d-筒箭毒碱对V79细胞和小鼠骨髓细胞有丝分裂的影响

目的：探讨烟碱型乙酰胆碱受体阻断剂ｄ－筒箭毒碱对Ｖ７９细胞和小鼠骨髓细胞有丝分裂的影响。方法：在离体情况下以受试物处理中国仓鼠Ｖ７９细胞，通过分析Ｖ７９细胞晚末期和早Ｇ１期细胞核与细胞质构型，双核细胞频率，探讨受试物对细胞质质裂的影响；研究同时探讨了活体情况下，该化合物对小鼠骨髓细胞的Ｃ－有丝分裂（Ｃ－Ｍ）效应，分析其对哺乳动物体细胞有丝分裂的影响。结果：ｄ－筒箭毒碱能使Ｖ７９细胞的晚末期一早Ｇ１     

CYP2B6cDNA导入V79、FL和CHL细胞中稳定表达及其初步鉴定

ＣＹＰ２Ｂ６ｃＤＮＡ导入Ｖ７９、ＦＬ和ＣＨＬ细胞中稳定表达及其初步鉴定吴健敏，董海涛，余应年，朱丽君（浙江医科大学病理生理学教研室及医学分子生物学实验室杭州３１００３１）细胞色素Ｐ４５０是代谢活化大多数前致突变物／致癌物的主要酶系，在建株细胞中这些基...     

V79细胞基因突变试验的应用研究

哺乳动物细胞基因突变试验是近年来发展的检测化学物质致突变作用一较为成熟的方法．本文利用中国仓鼠肺V79细胞HGPRT基因位点突变试验对蜂胶的致突变性和有机锗Ge-132的抗突变性进行了初步研究．结果显示：①剂量为2μg／ml、10μg／ml,50μg／ml的蜂胶浸出液无诱变性．②剂量为100μg／ml的Ge-132可抑制丝裂霉素C诱导的V79细胞基因突变,     

阿托品对中国仓鼠V79细胞有丝分裂过程的影响

本研究以毒蕈碱型乙酰胆碱受体抑制剂阿托品在离体情况下作用于中国仓鼠Ｖ７９细胞,通过分析Ｖ７９细胞晚末期和早Ｇ１期细胞核细胞质构型,双核细胞频率,探讨了阿托品对哺乳动物离体细胞正常有丝分裂过程的影响。结果发现,阿托品使Ｖ７９细胞的晚末期一早Ｇ１期细胞核和细胞质分裂构型发生显著变化,以核细胞的阿托品可能通过Ｍ型胆碱受体阻断过程而对哺乳动物有丝分裂真实性产生影响。胆碱受体的功能异常可能为非整倍体发生的诱     

五种氯化有机物对V79细胞DNA损伤作用的研究

本文采用近年来发展的单细胞凝胶电泳试验检测了二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳及一氯化酸和三氯乙酸对Ｖ７９细胞的ＤＮＡ损伤作用。结果显示：五种受试物均可引起体外培养的Ｖ７９细胞ＤＮＡ损伤,但其作用强度差异很大。其顺序为四氯化碳〉三氯甲烷〉二氯甲烷〉一氯乙酸〉三氯乙酸。该结果还提示：五种氯化有机物对Ｖ７９细胞的毒性及ＤＮＡ损伤作用的大小顺序是一致的,氯化烷基类化合物的细胞毒性及ＤＮＡ损伤作用均大于氯乙酸类     

B（a）P诱导的V79细胞HGPRT位点突变的检测

在加与不加Ｓ９两种情况下，用Ｖ７９中国仓鼠细胞检测了Ｂ（ａ）Ｐ诱ＨＧＰＲＴ突变频率和细胞毒性。结果表明，无论加与不加Ｓ９混合液，Ｂ（ａ）Ｐ对Ｖ７９细胞都具有明显毒作用，但在不加Ｓ９时，不会导致６－巯基嘌呤抗生细胞发生率的明显增加。在存在Ｓ９混合液时，Ｂ（ａ）Ｐ诱导的ＨＧＰＲＴ突变频率随Ｂ（ａ）Ｐ浓度的加大而明显增加。剂量在０．５－８μｇ／ｍｌ范围时，每１μｇ／ｍｌＢ（ａ）Ｐ诱发的Ｖ７９细胞ＨＧＰＲ     

中国仓鼠V79细胞对长波紫外辐射的应激反应

长波紫外线(UVA,320～400nm)在环境光生物学和光医学中具有重要意义。作者以指数生长期V79细胞为材料,用克隆形成和MTT分析法,实验证明:①UVA对V79细胞增殖有刺激作用。光源强度一定,在实验所用剂量范围内(5×10~3～2×10~J/m~2),效应谱约在330～370nm波段之间,系单峰,效应峰值在350nm处。峰位不随剂量而变化,说明刺激作用有波长特异性。波长350nm时的剂量-效应曲线近似铃形,最佳刺激剂量为5×10~4J/m~2。所有这些特征均与激光相类似,说明“刺激作用”并非相干     

纺锤体毒剂和断裂剂体外诱发V79细胞多核与微核效应的差异

采用长春新碱，秋水仙素，丝裂霉素Ｃ和环磷酰２胺对Ｖ７９细胞染毒，发现两类诱变剂在诱发多核与微核的敏感性和强度上存在显著差异。当剂量较高时，四种诱变剂都可诱发多核与微核，但纺锤体毒剂以请发多核为主，多核细胞率与微核细胞率的比值为２．０－３．５．而断裂剂以诱发微核为主。     

B（α）P诱导的V79细胞HGPRT位点突变的检测

在加与不加Ｓ９两种情况下，用Ｖ７９中国仓鼠细胞检测了Ｂ（α）Ｐ诱导的ＨＧＰＲＴ突变频率和细胞毒性。结果表明，无论加与不加Ｓ９混合液，Ｂ（α）Ｐ对Ｖ７９细胞都具有明显毒作用，但在不加Ｓ９时，不会导致６—巯基鸟嘌呤抗性细胞发生率的明显增加．在存在Ｓ９混合液时，Ｂ（α）Ｐ诱导的ＨＧＰＲＴ突变频率随Ｂ（α）Ｐ浓度的加大而明显增加。剂量在０．５—８μｇ／ｍｌ范围时，每１μｇ／ｍｌＢ（α）Ｐ诱发的Ｖ７９细胞ＨＧＰＲＴ位点突变频率为７—２４／１０６细胞。     

TK基因突变试验—L5178Y细胞与TK6细胞的比较研究

TK基因突变试验是一种国外已广泛使用的体外短期致突变实验,它具有很高的灵敏度,可检出包括点突变、大的缺失、重组、染色体异倍性和其他较大范围基因组改变在内的多种遗传改变。TK基因突变试验采用的靶细胞系主要有小鼠淋巴瘤细胞L5178Y以及人类淋巴母细胞TK6和WTK1等,其基因型均为tk^ /-。使用L5178Y细胞的试验（即小鼠淋巴瘤细胞试验）发展较早,已形成一套比较完善的方法。而TK6和WTK1等人类来源的细胞在TK基因突变分析中的应用时间还不长,其方法尚不太成熟且资料有限,但因为来源于人类,在评价受试物对人体的损伤方面意义可能更大。有关小鼠淋巴瘤细胞和人类淋巴母细胞在TK基因突变试验中的灵敏度和特异性方面的比较性研究的报告尚不多见。本研究使用3种常规诱变剂（MMS、EMS、MMC）和一种非诱变剂（KCl）,分别采用琼脂平皿血和微孔平板法对两种细胞（L5178Y与TK6）的灵敏度和特异性进行比较研究。研究结果表明,直接比较同一受试物诱发两种细胞的突变频率,TK6细胞显著低于L5178Y细胞。比较两种细胞的相对突变指数时,TK6细胞突变指数显著高于L5178Y细胞。而且TK6细胞在较低浓度的受试物剂量下即可诱发突变频率、突变指数的显著增加。说明TK6细胞在本试验中比L5178Y细胞敏感。两种细胞采用两种方法对4种受试物的致突变性评价结果一致,即3种强致突变剂的检测结果均为阳性;微孔法检测KCl的结果两种细胞均为阳性,而琼脂法的检测结果均为无反应。结论：使用TK6细胞和L5178Y细胞对4种受试物的检测结果基本一致,但TK6细胞在检测低毒性、低浓度受试物时优于L5178Y细胞。另外,从对人类的实际意义来看,也应推广TK6细胞在TK细胞突变分析中的应用。     

3种玻纤在V79细胞体外微核试验中微核着丝粒的分析

玻璃纤维是最普通的人造纤维之一，广泛用于建筑、防火、隔热隔音，可塑性铺垫、空气和液体的过滤等材料，因此有大量工人和普通居民都可能接触玻纤尘埃．有关玻纤遗传毒性的文献很有限，但都表明玻纤可以导致染色体断裂和多倍体．为探讨玻纤诱发C79细胞产生微核的潜在性，并对所形成的微核进行分析．     

卵巢癌中p53基因突变和粘附分子CD44V6的表达

目的研究p53基因突变、CD44V6在卵巢癌中的表达及两者与肿瘤转移之间的关系.方法RT-PCR方法及特异探针D3对卵巢癌细胞进行DNA印迹杂交,对杂交条带进行X线摄片曝光,并对X线摄片上的杂交条带进行灰度扫描,定性、定量分析CD44V6的表达;银染多聚酶链式反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)技术检测卵巢癌细胞p53基因突变.结果正常卵巢、良性卵巢肿瘤、卵巢癌未转移者和转移者CD44V6阳性率依次为0,10%,75%,88%,而p53基因突变率为0,5%,40%,60%二者都呈逐渐上升趋势,CD44V6灰度扫描表明卵巢癌转移组CD44V6表达量明显高于其他实验组,其中,肿瘤未转移者(3820.14±289.43)和转移者(10132.92±1521.20)相比较,表达量有显著差异(P＜0.01).结论CD44V6与p53基因突变相比较而言,CD44V6阳性率明显高于p53基因突变率.CD44V6的表达与肿瘤转移高度相关.     

环孢素诱导白血病细胞系Nalm—6细胞凋亡

目的：研究环孢素（环孢霉素A，CsA）在体外对B－细胞性白血病细胞株Nalm-6细胞增殖的影响，并探讨其可能的作用机制。方法：应用细胞形态学、DNA凝胶电泳等方法检测在体外CsA对B－细胞性白血病细胞株Nalm-6细胞增殖的作用。结果：临床耐受剂量CsA能明显抑制Nalm-6细胞增殖，且证实诱导细胞凋亡是CsA抑制增殖的主要机理之一。结论：CsA能有效地通过诱导人类B－细胞性白血病细胞株凋亡而起到抑制增殖的作用。     

bcl—xs增加鼻咽癌细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性

目的：利用bcl-xs基因降低肿瘤细胞凋亡阈值,促进化疗药物顺铂诱导的鼻咽癌细胞凋亡,探索提高顺铂疗效的新途径。方法：利用脂质体LipofectAmine将含有人bcl-xs基因的重组真核表达质粒pcDNA3xs导入人鼻咽癌低分化上皮细胞株CNE－2Z,G418筛选培养后,经Western blot检测bcl-xs的表达,以不含有bcl-xs基因的pcDNA质粒转染CNE－2Z作为对照细胞（CNE－2Zneo)。顺铂处理2种细胞后,台盼蓝计数求得各自的IC50,流式细胞仪及荧光染色检测凋亡细胞百分比。结果：Western blot检测证实获得稳定表达bcl-xs的细胞（CNE－2Zxs),与对照细胞相比,其对顺铂的IC50值明显降低,经相同剂量顺铂处理后,流式细胞仪及荧光染色检测,结果表明,其凋亡细胞百分比明显高于对照细胞。结论：bcl-xs能显著增加鼻咽癌CNE－2Z细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性。     

肾细胞癌CD44V6、nm23—H1、PCNA、bcl—2的表达及其意义

目的：研究肾细胞癌组织中CD44V6、nm23-H1、PCNA和bcl-2的表达及其与临床病理的关系。方法：应用免疫组化S－P法检测30例肾细胞癌细胞中上述4项蛋白达的变化。结果肾细胞癌组织中CD44V6、nm23-H1、PCNA和bcl-2的表达率分别为23．3％、50．0％、66．7％和36．75。CD44V6、PCNA的高表达与肾细胞癌的脉管浸润密切相关。CD44V6的高表达还与组织学类型密切相关。nm23-H1、bcl-2的表达与肾细胞癌的脉管浸细胞、组织学类型及组织分级无关,结论CD44V6、PCNA高表达是判断肾细胞癌生物学行的良好指标。     

E-cadherin、CD44V6和HLA-DR在非小细胞肺癌表达的临床意义

目的：探讨E-cadherin、CD44V6和HLA-DR抗原在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化ABC法，检测65例原发性非小细胞肺癌组织中E-cadherin、CD44V6和HLA-DR抗原表达情况，并分析了其表达与肺癌临床病理的关系。结果：65例肺癌组织中E．cadherin、CD44V6和HLA-DR的阳性表达率分别为53．8％(35／65)、58．5％(38／65)和53．8％(35／65)。E-cadherin、CD44V6表达与组织学类型无明显相关，与肺癌淋巴结转移密切相关。HLA-DR与组织学类型明显相关，与肺癌有无淋巴结转移无明显相关性。E-cadherin、CD44V6和HLA-DR阳性表达与病理分级及临床分期密切相关。结论：E-cadherin、CD44V6和HLA-DR异常表达在肺癌发生、发展和转移过程中起着重要作用，联合检测对判断肺癌生物学行为具有重要意义。     

K562耐热细胞的放射敏感性

目的 研究Ｋ５６２细胞热耐受性与放射敏感性的关系。方法 先诱导产生Ｋ５６２耐热细胞亚群,然后且不同济量＾Ｃｏγ射线照射和５－Ｆｕ对Ｋ５６２细胞株及其耐热细胞的放射敏感性进行测定。结果 Ｋ５６２耐热细胞对射线照射和５－Ｆｕ具有一定程度的耐受性;５－Ｆｕ联合不同剂量的照射有部分的相加作用。结论 Ｋ５６２细胞热耐受性、耐药性及放射抗性之间有一定的相关性。提示在临床热疗工作中,必须采用合理的序贯和递降加温     

膀胱癌组织及尿脱落细胞CD44V6表达的研究

目的　探讨尿脱落细胞 CD4 4 V6的表达对膀胱癌诊断的意义 ,以及 CD4 4 V6在膀胱癌组织的表达与临床病理特征的关系。方法　对 4 1例膀胱癌及 37例非癌患者尿液脱落细胞涂片进行 HE染色及免疫组化 S- P法染色 ;术后对膀胱癌组织和对照组膀胱黏膜组织进行 HE染色和免疫组化 S- P法染色。结果　细胞涂片传统细胞学法敏感性 34.1% ,特异性为 94 .6 % ;CD4 4 V6免疫组化法敏感性为 73.2 % ,特异性为 89.2 % ,两者差异有高度显著性 ( P<0 .0 1)。膀胱癌 CD4 4 V6阳性表达率 , 级为 10 0 .0 % ( 7/ 7) , 级为 75 .0 % ( 15 / 2 0 ) , 级为 6 4 .3% ( 9/ 14 )。膀胱癌 CD4 4 V6的表达与病理组织分级呈负相关 ( P<0 .0 5 )。膀胱癌 CD4 4 V6阳性表达率 Ta～ 1 组为 92 .3% ( 2 4 /2 6 ) ,T2～ 4 组为 6 0 .0 % ( 9/ 15 ) ,两组差异有显著性 ( P<0 .0 5 ) ,肌层浸润者 CD4 4 V6表达较无肌层浸润者低。结论　膀胱癌 CD4 4 V6的表达与组织学分级有显著性关系。膀胱癌组织学分级越高 ,则 CD4 4 V6阳性越低。膀胱癌肌层浸润者 CD4 4 V6的阳性表达较无肌层浸润者显著降低。尿脱落细胞 CD4 4 V6免疫组化 S- P法优于常规细胞学检验法。     

非小细胞肺癌CD44V6和C-erbB-2的表达及其意义

目的 :探讨CD44V6及C erbB 2表达与非小细胞肺癌临床病理特征之间的关系。方法 :采用S P免疫组化法检测 132例非小细胞肺癌、6 6例淋巴结转移癌、95例癌旁肺组织和 2 0例正常肺组织CD44V6和C erbB 2表达的情况。结果 :非小细胞肺癌CD44V6阳性表达率为 48 4 8%,明显高于癌旁肺组织 16 84%和正常肺组织 2 0 0 0 %的阳性有效率。CD44V6阳性表达与淋巴结转移状况、TNM分期、肿瘤大小和组织学类型有显著相关性。非小细胞肺癌淋巴结转移组、TNMⅢ期患者、直径>3cm的肿瘤和鳞癌CD44V6阳性表达率分别明显高于无淋巴结转移组、TNMⅠ、Ⅱ期患者、直径≤ 3cm的肿瘤和腺癌。淋巴结转移癌CD44V6阳性表达率明显高于肺原发癌。CD44V6阳性表达与患者的性别、年龄和组织学分级无显著相关性。非小细胞肺癌C erbB 2阳性表达率为 6 1 36 %,明显高于癌旁肺组织 18 95 %和正常肺组织 10 0 0 %的阳性表达率。C erbB 2阳性表达与临床病理特征无显著相关性。结论 :CD44V6阳性表达预示非小细胞肺癌具有较强的侵袭和转移能力 ,CD44V6可作为一项预测非小细胞肺癌转移潜能及判断预后的生物学指标。C erbB 2作为判断非小细胞肺癌预后的指标不理想