Klinefelter综合征X染色体着丝粒区α-卫星DNA变异

目的从DNA分子水平建立研究X染色体着丝粒区域的α-卫星DNA变异的方法,发现Klinefelt综合征患者的X染色体着丝粒区域的α-卫星DNA串联重复序列结构变化与染色体不分离的关系。方法采用（representative sampling of multiple repetitive units,rep）PCR方法,通过设计适当的引物,对α-卫星DNA多个单拷贝串联重复序列同时进行扩增,检测重复序列中结构变化的种类、频率及重组位点。结果首次发现由缺失产生的562bp和220bp变异片段和重组位点,异常组的570、562、220bp构成显著高于正常组（P〈0．05）。Logistic回归分析显示：570、562bp和220bp3个短片段同时出现和任两个短片段同时出现均是疾病相关的危险因素。结论Klinefelt综合征的X染色体着丝粒区α-卫星DNA过多的重组可能是造成X染色体不分离的重要原因之一。     

Klinefelter综合征及双亲X染色体着丝粒区α-卫星DNA变异研究

目的:本文从DNA分子水平对Klinifelter综合征患者及双亲X染色体着丝粒区域的α-卫星DNA变异进行研究,探讨Klinefelter综合征患者X染色体不分离形成的原因.方法:采用(representative sampling of multiple repetitive units,rep)PCR方法,通过设计适当的引物,对-卫星DNA多个拷贝串联重复序列同时进行扩增,检测患者、双亲和正常人重复序列中变异发生.结果:(1)扩增产物中分别出现1774bp、570bp(由缺失产生)片段和1410bp、583bp(由缺失产生)、220bp(由缺失产生)片段,(2)患者组570bp和583bp产生率高于正常组,x2统计有显著性意义(P＜0.05).(3)患者与患者双亲比较差异不显著.结论:Klinefelter综合征患者及双亲的X染色体着丝粒区α-卫星DNA表现出较正常人具更多的变异.提示通过孕前或产前对双亲外周血X染色体着丝粒区域的α-卫星DNA变异分析,对Klinefelter综合征发生风险进行估计,为产前绒毛或羊水染色体检查提供重要的依据.     

人X染色体α卫星DNA的定位及应用初探

应用人X染色体α卫星DNA探针对正常男女及45,XO/47,XXX个体外周血淋巴细胞的原位杂交研究表明,在R显带的中期分裂相中,绝大部分杂交颗粒位于X染色体着丝粒区,即p11→q11区,在间期核内,则呈现与X染色体数目明显相关的银颗粒簇,其中44％位于核边缘区。本实验显示α卫星DNA的染色体区域定位及在具有不同X染色体数目间期核内分布的高度特异性。     

小卫星变异重复序列的研究现状及其在法医学中的应用

自１９８５年Ｊｅｆｒｅｙｓ等〔１〕发现了ＤＮＡ指纹图谱以来，ＤＮＡ多态性分析技术得到了迅猛发展，其中可变数目串联重复序列（ｖａｒｉａｂｌｅｎｕｍｂｅｒｔａｎｄｅｍｒｅｐｅａｔ，ＶＮＴＲ）和短串联重复序列（ｓｈｏｒｔｔａｎｄｅｍｒｅｐｅａｔ，ＳＴＲ）位...     

跨越断裂位点PCR检测α-地中海贫血基因缺失

目的:运用跨越断裂位点PCR(GAP-PCR)法检测α-地中海贫血(α-Thal)基因缺失类型,评价临床应用的可行性。方法:对213例临床疑诊为α-Thal患者血液标本进行GAP-PCR法检测。结果:α-Thal基因缺失阳性率为42.34%(90/213),其中--SEA为32.39%,-α3.7为7%,-α4.2为1.88%,GAP-PCR法检测敏感度、特异度和准确度均为100%。结论:GAP-PCR检测α-Thal基因缺失类型结果准确,操作简便,为诊断和筛查α-Thal的有效方法。     

中国人群非综合征性唇腭裂与转化生长因子-α基因的相关性研究

目的:探讨转化生长因子-α(TGF-α)基因与中国汉族人群非综合征性唇腭裂(NSCLP)的关系.方法:应用聚合酶链式反应(PCR)结合限制性内切酶酶切(RFLP)方法,对57名非综合征性唇腭裂患者和27名健康对照进行TGF-α基因多态性检测.PXR后直接用限制性内切酶酶切,聚丙烯酰胺凝胶电泳检测基因多态性.结果:在57例NSCLP病例组中TGF-α基因C1等位基因频率为76.3%,C2等位基因频率为23.7%,而在27例健康对照者中C1等位基因频率为93.3%,C2等位基因频率为6.7%.TGF-α基因的C1、C2等位基因频率经χ2检验在NSCLP组和对照组之间无显著性差异(χ2=2.609,ν=1,P=0.106＞0.05).结论:中国人群非综合征性唇腭裂TGF-α基因中存在Taq I多态性位点,TGF-α/Taq I位点与中国汉族人群非综合征性唇腭裂无关.     

肺鳞癌患者癌组织和血液中微卫星DNA变异的检测

目的：检测肺鳞癌患者癌组织和外周血中微卫星DNA的变异。方法：选择30例原发性肺鳞癌患者的癌组织、外周血液标本及30例肺部良性疾病患者的外周血液标本,用PCR—银染法,对其中的20个微卫星位点进行检测。结果：癌组织微卫星DNA变异的检出率较高(26％),肺鳞癌患者外周血20个位点微卫星DNA变异的检出率(20．2％)与癌组织相比差异均无统计学意义,检测出的敏感位点有D3S1067、D3S1447、D3S1611、D3S1284、D3S1110、D3S1007、D5S346、D9S1748。30例肺部良性疾病患者外周血在全部20个微卫星DNA位点上没有检测到变异。结论：肺鳞癌患者存在微卫星DNA的变异,进行外周血中敏感位点微卫星DNA变异的检测对肺鳞癌的早期诊断有重大意义。     

二聚体蝎型探针快速检测α-地中海贫血基因-α~(3.7)缺失

目的建立快速检测α-地中海贫血基因-α3.7缺失的二聚体蝎型探针荧光聚合酶链反应(gap-PCR)方法。方法采用二聚体蝎型探针gap-PCR技术,建立一种快速检测α-地中海贫血基因-α3.7缺失的方法;检测40份已知基因型和100份临床样本,并与常规gap-PCR法进行平行对比分析。结果本研究建立的检测方法能准确检测α-地中海贫血基因-α3.7缺失;40份已知基因型和100份临床标本检测的灵敏度和准确性均达到100%。结论本研究建立的二聚体蝎型探针α-地中海贫血基因-α3.7缺失gap-PCR方法,操作简单快速,结果准确可靠。     

α-受体阻滞剂治疗脊髓牵缚综合征

目的：探讨α-受体阻滞剂治疗脊髓牵缚综合征临床效果。方法：回顾总结1992年以来收治的12例脊髓牵缚综合征患者的临床资料。结果：显效8例，好转2例，效果欠佳1例，无效1例，总有效率为83．33％。结论：应用α-受体阻滞剂治疗脊髓牵缚综合征，用药方便，效果确切。     

抗α-胞衬蛋白抗体与干燥综合征

干燥综合征(SS)是一种以侵犯泪腺、唾液腺等外分泌腺体为主的慢性自身免疫性疾病。目前SS的诊断尚缺乏特异度高的简便易行的检测方法,α-胞衬蛋白是从小鼠涎腺组织中提取的器官特异度自身抗原,与SS患者的发病机制密切相关。抗α-胞衬蛋白抗体是SS的一个标志性抗体,其对SS诊断的灵敏度和特异度国内外报道不一,总体来说,具有较低的灵敏度和较高的特异度,抗体阴性对于临床排除SS诊断意义不大,抗体阳性对于确定SS诊断可能具有更高的临床价值。近年来研究发现,抗α-胞衬蛋白抗体有可能为SS疾病早期的一项标志性抗体,而且与疾病活动相关。     

肢端肥大症合并Klinefelter综合征1例报告

目的 总结肢端肥大症合并Klinefelter综合征患者的诊治经验.方法 对1例肢端肥大症术后性腺功能减退的患者进行临床分析及鉴别诊断,复习相关文献,明确患者垂体生长激素瘤术后的治疗策略,对其性腺功能减退进行定位诊断,进而明确病因.结果 患者垂体瘤术后GH及IGF-Ⅰ水平不达标,给予生长抑素治疗,根据其为高促性腺激素型性腺功能减退,染色体核型分析为47,XXY,确诊其为Klinefelter综合征.结论 反馈调节是内分泌系统的基本特征,对腺体功能评价,必须遵循功能-定位-病因的诊断程序,才能准确定位,明确病因.     

克氏综合征的生育相关研究进展

克氏综合征是男性不育中最常见的遗传性疾病。由于睾丸发育不良,无法正常生产精子常导致无精子症,无法生育后代。许多夫妇选择收养或使用捐精者的精子生育。近些年来,随着辅助生殖技术的发展,对克氏综合征患者的治疗有了更多的策略,可采用内分泌治疗以及通过获取睾丸精子进行卵母细胞内单精子注射治疗。对克氏综合征生育相关研究进行综述,探讨克氏综合征患者取精年龄、手术方式、内分泌治疗以及遗传风险相关问题。     

三种性分化异常综合征患者的SRY基因检测

目的 探讨K1inefelter综合征、46，XY女性性反转综合征和Turner综合征患者是否存在SRY基因，进一步了解SRY基因在性分化中的作用。方法 用SRY特异性引物通过PCR方法检测三种性分化异常患者外周血淋巴细胞SRY基因。结果 7例Klinefelter综合征患者有1例未测出SRY基因，6例SRY基因阳性；3例46，XY女性综合征患者SRY基因均阳性；7例Turner综合征患者SRY基因皆阴性。结论 SRY基因是睾丸分化和发育的关键基因，但正常男女性分化还需要其他基因或因素的作用。     

非嵌合型克氏综合征患者显微取精成功3例报告

目的:探索非嵌合型克氏综合征(Klinefelter syndrome,KS)患者生育的方法,为此类患者拥有自己遗传学意义的后代寻找出路。方法:对在北京大学第三医院就诊的3位非嵌合型克氏综合征患者实施显微镜下睾丸切开取精术。结果:3例患者,年龄分别为31、36和23岁,均多次检查无精子,双侧睾丸大小分别3 mL、1 mL和4 mL;卵泡刺激素、促黄体生成素均明显升高,睾酮水平均下降;染色体核型均为47,XXY。2例患者在手术中找到形态基本正常的精子,仅行单侧睾丸切开取精术,术后培养后可见活动精子,冷冻保存。1例患者行双侧睾丸切开取精术,手术中未找到精子,术后再次寻找,找到少量精子,培养后未见活动精子,形态差,未冷冻保存。结论:非嵌合型克氏综合征患者虽睾丸小,生精功能减弱,但尚有一部分患者可以通过显微取精的方式获得精子。     

彩色多普勒超声在Klinefelter综合征中的应用价值

目的 探讨彩色多普勒超声在Klinefelter综合征中的应用价值。方法 选取超声发现并经染色体检查证实的Klinefelter综合征患者16例同时选取20例健康自愿者作对比，二维观察睾丸内部回声、测量睾丸大小，彩色多普勒观察其血流灌注，频谱多普勒测量其内动脉血流收缩期峰值流速（PSV）、阻力指数（RI）：结果 Klinefelter综合征患者睾丸长径及容积均明显小于对照组，PSV低于对照组而RI高于对照组，两组间差异有统计学意义。结论 Klinefelter综合征患者具有较特异的彩色多普勒超声声像图表现。     

克氏综合征患者性激素水平分析

目的分析血清雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平变化规律对快速筛查诊断克氏综合征(KS)患者的应用价值。方法染色体核型分析KS患者22例为实验组,正常核型男性不育患者20例为对照组。所有患者均为雄性激素治疗前进行精液分析及血清性激素水平检测。结果实验组FSH和LH两项指标同时增高占100%,对照组占5%。以FSH和LH两项同时升高为筛查KS患者的诊断指标,其敏感性可达100%,特异性可达97.5%。实验组81.8%的患者血清睾酮水平降低。结论 FSH和LH两项指标同时升高是KS患者血清性激素变化的主要特征,FSH和LH两项同时升高可作为筛查诊断KS患者的指标。     

Rett综合征患者线粒体DNA突变的初步分析

目的 探讨线粒体ＤＮＡ在Ｒｅｔｔ综合征发病中的作用。方法应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、聚合酶链反应（ＰＣＲ）－单链构象多态性（ＳＳＣＰ）分析及ＤＮＡ直接测序结合错配ＰＣＲ的方法，对１５例Ｒｅｔｔ综合征患儿及其中１４例的母亲的外周血白细胞线粒体ＤＮＡ的部分片段进行分析。结果１３例患儿及其中１１例的母亲的线粒体ＤＮＡ上，编码１６ＳｒＲＮＡ基因的２６５０－３０００区域ＤＮＡ突变，其中７例患儿及其中６例的母亲存在２８３５位点的点突变（Ｃ－Ｔ），３０例正常对照均未发现有此点突变。结论线粒体ＤＮＡ在Ｒｅｔｔ综合征的发病中起一定作用。     

人胃癌组织DNA聚合酶αmRNA的高表达

用斑点杂交法研究１２例胃癌切除标本中癌组织、癌旁胃粘膜和切除缘胃粘膜ＤＮＡ聚合酶αｍＲＮＡ的表达。结果显示胃癌组织ＤＮＡ聚合酶αｍＲＮＡ表达均高于同一切除标本的癌旁粘膜和切除缘粘膜，癌旁粘膜与切除缘间ＤＮＡ聚合酶αｍＲＮＡ的表达无显著差异，ＤＮＡ聚合酶αｍＲＮＡ在胃癌组织中的高表达可能是ＤＮＡ聚合酶α表达增加的原因之一。