EZH2基因在膀胱移行细胞癌细胞株和癌组织标本中的表达及意义

目的 探讨EZH2基因在膀胱癌发生及进展中的作用. 方法 应用RT-PCR、蛋白质印迹及免疫细胞化学方法,以前列腺癌细胞株PC-3M作为阳性对照,检测EZH2基因在人膀胱移行细胞癌细胞株T24、EJ、MGH-U1、BIU-87中的表达;采用RT-PCR方法检测45例膀胱移行细胞癌和12例正常膀胱黏膜组织中EZH2基因表达情况.45例膀胱移行细胞癌中表浅性癌(Tis、Ta、T1)31例(68.9%),浸润性癌(T2～T4)14例(31.1%);病理分级G1 13例(28.9%),G2 21例(46.7%),G3 11例(24.4%). 结果 4种膀胱癌细胞株中均有EZH2基因表达.EZH2基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达率(82.2%)明显高于正常膀胱黏膜(8.3%,P<0.05),在表浅性膀胱癌中的表达率为74.2%,浸润性膀胱癌中为100.0%,差异无统计学意义(P>0.05).EZH2基因在G1,G2和G3级肿瘤中的表达率分别为61.5%,85.7%和100.0%.随细胞分级程度升高.EZH2表达率有增加趋势,但差异无统计学意义(P>0.05). 结论 EZH2基因可能在膀胱癌的发生及进展中起重要作用,可能成为膀胱癌一个潜在的基因治疗靶点.     

钙网蛋白在膀胱移行上皮细胞癌中的表达和意义

目的 探讨钙网蛋白(CRT)在膀胱移行上皮细胞癌组织和尿液中的表达和临床意义.方法 免疫组织化学和Western blot检测正常膀胱组织(n=8)和膀胱移行上皮细胞癌组织(n=16)CRT的表达.Western blot检测膀胱移行上皮细胞癌患者尿液(n=37)和非膀胱癌患者(n=42)及其中21例膀胱移行上皮细胞癌患者术后3～7 d尿液CRT的表达.结果 膀胱移行上皮细胞癌组织较正常膀胱组织CRT的表达增加,膀胱移行上皮细胞癌患者尿液的CRT阳性率为70.27%,非膀胱癌患者尿液的CRT阳性率为22.73%,正常人尿液CRT阳性率为15.00%.尿液CRT诊断膀胱癌的敏感性和特异性分别为70.27%和80.95%.21例膀胱移行上皮细胞癌患者术后尿液的阳性率为52.94%.结论 CRT在膀胱移行上皮细胞癌诊断中有一定的临床意义,并可能与预后相关.     

膀胱移行细胞癌中Survivin与Ki-67、p53的表达及临床意义

目的 探讨膀胱移行细胞癌中Survivin、p53及Ki-67的表达与膀胱移行细胞癌临床病理特征的关系及其临床意义. 方法 用免疫组织化学方法 检测88例膀胱移行细胞癌与10例正常膀胱黏膜组织中Survivin、p53及Ki-67的表达,并用RT-PCR方法 验证其中30例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜组织中Survivin的表达. 结果 免疫组织化学方法 显示在膀胱移行细胞癌中Survivin、p53阳性表达率分别为63.6%(56/88)和45.5%(40/88),正常膀胱黏膜组织中均无表达,差异有统计学意义(P<0.01),且Survivin的表达与膀胱癌的临床分期密切相关(P<0.05).膀胱癌组织中Ki-67增殖指数(PI)为20.4士10.7,正常膀胱黏膜组织中为0.RT-PCR方法 显示在30例膀胱移行细胞癌中Survivin阳性表达率为100%,而正常膀胱黏膜组织中均无表达.结论 Survivin与膀胱癌的恶性程度有关,与p53及Ki-67共同参与了膀胱移行细胞癌的发生、发展及进程.     

Notch-2在甲状腺乳头状癌中的表达

目的:探讨Notch-2在甲状腺乳头状癌中的表达特点及其生物学意义。方法:应用RT-PCR法、免疫荧光法和Western-blot法,检测Notch-2人甲状腺乳头状癌与正常甲状腺组织标本中mRNA和蛋白的表达情况。结果:甲状腺乳头状癌组织中Notch-2 mRNA的表达明显低于正常甲状腺组织;免疫荧光法测定,Notch-2在正常甲状腺组织中表达呈强阳性,甲状腺乳头状癌组织中呈弱阳性;Western blot分析发现,Notch-2 mRNA在甲状腺乳头状癌中的表达低于正常甲状腺组织。Notch-2基因及蛋白表达在甲状腺乳头状癌组织和正常甲状腺组织之间明显不同。结论:在甲状腺乳头状癌组织中,Notch-2 mRNA及蛋白表达均下调,提示Notch-2信号通路受到普遍抑制,该基因在甲状腺癌发生、发展中起抑癌作用。     

膀胱移行细胞癌中PKM2与多聚嘧啶串结合蛋白的表达及其临床意义

目的 探讨PKM2与多聚嘧啶串结合蛋白(PTB)在膀胱移行细胞癌中的表达及意义.方法 半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定PKM2和PTB mRNA在不同分级膀胱癌组织和膀胱癌细胞株中表达水平的变化;Western blot法测定PKM1、PKM2和PTB蛋白表达水平的变化;免疫组织化学方法检测膀胱移行细胞癌组织及正常膀胱组织中PKM1、PKM2与PTB的表达差异.结果 PKM2与PTB的mRNA水平和蛋白水平在膀胱移行细胞癌中明显增高,以高分级癌组织和癌细胞株中最为明显.免疫组织化学显示膀胱移行细胞癌组织PKM2阳性率为84.4%(38/45),高于正常膀胱黏膜组织60.0%(27/45),P＜0.05;PTB在膀胱移行细胞癌组中的阳性率为95.6%(43/45),高于正常膀胱粘膜组织55.6%(25/45),P＜0.05,且PKM2的表达与PTB呈正相关.结论 PKM2与PTB在膀胱移行细胞癌组织中呈高表达,两者的表达呈正相关,提示PTB可能通过对PKM2的选择性剪接而调控膀胱癌细胞的能量代谢.     

硒结合蛋白在膀胱癌中的表达及临床意义

目的 探讨硒结合蛋白-1(Selenium binding protein 1,SBP1)在不同膀胱组织中的表达情况及其临床意义.方法 运用Western blot法检测膀胱癌组织、膀胱黏膜良性病变组织及正常膀胱黏膜组织中的SBP1的表达,并分析其表达差异性.结果 SBP1在膀胱癌组织中的表达明显低于膀胱黏膜良性病变组织及正常膀胱黏膜(P＜0.05),且浅表性膀胱癌组织表达阳性率高于浸润性膀胱癌,无淋巴结转移的膀胱癌组织表达阳性率高于具有淋巴结转移的膀胱癌组织.结论 SBP1在膀胱癌组织中表达下调,膀胱癌的发生、进展可能与SBP1的表达抑制有关.     

SHH和PTCH蛋白在膀胱移形细胞癌中的表达及其意义

目的 探讨Hedgehog信号通路中SHH和PTCH蛋白在膀胱移行细胞癌中的异常表达及其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法检测30例膀胱癌及10例正常膀胱黏膜中SHH和PTCH蛋白的表达情况，并分析其阳性率与肿瘤分级分期的关系。结果 SHH和PTCH蛋白表达于膀胱移行细胞癌细胞的胞质，阳性表达率分别为53．33％和60．00％，正常膀胱黏膜中未见两者的阳性表达；SHH、PTCH蛋白在表浅性膀胱癌的阳性表达率分别为70％和75％，高于浸润性膀胱癌（P〈0．05）；SHH、PTCH蛋白在高中分化膀胱癌的阳性表达率分别为68％和79％，高于浸润性膀胱癌（P〈0．05）。结论 SHH和PTCH蛋白在膀胱癌中过度表达，两者的阳性率与膀胱癌的分级分期有关，提示Hh通路的激活可能部分参与膀胱癌的发生过程。     

膀胱癌组织中环氧化酶-2表达及与微血管形成的定量关系

目的探讨膀胱移行细胞癌组织中COX-2表达与微血管形成的定量关系。方法应用免疫组化方法对68例原发性膀胱癌及10例正常膀胱黏膜组织标本中COX-2进行检测,并对32例浸润性膀胱癌组织中微血管计数。结果膀胱癌组织COX-2阳性表达率63.2%(43/68),正常膀胱黏膜组织COX-2表达均为阴性。低分化和浸润性癌组织中COX-2阳性表达率显著高于高分化和表浅癌组(P值均<0.01);有血管浸润性癌组COX-2阳性表达率明显高于无血管浸润癌组(P<0.01)。32例浸润性膀胱癌组织中血管形成定量为(61.5±19.6),并与COX-2表达密切相关(P<0.01)。结论COX-2表达与肿瘤浸润及癌细胞的分化程度及癌组织中微血管计数密切相关。     

Notch-1和Jagged-2基因在先天性巨结肠中的表达及意义

目的研究先天性巨结肠症（HD）患儿各段肠管中Notch-1及Jagged-2的表达情况,初步探讨Notch-1及Jagged-2表达与HD发生的可能关系。方法选取2005-2010年间在中国医科大学附属盛京医院行手术治疗的HD患儿结肠标本共30例．将HD患儿正常段肠管设为对照组．移行段及痉挛段肠管设为实验组,应用免疫组织化学（免疫组化）染色、Westernblot及RT-PCR法观察Notch-1及Jagged-2在各肠段的表达情况。结果免疫组化染色示HD患儿正常段肠管的神经节细胞中有大量Notch-1及Jagged．2阳性细胞的表达．而在痉挛段肠管中没有这两种细胞的表达．移行段肠管中可见少量Notch-1及Jagged-2阳性细胞的表达。Westeinblot结果显示Notch-1和Jagged-2蛋白在痉挛段肠管相对表达量分别为0．19±0．02和0.13±0．04．明显少于移行段肠管和正常段肠管（0．58±0．05和0．52±0．04;0．72±0．04和0．69±0．04）（P〈0．05）。RT—PCR结果显示,Notch-1及Jagged-2的mRNA水平与蛋白表达一致。结论HD患儿痉挛段肠管中Notch-1及Jagged-2的表达缺失可能与HD的发生有关。     

survivin在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的 探讨凋亡抑制基因survivin在膀胱移行细胞癌中的表达及意义.方法 膀胱移行细胞癌组87例,20例正常正常膀胱黏膜作为对照,采用免疫组织化学方法检测survivin蛋白表达,然后分析survivin蛋白在膀胱癌组织中的表达情况,以及随着不同临床分期和病理分级表达的变化.结果 所有膀胱 癌患者平均年龄56.1岁,其中男性患者48例.免疫组织化学分析表明,survivin蛋白表达在细胞的细胞核.膀胱癌组织中survivin表达明显高于正常对照组.随着临床分期的进展,survivin表达上升.结论 survivin 在膀胱移行细胞癌的生物学行为中起重要作用,survivin与膀胱移行细胞癌的恶性进展有关.     

The Notch signaling pathway is related to neurovascular progression of pancreatic cancer

OBJECTIVE: To analyze the potential role of the Notch signaling pathway in pancreatic cancer angiogenesis and invasion. BACKGROUND: Angiogenesis, pain, and early neuroinvasion are clinical features of pancreatic cancer. Blood vessels and nerves develop together and use common routes through the organism. The Notch pathway (Notch-1/4, Jagged-1/2, Delta-1) appears crucial in this process. The current study analyzed the Notch pathway in pancreatic cancer and characterized its angiogenic and invasive effects. METHODS: Five PaCa cell lines were cultured for the in vitro experiments. Real-time quantitative RT-PCR was done to quantify mRNA expression in 31 human PaCa specimens, and immunohistochemistry was used to localize protein expression within tumor specimens. Activation of the Notch signaling was done by transfection of PaCa cells with a constitutive active Notch-1 mutant (Notch-IC). Overexpression of Jagged and Delta was achieved by transfection of full-length cDNA. Spheroid assays were used to study angiogenesis and ELISAs to measure VEGF, bFGF, and angiogenin expression. Matrigel invasion assays were used to analyze tumor cell invasion. RESULTS: Notch-3 and Notch-4 mRNA were significantly (P < 0.001) overexpressed in PaCa. Immunohistochemistry revealed protein accumulation of Notch-1 as well. All ligands were significantly up-regulated. A positive immunosignal of ligands was seen in nerves, blood vessels, and ductal tumor cells. Transfection of PaCa cells with the constitutive active Notch-IC mutant and with Jagged-1 revealed increased levels for VEGF. Concomitantly, recombinant Jagged-1 increased sprouting of endothelial cells in the spheroid assay. CONCLUSION: The Notch pathway most likely regulates neurovascular development in pancreatic cancer. Activation of this signaling pathway by constitutive Notch-1 mutants and by Jagged-1 causes an angiogenic and invasive tumor phenotype. Specific blockade of Notch signaling may therefore be beneficial for patients with pancreatic cancer.     

膀胱移行细胞癌中候选肿瘤干细胞标记物USP22 mRNA水平定量分析及其与肿瘤分级的关系

目的：研究肿瘤干细胞标记物USP22 mRNA在不同级别膀胱移行细胞癌和正常膀胱黏膜中的表达差异．并探讨其与肿瘤分级,临床分期的关系。方法：分别抽提不同级别的膀胱移行细胞癌组织标本和正常膀胱黏膜组织标本的总RNA,经RT为cDNA后,采用qRT—PCR法检测USP22 mRNA的表达情况。结果：正常膀胱黏膜组织中USP22的表达明显低于膀胱肿瘤组织,几乎不表达;不同级别膀胱肿瘤组织中,低度恶性潜能的乳头状尿路上皮癌和低级尿路上皮癌中USP22的表达要明显高于其在高级尿路上皮癌中的表达;特别是Ⅲ级膀胱移行细胞癌组,USP22的表达仅略高于其在正常膀胱黏膜中的表达。结论：USP22可能是正常干细胞向肿瘤干细胞恶变的关键凋节分子,可能成为一个新的诊断移行上皮癌侵袭性的有效指标。干扰其蛋白质合成将成为一个抗肿瘤生长的新靶点。     

Intravesical instillation of doxorubicin hydrochloride and its incorporation into bladder tumors

We studied single dose intravesical doxorubicin instillation (50 mg. dissolved in 30 ml. saline) in 29 patients with bladder tumor and 2 with dysplasia of the bladder. The results demonstrated that 1) the levels of doxorubicin hydrochloride in extracts of tumors were significantly higher than those of histologically normal bladder tissues in all regions examined except the dome, 2) the incorporation concentration of the drug into the smallest tumor was 3-fold greater than that of larger tumors, 3) tissue concentration of the drug in histologically normal bladder tissues was 2.4-fold greater in patients with recurrent than with primary bladder tumors, and 4) a high concentration of the agent was noted in unifocal, multifocal and primary tumors classified as papillary noninvasive or invasive transitional cell carcinoma. These findings indicate that intravesical installation of doxorubicin hydrochloride can be incorporated to a high degree by relatively small papillary noninvasive or invasive transitional cell carcinoma located in almost all regions except the bladder dome.     

膀胱移行细胞癌中环氧化酶-2表达及其预后价值

目的探讨与膀胱移行细胞癌预后相关的新诊断方法。方法采用免疫组化SP法,检侧68例原发性膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱组织标本环氧化酶-2(COX-2)的表达,结合临床资料,探讨其相互联系以及其表达与预后的关系。结果68例膀胱移行细胞癌组织中COX-2阳性表达率为63.2%(43/68),与病理分级、临床分期、血管浸润有关(P<0.05),而与淋巴结是否转移无显著性差异(P>0.05);对照组10例正常膀胱黏膜COX-2表达均为阴性;COX-2表达阳性生存超过5年者(54.1%)明显低于COX-2表达阴性者(91.3%)(P<0.05)。结论COX-2表达与膀胱移行细胞癌的恶性程度密切相关,检测COX-2表达对判断膀胱移行细胞癌预后有重要意义。     

膀胱移行细胞癌组织端粒酶活性和增殖细胞核抗原的表达及意义

目的 探讨膀胱移行细胞癌（TCCB）组织中端粒酶活性和增殖细胞抗原（PCNA）的表达关系及临床意义。方法 采用TRAP－ELISA法及免疫组化方法测定58例TCCB组织的端粒酶活性和PCNA表达情况。结果 TCCB的端粒酶阳性率为86．2％（50／58），不同病理分级或临床分期之间差别无显著性意义（P＞0．05）；PCNA表达强度与分级或分期呈正相关（P＜0．05）；不同PC－NA表达强度的TCCB样品之间，端粒酶活性差别有显著性意义（P＜0．05），二者呈正相关。结论 TCCB组织中端粒酶活性与PCNA表达有较好的协同性，二者联合检测对TCCB的诊断治疗和估计预后有重要意义。     

Total cystectomy for urinary bladder cancer: clinicopathological study of 95 cases

Total cystectomy was performed on 95 patients with primary urinary bladder cancer between 1973 and 1983. Histopathological and prognostic studies were reviewed according to the general rules for clinical and pathological studies on bladder cancer. The cancer histological type were transitional cell carcinoma in 87 cases, squamous cell carcinoma in 5 cases, adenocarcinoma in 2 cases, and undifferentiated carcinoma in 1 case. The overall 5-year actuarial survival rate was 36.0%. As for the growth pattern of the bladder cancer, the 5-year survival rates for the patients with papillary non-invasive type (PNT), papillary invasive type (PIT), and non-papillary invasive type (NIT) were 100%, 25.8% and 34.8% respectively. As for the stage, the 5-year survival rates for the patients with pTa, pT1, pT2, pT3a, pT3b, and pT4 were 81.8%, 64.7%, 40.1%, 30.5%, 22.6% and 6.7% respectively. Of 87 patients with transitional cell carcinoma, the 5-year survival rates for the patients with grade 1, grade 2 and grade 3 were 100%, 43.0% and 32.1% respectively. Intramural lymphatic invasion and vascular invasion and intramural histopathological mode of spread were significant indicators of prognosis.     

PTEN在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义

日曲探讨膀胱移行细胞癌中PTEN的表达及其临床意义。方珐应用免疫组织化学（S-P）法对50例膀胱移行细胞癌组织和10例正常膀胱黏膜中PTEN蛋白的表达进行检测。结果膀胱癌组织中PTEN蛋白阳性表达率为54．0％（27／50），明显低于正常膀胱组织100．0％（10／10），两组间的差异有统计学意义（P〈0．01）；且其表达水平在不同病理分级、临床分期间也有显著差异（P〈0．01）。结论PTEN蛋白表达的缺失可能在膀胱移行细胞癌的发生及进展过程中起着重要作用，并影响其生物学行为；检测PTEN蛋白表达水平有助于膀胱癌的诊断和预后判断。     

膀胱癌WIF-1启动子甲基化状态及其与膀胱癌临床病理关系的研究

目的:研究Wnt抑制因子1(WIF-1)启动子甲基化状态对WIF-1蛋白表达的影响及其与膀胱癌的临床病理关系。方法:采用甲基化特异性PCR方法和免疫组织化学方法检测57例膀胱癌WIF-1启动子甲基化状态和WIF-1蛋白表达情况。以正常膀胱黏膜及腺性膀胱炎组织为对照。结果:膀胱癌、腺性膀胱炎和正常膀胱组织WIF-1启动子甲基化率分别为57.9%,15.0%和0,差异有统计学意义(P<0.01)。WIF-1启动子甲基化阳性率随肿瘤分级、分期的增加逐渐升高(G1、G2、G3级分别为20.0%、56.3%和86.7%;浅表性和浸润性肿瘤分别为43.8%和76%,P<0.01)。膀胱癌组织WIF-1基因启动子甲基化时WIF-1蛋白表达率明显低于未甲基化组(P<0.001,Kappa值为0.783)。WIF-1甲基化与未甲基化组膀胱癌患者之间的5年总生存率分别为60.6%和91.7%(P<0.05)。结论:膀胱癌WIF-1蛋白表达缺失或减少与WIF-1启动子甲基化密切相关。WIF-1启动子甲基化可能是膀胱肿瘤发生的早期事件,而且与肿瘤的进展有关,可作为膀胱癌患者预后判断分子标志物。     

MMP2及MMP9在膀胱癌中的表达及在侵袭转移中的作用

目的探讨ＭＭＰ２及ＭＭＰ９在膀胱癌中的表达及在侵袭转移中的作用。方法采用原位杂交方法观察人膀胱移行细胞癌（ＴＣＣＢ）ＭＭＰ２、ＭＭＰ９、ＭＴＭＭＰ１、ＴｉＭＰ１、ＴｉＭＰ２ｍＲＮＡ表达。结果ＴＣＣＢ组织中ＭＭＰ２、ＭＭＰ９、ＭＴＭＭＰ１、ＴｉＭＰ１及ＴｉＭＰ２表达显著高于正常膀胱上皮,其中ＭＭＰ２及ＭＭＰ９表达增加较ＴｉＭＰ２及ＴｉＭＰ１更显著。阳性表达细胞在肿瘤间质界面较多。随分级升高,ＭＭＰ２、ＭＭＰ９及ＭＴＭＭＰ１表达呈增加趋势,而ＴｉＭＰ１及ＴｉＭＰ２表达呈下降趋势。死亡患者ＭＭＰ２、ＭＭＰ９、ＭＴＭＭＰ１表达有显著升高,而ＴｉＭＰ１及ＴｉＭＰ２有显著下降。结论ＭＭＰ２及ＭＭＰ９参与ＴＣＣＢ侵袭和转移,具有较高的预后价值。