骨折愈合修复过程中血管内皮生长因子的表达及其动态改变

目的:通过研究骨折愈合过程中骨痂组织内血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的基因表达水平的动态变化,探讨VEGF对骨折愈合的影响。方法:实验于2004-01/10在南通大学实验动物中心完成。采用RT-PCR方法检测大鼠骨折不同阶段(3,6,12,24,48d)骨痂组织中VEGF基因的表达及动态变化。结果:VEGFmRNA在骨折后3d开始表达,24d达到高峰,其与β-actin表达量比值在骨折后3,6,12,24,48d分别为0.65±0.22,0.78±0.23,3.81±1.04,5.20±2.15,0.98±0.46,其中12d组、24d组与3d组比较差异有显著性意义(P<0.01),48d组与3d组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结论:VEGF参与调节骨折愈合的修复并可能在骨愈合中起重要作用。     

活血化瘀汤对骨折早期血管内皮细胞因子活性的影响

目的：探讨活血化瘀汤对骨折早期局部血管内皮生长因子(vascular endotllelial growth factor，VEGF)表达的影响。方法：72只雄性SD大鼠建立闭合骨折髓内固定动物模型，分活血化瘀汤组、生理盐水组。分别在24，48，72h，5，7，14d取骨折区组织，通过RT-PCR方法进行半定量分析VEGF的表达。结果：VEGF在前24h表达开始增强；实验组24，48，72h VEGF表达较生理盐水组弱(P&;gt;0．05)，5，7，14d活血化瘀汤组表达较生理盐水组强(P&;lt;0．05)；5，7d VEGF表达到峰值(P&;lt;0．01)。结论：骨折早期活血化瘀汤促进VEGF表达增强。     

股骨颈骨折患者与正常体检者骨矿物质含量的对照观察

目的：探讨股骨颈骨折与骨质疏松之间的关系。方法：1990／2000从34例髋关节骨折患者中选择20例作为研究对象。选择年龄，性别相匹配的20例正常人群作为对照组，分别测量骨矿含量、尿羟脯氨酸含量。结果：对照组男性、女性骨皮质(BCl、BC2)、骨矿含量、骨密度的差异有显著性(t=5．33，6．47，3．44，1．65，P&;lt;0．01)，股骨颈骨折男性人群与对照组男性人群骨矿含量比较差异有显著性(t=3．52，P&;lt;0．01)，股骨颈骨折女性与对照组女性比较骨矿含量，骨密度差异有显著性(t=4．21．3．68，P&;lt;0．01)。骨折妇女与对照组尿羟脯氨酸含量差异有显著性(t=5．0，P&;lt;0．01)，骨折的男女人群之间比较差异有显著性(t=11．1．P&;lt;0．01)。结论：股骨颈骨折患者骨矿物含量较正常体检者低。     

限制吸烟对胫骨骨折愈合与功能恢复的影响

目的：探讨限制吸烟对胫骨骨折愈合及功能恢复的影响。方法：选择96例经模型外部固定或交锁骨髓内钉固定治疗的胫骨骨折患者，在相同康复治疗下观察54例吸烟患者和42例限制吸烟患者的骨折愈合和功能恢复效果。结果：吸烟组平均愈合时间(267&;#177;10)d明显长于限制吸烟组(136&;#177;9)d，(t=2．30，P&;lt;0．05)，两组功能恢复效果(吸烟组：优22例，差9例；限制吸烟组：优22例，差1例)比较，差异有显著性意义(χ^2=8．81，P&;lt;0．05；χ^2=13．56，P&;lt;0．01)。结论：限制吸烟可缩短骨折愈合时间，对骨折后的功能恢复有积极意义。     

深Ⅱ度烧伤早期电动磨痂对创面愈合的影响

目的：观察深Ⅱ度烧伤早期电动磨痂后大白兔血清肿瘤坏死因子α，白细胞介素6和白细胞介素8浓度的变化情况，以探讨早期电动磨痂术对机体创面修复的影响。方法：实验于2004-03／06在广西医科大学动物实验中心完成。将60只30％深Ⅱ度烫伤大白兔，随机分为磨痂组和非手术组，于伤后不同时间检测两组血清肿瘤坏死因子α，白细胞介素6和白细胞介素8浓度；并记录两组创面的愈合时间。另取6只正常大白兔作对照。结果：伤后24h～3d两组肿瘤坏死因子α，白细胞介素6和白细胞介素-8浓度明显升高并达到峰值，但无明显差别；伤后4～11d，磨痂组血浆肿瘤坏死因子α，白细胞介素6和白细胞介素8浓度明显低于非手术组(t=2．2732，2．0372，1．6991，2．1811，2．0299，P&;lt;0．05;t=3．1202，2．5736，3．8060，3．8099，P&;lt;0．01)；磨痂组创面愈合时间较非手术组明显提前(t=4．3369，P&;lt;0．01)。结论：早期电动磨痂治疗大面积深Ⅱ度烧伤创面对机体是安全的，有利于促进创面愈合。     

抗感染组织工程化骨的生物特性

目的 探索抗感染组织工程化骨一期修复感染性骨折、骨缺损的新途径。方法 昆明小鼠84只，雄性，体重24—27g。其中30只于右侧股部肌袋植入利福平组织工程化骨做药物释放特性观察。54只以随机数字法分为A，B，C3组，每组18只。将植骨材料植入小鼠右侧股部肌袋中。A组植入利福平组织工程化骨，B组植入单纯组织工程化骨，C组植入牛松质骨，做成骨活性观察。结果 ①此种材料21d内骨粒周围软组织的利福平浓度(1.8mg／L)高于金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(0．008—0．06mg／L)，而小鼠血药浓度很低。②此种材料的成骨活性与单纯组织工程化骨无明显差别(P&;gt;0．05)，均较单纯牛松质骨载体的成骨活性好(P&;lt;0．01)。碱性磷酸酶(μmol／s&;#183;kg)测定显示：7d A组43&;#177;12，B组48&;#177;10，C组22&;#177;5，F=7．56，P&;lt;0．01；14d A组65．3&;#177;3．2，B组63．0&;#177;2．8，C组18．2&;#177;2．7，F=34．86，P&;lt;0．01；28d A组122&;#177;20，B组133&;#177;12，C组27&;#177;7，F=53．86，P&;lt;0．01。结论 一定剂量的利福平组织工程化骨有较好的成骨活性和极好的抗感染能力。且能保持很低的血药浓度。     

跌打颗粒对骨折愈合修复的实验研究

目的：研究跌打颗粒对骨折愈合及软组织损伤后的修复及祛瘀作用。方法：小鼠180只：①60只小鼠右腿向内侧对折90。造成骨折模型，随机分成4组，跌打颗粒两个剂量组，伤科接骨片组和蒸馏水组，分别经口灌胃给药。②40只小鼠麻醉状态下观察耳郭固定区域内毛细血管交叉网点开放数增加值。③40只小鼠造模成右后腿软组织损伤。④40只小鼠右耳两面涂二甲苯造成炎症肿胀。大鼠80只：①40只麻醉后造成骨折模型。②40只按照“小鼠骨折试验”项的方法分组进行大鼠抗折力试验。结果：①跌打颗粒对骨愈合的作用：跌打颗粒两个剂量组、伤科接骨片组断端软骨细胞骨化小鼠均明显高于蒸馏水组(T=15．0，P&;lt;0．01)，大鼠均明显高于蒸馏水组(T=55，T=59，P&;lt;0．01)。跌打颗粒高剂量组大鼠骨折愈合X射线片观察骨痂生成高于蒸馏水组(T=73．5，P&;lt;0．05)。②跌打颗粒抗折力的作用：跌打颗粒两个剂量组、伤科接骨片组大鼠的抗折力明显高于蒸馏水组(t=10．44，t=5．53，t=7．03，P&;lt;0．01)。③跌打颗粒对软组织损伤及散瘀作用：跌打颗粒两个剂量组、伤科接骨片组小鼠腿部软组织撞击伤积分均明显低于蒸馏水组(T=155。T=150，T：155，P&;lt;0．01)，跌打颗粒高剂量组、复方丹参片组小鼠耳郭毛细血管交叉网点开放数增加值均明显高于蒸馏水组(t=5．53，t=4．27，P&;lt;0．01)。结论：跌打颗粒具有促进骨折愈合的修复及对软组织损伤的祛瘀作用。     

活血化瘀汤对骨折愈合过程中诱导型一氧化氮合酶基因表达的影响

目的：观察活血化瘀汤对骨折愈合中诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的影响，从而调控成骨作用。方法：实验于2002-12／2004-08在华中科技大学基础学院分子生物学实验室完成。将24只SD大鼠胫骨中段闭合骨折骨髓内克氏针固定制成骨折模型，随机分为活血化瘀汤组(n=12)及生理盐水组(n=12)；于骨折后4，7，14，21d收集骨痂样本，反转录聚合酶链反应测定诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达水平。结果：24只大鼠均进入结果分析。骨折后7，14，21d所有骨痂样本诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达增强，骨折后14d达到峰值，活血化瘀汤组与生理盐水组比较，骨折后7，14d骨痂诱导型一氧化氮合酶基因表达显性增强(P=0．0037)。结论：活血化瘀汤可能通过增加早期大鼠骨痂诱导型一氧化氮合酶源性一氧化氮，影响骨细胞增殖功能，从而促进骨折愈合。     

亚低温对缺血再灌注大鼠海马CA1区Bcl-2和Bax表达动态变化的影响

目的：研究脑缺血再灌注后全身亚低温的脑保护作用及其对Bcl-2和Bax表达的动态影响，探讨亚低温脑保护作用的机制。方法：实验于2002-01／12在江苏省麻醉医学研究所(省级重点实验室)完成。实验动物选择126只SD雄性大鼠随机分为假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组。采用Pulsinelli四血管阻断法制作大鼠全脑缺血再灌注模型，即刻全身亚低温4h，分别在再灌注后4，8，24，48，72，96h，7d，7个时间点取脑标本，进行Bcl-2和Bax免疫组织化学及苏木精-伊红染色。结果：与常温组相比，全身亚低温组海马CA1区死亡细胞数明显减少[常温比亚低温24h：(195&;#177;18)比(214&;#177;20)个／mm，P&;lt;0．05；48h：(185&;#177;17)比(215&;#177;21)个／min．P&;lt;0．01；72h：(130&;#177;20)比(200&;#177;17)个／mm，P&;lt;0．01)]；Bcl-2蛋白免疫反应强度峰值增高，持续时间延长[灰度值：常温比低温：24h(40&;#177;8比57&;#177;8，P&;lt;0．01)；48h(42&;#177;6比55&;#177;8，P&;lt;0．01)；72h(38&;#177;4比41&;#177;6，P&;lt;0．01)]。Bax蛋白免疫反应强度峰值减低，持续时间缩短[灰度值：常温比低温24h(32&;#177;4比24&;#177;5．P&;lt;0．05)；48h(30&;#177;7比24&;#177;6，P&;lt;0．05)；72h(26&;#177;4比22&;#177;5，P&;lt;0．05)]。结论：全身亚低温对缺血性锥体细胞损害有较好的保护作用。可增强具有抗凋亡的Bcl-2蛋白的表达，延长其表达持续时间，而减弱具有促凋亡的Bax表达，同时缩短其表达持续时间，此可能是亚低温对缺血性脑组织损害产生保护作用的分子机制之一。     

强骨抗萎方对骨细胞代谢及血液流变学的影响

目的：研究中药复方强骨抗萎方对尾吊大鼠血液流变学的影响。方法：用大鼠尾吊-30&;#176;21d模拟失重，观察强骨抗萎方对大鼠血沉、血细胞比容、纤维蛋白原、血液黏度及红细胞变形性、聚集性等指标的作用。结果：悬吊大鼠纤维蛋白原明显升高(P&;lt;0．01)，全血还原黏度及全血黏度明显增加(P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)，红细胞刚性指数升高(P&;lt;0．01)，最大变形指数降低(P&;lt;0．01)，最大聚集指数增加(P&;lt;0．01)。该方不同剂量显示了不同的作用。低剂量组(10g／Kg)可降低各个切变率下的全血还原黏度和全血黏度(P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)，以及异常的红细胞刚性指数和最大聚集指数(P&;lt;0．01)；中剂量组(20g／kg)可使纤维蛋白原含量减少(P&;lt;0．01)；高剂量组(30g／Kg)可降低高切变率下的全血还原黏度和全血黏度(P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)，降低红细胞刚性指数(P&;lt;0．01)，并可升高红细胞最大变形指数(P&;lt;0．01)。结论：该方具有改善尾吊大鼠血液流变学的作用，但无明显的量效关系。     

褪黑素对戊四氮致癫痫大鼠海马谷氨酸受体和γ-氨基丁酸受体的影响

目的：探讨褪黑素抗癫痫的机制。方法：应用SP法研究戊四氮致癫痫大鼠和褪黑素抗癫痫大鼠海马谷氨酸受体ζ1(N-methyl-D-aspartate recepterζ1，NMDAζ1)和γ-氨基丁酸受体Aα1(r-aminobutyric acid-A recepter α1，GABAAR α1)的变化。结果：海马NMDAζl表达在戊四氮致癫痫组明显高于正常对照组(q吸光度=6．34，P&;lt;0.01；q阳性率=9．394，P&;lt;0．01)，褪黑素抗癫痫组明显低于戊四氮致癫痫组(q吸光度=6．01，P&;lt;0．01；q阳性率=9．000，P&;lt;0．01)．褪黑素抗癫痫组与正常对照组之间差异无显著性意义(q吸光度=0．032，P&;gt;0．05；q阳性率=0．4015，P&;gt;0．05)；海马GABAARα1表达在戊四氮致癫痫组明显低于正常对照组(q吸光度=4．65，P&;lt;0．01；q阳性率=5．3，P&;lt;0．01)，褪黑素抗癫痫组明显高于戊四氮致癫痫组(q吸光度=4．58，P&;lt;0．01；q吸光度=5.21，P&;lt;0．01)，褪黑素抗癫痫组与正常对照组之间差异无显著性意义(q吸光度=0．07，P&;gt;0．05；q吸光度=0．097，P&;gt;0．05)。结论：褪黑素可能通过抑制海马兴奋性神经递质受体NMDAζ1和激活海马抑制性神经递质受体GABAARα1的活性与表达，降低大脑皮质的兴奋性，抑制癫痫的形成及发展来发挥抗癫痫作用。     

主要组织相容性复合体在卵巢上皮性肿瘤中表达及对预后的影响

目的：探讨主要组织相容性复合体(MHCIb，HLA-DR)、血管内皮生长因子(VEGF)、共刺激分子(hB7—1)在人卵巢上皮性肿瘤组织中的表达与卵巢上皮性肿瘤发生、发展、预后及肿瘤免疫逃逸的关系，为卵巢癌的生物、基因治疗以及预后的评价提供理论依据。方法：选择1999—01／2003—12本院手术切除的人卵巢上皮癌存档标本52块。选择交界性卵巢上皮肿瘤10块，良性卵巢肿瘤10块，正常卵巢组织10块作为对照采用SP免疫组化技术检测MHC Ib，HLA—DR，hB7-1，VEGF在卵巢上皮性肿瘤中的表达。结果：MHC Ib，HLA—DR在卵巢上皮癌中的表达分别为14％，59%，与正常卵巢组织及良性肿瘤比较差异均具有显著性意义(P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)，其中HLA—DR表达与组织学类型、临床分期有关，低分化腺癌和宫内膜样癌以及Ⅰ—Ⅱ期和Ⅲ—Ⅳ期的表达强度相比差异均有明显意义(P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)；VEGF抗原在52例卵巢上皮癌的表达阳性率为75％，与正常卵巢组织及良性肿瘤比较差异有显著性意义(P&;lt;0．01），且与临床分期有关，Ⅰ—Ⅱ期和Ⅲ—Ⅳ期的表达强度相比差异有明显意义(P&;lt;0．01)；hB7—1抗原在52例卵巢上皮癌的表达阳性率为20%，较正常卵巢组织及良性肿瘤差异均具有显著性意义(P&;lt;0．01或P&;lt;0．05)。结论：卵巢上皮癌组织中MHC Ib，HLA—DR，hB7—1，VEGF表达的变化在机体自身抗卵巢肿瘤免疫中起重要作用，与病理分型及分期有关，其联合检测对卵巢上皮性肿瘤发生、发展、预后的判定有一定指导作用。     

大鼠脑缺血后树突状细胞参与脑损伤过程的作用及其免疫活性

目的：证明大鼠脑缺血后树突状细胞(dendritic cell，DC)是否参与脑损伤过程和所具有的免疫活性。方法：用线栓方法封闭大鼠右侧大脑中动脉制作动物模型。用免疫组化染色方法检测脑缺血1h到第6天时，缺血脑组织中DC(OX62^+)的存在，以及胶质细胞／巨噬细胞(OX42^+)转化成DC(OX62^+)的情况。同时检测活化后的DC样细胞表达MHC—Ⅱ类分子的水平。结合免疫组化和寡核苷酸探针杂交方法，检测DC样细胞的功能。结果：缺血脑半球和假手术的脑半球相比较，在1h DC的数量明显增加(t=7．143，P&;lt;0．001)。在脑缺血组中，缺血脑半球与非缺血脑半球相比较，DC的数量也增多(t=10．295，P&;lt;0．001)。脑缺血第6天，缺血组与假手术组进行比较，DC表达MHC—Ⅱ类分子(OX62^+OX6^+)显著升高(t=2．975，P&;lt;0．05)。缺血脑半球与非缺血脑半球相比较，在12，24和48h，DC表达白介素-6(interleukin-6，IL-6)mRNA，P值均&;lt;0．05，而DC表达白介素-10(interleukin-10，IL-10)mRNA在12h时，t=11．258，P&;lt;0．01，24h时，t=12．124，P&;lt;0．001。脑缺血1h到第6天，缺血脑半球与非缺血脑半球相比较，DC表达肿瘤坏死因子—α(tumor necrotic factor—α，TNF—α)mRNA有两个—α，TNF—α)mRNA有两个2．696．P&;lt;0．05)和12h(t=4．793，P&;lt;0．01)，第二个高峰期是在48h(t=3．072，P&;lt;0．05)和第6天(t=2．715，P&;lt;0．05)。脑缺血后，DC表达干扰素-γ(interferon—γ，IFN—γ)mRNA是随着脑缺血时间延长，IFN—γ表达量增加，24h时，t=2．677，P&;lt;0．05，48h时，t=2．896，P&;lt;0．05，第6天，t=6．145，P&;lt;0．001。结论：脑缺血后，脑缺血组织中DC数量的增加，提示DC参与了脑缺血过程。DC不仅在脑损伤过程中处于活化状态，而且通过DC表达的细胞因子产生免疫效应。     

双膦酸盐和性激素替代治疗女性甲状腺功能异常并发骨质疏松症的疗效对比

目的：探讨女性甲状腺功能异常伴骨质疏松症患者综合治疗的疗效及性激素影响。方法：对甲状腺功能亢进患者32例(甲亢组)、甲状腺功能减低患者15例(甲减组)、原发性骨质疏松症患者32例(对照组)，每组按治疗方法不同分为普通组和性激素替代(hormone replacement trestment，HRT)组。治疗前和后进行放射免疫法测游离碘塞罗宁(三碘甲状腺氨酸)、游离甲状腺素；免疫放射法测促甲状腺激素、骨钙素、甲状旁腺素含量；骨密度测定。结果：治疗前甲减组雌激素为(22．12&;#177;13．22)pmol／L，较对照组下降(t=2．367，P&;lt;0．05)。甲亢组雌激素为(62．93&;#177;2．07)pmol／L，较对照组明显增高(t=89．444，P&;lt;0．001)，但活性雌激素降低。治疗后甲亢组疗效最佳，骨量较对照组明显提高，普通组骨量变化为4．24&;#177;1．34，两组差异有显著性意义(t=5．302，P&;lt;0．001)，HRT组骨量变化为7．29&;#177;1．90(t=6．612，P&;lt;0．001)，HRT组疗效优于普通组(x^2=7．692，P&;lt;0．01)。甲减组骨量较对照组略提高，普通组骨量变化为3．46&;#177;1．06，两组差异有显著性意义(t=2．122，P&;lt;0．01)；HRT组为4．36&;#177;1．21，与对照组比较差异无显著性意义(t=0．832，P&;lt;0．05)，与普通组比较差异无显著性意义(r=0．125，P&;gt;0．05)。结论：雌激素替代是更年期甲亢患者提高骨量的最优化方法。     

血管内皮细胞生长因子与微血管密度对乳腺癌患者预后的评价：1～10年随访观察

目的：观察乳腺良恶疾病中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD)的分布，并探讨VEGF和MVD与乳腺癌肿瘤大小(T)、组织学分级、雌激素受体水平(ER)、腋淋巴转移及复发转移的关系，同时评价VEGF和MVD的预后价值。方法：用Ⅷ因子抗体与抗VEGF多克隆抗体分别作病理切片的免疫组织化学染色，在显微镜下判断VEGF染色程度和进行微血管计数。随访预后情况。结果：乳腺癌的VEGF表达阳性率为51．35％(38／74)，MVD均值为(30．8&;#177;19．4)个／200倍视野，而良性乳腺疾病的VEGF表达阳性率16．13％(5／31)(x^2=11．21，P&;lt;0．005)，MVD均值为(16．09&;#177;7．9)个／200倍视野，(t=4．47，P&;lt;0．01)；乳癌中，MVD与肿瘤大小、组织学分级、腋淋巴转移及复发转移有关(t=2．0，P&;lt;0．05；F=3．48．P&;lt;0．05；x^2=4．24，P&;lt;0．05；t=2．84，P&;lt;0．05)，VEGF与腋淋巴转移及复发转移有关(x^2=5．62，P&;lt;0．05；x^2=5．13，P&;lt;0．05)。VEGF和MVD与患者的无瘤生存率明显相关(x^2=5.12,P&;lt;0．05；x^2=8.752，P&;lt;0．05)。VEGF和MVD之间无明显相关性。结论：乳腺癌的VEGF表达阳性率与MVD大于良性乳腺疾病者。VEGF与MVD与患者的预后相关，均可作为判断乳癌患者预后的指标之一。VEGF不是影响肿瘤新生血管形成的惟一因素。     

神经元谷氨酸转运体反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤大鼠的神经保护作用

目的：测定神经元谷氨酸转运体(excitafory amino acid cartier 1，EAAC1)反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤大鼠的神经功能缺损评分、梗死体积和海马数密度值的影响，探讨脑缺血神经保护新方法。方法：将大鼠分为假手术组、模型组、反义寡核苷酸组(简称反义组)和正义寡核苷酸组(简称正义组)，用插线法建立大鼠局灶性脑缺血模型(MCAO)。运用Western blot法、神经功能缺损评分、TYC染色、尼氏染色观察缺血区EAAC1表达和EAAC1反义寡核苷酸对缺血大鼠神经功能缺损评分、梗死体积和海马数密度值的影响。结果：模型组缺血区EAAC1表达(0．61&;#177;0．03)明显高于假手术组(0．20&;#177;0．01)，差异有显著性意义(F=49．49，P&;lt;0．01)，而反义组表达(0．31&;#177;0．01)低于模型组，差异有显著性意义(F=49．33，P&;lt;0．05)。反义组大鼠梗死体积(101．33&;#177;15．08)mm^3显著小于模型组(140．5&;#177;20．27)mm^3，差异有显著性意义(F=6．66，P&;lt;0．01)，反义组大鼠神经功能缺损评分(3．33&;#177;0．41)分，显著高于模型组(1．42&;#177;0．34)分，差异有显著性意义(F=48．51，P&;lt;0．01)，海马各区数密度值均高于模型组(P&;lt;0．01和P&;lt;0．05)。结论：EAAC1反义寡核苷酸对急性脑缺血损伤有神经保护作用。     

三氧化二砷对哮喘小鼠肺组织IκB-α表达和核因子κB激活的作用

目的：研究三氧化二砷(As2O3)对哮喘小鼠肺组织核因子κB(NF-κB)激活和抑制蛋白IKB-α表达的影响，探讨As2O3抗炎作用的可能机制以及哮喘防治的新思路。方法：BALB／c小鼠36只随机分为对照组、哮喘组(卵蛋白末次激发后1，4。12和24h)和As2O3治疗组(4mg／kg)，每组6只。Diff-Quick染色观察支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中嗜酸细胞募集特点，电泳迁移率实验和免疫印迹实验分别检测肺组织NF-κB活性和IκB-α表达水平。结果：①哮喘组BALF中嗜酸细胞募集[(48．72&;#177;5．38)％]较对照组[(0.56&;#177;0．21)％1增加(q=33.46，P&;lt;0.01)，治疗组较哮喘组减少(q=34．65，P&;lt;0．01)。②哮喘组肺组织NF-κB活性均较对照组增加(q=41．84，72．75，61．61，16．32，P&;lt;0．01或0．05)，以4h活性最高，治疗组较哮喘组减少(q=89．48，P&;lt;0.01)。③哮喘组肺组织IκB-α表达较对照组减少(q=30.94，P&;lt;0.01)，治疗组较哮喘组增加(q=23．67，P&;lt;0．01)。④BALF中嗜酸细胞募集、肺组织NF-κB活性与IκB-α表达水平均呈负相关(r=-0．82，-0．94，P&;lt;0．01)。结论：肺组织NF-κB过度激活可能是哮喘慢性气道炎症持续存在的基础；诱导肺组织IκB-α表达和抑制NF-κB激活，可能是As2O3发挥广泛抗炎作用的重要机制。     

痹肿消汤对关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子表达水平及关节症状的影响

目的：观察痹肿消汤对实验性关节炎大鼠滑膜组织血管内皮生长因子(vscular区endothehal growth factor，VEGF)表达水平的影响，探讨痹肿消汤治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法：75只SD大鼠按随机数字表法分为4组(正常对照组，模型对照组，甲氨蝶呤治疗组，痹肿消汤治疗组)，皮下注射Ⅱ胶原诱导实验性关节炎模型，用免疫组化法检测各组不同时间点大鼠滑膜组织VEGF的表达，同时采用关节指数积分法评价其关节炎症状。结果：免疫大鼠88．57％出现关节炎症状；模型组的关节炎指数逐渐增加，而痹肿消汤组和甲氨蝶呤组关节炎指数则在35d后逐渐下降。正常组滑膜组织未见明显VEGF表达，模型组VEGF表达[(30．6&;#177;6．2)％]于25d起就明显高于痹肿消汤组[(16．2&;#177;4．41％](P&;lt;0．001)和甲氨蝶呤组[(24．4&;#177;3．6)％](P&;lt;0．001)；随着时间的延长，模型组VEGF表达逐渐升高，痹肿消汤组与甲氨蝶呤组的VEGF表达逐渐降低，于45d模型组更明显高于痹肿消汤组(P&;lt;0．001)和甲氨蝶呤组(P&;lt;0．001)，且痹肿消汤组又低于甲氨蝶呤组(P&;lt;0．001)。结论：VEGF参与了RA疾病滑膜炎的形成和发展过程；其VEGF表达的高低与关节炎症状的轻重有关。痹肿消汤可能通过阻断VEGF的表达来阻抑关节炎滑膜血管翳的形成或骨质侵袭。     

SHG-44胶质瘤细胞表达β-1，4-半乳糖基转移酶V后对鬼臼乙叉甙敏感性影响

目的：研究鬼臼乙叉甙(Etoposide，VP16)对表达β-1，4-半乳糖基转移酶V(beta-1，4-galactosyltransferase V，β-1，4-GaITV)的SHG-44胶质瘤细胞死亡和凋亡的影响，为进一步探讨β-1，4-GaIT V与化疗药物敏感性的关系奠定基础。方法：通过流式细胞仪(FCM)和Hoeehst 33258染色法，分析不同浓度的VP16处理转染了正义(GalT V-HA／SHG-44)、反义β-1，4-GalT V(GalT V-AS／SHG-44)和空载体(Mock)的SHG-44细胞后细胞的凋亡和死亡情况。结果：①低浓度的VP16(20μmoL／L)处理24h后，GalT V-HA／SHG-44组的死亡细胞加上凋亡细胞的比例明显低于Mock组(t=4．5506，P&;lt;0．01)和GalT V-AS／SHG-44组(t=5．0865,P&;lt;0．001)。GalT V-AS／SHG-44组的死亡细胞加上凋亡细胞比例明显高于Mock组(t=3．2873，P&;lt;0．01)。高浓度的VP16(120μmoL／L)处理48h和72h后，GalT V-HA／SHG-44组死细胞所占比例明显低于Mock组(t=3．3664，P&;lt;0．05；t=5．4953，P&;lt;0．01)和GalT V-AS／SHG-44组(t=3．1732，P&;lt;0．01：t=4．6035，P&;lt;0．001)。②MTT分析显示，VP16处理48，72h后，GalT V-HA／SHG-44组活细胞数明显高于Mock组(t=5．0783,P&;lt;0．05；t=3．8923,P&;lt;0．01)和GalT V-AS／SHG44组(t=4．5667，P&;lt;0．01；t=4．7849，P&;lt;0．001)。③VP16(20μmoL／L)处理24h后，用Hoechst 33258染色。镜下观察到死亡或者凋亡细胞中的细胞核仁及断裂的核片段呈新月形。或核固缩并深染。GalT V-AS／SH组平均死亡和凋亡阳性率为41％，大大高于经同样处理的转染空载体和转染正义β-1，4-GaIT V的SHG44细胞。结论：β-1，4-GalT V能够影响抗肿瘤药VP16的杀伤作用，过表达β-1，4-GalT V可以拮抗VP16的作用，为解释胶质瘤的化疗耐药性提供了新的依据。     

大鼠缺血下肢血管新生过程中人血管内皮细胞生长因子165和人血管形成素的协同效应

目的：观察肌肉转染腺病毒(adenovirus，Ad-)携带的人血管内皮细胞生长因子-165（vascular endothelial grow factor，Ad-VEGF165)和人血管形成素-1(angiopoietin-1，Ad-Ang-1)基因对大鼠缺血下肢的生血管效应。方法：用SD雄性大鼠84只，分为7个组，每组12只，分别为正常组、假手术组、结扎组、绿色荧光蛋白(given fluorescence protein，GFP)组(作为病毒对照组)、Angl组、VEGF165组、Angl+VEGF165组。制作大鼠下肢血管闭塞模型，肌肉内注射Ad-VEGFm或／和Ad-Ang-1，以Western法检测生长因子蛋白表达、免疫组化检测基因导入后在缺血肌肉引起的效应。结果：①肌肉经注射Ad-VEGF165和Ad-Angl后高表达人VEGF165蛋白和人Angl蛋白。②术后7d处理组与对照组新生毛细血管数目无明显差别。但术后14d和21dAngl和VEGF165组的毛细血管／骨骼肌纤维数目比明显高于对照组(F=24．53，P&;lt;0．01)，VEGF165+Angl两因子合用组明显高于单用组(F=12．22，P&;lt;0．01)。③VEGF165组及VEGF165+Angl合用组出现大量包围着一厚层平滑肌肌动蛋白a(smooth muscle actin，a-SMA)阳性平滑肌细胞的血管，其数量与肌肉数比值明显高于对照组(F=9．73，P&;lt;0．01)。④因子单用组和合用组肌肉内出现大量BrdU阳性细胞浸润，部分细胞表面呈现C-Kit阳性，新生血管内皮细胞中也有C-Kit阳性标记(F=9．73～35．10，P&;lt;0．01)。结论：①Ad-VEGF165和Ad-Angl能促进缺血肢体血管新生，两者合用的生血管效应更为显著。②VEGF165，能促进包被平滑肌细胞的形似微小动脉的血管数量增多。③肌肉血管新生增加除了血管生成作用外，可能还有血管发生的参与。