离心对附睾液精子存活率的影响

正无精子症占不育男性的10%~15%[1],是男性不育中最为严重的一种,病因复杂。无精子症患者可通过经皮附睾穿刺(PESA)结合卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)达到生育目的。PESA操作简便、患者痛苦少,获得精子的概率为85%[2],并有较高的精子活动率[3],且受精率、卵裂率、妊娠率等也较高[4]。ICSI使用的精子必须是活精子,然而,大约15%的附睾穿刺液标本,其全部精子均是d级精子[2]。因为不活动的精子并不意味着是死精子[5],此时评估精子的存活率就非常必要。而相比精液精     

左旋肉碱体外培养提高睾丸精子活力的实验研究

自1978年第一例试管婴儿出生以来,不育症,尤其是排卵障碍与卵子输送障碍所致不育症的治疗获得突破.自1992年卵胞浆内单精子注射(ICSI)技术问世以来,即使精液中无精子的患者也有望利用睾丸、附睾中的精子进行ICSI获得生育.但是,睾丸中的精子不能运动,难以判断其是否为活精子,需要体外培养一段时间部分活精子才能获得一定运动能力.为了提高睾丸精子的活率,便于选择成活精子用于ICSI中,本文尝试对睾丸精子用含左旋肉碱培养液进行培养,并对其提高精子的活力和活率效果进行评估.     

重组人睾丸精子结合蛋白对人精子运动参数的影响

目的:探讨重组人睾丸精子结合蛋白(TSBP)对体外培养人精子运动参数的影响。方法:将22例生育男性的精液经Percoll密度梯度离心后,分别与0.01mg/ml及0.1mg/ml的重组His6-TSBP在体外共同孵育1h或3h,同时设立对照组,Western印迹检测重组His6-TSBP与精子膜的结合情况,计算机辅助精液分析(CASA)系统测定重组His6-TSBP对精子运动参数的影响。将12例弱精子症患者的精液按同样方法处理,检测重组His6-TSBP对弱精子症患者精子运动参数的影响。结果:0.1mg/ml重组His6-TSBP与生育男性精子作用1h可以提高体外培养精子的前向运动百分率(a+b级精子百分率),培养3h后前向运动百分率和活率均有所提高,差异具有显著性(P<0.05);0.01mg/ml重组His6-TSBP对检测各指标均无显著性影响。0.1mg/ml重组His6-TSBP与弱精子症患者精子作用3h可以提高精子前向运动百分率(P<0.05),但对活率无显著影响。结论:0.1mg/ml的重组His6-TSBP在体外可以提高生育男性精子的前向运动百分率和活率及弱精子症患者精子的前向运动百分率。     

睾丸精子冷冻的研究进展

全球约20％的育龄夫妇受不孕症影响,其中无精子症占男性不育病因的10％～15％,使用新鲜或冻融的睾丸精子行ICSI已成为无精子症患者实现生育梦想的主要方法.然而睾丸精子由于未在附睾中进一步成熟,其抗冷冻能力明显不如射精精子,使用常规冷冻方法冻融后精子活率差、回收率低.自首次使用冻融睾丸精子获得1例活产以来,睾丸精子冷冻...     

大豆黄酮对小鼠精子质量、睾丸重量及睾酮水平的影响

目的 :探讨大豆黄酮对小鼠精子质量、睾丸生长和睾酮水平的影响。　方法 :给雄性小鼠饲喂 3个不同剂量的大豆黄酮 ( 5、10 0、10 0 0mg/kg日粮 ) ,2 1d后宰杀 ,睾丸称重 ,伊红丫染色确定精子存活率 ,顶体染色采用姬姆萨染色法 ,睾酮浓度采用放射免疫法测定。　结果 :5mg/kg日粮大豆黄酮能显著提高睾酮分泌水平 (P <0 .0 1) ,睾丸明显增重 (P <0 .0 5 ) ,提高了精液质量 ;10 0 0mg/kg日粮大豆黄酮抑制睾酮的分泌 (P <0 .0 1) ,精液质量变化不明显 ;10 0mg/kg日粮的大豆黄酮对精子质量等指标均无显著影响。　结论 :大豆黄酮能影响小鼠精子质量、睾丸生长及睾酮水平 ,并与剂量有关     

人类巨细胞病毒感染对移植肾存活的影响

１９８９年４月－１９９０年１月对肾移植术后发热４０例行尿ＰＣＲ检查。其中ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阳性１０例，ＨＣＭＶ－ＤＮＡ阴性２２例。两组存活时间相差１０月余（Ｐ＜０．０２５）。两组的１年、３年、５年存活率差别也较大。     

肌酸磷酸对冷冻复合后精子的活率和存活率的影响

肌酸磷酸和肌酸磷酸激酶在精子的能量再生和转移中发挥重要作用。西方研究了２０例冷冻复苏后精液标本，在起始时间，０时间，６０分钟，１２０分钟和１８０分钟采用计算机辅助精液分析仪和荧光分子探针方法测定精子的活率与存活率。实验结果表明，加ＣＰ的实验组与ＨＴＦ对照组，在６０分钟采用２０分钟和１８０分钟进行比较，发现精子活率与存活率ＣＰ实验组明显高于ＨＴＦ对照组，两组间有极显著性差异，提示ＣＰ有延长精子活动的     

肾移植患者的巨细胞病毒感染

肾移植患者的巨细胞病毒感染张仕光黄锋先肾移植是治疗终末期肾功能衰竭的最好办法。临床上为了防止排异，不得不应用各种免疫抑制剂，这就难免发生过度免疫的可能，因而易发生感染。感染仍然是肾移植患者最重要的死亡原因之一。细菌感染比较容易治疗，而病毒感染未因新的...     

电磁辐射对睾丸及附睾精子生物学效应的研究现状

睾丸对电磁辐射具有高度敏感性,精子是雄性遗传信息的传递者,电磁辐射可致睾丸结构和功能损伤以及附睾精子活力下降、畸形率增加、超微结构改变、遗传物质损伤。而生精细胞能量代谢障碍、脂质过氧化增强、炎症因子高表达和基因转录异常在其损伤发生发展过程中发挥重要作用。现对该方面的研究进展及相应的防治措施进行综述。     

生脉注射液在体外对精子运动能力和存活时间的影响

目的:观察生脉注射液对人精子运动参数和存活时间的影响。方法:将33例正常生育男性精液均分为两份,一份与生脉注射液+Hams-F10孵育,一份与Hams-F10共孵育。于0.5、1、2、4、8、12 h取样,检测精子存活率、并应用计算机辅助精子分析系统(CASA)测定精子的直线运动速度(VSL)、曲线运动速度(VCL)、平均路径速度(VAP)和头部侧摆幅度(ALH)等精子运动参数。结果:生脉组在孵育8 h时VCL明显高于Hams-F10组(P<0.05),12 h时生脉组VCL显著增高(P<0.01)。孵育4、8、12 h,生脉组VSL和VAP明显高于Hams-F10组(P<0.05)。孵育2、4、8、12 h时生脉组ALH明显高于Hams-F10组(P<0.05)。两份精液各时间段的精子死活比率相比,除12 h时有明显差异(P<0.05)外,其他各时间段无明显差异。结论:生脉注射液能提高精子的运动能力、延长精子的体外存活时间。     

The 'Indirect' Effects of Cytomegalovirus Infection

Cytomegalovirus (CMV) remains the most important infection in the immunocompromized host even in the era of effective therapy. CMV is usually acquired early in life and can be transmitted by contact with infected body fluids. In the immunocompetent population, primary infection is almost always of little clinical consequence. However, CMV infection in immunocompromized patients, especially those naive to CMV exposure, can cause tissue invasive disease, severe symptoms and/or death. However, beyond these direct effects, increasing in vitro evidence is accumulating that suggests CMV has many other effects on the host's immune response which may explain some of the detrimental consequences for the immunosuppressed patient, and may also be partially responsible for a variety of conditions in immunocompetent individuals. In its latent state, CMV employs several mechanisms to evade detection by the host's immune system. The virus also employs other methods to take advantage of activation of the immune system and replicate in sites of inflammation. This review focuses on the immunosuppressive and inflammatory mechanisms that have been attributed to CMV and will relate them to some of the clinical sequellae that have been associated with the indirect effects of CMV infection.     

邻苯二甲酸二-(2-乙基)己酯致小鼠隐睾睾丸和附睾的组织病理学改变

目的 :探讨邻苯二甲酸二 (2 乙基 )己酯 (DEHP)引起的小鼠隐睾睾丸和附睾的组织病理学改变。　方法 :妊娠KM小鼠 4 0只 ,随机分成 5组 ,分别为正常对照组 8只、玉米油对照组 8只、己烯雌酚 (DES)组 8只、DEHP低剂量组 [DEHP 10 0mg/ (kg·d) ]9只和DEHP高剂量组 [DEHP 5 0 0mg/ (kg·d) ]7只。自妊娠第 12d开始到分娩后 3d ,分别持续经口给予DEHP 10 0mg/ (kg·d)、5 0 0mg/ (kg·d)和DES 10 0 μg/ (kg·d)及玉米油 ,观察仔代雄小鼠的隐睾发生率及隐睾睾丸和附睾的组织病理学改变。　结果 :DEHP 5 0 0mg/ (kg·d)组染毒小鼠的隐睾发生率显著增高 ,睾丸和附睾的体积明显减小、重量减轻 ;睾丸生精上皮发育明显异常 ,精曲小管变薄、萎缩 ,间质细胞异常增生 ,电镜下其隐睾精曲小管上皮和间质细胞均出现明显的超微结构改变。同时附睾管腔中的精子数显著减少甚至缺乏。　结论 :高剂量 [5 0 0mg/ (kg·d) ]DEHP可能具有与DES类似的作用 ,是一种诱发隐睾的重要因子。小鼠在孕期及哺乳期接触DEHP后可引起雄性仔鼠性分化异常 ,诱导隐睾发生、睾丸生精上皮损害和生精过程障碍 ,从而对雄性仔鼠生育力产生不利影响。以上作用存在明确的量 效关系。     

小鼠睾丸引带细胞的培养及己烯雌酚对培养睾丸引带细胞的影响

目的:探讨小鼠睾丸引带细胞体外培养的有效方法,并进行形态学观察。研究经典的外源性雌激素己烯雌酚(DES)体外对小鼠睾丸引带发育的影响。方法:手术放大镜解剖出3日龄雄性昆明小鼠的睾丸引带组织并进行细胞培养。台盼蓝染色检测细胞存活率,HE染色观察细胞形态。传代培养并随机分为空白对照组、溶剂对照组(DMSO组)和实验组(DES 1~4组)共6组。溶剂对照组加入DMSO,实验组分别加入0.01、0.10、1.00以及10.00μg/ml DES。分别于培养12、24、48 h后进行细胞形态学观察,CCK-8法检测睾丸引带细胞的生长情况。结果:培养睾丸引带细胞大部分为成纤维细胞型,有少数的上皮样细胞。原代细胞的存活率为85%~90%。在不同剂量DES作用后的3个不同时间段里,细胞增殖性的检测结果存在时间-剂量效应的显著差异(P<0.01)。结论:睾丸引带细胞可经一定的方法进行体外培养,外源性雌激素对睾丸引带细胞的生长有抑制作用,且呈现一定的时间-剂量效应。对培养睾丸引带细胞影响的研究是外源性雌激素影响生殖系统发育研究的一条有效的睾丸外途径。     

Characterization of a Testis Specific Antigen in the Mouse

Summary: The partial characterization of a mouse hydrosoluble testis specific protein by crossed immunoelectrophoresis, ion-exchange chromatography and SDS-Page was made. This protein presented a low electrophoretic motility at pH 8.6. It was not adsorbed to DEAE-Sephacel at pH 8.6, but was slightly adsorbed at pH 9.0, while in CM-Sephadex it was readily adsorbed at pH 6.0, indicating the basic nature of this protein. The apparent molecular weight was determined to be of 28 Kd by SDS-Page. The previously reported testis specificity of this protein was corroborated by its absence in a liver extract.
Zusammenfassung: Charakterisierung eines hodenspezifischen Antigens in der Maus
Es wurde eine Teil-Charakterisierung des wasserlöslichen hodenspezifischen Proteins durch gekreuzte Immunelektrophorese, Ionenaustauschchromatogra-phie und SDS-Page dargestellt. Diese Proteine zeigen eine niedrige Beweglichkeit bei einem pH von 8.6. Es wurde mittels DEAE-Sephacel bei einem pH von 8.6 nicht, aber bei einem pH von 9.0 schwach absorbiert, während es mittels CM-Sephadex schon bei einem pH von 6.0 absorbiert wurde was durch die basische Natur dieses Proteins verursacht wird. Das scheinbare Molekulargewicht wurde mit dem SDS-Page auf 28 Kd bestimmt. Die voraus-gehend besprochene Hodenspezifität dieses Proteins wurde durch seine Abwesenheit im Leberextrakt bestätigt.     

血管内皮生长因子和其受体Flt-1在青春期大鼠睾丸、附睾及附睾内精子上的表达研究

目的:通过对血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-1在大鼠睾丸、附睾及附睾内精子上表达的研究,探讨其在雄性生殖系统中的作用。方法:免疫组化SP法和免疫荧光法检测20只青春期SD大鼠睾丸、附睾及精子上VEGF和Flt-1蛋白的表达情况。结果:VEGF和Flt-1在大鼠睾丸和附睾组织及精子上均有特征性表达。睾丸内VEGF蛋白表达于生精细胞、精子细胞发育中的顶体、Sertoli和Leydig细胞胞质内;Flt-1只见于精子细胞发育中的顶体及Leydig细胞胞质中。附睾中VEGF表达于各段上皮主细胞胞质内,而Flt-1表达于头、尾段上皮主细胞胞质内,体部免疫染色阴性;两者在附睾上皮亮细胞、晕细胞和基细胞中均为阴性表达。免疫荧光染色显示,VEGF和Flt-1共同定位于附睾内精子头部的顶体,尾部的颈、中和主段。结论:VEGF和Flt-1蛋白在大鼠睾丸、附睾及精子中的特异性表达提示,他们可由不同生精上皮细胞、间质细胞和附睾主细胞产生,可能以自分泌或旁分泌的形式单独或共同作用于睾丸和附睾的生殖细胞或Leydig细胞,直接或间接地影响精子的发生、发育和成熟过程,并与精子的活动和受精能力有关。     

实验性精索静脉曲张对青春期大鼠睾丸、附睾精子结合抗原11 mRNA及其蛋白异构体表达的影响

目的:研究实验性左侧精索静脉曲张(ELV)对青春期大鼠睾丸和附睾中精子结合抗原11(SPAG11)mRNA及其蛋白异构体SPAG11E表达的影响,并探讨其与精索静脉曲张导致男性不育的关系。方法:40只SD大鼠随机分为ELV2周组、4周组,假手术对照2周组、4周组,每组10只。ELV组行部分结扎左肾静脉建立青春期SD大鼠ELV模型,假手术对照组仅显露左肾静脉过程,但不结扎。应用RT-PCR和免疫组化法(n=5)检测SPAG11 mR-NA及SPAG11E蛋白在ELV2周组和ELV4周组及各自对照组大鼠双侧睾丸、附睾中的表达变化。结果:RT-PCR结果显示,SPAG11基因376bp的特异扩增产物仅见于大鼠附睾组织中。免疫组化结果显示,SPAG11E蛋白主要与睾丸生精上皮的圆形和长形精子细胞的顶体泡和顶体、睾丸间质细胞的胞质相结合;在附睾管上皮主细胞胞质和顶部静纤毛中表达。对RT-PCR的相对吸光度值和免疫组化的灰度值进行统计学分析显示:①左侧附睾ELV2周和4周组SPAG11 mRNA和SPAG11E蛋白的表达与各自右侧组及各自对照组比较均有显著减弱(P<0.05或P<0.01);左侧附睾ELV4周组SPAG11mRNA与SPAG11E的表达较ELV2周组显著减少(P<0.05或P<0.01);右侧附睾ELV4周组SPAG11E的表达也较ELV2周组显著减少(P<0.01);②两实验组双侧睾丸SPAG11E蛋白的表达与相应对照组比较均未见明显差异(P>0.05),且在ELV2周组和ELV4周组之间该蛋白的表达也无显著性差异(P>0.05)。结论:SPAG11是特异表达于附睾的基因,在大鼠睾丸和附睾中均可见其蛋白异构体SPAG11E免疫阳性反应,其定位及表达水平具有细胞特异性和区域特异性,而且SPAG11 mRNA及SPAG11E蛋白在ELV模型鼠附睾中的表达发生了明显变化,这提示SPAG11不仅可能在大鼠精子发生、成熟过程中发挥重要作用,还可能与精索静脉曲张所致的男性不育相关。     

奥硝唑对大鼠精子的影响及作用机制探讨

目的: 探讨奥硝唑降低大鼠精子活动力的影响因素及作用机制。　方法: 20只SD大鼠随机分为低剂量组(n=5)、高剂量组(n=8)和正常对照组(n=7)。低剂量组和高剂量组分别给予 200、400mg/kg奥硝唑灌胃,正常对照组给予0. 5%羧甲基纤维素钠灌胃,连续 20d。末次给药 24h后戊巴比妥钠麻醉,取附睾及睾丸,观察精子密度、精子活动力;检测睾丸、附睾组织匀浆中乳酸脱氢酶、α 葡糖苷酶、丙二醛、果糖的浓度变化。观察睾丸与附睾有无形态学改变。　结果: 奥硝唑 200、400mg/kg,连续灌胃给药 20d,能显著降低精子活动力(P<0. 01),对精子密度无明显影响(P>0. 05)。与正常对照组比较,高剂量组乳酸脱氢酶水平明显降低 (P<0. 01),丙二醛含量明显升高(P<0. 05)。　结论: 奥硝唑通过增加细胞脂质过氧化产物丙二醛,抑制附睾中的能量转换酶或非蛋白类物质使精子细胞受损、活动力降低,这是奥硝唑致弱精子症动物模型的作用机制之一。