益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的干预

观察益气活血方对球囊损伤大鼠颈动脉狭窄的干预作用,初步探讨其作用机理。方法:SD大鼠48只,用2.0F球囊导管自右股动脉插管建立大鼠左颈动脉球囊损伤模型,中药各组自手术前一天灌胃给药。每组动物于相应时相点麻醉心脏放血处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和Masson染色。然后输入HMIAS-2000型全自动彩色图像分析系统,观察动脉球囊损伤后相关指标的变化,统计分析益气活血方对其的影响。结果:益气活血方各组大鼠术后28天内膜增生面积、内膜增生平均厚度、残余管腔面积/总管腔面积与模型组相比差别有极其显著的意义(P<0.01);益气活血方各组大鼠术后28天胶原增生情况与模型组相比差异有显著性(P<0.05)。结论:益气活血方可显著防止或减轻球囊扩张大鼠颈总动脉所致的管腔狭窄,而且大剂量益气活血方作用更明显。     

益气活血方对高脂大鼠颈总动脉球囊损伤后血管内膜增生的影响

目的观察益气活血方对高脂大鼠颈总动脉球囊损伤后血管内膜增生的抑制作用。方法将90只雄性SD大鼠随机分为模型组、阿司匹林组及益气活血方大、中、小剂量组。大鼠给予高脂饲料喂养30 d,造成高脂血症;然后经右股动脉穿刺球囊扩张损伤大鼠左颈总动脉,造成颈总动脉管腔的狭窄。手术前1 d开始给药,每组动物于术后5、14、28 d处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色。结果术后5 d血管狭窄不明显,术后14 d和28 d血管内膜明显增厚,管腔狭窄,模型组尤为明显。益气活血方干预后,大剂量组内膜增生平均厚度,残余管腔面积/总管腔面积与模型组相比,P〈0.01,其余各用药组与模型组相比,P〈0.05,结论益气活血方可显著抑制高脂大鼠颈总动脉球囊扩张后所致的血管内膜增生,益气活血方大剂量作用更明显。     

益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后PCNA表达的影响

目的观察损伤血管细胞核增殖抗原（PCNA）的表达情况,探讨益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉内膜平滑肌细胞（VSMCs）增殖的干预机制。方法随机将108只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、阿司匹林组及益气活血方大、中、小剂量组。球囊损伤大鼠颈总动脉前给予高脂饲料喂养30d,造成高脂血症;然后经右股动脉穿刺球囊扩张损伤大鼠左颈总动脉,造成颈总动脉管腔的狭窄。手术前1d开始给药,每组动物于术后（5d、14d、28d）处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和免疫组织化学SABC法检测PCNA的表达。结果各组PCNA均表达阳性,模型组明显增多,用益气活血方干预后14d和28dPCNA表达量与模型组比较有统计学意义（P〈0.05）。结论益气活血方对球囊损伤后动脉血管内膜VSMCs增生有明显的抑制作用,其机制可能与下调细胞核增殖抗原的表达,抑制血管内膜VSMCs的细胞分裂周期进程有关。     

益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后CyclinB_1异常表达的影响

目的：观察损伤血管细胞周期蛋白Β1（CyclinB1）的表达情况,探讨益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉内膜平滑肌细胞（VSMCs）增殖的干预机制。方法：随机将90只雄性SD大鼠分为模型组,阿司匹林组,益气活血方大、中、小剂量组。球囊损伤大鼠颈总动脉前给予高脂饲料喂养30天,造成高脂血症;然后经右股动脉穿刺球囊扩张损伤大鼠左颈总动脉,造成颈总动脉管腔的狭窄。手术前1天开始给药,每组动物于术后（5d、14d、28d）处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和免疫组织化学SABC法检测CyclinB1的表达。结果：模型缓慢CyclinB1表达明显增多,用益气活血方干预后,14d和28dCyclinB1表达量与模型组比较差异有显著性（P〈0.05）。结论：益气活血方对球囊损伤后动脉血管内膜VSMCs增生有明显的抑制作用,其机制可能与下调细胞周期蛋白B1的表达,抑制血管内膜VSMCs的细胞分裂周期进程有关。     

益气活血解毒方对球囊损伤后大鼠颈动脉早期血管重构和炎性因子的影响

目的:观察益气活血解毒方对血管损伤后血管重构指标及炎性因子的干预作用。方法:采用球囊导管损伤大鼠左侧颈总动脉模型,动物随机分为假手术组、模型组、他汀组和益气活血解毒组。用药后7天行HE染色,观察血管壁各层面积和管腔内径,放免法检测血清单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、C反应蛋白(CRP)以及转化生长因子-β(TGF-β)的浓度。结果:与假手术组比,模型组内膜轻度增生(P<0.01),外膜明显增厚,面积变大(P<0.05),MCP-1、CRP、TGF-β含量显著升高(P<0.01);与模型组比,益气活血解毒方明显减少内膜面积(P<0.05),降低CRP、TGF-β的含量(P<0.01);阿托伐他汀显著降低TGF-β的含量(P<0.05)。结论:球囊损伤大鼠颈总动脉早期,外膜增生明显,内膜有轻度增生,但管腔内径无显著变化,血管重构主要表现为正性重构,并伴随MCP-1、CRP、TGF-β含量的显著上升。益气活血解毒方抑制新生内膜生成,可能与降低CRP、TGF-β的含量有关。     

黄芪甲苷对大鼠平滑肌细胞及颈动脉内膜增生的影响及机制研究

目的 通过细胞培养及建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,观察黄芪甲苷对血管平滑肌细胞(VSMCs)及血管内皮损伤后内膜增生的影响,并初步探讨黄芪甲苷抑制内膜增生的可能机制。方法 采用组织贴块法培养大鼠VSMCs,以重组大鼠肿瘤坏死因子(TNF-α,100 ng/m L)作为刺激因素,建立体外VSMCs增殖模型,应用CCK-8法检测黄芪甲苷(0、0.5、5、25、50μg/m L)对TNF-α诱导的VSMCs增殖能力的影响。采用Fogarty(2F)球囊导管制备大鼠颈总动脉球囊损伤模型,SD大鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪甲苷(20、40、60 mg/kg)组,各组于造模前3 d开始ig给药,连续给药17 d,术后第15天,取损伤颈总动脉进行HE染色,光镜下观察血管内膜的形态学变化,并用计算机图像分析系统测定管腔面积、内膜面积、内膜面积/中膜面积;采用免疫组织化学法检测内膜增殖细胞核抗原(PCNA)和血小板源性生长因子(PDGF-BB)的表达。结果 在TNF-α刺激下,VSMCs增殖活性与对照组相比均明显提高,差异显著(P0.01),经黄芪甲苷预处理后,各质量浓度黄芪甲苷组细胞增殖均受到抑制,与TNF-α组相比差异显著(P0.05),且抑制作用具有时间和浓度依赖性。颈总动脉球囊损伤模型中,模型组大鼠颈动脉内膜增生明显,管腔狭窄,与假手术组比较,内膜面积、内膜面积/中膜面积增大(P0.01),管腔面积减小(P0.01);与模型组比较,黄芪甲苷各剂量组内膜面积、内膜面积/中膜面积减小(P0.05、0.01),管腔面积增大(P0.05、0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠颈总动脉血管内膜PCNA、PDGF-BB的阳性表达明显升高(P0.01);与模型组比较,黄芪甲苷各组大鼠颈总动脉内膜PCNA、PDGF-BB的阳性表达明显降低(P0.05),且呈剂量依赖性。结论 黄芪甲苷能够以时间和剂量依赖方式抑制TNF-α诱导的VSMCs增殖;黄芪甲苷能够抑制颈总动脉球囊损伤大鼠颈总动脉内膜的增生,黄芪甲苷抑制生长因子PDGF-BB的表达可能是黄芪甲苷抑制球囊损伤大鼠颈总动脉内膜增生的机制之一。     

鹿蹄草总黄酮抑制动脉内膜增生的研究

目的 观察鹿蹄草总黄酮(tolal flavones of Herba Pyrdae,TFHP)抑制病理性动脉内膜增生,并初步探讨其作用机制.方法 采用小鼠颈总动脉结扎所致内膜增生和管腔狭窄模型和血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖试验(MTT法).结果 ICR小鼠颈总动脉结扎28 d成功复制出内膜增生和管腔狭窄,TFHP具抑制作用.HE染色切片图像分析显示,TFHP 50 mg/kg组颈总动脉管腔面积、内膜面积、中膜面积、相对管腔面积与模型组比较均无差异(P>0.05),但内膜/中膜面积比值明显减小(P<0.01);TFHP 100、200 mg/kg组内膜面积、内膜/中膜面积比值均较模型组减小(P<0.05,0.01),管腔面积、相对管腔面积均较模型组增大(P<0.01).免疫组化染色显示,与模型组相比,TFHP各组血管壁增殖细胞核抗原阳性细胞指数均减少(P<0.01).MTT法研究表明,小鼠颈总动脉平滑肌细胞培养48 h后,TFHP各组细胞增殖活性随TFHP浓度增加而减小,与对照组比较,均有显著差异(P<0.05,0.01).结论 TEHP能抑制病理性动脉内膜增生和管腔狭窄,可能与抑制VSMCs增殖有关.     

Ghrelin对球囊损伤大鼠颈动脉后狭窄的影响及机制

目的:观察Ghrelin对球囊损伤大鼠颈动脉狭窄的干预作用,初步探讨其作用机制。方法:选择健康雄性SD大鼠30只,建立大鼠颈总动脉球囊损伤模型,制模后随机分为假手术组、模型组、Ghrelin组,各为10只。腹腔注射给药30 d后取损伤侧颈总动脉,行天狼星红染色并测量管腔面积以判定血管腔狭窄程度;Westernblot检测血管壁Mfn-2蛋白表达。结果:(1)术后30 d,模型组血管内弹力板断裂,内膜及中膜尤其是中膜增生严重,管腔狭窄(46.53±9.78)%,Ghrelin组中膜增生及狭窄程度为(75.62±10.08)%组间比较,差异具有统计学意义(P0.05)(2)球囊扩张损伤颈动脉可明显下调Mfn-2蛋白表达(1.243±0.129)vs(0.634±0.097)。Ghrelin则能明显上调Mfn-2的表达(0.824±0.049 vs 0.634±0.097),组间比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:Ghrelin可抑制球囊损伤大鼠颈总动脉所致的管腔狭窄,同时能上调颈动脉平滑肌Mfn-2的表达,Ghrelin可能是通过上调Mfn-2的表达来抑制再狭窄的。     

益气活血方对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管壁的影响

目的：观察益气活血方对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管壁的影响。方法：SD大鼠48只。随机分成4组。用2．0F球囊导管自右股动脉插管建立大鼠左颈总动脉球囊损伤模型，治疗结束，麻醉，心脏放血处死大鼠，取损伤大鼠左颈总动脉，常规固定、包埋、切片，做HE染色和Masson染色。用HMIAS-2000型全自动彩色图象分析系统，观察动脉球囊损伤后不同时相点血管壁病理改变，进行比较分析。结论：成功复制球囊损伤术后颈总动脉再狭窄动物模型；益气活血方可显著防止或减轻大鼠颈总动脉球囊扩张后所致的血管狭窄，益气活血方大剂量作用更明显。     

冠心七味丸对大鼠血管球囊损伤再狭窄的治疗作用研究

目的:冠心七味片对心肌缺血再灌注损伤的预防及治疗提供实验依据。方法:将SD大鼠随机分为正常组、假手术组、心肌缺血再灌注损伤组(模型组)和冠心七味片高中低组,采用球囊损伤法制作颈动脉球囊损伤模型,球囊损伤组按设计剂量给药。连续灌胃给药7d后,取损伤段的颈总动脉,光学显微镜下观察各组血管的形态变化,并计算血管内膜、中膜的面积以及内膜/中膜的面积比,用ELISA检测试剂盒检测血清中MDA的水平。结果:正常组及假手术组内膜无增生,模型组内膜增生明显,导致管腔明显狭窄,其中冠心七味片中剂量组新生内膜面积/中膜面积之比均低于模型组(P0.01)。结论:冠心七味片对大鼠实验性心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。     

冠心通络方对球囊损伤动脉粥样硬化兔的实验研究

目的:观察冠心通络方对球囊损伤动脉粥样硬化(AS)兔动脉斑块的干预作用。方法:采用高脂饮食喂养并加以球囊损伤的兔AS模型,实验结束后测量内膜增生面积及内膜增生指数,并观察动脉内膜病理学变化。结果:①术后模型组内膜明显增厚,血管腔狭窄;冠心通络组以上改变较同期模型组显著减轻。②模型组内膜增生面积和内膜增生指数均显著高于冠心通络组。结论:冠心通络方能明显抑制球囊损伤后内膜增生,防止血管狭窄等作用。     

益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后VEGF动态变化的影响及意义

目的:观察损伤血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况,探讨益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后再狭窄的干预机制。方法:随机将160只雄性SD大鼠分为假手术组,阴性对照组,益气活血方大、中、小剂量组。首先自左颈外动脉球囊损伤大鼠左颈总动脉,后给予高脂饲料喂养30 d,造成动脉硬化,然后经右股动脉穿刺球囊扩张损伤大鼠左颈总动脉,造成颈总动脉再狭窄。手术前1 d开始给药,每组动物于术后(3 d、7 d、14d、28 d)处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和免疫组织化学SABC法检测VEGF的表达。结果:用药组VEGF表达明显增多,3 d、7 d和14 d益气活血方大剂量组VEGF表达量与阴性对照组、假手术组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:益气活血方对球囊损伤后大鼠颈动脉再狭窄有明显的防治作用,其机制可能与上调VEGF的表达,促进血管内皮细胞修复与新生有关。     

益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后bFGF表达的影响

目的:观察损伤血管后碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的表达情况,探讨益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后再狭窄的干预机制。方法:随机将160只雄性SD大鼠分为假手术组,阴性对照组,益气活血方大、中、小剂量组。首先自左颈外动脉球囊损伤大鼠左颈总动脉,后给予高脂饲料喂养30天,造成动脉硬化,然后经右股动脉穿刺球囊扩张损伤大鼠左颈总动脉,造成颈总动脉再狭窄。手术前1天开始给药,每组动物于术后(3天、7天、14天、28天)处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和免疫组织化学SABC法检测bFGF的表达。结果:血管损伤后第14天、28天用药组bFGF表达量与阴性对照组比较有显著性差异(P0.05)。结论:益气活血方对球囊损伤后大鼠颈动脉再狭窄有明显的防治作用,其机制可能与下调bFGF的表达,抑制血管平滑肌细胞增殖有关。     

冠心通络方对球囊损伤动脉粥样硬化兔的实验研究

目的：观察冠心通络方对球囊损伤动脉粥样硬化（AS）兔动脉斑块的干预作用。方法：采用高脂饮食喂养并加以球囊损伤的兔AS模型，实验结束后测量内膜增生面积及内膜增生指数，并观察动脉内膜病理学变化。结果：①术后模型组内膜明显增厚，血管腔狭窄；冠心通络组以上改变较同期模型组显著减轻。②模型组内膜增生面积和内膜增生指数均显著高于冠心通络组。结论：冠心通络方能明显抑制球囊损伤后内膜增生．防止血管狭窄等作用。     

冠通方通过干预NLRP3炎症小体信号通路对大鼠血管内膜损伤后再狭窄作用机制分析

目的：从NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路,探究冠通方改善大鼠血管内膜损伤后再狭窄的分子机制。方法：将大鼠随机分为假手术组、模型组、冠通方组、NLRP3激活剂组、冠通方+激活剂组,每组12只;用颈动脉球囊损伤术复制血管内膜损伤后再狭窄模型,各组大鼠经药物干预处理4周后,ELISA法检测大鼠血管白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平;HE染色观察颈动脉血管组织病理变化;增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色法检测血管平滑肌细胞增殖状况;RT-PCR法检测血管组织NLRP3mRNA、IL-1βmRNA表达;Western blot法检测血管组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、IL-1β、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)蛋白表达。结果：与假手术组相比,模型组大鼠颈总动脉血管组织内膜增生及管腔狭窄等病理损伤加重,内膜增生程度、炎症因子水平、血管平滑肌细胞增殖活性及NLRP3炎性小体信号通路活性升高(P<0.05)。冠通方干预治疗后,大鼠血管内膜增生、管腔狭窄等病理损伤减轻,内膜增生程度、炎症...     

中药复方对兔再狭窄模型内膜增生时相变化的影响

目的:探讨中药复方对新西兰白兔实验性血管成形术后再狭窄模型内膜增生时相变化的影响。方法:将新西兰白兔54只随机分为假手术组、模型组、中药组,采用1次球囊导管损伤方法制备兔颈动脉球囊损伤模型,于术后1W、2W、4W动脉造影取材,HE染色进行定量组织形态学分析;电镜观察超微结构。结果:损伤后1W时平滑肌细胞增殖向内膜迁移,内膜开始增生,2W时平滑肌细胞增殖达到高峰,4W时血管内膜增厚,以胶原纤维增生为主。与模型组相比,中药组在2W、4W时管腔面积明显增大、管腔的狭窄程度、内膜与中膜面积之和明显降低。结论:益气温阳、活血化瘀方可能通过抑制平滑肌细胞的增殖和胶原的合成,从而改善血管成形术后再狭窄。     

益气活血复方对兔颈总动脉球囊损伤后PDGF-B mRNA表达的影响

目的观察益气活血复方对兔颈总动脉内皮损伤后血小板源性生长因子-B(PDGF-B)mRNA表达的影响。方法将雄性新西兰白兔28只随机分为3组:空白组给予普通饲料喂养8周;模型组和益气活血复方组给予高脂饲料喂养6周后,用球囊拉伤法建立兔颈总动脉内皮损伤模型。第8周末处死动物,用RT-PCR法检测颈动脉损伤处PDGF-B mRNA的表达,HE染色观察颈动脉组织病理形态学改变。结果与模型组对比,益气活血复方可明显抑制动脉损伤后的内膜增殖反应,下调损伤处PDGF-B mRNA的表达水平(P<0.05)。结论益气活血复方可以显著减轻兔血管成形术后内膜增生,其机制可能与抑制PDGF-B mRNA表达有关。     

赤芍防止高脂喂养兔颈总动脉球囊损伤术后血管狭窄的实验研究

目的 观察赤芍提取物对高脂喂养兔颈总动脉球囊损伤术后血管狭窄有无防止作用。方法 采用Clowes方法建立兔颈总动脉球囊损伤模型,并给予赤芍提取物。免疫组化染色测定兔颈动脉新生内膜成分、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及巨噬细胞表达;血管特殊染色观察Ⅰ型胶原增生;图像分析系统测定新生内膜面积。结果赤芍提取物可减少PCNA阳性细胞数,抑制Ⅰ型胶原增生,减轻新生内膜形成。结论 赤芍对高脂喂养所致动脉粥样硬化兔颈总动脉球囊损伤术后再狭窄血管有显著防治作用。     

通冠胶囊对大鼠颈动脉球囊损伤术后血管内膜VEGF表达的影响

目的 探讨通冠胶囊对血管损伤后内膜增生及VEGF表达的影响.方法 制备大鼠左颈总动脉球囊损伤模型,将54只SD大鼠随机分为通冠胶囊组、盐水对照组和辛伐他汀对照组,于术后第4周、第8周和第12周处死动物.分别进行取材检测指标:HE染色及弹力纤维染色后光镜下观察管壁增生情况,计算机图像分析内、中膜面积及其比值观察通冠胶囊对新生内膜形成的影响.血管内皮生长因子(VEGF)免疫组织化学法检测明确损伤后血管内皮修复情况.结果 通冠胶囊组在4周、8周和12周时免疫组化VEGF表达较盐水对照组明显升高(均P<0.01),辛伐他汀组的变化趋势与通冠胶囊组相似.通冠胶囊组4周、8周与同时段辛伐他汀组比较无统计学差异(均P>0.05),12周较辛伐他汀组明显升高(P<0.05).球囊损伤后4周各组内膜增生明显,8周时形成的增生内膜减少,12周时形成的增生内膜明显减少.通冠胶囊组在损伤后4周、8周、12周形成的增生内膜较盐水对照组显著减少(均P<0.01),内膜面积与中膜面积的比值较盐水对照组明显降低(均P<0.01).结论 通冠胶囊可以促进大鼠颈总动脉球囊损伤处的VEGF的表达,并减少新生内膜的形成.     

益气温阳、活血化瘀方对兔血管成形术后再狭窄平滑肌凋亡的影响

目的:探讨益气温阳、活血化瘀方对家兔颈动脉内膜损伤后平滑肌细胞凋亡的影响.方法:将54只家兔随机分为模型对照组、中药防治组和假手术组,以球囊损伤家兔颈动脉的方法复制实验性血管成形术后再狭窄模型,各组进一步分为球囊损伤后1W、2W、4W三个时间点,HE染色进行定量组织形态学分析,TUNEL法观察平滑肌细胞的凋亡.结果:中药防治组与模型组相比.在2W、4w时管腔面积明显增大、管腔的狭窄程度、内膜与中膜面积之和显著降低,且血管平滑肌细胞凋亡数目显著增多.结论:益气温阳、活血化瘀方能促进实验性血管成形术后血管平滑肌细胞的凋亡,减轻血管管壁增厚及管腔狭窄程度,从而防治血管成形术后再狭窄.