温石棉对大鼠肺泡巨噬细胞膜脂质过氧化的研究

温石棉对大鼠肺泡巨噬细胞膜脂质过氧化的研究肖国兵，马藻骅，邱华士宁波市卫生防疫站３１５０１０众所周知，长期接触石棉尘可引起石棉肺、肺癌等，但其致病机制尚不明了。已有试验表明石棉纤维可增加巨噬细胞脂质样化［１］。肺泡巨噬细胞作为肺纤维化的主要反应细胞，...     

温石棉对肺泡巨噬细胞的脂质过氧化作用研究

采用硫代巴比妥酸法，探讨了茫崖及涞源温石棉对肺泡巨噬细胞的脂质过氧化作用，结果表明，两种温石棉与巨噬细胞温育后，其反应体系中丙二醛水平升高，且与石棉剂量及温育时间有关。说明两者可致肺泡巨噬细胞脂质过氧化，柠檬酸铝可明显抑制两种温石棉对细胞的损伤，但对其脂质过氧化作用的抑制则较弱，提示脂质过氧化与温石棉的细胞损伤作用似无直接联系。     

柠檬酸铝对温石棉致肺泡巨噬细胞酶释放的抑制作用

用柠檬酸铝溶液于室温下浸泡茫崖或涞源温石棉一小时，观察了两种温石棉致肺泡巨噬细胞酶释放能力的改变。结果表明，示经柠檬酸铝处理的茫崖或涞源温石棉，均可致肺泡巨噬细胞释放乳酸脱氢酶及酸性磷酸酶，该作用存在时间及剂量依赖关系。经柠檬酸铝处理后，两种温石棉致细胞释放两种酶的能力，随柠檬酸铝剂量增加而逐渐降低。表明柠檬酸铝能抑制温石棉对肺泡巨噬细胞的损伤作用。这为预防温石棉的危害提供了重要信息。     

温石棉对肺泡巨噬细胞膜Fc变体的影响

肺泡巨噬细胞可以一种或多种机制参与石棉相关疾病的发生过程。研究表明,巨噬细胞膜Fc受体与细胞的许多生物学功能有关,如花生四烯酸代谢及前列腺素的合成,触发细胞产生活性氧自由基及释放溶酶体酶。最近有人报道Fc受体还具有离子通道作用。因此,本研究拟就国产茫崖及涞源温石棉(简称茫棉及涞棉)对肺泡巨噬细胞膜Fc受体的影响进行了初步探讨。 1 材料与方法 1.1 温石棉的制备将来自茫崖及涞源石棉矿的长纤维石棉剪成1cm,置于冰冻切片机上切断,将切下的纤维置于60℃烤箱内烘干。用前以生理盐水稀释成一定浓度。     

温石棉纤维对AM毒作用与其分散度的关系

通过体外细胞培养的方法，观察到不同分散度的新康温石棉纤维（Ａ，Ｂ和Ｃ三种纤维长径小于２０μｍ分别为２７％，３６％和９５％）对免肺泡巨噬细胞（ＡＭ）的毒性作用不同，可致ＡＭ存活率降低，ＡＭ吞噬能力降低和致乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）溢漏增加，以分散度最高的石棉纤维Ｃ作用最强，纤维Ｂ次之，分散度最低的纤维Ａ作用最弱。结果表明温石棉纤维对ＡＭ的细胞毒作用与其分散度有关，与其表面积大小有关。     

Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞氧化损伤的缓解作用

目的 探讨Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞氧化损伤的影响。方法 应用支气管灌洗的方法获得大鼠肺泡巨噬细胞(AM),纯化后与终浓度50μg／ml的温石棉分别孵育2h和4h,在孵育的同时加入不同浓度的Oncolyn,检测AM中DNA损伤状况以及抗氧化酶SOD、GSH—Px的活性。结果 肺泡巨噬细胞与温石棉共同培养2h后,DNA损伤和SOD、GSH—Px活性增加,表现出彗星出现率和DNA迁移长度增加;当培养4h后,彗星出现率比培养2h更高,DNA迁移长度不再增加,而SOD、GSH-Px活性均下降。在AM与温石棉作用的同时加入不同浓度的Oncolyn后,DNA损伤减轻,抗氧化酶SOD、GSH—Px的活性上升。结论 Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞的氧化损伤有一定的缓解作用。     

食用油烟对实验动物脂质过氧化和巨噬细胞膜脂流动性的影响

为探讨食用油烟对巨噬细胞膜脂流动性的影响，选用ＳＤ大鼠于染毒柜中自然吸入食用豆油油烟，急性染毒，观察到油烟平均浓度为１．０５ｍｇ／ｍ＾３时，肺组织发生脂质过氧化，ＭＤＡ开始增加（Ｐ〈０．０５），平均浓度为９．５８ｍｇ／ｍ＾２，肺泡灌洗液中肺巨噬细胞脂膜流动性增加（Ｐ〈０．０１），且ＬＤＨ，ＡＣＰ酶的活力升高（Ｐ〈０．０５），吸入油烟浓度与各指标间有显著的剂量－反应关系。结果提示，食用油烟在本实验条     

温石棉与纤维水镁石矿物粉尘体外细胞毒性对比

目的比较温石棉与纤维水镁石矿物粉尘对肺泡巨噬细胞体外细胞毒性来评价纤维水镁石的安全性。方法采用体外细胞培养技术,测定细胞死亡率、乳酸脱氢酶及超氧化物歧化酶活力、细胞膜流动性、丙二醛含量,采用光学显微镜以及扫描电镜观察肺泡巨噬细胞形态变化。结果温石棉及纤维水镁石均产生了肺泡巨噬细胞毒性。结论作为温石棉代用品的纤维水镁石对肺泡巨噬细胞的作用也并不是绝对安全的。     

重铬酸钾对卵黄囊细胞膜脂质流动性的影响

为探讨重铬酸钾导致卵黄囊功能絮乱的机理,以１．６－二苯－１,３,５－已三烯（ＤＰＨ）为荧光探针,用荧光偏振技术观察重铬酸钾对大鼠卵黄囊细胞膜脂质流动性的影响。结果表明：重铬酸钾深度为１．０ｍｇ／Ｌ以上时,卵黄囊细胞膜脂质流动度（ＬＦＵ）降低（Ｐ〈０．０５）,胚胎发育受到抑制（Ｐ〈０．０５）,且都呈明显的剂量－效应关系。提示卵黄囊细胞膜脂质流动度改变可能是重铬酸钾对大鼠胚胎发育毒性的机理之一。     

石棉尘及保护剂对肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的影响

石棉尘及保护剂对肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的影响王为民，施中华，魏自来，孙义敏（８１１０１部队医院）本文通过石棉尘及保护剂对肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）产生几种细胞因子的影响，探讨石棉致病机理及保护剂的作用。１材料与方法（１）粉尘制备：四川石棉矿的温石棉（０...     

葡萄糖酸锌抗石英细胞毒作用的研究

为探讨葡萄糖酸锌（ＺｎＧ）抗石英尘细胞毒作用及可能的作用机制，作者采用体外细胞实验方法，观察了ＺｎＧ对肺泡巨噬细胞膜脂质过氧化、膜通透性、膜流动性及溶血作用的影响。结果表明，ＺｎＧ与ＳｉＯ２、肺泡巨噬细胞共孵后，抑制了肺泡巨噬细胞的脂质过氧化，使其膜通透性及流动性下降；ＺｎＧ与红细胞共孵后能降低石英的溶血作用。     

“克矽风药酒”抗细胞膜损伤作用的实验研究

采用体外细胞实验方法，观察了“克矽风”药酒对染尘大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）细胞膜流动性、通透性、存活率和红细胞溶血率的影响。实验结果表明，该药酒具有降低ＡＭ膜流动性、通透性及红细胞溶血率，提高ＡＭ存活率等作用。此研究为克矽风药酒疗效机制提供了实验依据。     

p53基因抑制染尘AM作用下2BS增殖活性和功能研究

研究野生型Ｐ５３基因对染石英尘肺泡巨噬细胞培养上清导 成纤维细胞非正常增殖和功能的影响,将体内,体外染尘ＡＭ上清加入人胚成纤维细胞中培养２４小时后,应用胆质体介导转染将野生型Ｐ５３基因导入继续培养２４小时。结果,转染Ｐ５３基因组２ＢＳ细胞增殖和胶原合成较未转染组受到抑制。     

六种生物膜稳定剂抑制石英对巨噬细胞膜破坏作用的体外实验

本文观察了六种生物膜稳定剂抑制石英对肺泡巨噬细胞膜的破坏作用。将家兔麻醉,无菌操作,行肺灌洗获取健康家兔的肺泡巨噬细胞。将细胞配制成10×10~5cells/ml悬液,置于CO_2孵育箱中培养。与临床治疗矽肺的药物(矽肺宁)作对比。通过测定细胞内外酸性磷酸酶(ACPase)含量变化,筛选五种试剂对膜具有最大稳定的浓度。分析结果表明,膜保护作用由强到弱的排列顺序是Zn~(++),Se,矽肺宁,VE,Mg~(++),Ca~(++)。本文结果提示,石英直接损伤肺泡巨噬细胞的生物膜,故任何能保护生物膜的试剂,对煤工矽肺的防治均可能有意义。     

经SiO2粉尘刺激的矽肺患者肺泡巨噬细胞中CTGF的表达及意义

[目的]通过矽肺病人肺灌洗液中巨噬细胞经SiO2粉尘刺激后,巨噬细胞及培养上清中CTGF的表达,探讨CTGF在矽肺纤维化过程中的作用。[方法]应用免疫细胞化学方法和酶联免疫吸附法检测巨噬细胞及培养上清的CTGF的表达。[结果]处理组不同时间点SiO2刺激的矽肺患者AM和培养上清中CTGF表达不断增高,并在18h表达最高,与同期对照组相比差异显著。[结论]SiO2可促进矽肺病人AM高表达CTGF,提示CTGF在肺纤维化的形成与发展中其重要作用,推测CTGF的表达与肺纤维化形成有关。     

经SiO2活化的硅肺患者肺泡巨噬细胞对肺成纤维细胞的增殖作用

[目的]探讨硅肺患者肺灌洗液中巨噬细胞(AM)经SiO2粉尘刺激,得到的AM培养上清对肺成纤维细胞(FB)增殖的作用。[方法]收集硅肺患者支气管肺泡灌洗液中的AM,进行SiO2再次染尘,取得培养上清,刺激肺成纤维细胞。应用MTT法检测FB的增殖情况,流式细胞仪法分析FB各期细胞分布比例(即细胞增殖情况)的改变。[结果]经SiO2刺激硅肺患者AM培养上清,可使FB增殖活性增强,细胞增殖指数(proliferous index,PI)明显增加。[结论]经SiO2活化的硅肺患者肺泡AM对肺成纤维细胞有促增殖作用。     

煤尘对大鼠肺泡巨噬细胞分泌白细胞介素－1的影响

测定体外加煤尘后，不同时点大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）分泌白细胞介素－１（ＩＬ－１）的结果表明，煤尘组明显高于对照组，各煤组间，无烟煤组与肥煤组间差异不显著，而两组与贫煤组间有显著性差异。另外，随着煤尘浓度的增高，ＡＭ的ＩＬ－１分泌量也随之增加。我们认为ＩＬ－１可能在煤工尘肺发生发展中起重要作用。     

巨噬细胞内β-胡萝卜素对细胞膜流动性的影响

体外ＭΦ可摄取、蓄积β－胡萝卜素（ＢＣ），培养７２ｈ的ＭΦ不能转化可测水平的视黄醇，结果显示ＭΦ可摄取完整的ＢＣ分子但在细胞内不能进一步转化，提示ＢＣ分子可能存在独立于ＶＡ类物质的免疫调节作用。表明β－胡萝卜素对ＭΦ的免疫调节作用可能与ＶＡ类物质无关；β－胡萝卜素改变ＭΦ细胞膜的偏振度（Ｐ）及微粘度（η），影响膜的流动性可能参与对ＭΦ功能的调节。     

不同食用油对大鼠机体脂类与过氧化脂类含量的影响

本文报告了茶油、菜油、色拉油、豆油和猪油对大鼠机体脂类水平和脂类过氧化作用的影响及两者的相关关系。结果表明:茶油和豆油有良好的阻止血脂升高的作用。血浆卵磷脂胆固醇酰基转移酶的活性在4种植物油组相近(80.26～94.03nmol/ml.h),猪油组最低(57.07nmol/ml.h)。饲猪油者肝及主动脉中脂类含量偏高。血清及心、肝、肾组织中过氧化脂类(LPO)含量以猪油组最高,茶油组较低。此外,豆油有升高组织中LPO含量的作用,而菜油和色拉油相反。实验后,饲以富含单不饱和脂肪酸油脂者,其红细胞超氧化物歧化酶活力升高,饲豆油和猪油者降低。实验末大鼠血清及肝组织中LPO与脂类(TC、TG)含量呈显著正相关(P<0.01),心,脑中此关系不明显。