环孢素A对小鼠髓源性树突状细胞的影响

 目的研究环孢素A(CsA)对小鼠髓源性树突状细胞(BMDC)的影响。方法以小鼠BMDC为对象,在其培养过程中加入不同质量浓度的CsA(0,0.5和1 mg·L^-1)、脂多糖(LPS)诱导细胞成熟,流式细胞分析其免疫表型的改变,氚-胸腺嘧啶核苷(³H-TdR)掺入法和ELISA法检测其刺激同种T细胞增殖能力和分泌细胞因子等功能变化。结果CsA处理后的树突状细胞(DC),其表面共刺激分子CD80,CD86表达下调,抑制性分子B7-DC表达进一步上调,而另一抑制性分子B7-H1表达无明显变化,该DC刺激同种T细胞增殖能力下降,TNF-α和IL-12P70分泌降低,IL-10分泌增加。结论在BMDC的分化过程中,CsA能直接作用于DC,使其具有不成熟DC的特性,该DC可以诱导免疫耐受,这种作用是通过共刺激分子CD80,CD86表达下调和抑制性分子B7-DC表达上调实现的。     

HepG2肝癌细胞外泌体对人树突状细胞成熟与功能的影响

目的:观察HepG2肝癌细胞外泌体对人树突状细胞(Dendritic cells,DC)成熟和功能的影响。方法:采用透射电镜、Nano FCM和Western Blot鉴定和测定外泌体的形态、粒径分布及特征性蛋白的表达,用细胞因子GM-CSF(20 ng/ml)、IL-4(10 ng/ml)、IFN-β(105U/ml)和LPS(10 ng/ml)诱导刺激DC成熟,用流式细胞术检测DC成熟相关表面分子CD80、CD83、CD86、HLA-DR的表达,ELISA检测培养上清液中细胞因子IL-12的水平,CCK-8法检测DC刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。结果:HepG2、MIHA来源外泌体表达CD63、Alix,同时不表达细胞色素C(Cytochrome C);在HepG2肝癌细胞外泌体刺激下,DC的CD80、CD83阳性表达率较仅加入LPS的对照组明显降低(P<0.05),而CD86、HLA-DR表达较对照组无明显差异;ELISA测定结果显示,200μg/ml HepG2 EXO干预后的DC较对照组分泌IL-12的量明显减少(P<0.05);CCK-8检测显示,200μg/ml HepG2EXO干预的DC较对照组刺激异体淋巴细胞增殖的能力明显降低(P<0.05)。结论:HepG2肝癌细胞外泌体对DC表面成熟相关分子表达、细胞因子的分泌、刺激异体T淋巴细胞增殖的能力均有一定的抑制作用。     

枸杞多糖对树突状细胞的成熟及免疫学功能的影响

目的:研究枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)对小鼠骨髓来源的树突状细胞(dendritic cell,DC)的成熟和免疫学功能的影响。方法:运用体外大量扩增培养小鼠骨髓来源的DC的技术,在DC的分化,成熟、活化这一系列过程中加入枸杞多糖观察其影响。在BMDC体外培养时加入低、中、高3种浓度(5,10,20 mg/L)的LBP进行干预,同时设生理盐水对照组,培养至第6天,以流式细胞仪(flow cytometer,FCM)分析各组细胞的免疫表型及T细胞的增殖情况;用Western-Blot方法测定其分泌的白介素-12P40(interleukin-12P40,IL-12P40)水平;MTT法检测体外经冻融的H22肝癌细胞冲击后的DC刺激同种反应性T细胞的杀伤活性。结果:体外加入LBP培养后,DC表达高水平共刺激分子CD86和CD11a(加药组与NS组对比,差别有统计学意义,P0.05);其分泌的IL-12P40水平升高;DC刺激同种反应性T细胞的杀伤活性增加,其中以10 mg/L LBP培养时上述指标增加最为明显,与其他组对比,差别有统计学意义(P0.05);而以LBP 5 mg/L,20 mg/L培养时,共刺激分子CD86和CD11a以及IL-12P40并没有高表达(加药组与NS组对比,差别无统计学意义,P0.05)。DC刺激同种反应性T细胞的杀伤活性也没有变化(加药组与NS组对比,差别无统计学意义,P0.05)。结论:LBP能够促进体外培养的DC的分化、成熟,提高其表面表达CD86(B7-2)以及CD11a(LFA-1)的水平;能够促进DC分泌IL-12P40;提高CTL的特异性杀伤能力,并且这种作用有其最佳剂量。     

落新妇苷对小鼠骨髓来源树突状细胞成熟及免疫功能的抑制作用

目的:探讨落新妇苷对小鼠骨髓来源树突状细胞(dendritic cell,DC)成熟和免疫功能的影响。方法:采用体外条件培养法得到小鼠骨髓来源未成熟树突状细胞,加入脂多糖刺激细胞成熟。落新妇苷(低浓度25μg/mL、中浓度50μg/mL、高浓度100μg/mL)处理细胞后,流式细胞仪分析各组细胞凋亡,细胞表面主要组织相容性抗原复合物分子Ⅰa和共刺激分子CD40、CD80和CD86表达;异硫氰酸荧光素标记葡聚糖内吞实验分析各组DC抗原吞噬功能;酶联免疫吸附测定法检测各组DC培养液上清白细胞介素12亚单位p40(p40 subunit of interleukin-12,IL-12p40)水平;氚-胸腺嘧啶核苷掺入法检测体外混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction,MLR)中各组DC刺激同种反应性T细胞的增殖能力,酶联免疫吸附测定法检测MLR上清IL-2、IL-4、IL-10、γ干扰素水平。结果:各组DC凋亡率差异无统计学意义(P0.05)。与脂多糖组相比,高、中、低浓度落新妇苷组细胞表面主要组织相容性抗原复合物分子Ⅰa和共刺激分子表达明显降低,抗原吞噬能力明显升高,分泌IL-12p40明显减少,刺激同种反应性T细胞增殖的能力显著下降(P0.05)。与脂多糖组相比,高、中、低浓度落新妇苷组MLR上清中IL-2和γ干扰素水平明显降低(P0.05),而IL-4、IL-10水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:落新妇苷(25、50、100μg/mL)能够剂量依赖性地抑制体外培养小鼠骨髓来源DC的成熟,并对其免疫功能具有一定的负性调节作用。     

华蟾素对慢性乙型肝炎患者外周血来源树突状细胞的影响

目的:研究华蟾素对慢性乙肝患者外周血来源的树突状细胞(dendritic cells,DCs)形态、表型和功能的影响,以了解华蟾素提高慢乙肝患者机体免疫力的作用机制。方法:实验研究分3组:正常对照组、慢乙肝组和慢乙肝华蟾素组。分离慢性乙肝患者和正常人外周血单核细胞(Monocytes,Mo),以GM-CSF和IL-4联合诱导培养生成DCs,慢乙肝华蟾素组于DCs培养48小时后加入华蟾素。各组DCs均于培养的第7天以相差显微镜观察和拍摄细胞形态;用流式细胞仪检测表面分子CD40、HLA-DR、CD80、CD86的表达水平;用CCK8法检测DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力;用ELISA法检测DCs培养液上清中IL-12的水平。结果:与正常人相比,慢乙肝组患者外周血来源的DCs细胞形态相对不成熟,表面分子表达水平低,刺激同种异体淋巴细胞增殖能力和IL-12分泌能力较弱;加入华蟾素培养的慢乙肝患者DCs与慢乙肝组比较,细胞形态相对成熟,表面分子CD40、CD80和CD86表达水平增高,刺激同种异体淋巴细胞增殖能力和IL-12分泌能力增强。结论:华蟾素能促进慢性乙肝患者外周血来源DCs的发育成熟,改善其功能。     

健脾滋肾泻火方对免疫性血小板减少症小鼠脾脏树突状细胞、CD86表达和外周血IL-12p70的影响

目的 通过观察健脾滋肾泻火方对免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia, ITP)模型小鼠脾脏树突状细胞(dendritic cell, DC)数量、CD86表达以及外周血白介素-12p70(inter leukin-12p70,IL-12p70)的影响,探讨健脾滋肾泻火方治疗ITP的疗效机制。方法 选取40只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、健脾滋肾泻火方组和强的松对照组(10只/组)。除正常对照组外,其余3组均采用腹腔注射MWReg30抗体的方法复制ITP模型。造模成功后健脾滋肾泻火方组和强的松对照组分别给予相应的药物,连续灌胃14 d后取材,记录治疗前后各组小鼠血小板计数,应用流式细胞术、ELISA的方法观察各组小鼠脾脏DC的占比、DC表面共刺激分子CD86的表达以及外周血中IL-12p70的分泌情况。结果 与模型组相比,两治疗组血小板计数均显著提升(P<0.05);脾脏DC占比和CD86表达均降低(P<0.05),外周血IL-12p70水平均有不同程度下降(P<0.05),但两治疗组对比差异无统计学意...     

蝎毒多肽提取物对小鼠Lewis肺癌免疫逃逸的影响

目的:观察蝎毒多肽提取物(PESV)对Lewis肺癌(LLC)免疫逃逸的影响。方法:取40只C57BL/6J小鼠,右腋下接种Lewis肺癌细胞悬液,建立皮下种植瘤模型,随机分为荷瘤对照组和PESV治疗组,连续灌胃给予PESV 18 d,检测肿瘤体积并计算抑瘤率;免疫组化法和ELISA法分别检测瘤组织及血清中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β1(TGF-β1)和白介素10(IL-10)的表达,免疫组化法和流式细胞仪分别检测肺癌组织中浸润的DC表面共刺激分子CD80,CD86的表达。结果:PESV抑瘤率为56.60%。与荷瘤对照组相比,瘤组织和血清中VEGF,TGF-β1和IL-10的表达明显降低(P0.05),DC共刺激分子CD80,CD86的表达明显增加(P0.05)。结论:PESV可干预肺癌免疫逃逸,其机制可能与减少肿瘤微环境中VEGF,TGF-β1和IL-10的表达,增加DC共刺激分子CD80,CD86的表达有关。     

核因子-κB对小鼠树突状细胞分化成熟及其体外刺激T细胞免疫反应的影响

目的　探讨在小鼠树突状细胞 (DC)成熟过程中核因子 κB(NF κB)基因的作用。方法　应用特异性NF κB寡聚脱氧核苷酸诱骗剂 (NF κBODNDecoys)阻断NF κB活性 ,观察DC形态、细胞表面分子表达以及同种T淋巴细胞增殖反应的变化 ,了解NF κB基因对DC成熟及免疫生物活性的影响。结果　NF κBODNDecoys的有效摄取 ,抑制了DC表面共刺激分子CD80、CD86、CD40的表达和白细胞介素 1 2 (IL 1 2 )的分泌 ,阻碍了DC的发育成熟 ,这种阻碍作用不可被脂多糖 (LPS)所逆转。混合淋巴细胞反应显示 ,NF κBODNDecoys的应用可诱导DC刺激同种T淋巴细胞低反应活性 ,抑制了T细胞IL 2和γ 干扰素 (IFN γ)的分泌。结论　NF κB是DC发育成熟过程中关键性调控基因。应用NF κBODNDecoys可抑制DC的成熟 ,从而为生成耐受原性未成熟DC、诱导移植免疫耐受提供了一种新的途径     

慢性乙型重型肝炎黄疸证患者外周血树突状细胞功能的研究

目的:比较慢性乙型重型肝炎阳黄证和阴黄证患者的树突状细胞功能。方法:体外培养上述病人外周血树突状细胞,流式细胞仪检测其表面分子CD80、CD86、CD40、HLA-DR、CD1a的表达,MLR中刺激T细胞的增殖和分泌IL-12、IFNα的能力。结果:阴黄证患者的DC表面分子CD86的表达较阳黄证组下降(P<0.05)。其他表面分子,如CD40、HLA-DR、CD1a和CD80,阳黄证与阴黄证两组无明显差异;经TNFα刺激后,上述各表面分子的表达较未加TNFα组均有上调,但阴黄证组CD80、CD86、HLA-DR上调的幅度低于阳黄证组(P<0.05)。阴黄证患者组自身T淋巴细胞增殖的能力较阳黄证患者组为低,但差异无显著性意义(P>0.05);经DC刺激后,阴黄证患者的T淋巴细胞的增殖效果明显低于阳黄证组(P<0.05)。阳黄证和阴黄证患者的IL-12和IFNα水平未经TNTα刺激前无明显差异,经TNTα刺激后两组的IL-12和IFNα水平较同组未经TNTα刺激者明显升高(P<0.05)。但阴黄证组上升的幅度低于阳黄证组(P<0.05)。结论:慢性乙型重型肝炎阳黄证和阴黄证患者均存在明显外周血DC功能障碍,运用TNFα激活可提高DC的部分功能,阴黄证患者的外周血DC细胞功能低下较阳黄证患者更为明显。     

黄芩苷对LPS刺激诱导的未成熟树突状细胞(DC2.4)的作用

目的 研究黄芩苷(BAI)对LPS刺激诱导的DC2.4细胞的增殖、成熟及抗原呈递功能的影响,为进一步揭示黄芩苷抗炎的免疫细胞分子机制提供基础。方法 (1)采用CCK8法测定黄芩苷对LPS刺激的DC2.4增殖的影响;(2)采用流式细胞术检测BAI对LPS刺激的DC2.4细胞成熟标志分子CD86及抗原呈递分子MHCⅡ的影响。结果 (1)CCK8实验结果显示,DC2.4细胞培养12至24h后增殖明显(P0.05),24h达到高峰,其后增殖速度降低;加入LPS作用48h后,DC2.4细胞仍有明显增殖(P0.05);单用BAI高、中浓度在12h、24h时明显抑制DC2.4细胞增殖(P0.05),单用BAI低浓度在3个时间点对DC2.4细胞增殖无明显抑制作用;在LPS+BAI组中,高、中浓度在3个时点均可明显抑制DC2.4的增殖,低浓度的BAI使LPS诱导的细胞增殖水平接近对照组细胞;(2)流式细胞仪检测结果表明,LPS组的CD86和MHCⅡ分子表达显著增加(P0.01),BAI组的CD86和MHCⅡ分子表达有增加趋势(P0.05),而LPS+BAI组的CD86和MHCⅡ表达显著下降(P0.05)。结论 黄芩苷抗炎的免疫分子机制可能与其抑制病原体刺激未成熟树突状细胞的成熟及其抗原呈递分子MHCⅡ的过度表达相关。     

黄连素合用环孢素A对小鼠皮肤移植排斥反应的影响

目的观察黄连素合用环孢素A抗同种异体小鼠皮肤移植排斥反应的影响,探讨其作用机制。方法以BALB/c小鼠为供体,以C57BL/6小鼠为受体,采用背-背皮肤移植手术法制备模型。将受体小鼠按随机数字表法分为模型组、黄连素组、环孢素A组、联合组,每组20只;另取20只健康C57BL/6小鼠作为假手术组。造模后黄连素组小鼠腹腔注射黄连素100 mg/kg,环孢素A组小鼠腹腔注射环孢素A注射液10 mg/kg,联合组腹腔注射黄连素100 mg/kg及环孢素A注射液5 mg/kg,假手术组和模型组小鼠腹腔注射等体积0.5%羧甲基纤维素钠。1次/d,连续10 d。记录受体小鼠移植皮片的存活时间;采用ELISA法检测血浆Th1类细胞因子[IL-2、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)]和Th2类细胞因子(IL-4、IL-10)水平;采用流式细胞术检测脾脏T淋巴细胞亚群CD4+CD25+比例。结果与模型组比较,各给药组受体小鼠移植皮片的存活时间延长(P<0.01);联合组移植皮片存活时间较黄连素组或环孢素A组延长(P<0.01)。与模型组比较,联合组血浆IL-2[(11.55±3.14)pg/ml比(19.85±2.42)pg/ml]、IFN-γ[(26.41±6.20)pg/ml比(57.23±10.15)pg/ml]水平降低,IL-4[(192.45±70.12)pg/ml比(61.09±21.61)pg/ml]、IL-10[(106.79±27.83)pg/ml比(40.08±11.23)pg/ml]水平升高(P<0.05),脾脏CD4+CD25+调节性T细胞比例[(7.65±2.42)%比(3.69±0.83)%]升高(P<0.01)。结论黄连素合用环孢素A通过促使Thl向Th2细胞的偏移、诱导免疫耐受、刺激CD4+CD25+调节性T细胞的表达等途径,抑制同种异体小鼠的皮肤移植排斥反应。     

加味青蒿鳖甲汤对髓系MRD-L患者CD_(34)~+细胞源DC诱导过程中IL-12的影响

目的:探讨加味青蒿鳖甲汤对树突细胞(DC)诱导和对IL-12分泌的影响。方法:本研究采用体外培养的方法,用含不同剂量(高、中、低)加味青蒿鳖甲汤动物血清联合细胞因子、不含药血清联合细胞因子及单纯用细胞因子,共同培养缓解期急性髓系白血病(AML-CR)患者骨髓中分离提取的CD+34细胞,诱导其成为DC,观察各组在不同阶段对DC成熟的影响,以及各组血清中IL-12的分泌变化。结果:含药血清均能上调DC表面特征性分子及共刺激分子CD80、CD83、CD86表达水平,较单纯细胞因子组比较有显著性差异(P<0.01),且含中剂量药血清更能促进DC分泌IL-12(P<0.01)。结论:联合细胞因子的含加味青蒿鳖甲汤的血清,可使来源AML-CR骨髓的CD+34,在体外比单纯用细胞因子诱导培养DC能够更好地促进DC的生长、成熟和分化,并能促进DC分泌IL-12,增加抗肿瘤作用。     

青藤碱对类风湿关节炎病人树突状细胞免疫活性的影响

 目的观察中药单体青藤碱对体外培养类风湿关节炎树突状细胞免疫活性的影响。方法分离12例类风湿关节炎病人外周血单核细胞,分为青藤碱高、中、低剂量组和空白对照组。采用GM-CSF,IL-4进行刺激分化,于分化第4天开始给予干预,于培养第8天收获细胞。混合淋巴细胞反应检测树突状细胞对同种异体T细胞的刺激作用,酶联免疫吸附法检测树突状细胞培养上清中IL-12的含量,流式细胞技术检测树突状细胞表型的改变。结果与对照组相比,在不同混合比例下青藤碱可抑制树突状细胞对同种异体T细胞的刺激能力,青藤碱可抑制树突状细胞IL-12的分泌及其表面分子CD40,CD80,CD83,CD86和HLA-DR的表达。结论青藤碱可能通过抑制树突状细胞激活T细胞的能力,而达到治疗类风湿关节炎的作用。     

当归多糖对树突状细胞成熟和功能的影响

目的:探讨当归多糖对外周血单个核细胞(PBMC)来源的树突状细胞(DC)体外分化、成熟和功能的影响。方法:以外周血单个核细胞为来源,联合应用 GM-CSF、IL-4及 TNF-α,在体外诱导培养 DC。采用 MTT 法测定 DC 诱导的混合淋巴细胞反应分析 APS-3对 DC 刺激淋巴细胞增殖功能的影响;采用流式细胞术检测细胞表面标志 CD1a,HLA-DR,CD86的表达,来评价 APS-3对 DC 分化的作用;RT-PCR 技术研究 DC IL-12p40mRNA 的表达,探讨 APS-3对 DC 分泌 Th1型细胞因子 IL-12的影响。结果:人 PBMC 在体外可诱导培养出具有典型形态、表型及免疫活性的 DC。采用不同浓度APS-3(0.1、0.3、1.0μg/mL)处理培养的 DC 表面标志 CD1a、CD86、HLA-DR 及 IL-12mRNA 表达量均呈上升趋势。经不同浓度 APS-3处理的 DC 诱导的 MLR,在小剂量范围(0.01-1μg/mL)是剂量依赖性的增强作用,在高剂量范围(30-100μg/mL)表现为抑制效应;常规培养8天生成的 DC 与淋巴细胞共培养后,加入不同浓度 APS...     

参苓白术散对溃疡性结肠炎小鼠肠道调节性T细胞免疫调节作用

目的探讨参苓白术散对溃疡性结肠炎小鼠肠道调节性T细胞免疫调节作用及机制。方法 2,4,6-三硝基苯磺酸钠(Tfipitrobenzene sulfonic acid,TNBS)制造溃疡性结肠炎小鼠模型。实验设正常对照组、TNBS模型组、高剂量参苓白术散组、中剂量参苓白术散组、低剂量参苓白术散组及地塞米松组。造模后给予参苓白术散或地塞米松治疗10 d。实验结束处死小鼠,比较各组结肠长度、ELISA法测定肠组织肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素1β(Interleukin-1β,IL-1β)和白介素10(Interleukin-10,IL-10)水平、流式细胞仪测定肠系膜淋巴结淋巴细胞CD4+CD25+Foxp3+/CD4+T比值。结果与模型组比较,高剂量参苓白术散组有效预防了TNBS结肠炎小鼠结肠长度缩短;与模型组比较,高剂量参苓白术散组明显降低肠黏膜TNF-α、IL-1β水平、显著升高肠系膜淋巴结淋巴细CD4+CD25+Foxp3+/CD4+T细胞比例、增加肠道黏膜IL-10分泌水平。结论参苓白术散通过提高肠道CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数量发挥肠道黏膜免疫功能。     

树突状细胞表面分子的表达变化在苦参素注射液抗HBV中的作用

目的:观察苦参素注射液对HBV转基因小鼠体内HBV-DNA含量及其树突状细胞表面分子的影响,探讨其抗病毒作用及其作用机制.方法:20只HBV转基因小鼠,将其随机分为苦参素注射液和生理盐水组,10只同种同龄健康小鼠作为正常对照;苦参素注射液按照82.2 mg/(kg·d)每日腹腔注射1次,生理盐水组以同体积生理盐水腹腔注射,共30d.采用荧光定量PCR检测治疗前后HBV转基因小鼠血清以及治疗后肝脏中HBV-DNA含量;并取脾脏分离、培养树突状细胞,经流式细胞仪检测DC表型.结果:治疗前两组小鼠血清HBV-DNA含量没有统计学差异,治疗后,两组血清HBV-DNA含量均有明显下降,但是与生理盐水组比较,苦参素注射液组又具有明显下降,两组小鼠肝组织HBV-DNA含量没有明显差异;转基因小鼠脾脏来源树突状细胞均有MHC-Ⅱ、CD80与CD86的表达,与正常鼠比较,生理盐水组转基因小鼠MHC-Ⅱ的表达明显下降,苦参素注射液对其表现出显著的上调作用.结论:苦参素注射液具有抑制HBV转基因小鼠体内HBV-DNA复制的能力,通过调节其DC表面分子的表达可能是其发挥抗HBV的机制之一.     

重组人p53腺病毒转染急性早幼粒细胞白血病源性树突状细胞的免疫效应研究

目的研究重组人p53腺病毒(rAd-p53)转染急性早幼粒细胞白血病(APL)源性树突状细胞(DC)的免疫效应。方法采集APL初治患者骨髓单个核细胞在完全培养基中培养并以r-Ad-p53/Lac Z(腺病毒空载体)处理。Western blot鉴定p53蛋白的表达,流式细胞仪检测DC免疫表型、酶联免疫吸附法(ELISA)进行上清夜IL-12水平测定,MTT法观察rAd-p53-APL-DC刺激自体T淋巴细胞增殖能力(MLR)。结果转染rAd-p53或Lac Z可明显上调APL-DC表面CD80、CD86、CD83、CD1a、CD40和HLA-DR表达;转染rAd-p53后72小时rAd-p53-APL-DC上清液中IL-12分泌水平明显增加;刺激自体淋巴细胞增殖的能力随rAd-p53-APL-DC与淋巴细胞比例的增加而升高(P0.05).结论利用rAd-p53转染急性早幼粒细胞白血病细胞来源树突状细胞(APL-DC),可有效刺激APL-DC的成熟,其介导的MLR明显强于非rAd-p53组所诱导的DC。     

大黄素抗小鼠皮肤移植排斥反应的实验研究

目的:探讨大黄素抑制同种异体小鼠皮肤移植排斥反应的作用。方法:采用BALB/c供体鼠→C57BL/6受体鼠背-背皮肤移植法建立模型,分为假手术组、模型组、大黄素组(50 mg/kg)、环孢素A组(10 mg/kg)、大黄素+亚剂量环孢素A组(大黄素50 mg/kg+环孢素A 5 mg/kg),腹腔注射给药10 d.记录受体鼠移植皮片的存活时间;取血浆,酶联免疫吸附法检测Th1类细胞因子(IL-2,IFN-γ)和Th2类细胞因子(IL-4,IL-10)水平;取脾脏,流式细胞仪分析T淋巴细胞亚群CD4~+及CD25~+的比例。结果:与模型组比较,各给药组受体鼠移植皮片的存活时间均有明显延长,组间差异均有统计学意义(P0.01);大黄素联合环孢素A组的移植皮片存活时间比大黄素组或环孢素A组均有明显延长,差异有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,大黄素联合环孢素A组及大黄素组均可显著降低血浆IL-2和IFN-γ的水平,差异有统计学意义(P0.01),显著升高IL-4和IL-10的水平,差异有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,大黄素联合环孢素A组及大黄素组均可显著升高脾脏CD4~+及CD25~+调节性T细胞的比例,差异有统计学意义(P0.01)。结论:大黄素可抑制同种异体小鼠的皮肤移植排斥反应,其机制或与促使Thl向Th2细胞的偏移,刺激CD4~+及CD25~+调节性T细胞的表达,诱导免疫耐受等相关。     

温阳补肾方对哮喘小鼠脾脏树突细胞的免疫调控机制研究

目的通过观察哮喘小鼠脾脏中树突细胞（Dc）表面共刺激分子CD80、CD86的表达变化,探讨温阳补肾方对哮喘小鼠脾脏树突细胞的免疫调控机制。方法30只BALB／c小鼠随机分为正常对照组、模型组、中药组、西药组、中西药结合组,每组6只。除正常组外,余组建立小鼠哮喘模型,并予以相应的干预措施。各组小鼠肺组织切片进行苏木精-伊红染色后观察炎症反应;采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中IL-4、IFN-γ、ECP的含量;取各组小鼠脾脏组织分离树突细胞,经过DC培养,扫描电镜观察DC形态,用流式细胞仪（FACS）分析各组小鼠脾脏DC表面共刺激分子CD80、CD86的表达量。结果模型组小鼠气道上皮损伤、脱落,嗜酸性粒细胞等炎性细胞浸润。与正常对照组比较,模型组小鼠IL-4、ECP水平上调,INF-γ水平下调,CD80、CD86阳性表达率上调,差异均有统计学意义（P〈0．05）。与模型组比较,各治疗组可下调血清IL-4、ECP的水平（P〈0．01）;与中药组和西药组比较,中西医结合组疗效最佳,IL-4、ECP差异有统计学意义（P〈0．05）。中药组和中西医结合组可上调INF-γ表达水平（P〈0．01）;各治疗组可下调树突细胞表面CD80、CD86的表达水平（P〈0．05）;与中药组和西药组比较,中西医结合组疗效最佳,其CD80、CD86的表达水平差异有统计学意义（P〈0．05）。结论温阳补肾方可以抑制哮喘小鼠气道的炎症反应,调节Th1及Th2免疫失衡,与地塞米松有协同效应,其下调脾脏树突细胞的表达是温阳补肾方治疗哮喘的一个重要机制。     

平喘固本膏方对COPD稳定期大鼠模型树突状细胞及T淋巴细胞的影响※

目的:研究平喘固本膏方对COPD稳定期大鼠模型树突状细胞及T淋巴细胞的影响。方法:采用烟熏结合气管内注入脂多糖的方法制作大鼠COPD稳定期模型,并用平喘固本膏方对其进行干预,疗程为1个月,氨茶碱组采用氨茶碱片灌胃,治疗后检测IL-10、IL-12、CD4+T、CD8+T,同时取大鼠肺组织计数大鼠肺实质的DCs数量。结果:高剂量组在降低IL-12及CD8+T方面优于氨茶碱(P0.05),而在升高IL-10、降低CD4+T及CD4+T/CD8+T方面高中低各剂量组与氨茶碱组比较无显著差异(P0.05)。COPD大鼠模型DC表面分子标记物CD80及CD86明显升高(P0.05),膏方各组均能降低CD80及CD86的表达,在降低CD80的表达上,高剂量组与氨茶碱组比较有显著差异(P0.05),但中剂量组及低剂量组与氨茶碱比较无显著差异(P0.05);在降低CD86的表达上,高剂量组及中剂量组与氨茶碱比较均有显著差异(P0.05),而低剂量组与氨茶碱比较无显著差异(P0.05)。结论:COPD大鼠模型DC表面分子标记物CD80及CD86呈高表达,平喘固本汤膏方可降低IL-2、CD8+T以及CD80、CD86的表达,值得进一步研究。