外周血T细胞淋巴瘤的TCR基因分析

外周血Ｔ细胞淋巴瘤的ＴＣＲ基因分析唐恩洁Ｅ．ＨｏｄｇｅｓＪｏｈｎＬ．Ｓｍｉｔｈ外周血Ｔ细胞淋巴瘤（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌＴ－ｃｅｌｌｙｍ－ｐｈｏｍａ，ＰＴＣＬ）是高度异质性的免疫系统恶性肿瘤。因其组织学特征多样性和免疫表型易变性，故难于用形态学和免疫学...     

T细胞识别同种异型移植抗原的研究进展

移植是末期组织、器官功能衰竭最彻底的治疗措施。同种异体移植(allogeneic transplantation)是临床最常见的移植类型。在本质上,人类的同种异体移植排斥反应是由受者的T细胞介导的、针对移植抗原的免疫应答。这一免疫应答是通过受者T细胞表面的T细胞受体(T cell receptor,TCR)识别移植物     

T淋巴细胞抗原受体的抗体

T淋巴细胞的抗原受体在结构上与B淋巴细胞的典型抗原受体相似。T淋巴细胞受体是一种异源双体(heterodimer),具有可变区(V)和恒定区(C),都有相应的基因片段所编码。在个体发育过程中,编码V区的基因片段重新排列,形成成熟的受体链。抗原特异性的巨大差别是由于V区片段的多种选择翔各片段之间高度多样组合的结果。     

利用T细胞受体变异β基因谱系分析T细胞急性淋巴细胞白血病病人T细胞克隆性

目的:分析T细胞-急性淋巴细胞白血病(T-ALL)病人的T细胞克隆性.方法:利用RT-PCR方法分析6例T-ALL和10例正常人外周血单个核细胞中24个T细胞受体变异β(TCR Vβ)基因的CDR3长度,PCR产物再进一步进行基因扫描和序列分析.结果:3例病人的某些TCR Vβ亚家族T细胞呈单克隆或寡克隆性增殖,主要为Vβ2、3、6、9、21和24.其它3例及正常人均表现为多克隆性增殖T细胞.结论:部分T-ALL来自于TCR Vβ亚家族克隆性增殖T细胞.该方法有助于临床上检测微小残留病变.     

利用T细胞受体变异β基因谱系分析T细胞急性淋巴细胞白血病病人T细胞克隆性

目的:分析T细胞-急性淋巴细胞白血病(T-ALL)病人的T细胞克隆性。方法:利用RT-PCR方法分析6例T-ALL和10例正常人外周血单个核细胞中24个T细胞受体变异β(TCR Vβ)基因的CDR3长度,PCR产物再进一步进行基因扫描和序列分析。结果:3例病人的某些TCR Vβ亚家族T细胞呈单克隆或寡克隆性增殖,主要为Vβ2、3、6、9、21和24。其它3例及正常人均表现为多克隆性增殖T细胞。结论:部分T-ALL来自于TCR Vβ亚家族克隆性增殖T细胞。该方法有助于临床上检测微小残留病变。     

表达T细胞抗原受体的肠上皮内淋巴细胞

ＴＣＲ＾＋肠上皮内淋巴细胞（ｉＩＥＬ）一般可分为两类：一类在肠内发育，包括ＣＤ８αα＾＋ＴＣＲαβ＾＋和ＣＤ８αα＾＋ＴＣＲγδ＾＋细胞，对抗原识别可受或不受ＭＨＣ限制；另一类在胸腺内发育，包括ＣＤ４＾＋ＴＣＲαβ＾＋和ＣＤ８αβ＾＋ＴＣＲαβ＾＋细胞，抗原识别受ＭＨＣ限制。文中还初步介绍了ＴＣＲ＾＋ｉＩＥＬ中不同类型细胞在活化、功能和粘附分子表达上的差异及与疾病的关系。     

一种高效扩增人T细胞受体β链可变区基因的方法建立

目的:建立一种高效扩增人T细胞受体(TCR)β链可变区(Vβ)基因的方法.方法:根据TCR Vβ26个亚家族基因序列特点设计扩增Vβ基因的上游内引物34条、上游外引物37条, 并将内、外上游引物各分为8个简并组.在恒定区(C区)设计下游内、外和测序引物各1条以及扩增Cβ基因的上游引物1条.提取细胞RNA, 用PolyA介导反转录后, 采用巢式PCR扩增正常人CD8 T细胞TCR Vβ26个亚家族基因, 并用Jurkat T淋巴瘤细胞作为对照.用T-easy载体克隆RT-PCR 产物, 对克隆基因进行测序.结果:从正常人的CD8 T细胞中扩增到所有TCR Vβ亚家族基因, 克隆后测序与相应的参考序列同源.从Jurkat细胞扩增出TCR Vβ8基因, 经测序验证与文献报道一致, 且最少可从10个细胞提取的RNA模板中扩增成功.结论:建立的巢式RT-PCR方法可以高效、广谱地扩增人TCR Vβ基因, 为进一步进行抗原特异性细胞毒T淋巴细胞的TCR克隆和功能研究打下了良好基础.     

T细胞受体多样性及其生物学意义

T细胞如何识别外来抗原,是免疫学的中心问题之一.主要组织相容性复合物(MHC)的限制作用和T细胞受体(TCR)的发现,以及TCR分子立体结构的阐明,终于确定了TCR-MHC-肽复合物在抗原识别及细胞免疫中的核心地位.由数以百万计的各种TCR分子组成的TCR库,赋于免疫系统识别外来抗原的巨大潜力.对TCR多样性及其和MHC-肽复合物相互作用的了解,不仅加深对细胞免疫反应机制的认识,并对探讨某些疾病的病因和发病机理提供了新的途径.     

直肠癌肿瘤浸润性淋巴细胞中T细胞受体基因谱型特征

目的 分析直肠癌肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor—infiltrating lymphocytes，TIL)克隆的TCRβ基因谱型及CDR3区氨基酸序列，了解直肠癌TIL抗肿瘤细胞克隆的基因特征。方法 采用RT—PCR方法扩增直肠癌肿瘤组织、术前外周血和术后外周血T淋巴细胞TCTβ基因的24个不同V基因片段，经过特殊的测序凝胶分离和银染色后，确定它们的TCRβ基因表达谱型。通过对PCR产物直接测序的方法，分析克隆性增殖的特征和CDR3区氨基酸序列。结果 直肠癌肿瘤组织TIL的TCRβ基因谱型中具有克隆性表达，表明直肠癌TIL是呈寡克隆性增生的淋巴细胞；来自2例不同患者的肿瘤组织TIL中单克隆性表达的TCRβV11基因具有安全相同的DNA和氨基酸序列；其余四个寡克隆的CDR3区存在共同保守的氨基酸序列G／xGGN／xY（D）EQ，这些序列可能直接接触直肠癌肿瘤组织相关抗原。结论 直肠癌肿瘤组织TIL细胞中存在特异性识别肿瘤相关抗原肽的T淋巴细胞克隆。     

T细胞抗原受体复合体信号转导及其与疾病关系的研究进展

 T 细胞抗原受体（TCR）是由 TCRαβ 或 TCRγδ 组成的异源二聚体，它与 CD3 分子组成跨膜蛋白复合体结构。抗原在诱导幼稚 T 细胞或记忆性T细胞进行增殖进而分化成效应细胞时，需要有两个信号刺激，第一信号来自TCR与抗原的特异性结合，第二信号来自抗原提呈细胞（antigen presenting cell，APC）表面的协同刺激因子与 T细胞表面相应受体的相互作用。TCR 通过胞外部分可变区（V 区）的互补决定区（CDR）特异性识别结合抗原；胞内部分在CD3、CD4/CD8 和 CD28 等分子的辅助下，将胞外刺激信号经磷脂酶 C（PLC）-γ活化途径和促分裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinaes，MAPK）活化途径传递至胞内，使转录因子活化，这一过程称为 T 细胞活化的信号转导。而这一过程可使 T细胞活化而发挥其生物学作用。TCR/CD3 复合体介导的信号转导是T细胞活化并发生抗原特异性免疫反应的重要途径，很多疾病的发生都与其信号转导异常有关，因此更深入地了解 T 细胞信号转导的分子机制显得尤为重要。本文对 TCR 介导的信号转导途径作了较为系统地阐述，并简要介绍了其异常与几种重要疾病的关系。......     

中线T细胞淋巴瘤的TCR—γ基因重排研究

目的对中线Ｔ细胞淋巴瘤的克隆性进行研究。方法用一组针对Ｔ细胞受体γ链基因Ｖ区片段的家族特异性引物和ＰＣＲ方法,对１１例（２２个标本）中线Ｔ细胞淋巴瘤病例进行了Ｔ细胞受体γ基因重排的检测。结果２２个标本中２１个有Ｔ细胞受体γ链基因的克隆性重排（９４４５％）。在９例原发灶的连续活检和１例原发灶及其转移灶的标本中均未发现增生的克隆家族的改变。结论中线Ｔ细胞淋巴瘤的病变组织中存在Ｔ细胞的单克隆性增生,为该肿瘤的Ｔ细胞起源提供了分子生物学的证据。在中线Ｔ细胞淋巴瘤的疾病过程中（包括转移灶）增生Ｔ细胞的家族未发生变化,支持肿瘤的单克隆起源学说     

重症肌无力T细胞受体基因重排的研究

<正>重症肌无力(MG)是抗体介导的自身免疫病,自身抗体的产生依赖于T细胞;T细胞受体(TCR)是T细胞表面识别特异抗原的结构.我们用限制性片段长度多态性(RFLP)方法检测MG患者TCR基因重排,以了解TCR分子的多样性程度,为寻找特异免疫疗法提供线索.1 材料与方法20例MG患者及15例正常对照,每例取抗凝外周血7ml,离心分离淋巴细胞,按常规用蛋白酶K方法分离总DNA.取10μg DNA分别以EcoRI、HindⅢ及Bg1Ⅱ酶切,经电泳分离并变性后转移到尼龙膜上,与TCR-α、β及γ探针进行Southern杂交.放射自显影.     

T细胞性淋巴瘤诊断中TCR基因重排检测的应用

目的：探讨T细胞受体( T cell receptors, TCR)基因重排检测对T细胞性淋巴瘤诊断的价值。方法收集T细胞性淋巴瘤30例和淋巴反应性增生组织30例,提取DNA,应用BIOMED-2引物系统中的56条引物进行PCR扩增,核酸分子异源双链凝胶电泳分析结果。结果30例T细胞性淋巴瘤标本中TCRβ、TCRγ、TCRδ的检出率分别为83．3%(25/30)、93．3%(28/30)、13．3%(4/30),三者联合检测的检出率为96．7%(29/30),30例淋巴反应性增生组织中均未检测出TCR基因重排。结论利用BIOMED-2引物系统检测TCR 基因重排可作为T细胞性淋巴瘤的辅助诊断工具。     

正常人T细胞和胸腺细胞中多种新的TCRδRec基因重排

利用巢式或半巢式PCR扩增10例正常人外周血单个核细胞(PBMC)、4例分选CD3~+细胞和7例正常胸腺细胞DNA中TCR δRec区与Jδ1、Dδ3和Ja重排的基因片段,分析正常人外周血T细胞和胸腺细胞中TCR δRec基因重排情况。克隆性PCR产物进一步进行核苷酸序列分析确定其重排位置。结果发现了4种新的TCR δRec重排,包括TCR δRec_(149321)-Jδ1、TCRδRec_(149820)-Jδ1、TCR δRec_(151657)(Nx)-Ja和TCR δRec_(153199)-Jδ1等,其中以TCR δNx的重排最多见,通过利用不同模板DNA的PCR分析发现δRec重排在外周血和胸腺细胞中有所不同。结果显示TCR δNx-Jδ1重排在成熟和不成熟T细胞发生频率均较高,而TCR δNx-Dδ3重排在不成熟T细胞中发生率较高。但所有重排均不表达于mRNA中。本研究结果为TCR δ基因重排的研究补充了一些新的数据。     

T细胞受体基因转导的研究和应用

T细胞受体（TCR）作为T细胞识别抗原的分子,在免疫应答和免疫调节中发挥重要的作用。利用转基因技术,将识别特定抗原的TCR基因转导到正常T细胞中,使其强制性表达了识别特异抗原TCR,从而达到发挥特异性免疫效应的目的,为产生有效的特异性免疫治疗开辟了一条新途径。