条件下同时进行检测。结果： －S9条件下,IHT-PI 820诱发5株测试菌株的回变菌落数、IHT-PI ITX诱发TA98的回变菌落数呈剂量相关性增加;＋S9条件下,IHT-PI 820诱发TA98、TA1537、WP2 uvrA的回变菌落数呈剂量相关性增加。 结论: IHT-PI 820和IHT-PI ITX均对测试菌株有致突变作用,提示这两种高效光诱导剂对人体可能具有潜在的遗传毒性。     

丙烯酸-2-乙基己酯的遗传毒性研究

目的： 检测丙烯酸-2-乙基己酯的遗传毒性,为其安全性评价提供资料。方法：采用鼠伤寒沙门菌回复突变试验 (Ames试验),小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验检测丙烯酸-2-乙基己酯的遗传毒性。Ames试验设每皿0.08、0.4、2.0、10.0和50.0 μL剂量组,另设空白、溶剂、阳性对照;微核试验设350、700和1 400 mg/kg剂量组,另设溶剂、阳性对照;TK基因突变试验设12.5、25、50和100 μmol/L剂量组,另设溶剂、阳性对照。 结果：Ames试验中,加或不加S9的情况下,丙烯酸-2-乙基己酯对TA97、TA98、TA100和TA102菌株均显示致突变作用。微核试验中,雌雄鼠微核率均呈现剂量-反应关系;雄鼠高剂量组微核率与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);雌鼠各剂量组微核率与溶剂对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。TK基因突变试验中高剂量组突变频率与对照组比较,差异具统计学意义(P<0.05)。结论：在本实验条件下,Ames试验和TK基因突变试验均显示阳性结果,微核试验显示可疑阳性。丙烯酸-2-乙基己酯遗传毒性需结合其他检测系统综合评定。     

草苔虫内酯的遗传毒性评价

目的：检测草苔虫内酯的遗传毒性。方法：采用Ames试验、体外培养中国仓鼠卵巢（chinese hamsterovary,crto）细胞染色体畸变试验和小鼠骨髓微核试验检测草苔虫内酯的遗传毒性。结果：Ames试验显示在每皿100、10、1、0．1g受试剂量下,在加或不加S9代谢活化系统时对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102及TAl535所诱发的回复突变菌落数均与溶剂对照的突变菌落数相近。体外培养CHO细胞染色体畸变试验结果显示,在3．75、1．88和0．94g／ml 3个剂量组,在加S9条件下培养24h和不加S9培养24、48h的CHO细胞染色体畸变率与溶剂对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。小鼠骨髓微核试验,在12．5、25、50g／kg3个剂量下对ICR小鼠的微核诱发率呈剂量反应关系,与溶剂对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：在本实验条件下,草苔虫内酯对鼠伤寒沙门氏菌无致突变性,对哺乳动物培养细胞染色体的致畸变作用为可疑阳性,对ICR／b鼠有诱发骨髓嗜多染红细胞微核的效应,提示草苔虫内酯对人体具有潜在的遗传毒性。     

伊痛舒的致突变作用研究

应用CHL 细胞染色体畸变试验、Ames 试验和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验对伊痛舒进行了致突变作用研究。结果显示:0. 00625ml/ 皿、0. 125ml/ 皿、0. 025ml/ 皿、0. 05ml/ 皿、0. 1ml/ 皿各剂量组TA97 、TA98 、A100、TA102 各试验菌珠MR< 2 ;1250mg/ kg、2500mg/ kg、5000mg/ kg 各剂量组PCE 微核率分别为2. 0 ‰、212 ‰、218 ‰,与对照组(410 ‰) 比较无明显差异( P < 0105) ;0. 0125ml/ ml、0. 025ml/ ml、0. 05ml/ ml、0. 1ml/ ml 各剂量组加与不加S9 CHL 细胞染色体畸变率均小于5 % ,表明伊痛舒在该试验条件下无明显致突变作用。     

甲氧化三丁基锡的急性毒性和遗传毒性研究

目的:研究甲氧化三丁基锡(tributyltin methoxide,TBTMO)对小鼠的急性毒性和遗传毒性。方法:选取昆明种小鼠110只,随机分为11组(TBTMO 420、286、194、180、132、90、73、61、41.5、28 mg/kg及阴性对照组),一次性灌胃给药进行急性毒性测试;另取昆明种小鼠50只随机分成5组(TBTMO 80、40、20 mg/kg组,阴性对照组和阳性对照组),各剂量组和阴性对照组均连续给药2 d,阳性对照组连续给药5 d,均连续观察35d,处死小鼠取双侧附睾制片进行精子畸形试验;并取昆明种小鼠50只随机分成5组(TBTMO 80、40、20 mg/kg组,阴性对照组和阳性对照组),灌胃给药30 h后处死小鼠取胸骨骨髓进行微核试验;取GFP转基因小鼠50只随机分成5组(TBTMO 80、40、20 mg/kg组,阴性对照组和阳性对照组),收集每只小鼠的脾淋巴细胞进行hprt基因突变试验。然后用不同浓度TBTMO(69.4、48.6、34.0、23.8、16.6、0μg/ml)分别处理中国仓鼠肺成纤维细胞(Chinesehamster lung,CHL)进行染色体畸变试验;用不同浓度TBTMO(每皿5×10~5、5×10~4、5×10~3、5×10~2、50、5、0.5、0.05、5×10~-3、5×10~-4μg)分别处理TA97、TA98、TA100、TA102 4种菌株进行Ames试验。结果:TBTMO对小鼠的半数致死量(LD_(50))为98 mg/kg。与阴性对照组比较,TBTMO可致小鼠精子畸形(P0.05或P0.01),且有剂量依赖趋势,其余4项遗传毒性试验结果均为阴性。结论:在本实验条件下,TBTMO对小鼠的急性经口毒性属于中等毒性,可能具有一定的遗传毒性。     

溪黄草袋泡茶的急性毒性和遗传毒性研究

目的： 探讨溪黄草袋泡茶的急性毒性和遗传毒性。方法：急性毒性实验,分别对小鼠灌服剂量为21.5、10.0、4.64、2.15 g/kg的溪黄草袋泡茶提取液,采用霍恩氏(Horn)法计算其半数致死剂量(LD50)。设每皿5 000、1 000、200、40、8 μg共5个剂量组进行Ames试验;分别按 10.0、5.00、2.50 g/kg进行小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和小鼠精子畸形试验,检测溪黄草袋泡茶的遗传毒性。结果：溪黄草袋泡茶对雌雄小鼠LD50＞21.5 g/kg;Ames试验中,溪黄草袋泡茶对 TA97、TA98、TA100、TA102这4种试验菌株,在加与不加S9条件下,样品各剂量组回变菌落数均未超过溶剂对照组菌落数的2倍,亦无剂量-反应关系;小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和精子畸形试验结果显示,各剂量组的微核率和精子畸形率与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论：在本实验条件下,溪黄草袋泡茶属无毒级物质,未见遗传毒性。     

深圳和太原PM2.5样品致突变作用研究

目的：探讨深圳和太原大气细颗粒物（PM_2.5）样品是否具有致突变作用。方法：应用组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102和TA1535,通过平板渗入法同时对广东深圳和山西太原两地的PM_2.5样品进行标准Ames试验。实验设4个PM_2.5剂量组（分别为每皿40、100、200和400 μg）、1个阴性对照组和1个阳性对照组,每种细菌均设立加S9和不加S9两种试验组。结果：深圳PM_2.5样品的Ames试验结果显示,TA97、TA100和TA102在PM_2.5样品处理后菌落回变数显著高于阴性对照组,加S9与不加S9的菌落回变数比较差异有统计学意义（P < 0.01）。太原样品的Ames试验结果显示,TA97、TA98和TA100在PM_2.5样品处理后菌落回变数显著高于阴性对照组,加S9与不加S9的菌落回变数比较差异有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01）。但深圳和太原PM_2.5样品对TA1535未见阳性结果,结论：深圳和太原PM_2.5样品均能够引起TA97、TA98、TA100的Ames试验的自发回变数阳性结果,表明深圳和太原PM_2.5样品均具有致基因突变作用。     

美洛昔康的致突变研究

目的:研究美洛昔康是否有潜在的遗传危害。方法:利用Ames 试验、染色体畸变试验和微核试验对美洛昔康的突变性进行研究。结果:在±S9mix 条件下,各剂量组对TA97 、TA98 、TA100 和TA102 菌株无诱发回复突变菌落数增加作用;对中国仓鼠成纤维细胞(CHL) 染色体无畸变作用;以240 mg/ kg·bw、120 mg/ kg·bw、48 mg/ kg·bw 和16 mg/ kg·bw 的美洛昔康对小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核细胞率无增加作用。结论:在本实验条件下,美洛昔康对Ames 试验、染色体畸变试验和微核试验无致突变效应。     

特丁净致突变性与蓄积毒性实验研究

【摘要】 背景与目的: 研究特丁净的致突变性与蓄积毒性。 材料与方法: 采用小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验,鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验),小鼠骨髓多染红细胞微核试验,固定剂量蓄积毒性系数法。 结果: 小鼠睾丸M1期精母细胞染色体畸变数阴性对照组与特丁净各剂量组间差异无统计学意义(P>0.05), 而阴性对照组和特丁净各剂量组均低于环磷酰胺组(P<0.05);小鼠骨髓多染红细胞微核率阴性对照组与特丁净原药各剂量组间差异均无统计学意义(P>0.05),而阴性对照组和特丁净各剂量组均明显低于环磷酰胺组(P<0.01);四株试验菌在各试验剂量下(活化或非活化)均没有引起自发回变数呈2倍的增加,5.0 mg/皿剂量组对四个菌株均有抑菌作用,而0.5、1.0、2.0 mg/皿组无剂量反应关系。特丁净原药蓄积系数为1.4。 结论: 特丁净原药根据《农药登记毒理学试验方法》评定标准,未呈现致突变性,小鼠骨髓多染红细胞微核试验在所选剂量范围内结果为阴性,小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验在所选剂量范围内结果为阴性,但蓄积毒性明显。     

经环氧乙烷灭菌的培养皿对Ames试验的影响

目的：研究经环氧乙烷灭菌的培养皿对Ames试验的影响。方法：采用Ames试验平板掺入法,分别使用不同储存时间及是否通风等情况下的环氧乙烷灭菌培养皿,计数TA97、TA98、TA100、TA102及TA1535菌株的回变菌落数。结果：灭菌后存放1个月左右(25 d)的培养皿中环氧乙烷的残留在活化和非活化两种条件下均能引起TA100和TA1535菌株的回变菌落数增多(TA100,约自发回变数的1.5倍;TA1535,约自发回变数的10倍),而经通风或延长培养皿储存时间可减少环氧乙烷残留并消除这种致突变作用。结论：在一定条件下,经环氧乙烷灭菌的培养皿对Ames试验中TA100、TA1535菌株有致突变性。