哮喘小鼠气道重塑中α平滑肌肌动蛋白的表达

目的:用屋尘螨提取液(House DustMite Extract,HDM)构建哮喘小鼠气道重塑模型,检测肺组织中α平滑肌肌动蛋白(Smooth Muscle Actin-α,α-SMA)的表达。方法:BALB/c小鼠随机分为空白组、HDM低、高剂量三组,每组再分为3、6、9周3个亚组。用不同浓度的HDM皮下/腹腔致敏,滴鼻激发。用医学图像软件分析气道重塑的病理改变,分别用qRT-PCR和IH检测肺组织中α-SMAmRNA和蛋白的表达。结果:与空白组对比,HDM高、低剂量组肺组织病理炎症计分增加,气道内外径比值降低,α-SMA蛋白及其mRNA表达增加,随激发时间延长改变越来越显著;高剂量组较低剂量组更显著。结论:HDM诱导BALB/c小鼠支气管哮喘气道重塑中,α-SMA随气道重塑的加剧而表达增加。     

尿激酶抑制哮喘小鼠气道重塑

气道重塑是慢性哮喘的病理特征之一,是导致不可逆性气流阻塞及持续性非特异性气道高反应性的主要原因。尿激酶是组织纤溶酶原激活剂,国内外许多研究将其应用于肺等器官纤维化的治疗,但在哮喘气道重塑中的作用尚无报道。1材料与方法1.1实验动物及材料1.1.1实验动物:清洁级BALB/c     

Apyrase减轻过敏性哮喘小鼠气道炎症及气道重塑

目的探讨apyrase(三磷酸腺苷二磷酸水解酶)对过敏性哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的作用。方法采用C57BL/6雌性小鼠建立鸡卵清蛋白(OVA)致敏和激发的过敏性哮喘模型,并给予apyrase处理;以非致敏的同背景雌性小鼠作为对照。于最后1次激发24~48 h,完成小鼠气道高反应性测定、支气管肺泡灌洗及取肺组织。病理学方法评价肺组织气道炎症、杯状细胞及气道重塑,瑞氏吉姆莎染色并计数灌洗液的分类细胞,酶联免疫吸附法测定灌洗液细胞因子,实时定量PCR法测定肺组织转录因子(GATA3)水平。结果 Apyrase减轻哮喘小鼠肺组织嗜酸性粒细胞炎症,降低气道炎性细胞、Th2相关细胞因子及肺组织GATA3核酸水平;减轻气道上皮杯状细胞增生及胶原沉积。结论 Apyrase可减轻小鼠过敏性哮喘的气道炎症及气道重塑。     

缬沙坦对小鼠支气管哮喘气道重塑的干预作用

道重塑是支气管哮喘除气道慢性炎症之外的另一个重要特征.它不仅导致不可逆性的气流阻塞,还影响平喘药物的疗效,从而加重气道高反应性和肺功能低下.我们曾经报道TGF-β1和CTGF参与哮喘气道重塑的发生,并在哮喘气道重塑的发病机制中起重要的作用[1].     

人脑桥静脉平滑肌细胞α-肌动蛋白的表达

方法:人脑标本12例,共计62支桥静脉.应用H-E染色、丽春红-维多利亚蓝组合染色观察桥静脉SMC的组织学特点,运用免疫组织化学显色、免疫荧光化学显色和免疫印迹法检测平滑肌特异标记物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果:桥静脉管壁中膜可见散在、孤立的SMC,大多呈纵切面,α-SMA在桥静脉中免疫反应阳性;桥静脉流出端硬脑膜侧α-SMA表达高于蛛网膜侧.结论:桥静脉管壁中有SMC的存在,且分布不对称.     

三氧化二砷减轻支气管哮喘小鼠气道重塑及基质金属蛋白酶-9表达

气道重塑是支气管哮喘的典型特征之一,主要因气道壁结构的改变,形成不可逆的气流阻塞和持续性气道高反应,导致肺功能下降,故预防和逆转哮喘的气道重塑具有重要意义.     

三七透明质酸钠凝胶干预硬膜外瘢痕中α-平滑肌肌动蛋白的表达

背景:脊柱椎板减压后硬膜外瘢痕是导致继发性椎管狭窄的重要原因之一。研究证实局部应用三七凝胶能有效预防术后硬膜外瘢痕粘连的形成。目的:进一步验证三七透明质酸钠凝胶在家兔硬膜外瘢痕组织中α-平滑肌肌动蛋白表达的影响。方法:大耳白品系家兔96只,随机方法分为4组,制作家兔椎板切除模型,分别在兔硬膜囊周围涂抹生理盐水、三七浓缩液、透明质酸钠、三七透明质酸钠凝胶各0.5 mL,用药后1,2,4,8周取材,采用免疫组织化学方法分析α-平滑肌肌动蛋白抗体的表达。结果与结论:用药1,2周时,与生理盐水组比较,其他3组α-平滑肌肌动蛋白抗体表达明显降低(P0.01或P0.05),三七透明质酸钠凝胶组与三七组、透明质酸钠组差异不显著(P0.05);用药4,8周时,三七透明质酸钠凝胶组α-平滑肌肌动蛋白抗体表达明显低于其他3组(P0.01或P0.05),三七组、透明质酸钠组与生理盐水组差异不显著(P0.05)。结果证实三七透明质酸钠凝胶抑制α-平滑肌肌动蛋白的表达,减轻瘢痕挛缩。     

红景天抑制阿霉素肾病大鼠肾小管间质α平滑肌肌动蛋白表达

目的探讨红景天对阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞表型转化的作用。方法用阿霉素诱导制成大鼠肾病模型,红景天治疗组第4周起喂服诺迪康胶囊[即圣地红景天0.672g/(kg.d)],对照组及肾病组喂水[3mL/(kg.d)],于第4、8、12、16和20周末分批处死大鼠,观察肾组织病理变化,检测肌成纤维细胞(MFB)的标记蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肾小管间质中的表达。结果16周肾病组大鼠肾小管间质α-SMA半定量为6.24±0.57,明显高于红景天治疗组3.84±0.28(P<0.01),且与小管间质损害程度相关(r=0.872,P<0.01)。结论红景天能抑制肾小管间质细胞表型转化,对肾间质的纤维化有较好的防治作用。     

白蛋白超载诱导近端肾小管上皮细胞表达α-平滑肌肌动蛋白

目的：探讨白蛋白超载是否可以诱导近端肾小管上皮细胞（PTCs）向成肌纤维细胞转化（EMT）。方法：大鼠近端肾小管上皮细胞株NRK52E培养至70％融合或完全融合时，用不同浓度（0-30 g/L）去脂牛血清白蛋白(dBSA)超载144 h。NRK52E形态和结构改变用光镜和电镜观测。上皮细胞标记抗原E-钙黏蛋白和β-连环蛋白，以及成肌纤维细胞标记抗原α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达用免疫荧光和Western 印迹法检测。结果：dBSA超载可诱导未完全融合NRK52E表达α-SMA，少数细胞变为长梭形，但α-SMA 的表达不呈剂量依赖性。dBSA超载处理不能诱导完全融合的NRK52E表达α-SMA，细胞形态也无改变。dBSA超载完全或未完全融合NRK52E均不能抑制E-钙黏蛋白和β-连环蛋白表达，电镜显示这些细胞仍保持上皮细胞结构，包括微绒毛和紧密连接。结论：白蛋白超载可以诱导PTCs表达α-SMA，促进EMT，但不能诱导PTCs完全转化为成肌纤维细胞，细胞完全融合可抑制白蛋白超载诱导PTCs表达α-SMA。     

α-平滑肌肌动蛋白在良、恶性卵巢肿瘤中的表达

肌动蛋白是能聚合成微丝含量丰富的细胞内蛋白质。微丝对骨骼细胞的结构、细胞能动性及形成是必不可少的。在脊椎动物细胞中至少有6种肌动蛋白。α-平滑肌肌动蛋白(α-SmA)是其中之一种。 本文通过免疫组化染色法及使用抗α-SmA单克隆抗体对α-SmA行免疫过氧化物酶法分析,研究了3例人正常卵巢及14例赘生性卵巢肿瘤,3例非赘生性卵巢肿瘤,比较α-SmA在人良、恶性卵巢组织中的表达。发现在正常人卵巢中,α-SmA存在于血管壁、肌纤维及卵泡周围的基质细胞中,良性卵巢肿瘤中的α-SmA主要来源于血管壁,整个肿瘤的血     

气道上皮IL-25促进哮喘气道重塑

目的:通过检测白细胞介素-25(IL-25)在嗜酸细胞性哮喘(EA)及非嗜酸细胞性哮喘(NEA)患者的血清、诱导痰及气道上皮中的表达,探讨其在支气管哮喘气道重塑中的作用。方法:选取初诊的哮喘患者55例,健康对照组27例,所有受试者均进行肺通气功能检查,然后采集空腹静脉血及诱导痰。据诱导痰中嗜酸性粒细胞(EOS)的比例将哮喘患者分为EA组和NEA组。采用ELISA检测血清及诱导痰中IL-25的水平,同时对其中的10例EA组患者、10例NEA组患者及10例健康对照者行电子支气管镜气道黏膜活检,免疫组织化学技术分析IL-25在气道上皮的表达,HE染色测量气道重塑的重要指标-基底膜厚度,并行血清及诱导痰中IL-25的水平与基底膜平均厚度的相关性分析。结果:与正常对照组相比,EA和NEA组哮喘患者的肺功能轻度受损。ELISA结果显示哮喘患者血清及诱导痰中IL-25的水平明显高于对照组(P<0.05),而EA和NEA组哮喘患者间差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学结果显示哮喘患者气道上皮IL-25的表达明显高于对照组,HE染色显示气道黏膜下的基底膜厚度明显增加(P<0.05)。相关性分析显示哮喘患者血清及诱导痰中IL-25水平与气道黏膜下基底膜平均厚度成正相关。结论:IL-25可能有促进哮喘气道重塑的作用,嗜酸性粒细胞与基底膜厚度无明显相关性,其在哮喘气道重塑中的作用可能是有限的。     

活化型肝星状细胞中miRNA-193下调α-平滑肌肌动蛋白的表达

目的:研究活化型肝星状细胞(HSC)中miRNA-193(miR 193)下调肝纤维化相关基因的表达。方法:将大鼠miR-193的前体序列(pre-miR-193)克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经酶切和DNA测序鉴定,获得质粒pcDNA3.1-miR-193;通过脂质体转染法将质粒转染到大鼠的活化型肝星状细胞(HSC-T6)中,采用荧光素酶报告基因分析法和免疫印迹检测肝纤维相关基因的表达。结果:构建的真核表达载体pcDNA3.1-miR-193经酶切鉴定及DNA测序显示,目的片段的大小与预期结果一致;荧光素酶报告基因分析法和免疫印迹检测显示,重组质粒转染到活化型H-SC-T6中后,肝纤维化相关基因的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达呈明显下降趋势,而胶原蛋白Ⅰα1和Ⅰα2的下调作用不明显。结论:miR-193能抑制活化型肝星状细胞中肝纤维化相关基囚α-SMA的表达。     

肝细胞生长因子对肝纤维化进程中肝细胞再生及α平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的:探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在大鼠肝纤维化进程中对肝细胞再生及α平滑肌肌动蛋白(alph smooth mucle actin,α-SMA)表达的影响.方法:将SD大鼠随机分为2组:对照组(n=20)肝70%切除后腹腔注射CCl4和生理盐水8周;实验组(n= 20)肝70%切除后腹腔注射CCl4和HGF 8周.术后8周取残肝行HE、Masson、α-SMA免疫组化染色及电镜观察.结果:HE显示,实验组肝再生指数较对照组明显升高(P<0.05),而Masson和α-SMA免疫组化染色分别显示胶原纤维、α-SMA的表达减少(P<0.05).电镜显示,实验组肝细胞有内大量脂滴,间质胶原纤维减少;肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)内脂滴较对照组减少.结论:在肝纤维化进程中,HGF可促进肝细胞增殖,抑制HSC活化,减少胶原纤维的形成和α-SMA的表达.     

氨基胍降低肺纤维化大鼠肺成纤维细胞表达α-平滑肌肌动蛋白

肺纤维化主要的病理变化是肺间质中成纤维细胞活化为肌成纤维细胞（Myofibroblast，MF）及大量细胞外基质聚集。已知转化生长因子-β1（Transforming growth factor-beta 1，TGF-β1）是诱导肺成纤维细胞表达MF的标志性蛋白-平滑肌肌动蛋白α-smooth muscl eactin，α-SMA）的最重要的细胞因子。近年来一氧化氮（Nitric oxide，NO）在肺纤维化中的作用日益受到关注。研究者多以一氧化氮合酶（Nitric oxide synthase，NOS）抑制剂和NO的供体物质作为工具药，探讨NO与肺纤维化的关系。     

1,25-二羟维生素D_3减轻哮喘小鼠的气道重塑

目的探讨1,25-二羟维生素D3(1,25(OH)2D3,VD)对哮喘小鼠气道重塑及其肺组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的干预作用及其机制。方法建立慢性哮喘小鼠模型,将小鼠随机分为对照组、哮喘组、地塞米松(DEX)组及VD组。HE染色观察各组气道结构;用计算机图像分析系统评价各组气道重塑;用明胶酶谱法及RT-PCR法检测各组的MMP-9的活性及其mRNA表达。结果 (1)哮喘组出现炎性细胞浸润增多、上皮细胞脱落及平滑肌细胞层增厚等气道重塑改变,而DEX组及VD组均可部分逆转上述病理改变;(2)DEX组及VD组的支气管内壁厚度、平滑肌层厚度和平滑肌细胞核数显著低于哮喘组,但仍高于对照组(P<0.05);(3)DEX组及VD组肺组织MMP-9的活性分别为对照组的(2.24±0.16)倍及(3.46±0.09)倍,而哮喘组是对照组的(7.87±0.09)倍(P<0.05);(4)各组MMP-9mRNA相对定量分别为对照组(0.57±0.08)、哮喘组(5.74±0.13)、DEX组(2.63±0.11)及VD组(3.16±0.09),且两两比较均P<0.05。结论 1,25(OH)2D3可显著减轻哮喘气道...     

多肽类化合物Urantide对动脉粥样硬化大鼠心脏组织中骨桥蛋白和α平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的 观察Urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠心脏组织中骨桥蛋白(OPN)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨其防治大鼠心肌纤维化损伤的作用机制.方法 选取120只3周龄SPF级健康雄性Wistar大鼠,高脂饲料饲养及腹腔注射维生素D3(Vit D3)的方法建立AS大鼠模型,按照随机化原则分为:对照组...     

哮喘小鼠气道上皮TSLP表达及激活DCs加重气道炎症的研究

目的 研究支气管哮喘小鼠气道上皮中胸腺间质淋巴细胞生成素(TSLP)表达,探讨其对哮喘小鼠肺部炎症的影响.方法 BALB/c小鼠分为生理盐水对照组、哮喘模型组和TSLP中和抗体干预组.通过气道反应性和肺组织病理学评价哮喘模型;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)上清中IL-4、IL-5和IL13的含量;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定肺组织中TSLP mRNA的表达;免疫组化及Western blot法测定肺组织中TSLP蛋白的表达;流式细胞术检测BALF中树突状细胞(OCs)表面CD40、CD80、CD86的表达水平.结果 小鼠气道反应性增高和肺组织病理学检查结果均符合哮喘的典型表现证实造模成功;哮喘组BALF中IL-4、IL-5和IL-13的水平显著高于正常组(P<0.05),且TSLP与其成正相关;与正常对照组相比,哮喘组气道上皮TSLPmRNA和蛋白高表达,两组间差异有统计学意义(P<0.05);哮喘组BALF中DCs表面CD40、CD80、CD86表达明显高于正常组(P<0.05).TSLP中和抗体干预后,BALF中DCs表面CD40、CD80、CD86表达明显减低,并进一步减少IL-4、IL-5和IL-13的表达.结论 哮喘气道上皮中TSLP表达增高,TSLP通过上调DCs表面CD40、CD80、CD86的表达,激活DCs诱导CD4~+T细胞向Th2分化发育,与加重哮喘的气道炎症有关;TSLP抗体干预可阻断DCs的活化,减少Th2细胞因子的分泌,这些因素可能与减轻哮喘炎症反应有关,为哮喘治疗途径提供新的思路.     

α-平滑肌肌动蛋白在人胚心流出道早期发育中的表达

目的 探讨人胚早期心流出道心肌和流出道心内膜垫内α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达规律及其意义. 方法 32例C10～C16期[Carnegie分期法,受精后(22±1～37)d]人胚心连续切片,经抗α-SMA、抗α-横纹肌肌动蛋白(α-SCA)、抗肌球蛋白重链(MHC)抗体免疫组织化学染色,观察流出道重塑过程中α-SMA在心肌与心内膜垫内的表达规律. 结果 人胚发育C10～C15期,心包腔背侧脏壁上皮不断分化为心肌细胞添加至流出道远端,这些心肌细胞α-SMA的表达早于α-SCA和MHC.C16期,流出道嵴近心肌处出现α-SMA强阳性细胞,相邻的心肌细胞伸出突起与其相连.C12～C15期,α-SMA阳性细胞逐渐迁入流出道心内膜垫内,同时可见流出道内皮转为α-SMA阳性,向间充质细胞分化.不同来源的间充质细胞共同参与形成螺旋状流出道嵴. 结论 α-SMA可作为心肌细胞早期分化的标志;流出道嵴内α-SMA阳性细胞可能部分来自神经嵴,部分为正在向间充质细胞分化的内皮细胞.     

氨基胍降低肺纤维化大鼠肺成纤维细胞表达仅α-平滑肌肌动蛋白

摘要：目的 探讨氨基胍（Aminoguanidine, AG）对转化生长因子-β1（Transforming growth factor -beta1, TGF-β1）诱导大鼠纤维化肺成纤维细胞表达 -平滑肌肌动蛋白（ -smooth muscle actin, α-SMA）的影响。方法 用MTT法选择药物浓度。应用免疫细胞化学技术测定α-SMA阳性细胞百分率，用Motic图象分析系统测定其平均积光灰度值。应用流式细胞技术测定单个细胞表达α-SMA的均道值。结果 α-SMA阳性细胞百分率、平均积光灰度值及均道值AG单独刺激组与对照组比无明显差异，TGF-β1单独刺激组（10ng/ml）明显高于对照组（P＜0.01）；AG（500μM）+ TGF-β1（10ng/ml）联合刺激组低于TGF-β1单独刺激组（P＜0.05）。结论 AG单独作用不影响大鼠纤维化肺成纤维细胞表达α-SMA，但是AG能够削弱TGF-β1诱导大鼠纤维化肺成纤维细胞表达α-SMA的能力。     

α-平滑肌肌动蛋白在实验性放射线大鼠肾病组织中的表达和意义

一、材料和方法.1．实验模型建立：按文献[1]的方法制作放射性肾病动物模型。6周雄性Wistar大鼠（日本SLC公司,n=32）被随机分成对照组（n=12）和照射组（n=20）,全麻后开腹将右肾切除,暴露左肾,给予X线25 Gy单次照射。照射后1、3、6、9个月4个时间点分别处死各组动物。