乙型肝炎病毒表面抗体定性测定S/CO的临床意义

目的探讨乙肝病毒表面抗体定性测定S／CO（标本吸光度/临每界值）值与定节测定值的相关性。方法时间分辨荧光免疫分析法（TRF）及酶联免疫吸附试验（ELISA）检测不同浓度的血清，绘制标准曲线，建立方程。结果S／CO值与定量测定值呈曲线正相关，转换方程式为Y＝8．9118×e^0.1774X。S／CO计算值与实测值组内相关系数为0．934。结论乙肝病毒表而抗体含量可通过定性S／CO值推算，适用于基层未开展乙肝标志物定量检测的实验室应用。     

血液保养液与肝素抗凝剂对HBsAg ELISA检测结果的影响

目的对无偿献血者血标本进行HBsAg检测时,分析血液保养液（CPD）与肝素抗凝剂对结果的影响。方法取4IU/mlHBsAg质控品,分别制备成不同的待检样本,即肝素抗凝剂组（对照组）和CPD保养液组（实验组）;应用ELISA试剂盒检测两组样本HBsAg,将所得S/CO值进行配对t检验。结果对照组S/CO值为8.81,实验组S/CO值为7.60,差异有统计学意义（t=5.67,P〈0.05）。结论采用ELISA法检测HBsAg时,含CPD保养液的样本比肝素抗凝剂样本结果的S/CO值低,应引起采供血机构的重视。     

样品离心方式对HBsAg ELISA试验结果的影响

笔者在使用某一HBsAg ELISA试剂检测血液的过程中,有时发现空白和阴、阳性对照以及室内质控检测孔正常,而血液标本（不抗凝）检测孔的S/CO值却比较高的情况（82.4%的值〉0.571）：标本的阳性率较高（17.05%）且80%的阳性标本都表现为弱阳性结果（S/CO值为1.000～4.762）,即所谓ELISA试验的＂花板＂问题.经过仔细分析并采取相应措施,笔者解决了这一问题,现将做法总结如下.     

溶血标本使用国产HBsAg酶免试剂可用于常规分析

目的 观察标本不同程度溶血对国产两步法乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂检测结果的影响.方法 收集HBsAg阴性和阳性已确定的血液标本各3例,并将其分别作为HBsAg阴性组和阳性组.标本人为处理为无、轻、中、重度溶血,用3种国产HBsAg ELISA试剂对其进行重新检测,分析溶血后标本吸光度值与临界值的比值（S/CO值）的变化.结果 在HBsAg阴性标本中,不同浓度的溶血标本未检出阳性,S/CO值无明显改变（P〉0.05）;在HBsAg阳性标本中,不同浓度的溶血标本和无溶血的标本比较,S/CO值也无明显变化（P〉0.05）.结论 国产两步法HBsAg ELISA试剂可用于溶血标本的常规检测.     

三种方法检测低浓度乙肝表面抗原的比较与分析

目的：初步探讨三种方法对低浓度乙肝表面抗原（HBsAg）定性与定量检测的结果并进行对比分析。方法分别用酶联免疫吸附法（ELISA）、化学发光微粒子免疫分析法（CMIA）与时间分辨荧光免疫法（TRFIA）测定2013年10月～2014年4月间于湖南旺旺医院就诊及体检的85例低浓度 HBsAg（ELISA法0.6＜S／CO≤3.0）标本,三种方法测定低浓度 HBsAg定性结果分为0.6＜S／CO≤1.0,0.6＜S／CO≤3.0两组采用检出阳性率进行χ2检验;HBsAg定量结果分为0.6＜S／CO≤1.0,1.0＜S／CO≤2.0,2.0＜S／CO≤3.0,0.6＜S／CO≤3.0四组采用配对样本t检验进行两两比较;HBsAg含量相关性采用相关系数t检验进行两两分析。结果①HBsAg检出阳性率0.6＜S／CO≤1.0组 CMIA法（64.0％）和TRFIA法（54.0％）两者之间差异无统计学意义（χ2值为0.333,P＞0.05）,0.6＜S／CO≤3.0组 ELISA 法（70.6％）与CMIA法（89.4％）及TRFIA法（87.1％）之间差异有统计学意义（χ2值分别为9.412,6.907,P均＜0.05）,CMIA法和TR-FIA法两者之间差异无统计学意义（χ2值为0.227,P＞0.05）。HBsAg检出阳性率 CMIA＞TRFIA＞ELISA。②HBsAg含量测定0.6＜S／CO≤1.0,1.0＜S／CO≤2.0,2.0＜S／CO≤3.0三组除在2.0＜S／CO≤3.0组 ELISA法与 CMIA法之间,ELISA法与TRFIA法之间差异均有统计学意义（t值1.743～3.671,P均＜0.05）,0.6＜S／CO≤3.0组三种方法之间差异均有统计学意义（t值分别为2.053,2.766,4.459,P均＜0.05）,总体含量CMIA＞TRFIA＞ELISA。③三种方法测定HBsAg含量之间均呈正相关关系（t值分别为2.928,2.939,60.915,P均＜0.05）,其中 CMIA法与 TRFIA法之间相关性最好（r＝0.989）。结论低浓度 HBsAg检测应首选 CMIA法,TRFIA法次之。对于 ELISA法检测低浓度 HBsAg标本应向临床建议用CMIA法或TRFIA法复查,避免漏检;并且不建议临床对不同方法测定定量或半定量结果间进行横     

血液保养液对ELISA检测HBsAg结果的影响及改进措施

目的探讨CPD血液保养液对ELISA法检测HBsAg结果的影响。方法用CPD血液保养液和小牛血清分别将1ng／ml HBsAg阳性物稀释成不同浓度,每个浓度用ELISA方法进行一次平行对照实验（双孔检测取均值）,共检测20次,比较两者的检测结果。结果（1）两组不同的HBsAg阳性混合物的S／CO值均随着HBsAg阳性物的浓度降低而降低,但降低趋势不同;（2）在HBsAg阳性物浓度相同的情况下,两组不同的HBsAg阳性混合物的S／CO值的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论（1）ELISA检测系统对CPD血液保养液稀释的HBsAg阳性混合物的变化敏感;（2）CPD血液保养液对ELISA实验有明显影响。     

干式荧光发光法在HIV感染初筛中的应用价值

目的 探讨干式荧光发光法在HIV感染初筛中的应用价值。方法 收集疑似HIV感染患者血清样本351例,分别采用干式荧光发光法、ELISA进行检测,以免疫印迹法作为HIV的确证试验（金标准）,分析2种检测方法的敏感度、特异性、准确性、阴性预测值、阳性预测值、符合率和一致性。结果 ELISA的S/CO值显著高于干式荧光发光法（P<0.001）。趋势分析结果显示,干式荧光发光法的S/CO值随ELISA S/CO值的升高而升高,呈正相关（r=0.658,P<0.001）。351例样本中,干式荧光发光法阳性165例、阴性186例,ELISA阳性168例、阴性183例。2种方法的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值和阴性预测值差异均无统计学意义（P>0.05）。干式荧光发光法与ELISA的阳性符合率为95.83%,阴性符合率为97.27%,总符合率为96.58%,一致性好（Kappa=0.931）。结论 干式荧光发光法检测快速、操作简便,与ELISA有较高的一致性,适用于基层医疗机构对HIV感染的快速筛查。     

乙型肝炎病毒表面抗原弱反应性样本的确认与分析

目的对酶联免疫吸附试验（ELISA）定性的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）弱反应性样本进行确认及分析。方法收集经ELISA检测HBsAg的S／CO值为0．7～3．0的样本共613例,以中和试验确认,同时进行微粒子酶免疫方法（MEIA）检测,不确定病例继续随访。结果经确认共41例与ELISA判定结果不符,假阳性率4．9％,假阴性率10．7％;其中S／CO值0．9～1．2范围产生的假阴性率或假阳性率最高。中和试验和MEIA法检测结果基本一致,仅4例不符。结论ELISA检测HBsAg呈弱反应性,尤其是“灰区”结果应予以确认,中和试验和MEIA都是有效的方法,个别病例还需参考病史长期随访。     

不同孵育条件对HBsAg定性分析的影响

目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）中不同孵育条件对乙肝表面抗原（HBsAg）检测结果的影响。方法采用ELISA方法分析孵育温度（25℃、37℃）、时间（30、60、90、120min）、方式（25℃振荡和静止）对检测不同浓度HBsAg（0、0．2～0．5ng／mL、1．0ng／mL）标本吸光度／临界值（S／CO）的变化。结果在同一温度下,标本从0．2～1．0ng／mL的S／CO随孵育时间延长而增加。对于0．2ng／mL标本孵育30min、60min按照判断标准结果呈阴性,而孵育90、120min结果转为阳性。孵育时间不同对阴性标本S／CO基本无影响。在同一时间、同一浓度下,25℃孵育振荡方式S／CO值较静止方式明显增加。结论不同孵育条件对ELISA定性测定HBsAg结果有影响,尤其对弱阳性标本。     

ELISA试验加样误差对试验结果的影响分析

目的评价不同程度加样误差对ELISA试验结果的影响。方法分别在标准加样量基础上递减1、2、3、4μL和递增1、2、3μL进行加样,比较加样差异对HBsAg、HCV和TPELISA检测结果的影响。结果随加样量的增加,S／CO值呈上升趋势,HBsAg和TP（除＋3组）与对照组的平均S／CO值比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;各组S／CO值虽存在差异,但差异无统计学意义（P〉0．05）。HCV的-2、-1、＋1组S／CO值虽存在差异,但差异无统计学意义（P〉0．05）;而-4、-3组和＋2、＋3组与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0．05）。各试验组平均阳性率差（与对照组相减的绝对值）随标准加样最的减少呈增大趋势,HBsAg、HCV、TP加样量不足和加样过量的试验组之间的平均阳性率差相比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论加样误差对ELISA试验S／CO值和阳性率造成不同程度的影响,其影响程度随标准加样量的减少呈增大趋势。     

采供血系统ELISA筛检丙型肝炎病毒抗体阳性判断值的设定及意义

目的确定适合本实验室丙型肝炎病毒（HCV）抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）的阳性判断值（Cut-off）。方法通过统计5709例无偿献血员的HCV抗体ELISA测定吸光度（A）值确定本实验室的Cutoff值,同时使用免疫印迹（RIBA）方法进一步检测0.07≤A值≤0.140（S/CO值为0.5-1.0）的标本共45份确定该Cutoff值的实际意义。结果通过对检测数据的统计学处理确定Cutoff值为0.112,对0.07≤A值≤0.140（试剂盒提供的Cutoff值）的45份标本进行R IBA检测,结果发现其中1份（A值为0.122）为抗核心区（C22）单独阳性,另外1份（A值为0.135）为抗非结构蛋白（NS3）单独阳性。结论为尽可能减少输血后HCV感染的发生,实验室有必要确定符合实验室实际情况的Cutoff值。     

加样反应温育条件对ELISA法检测丙肝抗原的影响

目的：探讨丙肝抗原检测（ELISA法）加样后改变反应温度及时间对检测结果的影响。方法：对234例样本分别在37℃温育90min及在43℃温育45min的条件下检测丙型肝炎病毒核心抗原（HCV-cAg）的S/CO值。结果：两种温育条件对于样本阳性检出率、吸光度值、S/CO值没有显著影响。结论：适当地提高温育温度及缩短温育对HCV-cAg的检测结果影响不明显。这有助于缩短临床检验工作者的工作时间,尽快报告结果,提高工作效率。     

不同酶联免疫吸附试验检测系统评价方法探讨

目的：探讨不同酶联免疫吸附试验（ELISA ）检测系统的评价方法,以保证同一采供血机构实验室内多套检测系统检测结果的稳定性、准确性和一致性。方法稳定性评价,采用A、B两套ELISA检测系统同时检测同一个弱阳性标本,连续20次,比较两套系统变异系数（CV值）大小。准确性和一致性评价,A、B两套系统同时检测室间质评阳性样本,根据本试剂组反馈结果的吸光度／临界值比值（S／CO值）均值（x）、标准差（SD）,以 x作为参考结果分别计算每个样本A、B系统结果的S／CO值标准差指数 SDI1、SDI2;分析两套系统检测结果之间的差异。结果 A、B检测系统 CV值分别为6．5％和5．3％;A系统结果中有3个标本︱ SDI1︱大于2,其他结果均小于2,且无趋势性偏移;B系统结果︱ SDI2︱均小于2,且无趋势性偏移;两套系统检测结果之间的差异无统计学意义（P＞0．05）。结论两套检测系统稳定性较好,检测结果均处于可受控状态,且具有较好的一致性。     

用不同厂家ELISA试剂检测抗HCV结果的差异性分析

目的探讨不同厂家酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂检测丙型肝炎病毒抗体（抗HCV）结果的差异性。方法用4种不同厂家生产的第3代ELISA抗HCV试剂检测经上海科华公司生产的ELISA抗HCV试剂检测为阳性的出入境体检人员的血清标本62例,结果不一致的标本再用MP HCV BLOT3.0检测确认。结果A、B、C、D 4种试剂阳性反应数分别为59、50、43和53份,其中试剂B和C、B和D比较差异无统计学意义（P〉0.05）;试剂C和D比较差异有统计学意义（P〈0.05）。4种试剂反应都阳性标本37份,结果不一致的标本25份,经确认有9份标本阳性。结论不同厂家抗HCV试剂检测结果的阳性率有较大差异,提示选择灵敏度较高的试剂进行初筛,并且要有另一种灵敏度和特异性高的试剂作为复检方法,当2种试剂检测都为阳性,且标本吸光度值与阳性判定值（cut off）的比值（S/CO）≥3.8时,则可判定为抗HCV阳性;当检测结果为阳性但其S/CO值≤3.8或其中1种检测方法结果为阴性,建议用免疫重组印迹（RIBA）试验确认。     

用于国产一步法HBsAg ELISA试剂及确认试验试剂的改进方法

目的延长酶反应时间以提高国产一步法酶联免疫吸附试验（ELISA）乙型肝炎表面抗原（HBsAg）试剂的敏感性和精密度。方法将酶反应时间自30 min延长至120 min,观察检测结果的敏感性和特异性的变化,及其对相关确认试剂确认试验的影响,并与Murex确认试剂检测结果进行比对。结果酶反应时间延长至120 min,HBsAg ELISA试验检测的Cut-off值不变,在检测Murex HBsAg检测结果呈阴性反应的样本时,其结果均为阴性。延长酶反应时间至120 min可以提高检测结果的吸光度（A）值,位于灰区的弱阳性样本的A值可提高1倍左右。常规ELISA结果S/CO值在0.5-1.0区段的22例阴性灰区样本中,在酶反应时间延长至120 min的国产确认试剂检测中有4例样本确认为阳性,该4例样本在Murex确认试验中亦为阳性;S/CO值在1.0-2.0区段的79例阳性灰区样本中,120 min的国产确认试验与Murex确认试验均为50例阳性,2种确认试验结果一致（χ^2=0.078,P〉0.05）。结论延长国产一步法HBsAg ELISA试剂的酶反应时间可以提高检测的敏感性并适用于相关的确认试验。     

丙型肝炎病毒抗体酶联免疫吸附试验阳性判断值在献血员血液筛检中的意义

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)测定阳性判断值(Cut-off)“灰区”在献血员血液筛检中的应用价值。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了503份抗-HCV ELISA测定为阴性的献血员血清(浆)标本的HCV RNA。如HCV RNA检测为阳性，则使用重组免疫印迹(RIBA)方法进一步检测抗HCV。结果在503份抗-HCV ELISA阴性献血员血清(浆)标本中，发现有5份HCV RNA阳性，其中2份标本抗HCV ELISA测定S/CO比值小于0．5，RIBA结果均为阴性。另外3份抗HCV阴性(ELISA检测的S/CO值在0．8-0．9之间)但HCV RNA为阳性的献血员血标本，进一步进行RIBA检测，发现其中2份为抗核心区(C22)单独阳性，另外1份为抗NS3单独阳性。阳性标本HCV RNA的含量测定均约为10^4拷贝/ml。结论为尽可能减少输血后HCV感染的发生，有必要将抗-HCV ELISA测定的Cut-off值下移20％，因为S/CO比值接近Cut-off值的血液有很大可能为HCV感染者。     

单采血小板乙型肝炎病毒表面抗原快速检测的漏检分析

目的：通过比较胶体金法和酶联免疫法检测前端漏检单采血小板献血员标本结果,分析快速检测筛查漏检原因。方法采用金标法和酶联免疫法再次检测乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg ）前端筛查阴性、采集后酶联免疫吸附试验（ELISA）检测呈反应性的31例单采血小板献血员标本,对结果进行对比分析。结果31例前端漏检标本ELISA检测结果均为阳性,再次用胶体金法检测有16例阴性,15例阳性,总的一致性为48．4％。ELISA阳性标本中S/CO值小于10前端筛查漏检再次用胶体金法检测为阳性结果的有3例,阴性14例,一致性为9．7％;S/CO值在10～30时用胶体金法检测为阳性的标本总共有14例,阴性为2例,一致性为45．2％;S/CO值大于30的9例标本再次用胶体金法检测全部检出,一致性为100．0％。结论试剂检测方法不同所致的分析灵敏度差异和检测过程中操作不当是 HBsAg漏检的主要原因,胶体金试剂与ELISA试剂包被片段不同以及观察时间不够也是单采血小板 HBsAg漏检的常见原因。     

酶联免疫吸附测定法与甲苯胺红不加热血清试验在梅毒检测中的应用价值比较

目的 比较梅毒应用酶联免疫吸附测定法（ELISA）与甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）检测的应用价值。方法选取2019年6月至2022年6月于我中心就诊的68例疑似梅毒螺旋体感染的患者，均行ELISA、TRUST检测，以梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）检测结果为“金标准”，分析TPPA、ELISA法、TRUST法在梅毒中的检测结果，分析ELISA法、TRUST法在梅毒中的诊断价值，并计算与“金标准”的一致性。结果 68例疑似患者经TPPA检测阳性28例，阴性40例；ELISA法检出梅毒阳性29例，阴性39例；TRUST法检测梅毒阳性28例，阴性40例。ELISA法在梅毒中的诊断价值高于TRUST法，差异有统计学意义（P<0.05）。kappa检验显示：ELISA法诊断具有良好的一致性（kappa值=0.909,P=0.000）;TRUST法诊断一致性不佳（kappa值=0.393,P=0.001）。结论 ELISA与TRUST法检测均可鉴别诊断梅毒，但前者诊断准确度更高，诊断一致性较强，为临床进一步明确诊断提供有效参考，值得推广应用。     

乙肝表面抗原低吸光度值检测结果复查的意义

乙肝表面抗原（HbsAg）的检测临床上应用最广泛的是酶联免疫吸附（ELISA）双抗体夹心法，检查结果均用酶标仪判读，结果以样本吸光度值与阴性对照吸光度值（后者不足0．05按0．05计）之比（S／N）＜2．10时定义为阴性，S／N≥2．10为阳性。在实际操作中经常会出现一些低吸光度值的检测结果，按试剂说明书的删除值可判定为阳性结果。     

电化学发光免疫分析法和酶联免疫吸附法检测人类免疫缺陷病毒抗体效果评价

目的探讨罗氏电化学发光免疫分析法（ECLIA）在检测抗人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体中的临床应用及意义。方法采用ECLIA法及酶联免疫吸附试验（ELISA）二种方法分别对同一血清标本检测抗HIV抗体，并进行比较。结果通过对初筛10260例（其中HIV感染者25例）HIV检测，ECLIA法临界值与ELISA法吸光度彬临界值（OD／CO），2种方法的阳性符合率为100％。ECLIA法特异性为100％，ELISA法特异性为93．5％。结论ECLIA法具有较好的特异度与灵敏度，且具快速、自动化程度高及可减少院内感染可在医院推广应用和临床研究。