羟基喜树碱对3种人膀胱癌细胞体外生长作用的实验研究

目的探讨不同浓度的羟基喜树碱(HPT)对3种人膀胱癌细胞(EJ细胞、T24细胞及5637细胞)体外生长的抑制作用。方法通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度HPT对EJ细胞、T24细胞、5637细胞体外生长的抑制率,从而筛选出能够抑制多种膀胱癌细胞体外生长的药物浓度。结果当加入的HPT浓度≥5ng/ml时,实验组3种膀胱细胞的OD值低于对照组,且呈剂量递减;生长抑制率高于对照组,且呈剂量逆增,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 HPT浓度在≥5ng/ml时对3种膀胱癌细胞体外生长有较好的抑制作用。     

复方苦参注射液对人肝癌SMMC7721细胞增殖的抑制作用

目的:研究复方苦参注射液对人肝癌SMMC7721细胞增殖的抑制作用。方法:体外传代培养SMMC7721细胞。10、20、40、80、160μl/ml复方苦参注射液培养细胞24、48、72 h后,采用MTT法测定细胞活力并计算抑制率。0(阴性对照)、10、20、40、80、160μl/ml复方苦参注射液培养细胞48 h后采用流式细胞仪测定细胞凋亡率,并分析细胞周期分布百分比。结果:10、20、40、80、160μl/ml复方苦参注射液培养细胞24、48、72 h对细胞具有明显的抑制作用,且具有时间和剂量依赖性。与阴性对照比较,40、80、160μl/ml复方苦参注射液培养细胞48 h后,G0/G1期细胞比例明显升高(P<0.05),S期细胞比例明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。结论:复方苦参注射液对SMMC7721细胞的增殖具有抑制作用,其机制可能是诱导细胞凋亡、阻滞细胞于G0/G1期。     

羧甲基葡聚糖体外抗肿瘤作用的研究

目的研究不同取代度羧甲基葡聚糖(CMG)的体外抗肿瘤作用。方法以HL-7702正常肝细胞、HepG-2肝癌细胞、MGC-803胃癌细胞为实验材料,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分析。结果各种取代度的CMG对HL-7702的生长影响较小,但对HepG-2和MGC-803的抑制作用明显,并且随浓度升高对HepG-2、MGC-803的抑制作用也随之增强,尤以取代度为0.556的CMG2最为显著。CMG2浓度达到500μg/mL时对HepG-2的生长抑制率为54.3%,浓度为1 000μg/mL时对MGC-803抑制率达到51.3%。结论在体外实验中,取代度0.55左右的CMG能有效抑制HepG-2肝癌细胞、MGC-803胃癌细胞的生长。     

藤茶蛇葡萄素抗人胃癌细胞作用的实验研究

目的:探讨藤茶蛇葡萄素的体外抗肿瘤作用。方法:采用MTT法、生长曲线法、细胞集落形成法观察蛇葡萄素对人胃癌SGC-7901细胞的抑制作用。结果:蛇葡萄素能明显抑制体外培养的SGC-7901细胞的生长,MTT法IC50为11.19μg/mL;细胞生长曲线法提示其对SGC-7901细胞的生长也有明显的抑制作用;集落形成法,当药物浓度在9.90μg/mL以上时抑制率为100%,当药物浓度为6.60μg/mL时抑制率为72.3%,当药物浓度为4.40μg/mL时抑制率为36.0%。结论:蛇葡萄素对体外SGC-7901细胞的生长有明显的抑制作用。     

参麦注射液对人肝癌SMMC-7721肿瘤细胞的作用

目的 观察参麦注射液对人肝癌SMMC-7721肿瘤细胞的作用.方法 采用MTT法检测参麦注射液对于人肝癌SMMC-7721肿瘤细胞的体外增殖抑制率,流式细胞仪检测参麦注射液作用后的SMMC-7721肿瘤细胞的细胞周期、凋亡率的变化.结果 参麦注射液0～250μl/ml作用48 h,人肝癌SMMC-7721肿瘤细胞增殖的抑制率为9.0%～83.1%.随着浓度的增加,细胞增殖抑制率逐渐上升.参麦注射液终浓度200 μl/ml作用后的人肝癌SMMC-7721细胞G0～G1期明显增高,S期和G2～M期的细胞比例明显减少,凋亡率明显高于对照组(70.91%vs.7.57%).结论 参麦注射液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖具有明显的抑制作用.     

白色念珠菌细胞壁不溶性β-葡聚糖抗肿瘤细胞的实验研究

目的本研究旨在观察白色念珠菌细胞壁不溶性β-葡聚糖（Candida Albicans Insolubleβ-Glucan,CAIBG）对体外培养的B16恶性黑色素瘤细胞、SGC-7901胃腺癌细胞、SMMC-7721肝癌细胞的生长抑制作用。方法自制CAIBG,采用改良MTT法检测CAIBG在不同时间和不同浓度对体外培养的以上几种肿瘤细胞的生长抑制作用。结果 CAIBG对B16恶性黑色素瘤细胞和SGC-7901胃腺癌细胞有体外生长抑制作用,生长抑制率最高分别为42.8%和59.88%,IC50分别约为1.51mg/μl和0.43mg/μl。CAIBG对SMMC-7721肝癌细胞的体外生长不具有直接抑制作用。结论 CAIBG具有体外直接抑制B16恶性黑色素瘤细胞和SGC-7901胃腺癌细胞生长的作用。CAIBG是具有良好的应用开发前景抗肿瘤药物。     

刺梨提取物CL对胃癌细胞的抑制作用

目的观察刺梨提取物CL的体外抗肿瘤作用。方法采用溴化3-(4,5-二甲基噻唑2)-2,5-二苯基四氮唑蓝(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2.5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)检测法测定CL对胃癌-7901和MKN-45细胞的细胞毒性作用,台盼蓝排染法计数不同浓度药物作用下,不同时间点的活细胞数,绘制细胞生长曲线。结果MTT法检测显示,0.01μl·ml1～100μg·ml-1的CL 处理12～96h胃癌SGC-7901细胞和MKN-45细胞生长的抑制率均呈现剂量依赖性和时间依赖性, 细胞生长曲线显示:随CL浓度的升高曲线逐渐右移,且100μg·ml1的CL对SGC-7901细胞的生长曲线呈逐渐下降趋势。结论CL对胃癌7901和MKN-45细胞的体外生长具有一定的抑制作用,这种抑制作用均呈刺量依赖性和时间依赖性,提示CL有一定的体外抗肿瘤作用。     

PI3K/AKT信号通路特异性抑制剂LY294002对Tca8113细胞增殖活性的影响

目的探讨PI3K/AKT通路特异性抑制剂LY294002对人舌鳞癌Tca8113细胞株增殖活性的影响。方法用不同药物浓度的LY294002(5μmol/L,10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L)处理Tca8113细胞,MTT法检测对照组和实验组在不同的作用时间(24h、48h、72h、96h)下,Tca8113细胞的OD值,计算增殖抑制率,绘制Tca8113细胞浓度-抑制率曲线及时间-抑制率曲线。结果随药物浓度的增加及作用时间的延长,Tca8113细胞的OD值逐渐减小,增殖抑制率逐渐增大(P<0.01)。结论LY294002对体外培养的人舌鳞癌Tca8113细胞增殖有抑制作用,其抑制作用与LY294002的药物浓度及作用时间呈正相关。     

蛇葡萄素钠对人膀胱癌EJ细胞增殖的抑制作用

目的:研究蛇葡萄素钠(AMP-Na)对人膀胱癌EJ细胞增殖的抑制作用。方法:体外传代培养EJ细胞。以25、33、43.5、57.4、75.8、100μg/ml AMP-Na培养细胞24、48、72 h后,采用MTT法测定细胞活力并计算抑制率。以0、43.5、57.4、75.8μg/ml AMP-Na与2μg/ml顺铂培养细胞24 h后,采用流式细胞仪检测细胞数并计算细胞凋亡率与细胞周期分布。以0、43.5、57.4、75.8μg/ml AMP-Na与2μg/ml顺铂培养细胞24、48 h后,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法测定细胞中Cyclin D1 m RNA的表达。结果:以25、33、43.5、57.4、75.8、100μg/ml AMP-Na培养细胞24、48、72 h后对细胞具有明显抑制作用,且呈明显的时间依赖关系。以57.4、75.8μg/ml AMP-Na培养细胞24、48 h后在G0/G1峰之前出现凋亡峰;以75.8μg/ml AMP-Na培养细胞24 h与43.5、75.8μg/ml培养细胞48 h后,Cyclin D1 m RNA的表达减弱(P<0.05)。结论:AMP-Na能高效抑制EJ细胞的增殖并促进其凋亡,其机制可能与诱导细胞凋亡、下调Cyclin D1 m RNA表达以及使细胞周期阻滞于G0/G1期有关。     

蛇葡萄素钠协同卡铂对肺癌Lewis细胞增殖的抑制作用

目的:研究蛇葡萄素钠(AMP-Na)协同卡铂对肺癌Lewis细胞增殖的抑制作用。方法:以6.25、12.5、25、50、100μg/ml AMP-Na+3.125、6.25、12.5、25、50μg/ml卡铂培养细胞4 h,测定细胞活力并计算抑制率与半数抑制浓度(IC50)。以12.5、25、50、100μg/ml AMP-Na+12.5μg/ml卡铂培养细胞12 h,流式细胞仪检测细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)表达。结果:系列质量浓度AMP-Na与系列质量浓度卡铂联用后对细胞生长有明显抑制作用,随质量浓度的升高,卡铂对Lewis细胞的IC50逐渐降低;AMP-Na质量浓度范围在6.25~50μg/ml时,与3.125~25μg/ml卡铂联用后,对Lewis细胞增殖的协同抑制作用最强。AMP-Na与卡铂联合培养细胞12 h后,细胞Caspase-3表达明显增强。结论:AMP-Na与卡铂合用对Lewis细胞增殖具有协同抑制效应,其机制可能与AMP-Na激活细胞Caspase-3,从而诱导细胞凋亡有关。     

消癌平注射液联合奥曲肽对H22荷瘤小鼠细胞凋亡的影响

目的观察消癌平注射液联合奥曲肽对H22肝癌移植瘤的抑瘤作用及其抑瘤的最佳药效浓度,并初步探讨其作用机制。方法建立小鼠皮下H22肝癌移植癌模型,成瘤后将实验动物随机分为8组:分别为模型组(生理盐水0.4ml/d),消癌平低、中、高剂量组(10、20、40g/kg),奥曲肽组(100μg/kg)及消癌平低、中、高剂量分别联合奥曲肽组。腹腔注射给药14d。计算各瘤体体积,绘制肿瘤生长曲线,计算抑瘤率,采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测肿瘤组织中的细胞凋亡情况,免疫组织化学方法测定凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病基因-2(Bcl-2),Bcl相关X连锁蛋白(Bax)的表达情况;同时测定脾脏自然杀伤细胞(NK)活性。结果与模型组比较,各用药组对H22肝癌的生长均有一定的抑制作用,联合用药组的抑瘤作用优于单药组(P<0.05),以高剂量消癌平加奥曲肽的作用最好。高剂量消癌平及高剂量消癌平加奥曲肽组可使凋亡指数(AI)升高,下调Bcl-2的表达,上调Bax的表达,升高脾脏NK细胞活性,其中高剂量消癌平加奥曲肽组作用明显优于奥曲肽组和高剂量消癌平组。结论高剂量消癌平加奥曲肽为抑瘤的最佳药效浓度,其抑制肿瘤生长的作用可能与通过调控凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达诱导肿瘤细胞凋亡及增强脾脏NK细胞活性有关。     

复方苦参注射液联合化疗对人胰腺癌的抑制作用

目的:探索复方苦参注射液对人胰腺癌细胞SW1990的体外直接抑制作用,以及不同浓度的苦参注射液与化疗联合应用时的协同作用。方法:采用MTT法检测不同浓度的复方苦参注射液以及复方苦参注射液与化疗药联合应用对人胰腺癌细胞SW1990的体外抑制率。结果:不同浓度的复方苦参注射液均对人胰腺癌细胞SW1990有抑制作用,其抑制作用与浓度成正相关,不同浓度的苦参注射液与化疗药联用对人胰腺癌细胞SW1990的体外抑制作用均明显高于单用化疗药。结论:复方苦参注射液对人胰腺癌细胞SW1990有体外直接抑制作用,该药联合化疗有协同抗肿瘤作用。     

黄芪多糖对兔脂肪来源的间充质干细胞体外增殖的影响

目的黄芪多糖(APS)对兔脂肪来源的间充质干细胞(ASCs)体外增殖的作用。方法提取兔ASCs进行培养,设实验组和对照组,实验组加入不同浓度APS注射液,对照组加常规培养液,四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察细胞的增殖率,比较两组之间的差异。结果 APS浓度为1.95～3.90μg/mL时,对ASCs的增殖无明显影响(P>0.05);而浓度为7.80～1 000μg/mL时,对ASCs的增殖有明显抑制作用(P<0.01);在一定浓度范围内(25～100μg/mL),浓度对细胞增殖的影响不大,而与培养的时间有关,随着作用时间的延长,对ASCs的抑制作用更加明显。结论低浓度APS对兔ASCs体外增殖无影响;高浓度APS对ASCs有明显的抑制作用。     

乳大鼠表皮细胞体外培养及环孢素A对其增殖抑制作用

目的观察无表皮生长因子(EGF)条件下体外培养乳大鼠表皮细胞生长特点,及不同浓度的环孢表A(CSA)对细胞增殖的影响。方法用单细胞悬液法体外培养出生24h内的乳大鼠的表皮细胞 ,观察其生长曲线和CSA对细胞增殖的抑制作用。结果在无EGF条件下 ,细胞培养的最长时间为15天。接种24h开始贴壁 ,第2天开始生长 ,第5～7天达高峰 ,第10天开始在胞浆中出现空泡 ,以后逐渐死亡。1μg/mlCSA在24h、48h对细胞增殖无明显抑制作用 ,72h时的抑制率为15 %;3μg/mlCSA在24h也无抑制作用 ,48h和72h的抑制率分别达18 %和30 %;6μg/mlCSA培养24h、48h、72h后抑制率分别为16 %、40 %和65 %。结论无EGF时培养的乳大鼠表皮细胞在5～7天生长达高峰 ,最长培养时间为15天。CSA对细胞增殖有抑制作用 ,且有明显的浓度和时间依赖性。     

噻替派(Thiotepa)滴眼液对人癌细胞和正常细胞的细胞毒作用

目的 了解0.05%Thiotepa滴眼液对各种不同的人癌细胞和正常细胞生长的影响.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法进行体外细胞毒试验,测定Thiotepa滴眼液对人癌细胞和正常细胞的生长抑制作用,以半数抑制浓度(IC50值)进行评价.结果 Thiotepa滴眼液在50μg/ml～0.78μg/ml浓度下对人癌细胞Glc-82、K-562、Bel-7402、Hela和CNE2的IC50值依次为:22.7μg/ml、10.6μg/ml、15.3μg/ml、11.2μg/ml和9.6μg/ml.对人正常细胞Hk-293、ECV-304、HRPE、Fibro和小鼠3T3细胞的IC50值分别为:1.4μg/ml、12.5μg/ml、17.8μg/ml、36.6μg/ml和14.4μg/ml.结论 Thiotepa滴眼液对各种细胞有明显的生长抑制作用;0.05%Thiotepa滴眼液对各种人癌细胞和正常细胞均有强的细胞毒作用,且对人癌细胞无明显的选择性抑制作用.     

蝎毒抗肿瘤多肽对小鼠肝癌细胞H_(22)及移植瘤的抑制作用

目的观察纯化蝎毒抗肿瘤多肽穴APBMV雪,<3500kD灌胃对小鼠肝癌H22动物移植瘤的抑制作用及对H22细胞的体外抑制杀伤作用。方法将接种H22的带瘤小鼠分为对照组、环磷酰胺治疗组和纯化蝎毒抗癌多肽治疗组。其中APBMV浓度1.2mg/ml、0.8mg/ml,以0.5ml灌胃,给药10d后处死,取实体瘤称重并计算肿瘤生长抑制率。采用噻唑蓝(MTT法)、集落形成抑制实验,用丝裂霉素C(MMC)为阳性对照药品,以蝎毒提取物SVCⅠ、SVCⅡ、SVCⅢ、SVCⅣ各组分(浓度分别为45μg/ml、60μg/ml、75μg/ml、90μg/ml),分别处理人大肠癌细胞H22,观察H22的生长情况。结果APBMV在应用的前两个剂量范围内对H22移植瘤有明显的抑制作用,抑制率大于50%,与对照组比较差异显著(P<0.05),三个不同剂量组之间差异亦显著,有明显的量效关系。SVCⅢ对Lovo细胞的细胞毒性和集落形成的抑制作用略强于MMC组,与对照组差异显著穴r=0.98熏P<0.01雪,SVCⅠ、SVCⅡ、SVCⅣ对细胞H22的影响,在所用药物浓度内与对照组比较,无显著性差异,细胞毒性作用不显著。结论口服APBMV能有效的抑制H22移植瘤的生长和对H22细胞具有明显的细胞毒性和生长抑制作用。     

消癌平联合5-氟尿嘧啶对Hepa1-6肝癌细胞化疗增效中的作用

目的观察消癌平对化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)的最佳增效时间和最佳增效浓度,并探讨其发挥化疗增效作用的机制。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法观察不同浓度消癌平联合5-Fu对Hepa1-6肝癌细胞的生长抑制作用,消癌平作用浓度分别设10、305、0 mg/mL,作用时间分别设5-Fu作用前0、8、16、24 h和作用后8、16、24 h,采用细胞划痕愈合实验测定细胞扩散运动能力。结果不同浓度消癌平联合5-Fu化疗组细胞生长抑制率均明显高于5-Fu单药组(P均<0.05),且消癌平的增效作用随其剂量的增加而增加(P<0.05),50mg/mL消癌平于5-Fu作用前8 h加入增效作用最佳(P<0.01),消癌平8 h-5-Fu给药组较肝癌细胞组、5-Fu单药组能显著减弱细胞移行运动能力。结论消癌平以50 mg/mL的浓度于5-Fu作用前8 h加入化疗增效作用最佳,消癌平主要通过减弱细胞移行运动能力发挥增加5-Fu的化疗作用。     

苦参素对人膀胱癌EJ细胞抑制作用研究

目的 探讨苦参素对人膀胱癌EJ细胞的抑制作用及可能机制。方法 MTT法检测EJ细胞的生长抑制率;流式细胞仪检测EJ细胞周期改变,免疫组化检测EJ细胞Ki-67表达。 结果 2.5 mg&#8226;mL-1苦参素作用24和72 h 对EJ细胞的生长抑制率分别为（15.12±2.10）%和（52.61±7.02）%;浓度为10 mg&#8226;mL-1时24和72 h抑制率分别为（42.42±7.30）%和（88.52±10.93）%。随着苦参素浓度的增加, G0/G1期和S期EJ细胞所占比例逐渐上升,G2/M期细胞所占比例逐渐下降,且Ki-67的表达下降。结论 苦参素能通过诱导人膀胱癌EJ细胞周期阻滞于G0/G1和S期,下调Ki-67的表达来抑制癌细胞的生长增殖。     

CCK-8法检测AT#9对肿瘤细胞的生长抑制作用

目的:研究复方制剂AT#9 的体外抗肿瘤作用.方法:采用细胞毒性检测CCK-8 法检测AT#9 对小鼠乳腺癌细胞EMT6、人肺癌细胞A549 和人前列腺癌细胞PC3M 的体外抑制生长作用.结果:AT#9 对三种肿瘤细胞的半数抑制浓度IC50 分别为1824μg/ml、3219μg/ml 和5854μg/ml.结论:AT#9 在体外对三种不同的肿瘤细胞有不同程度的生长抑制作用,且呈浓度依赖关系.     

全反式维甲酸联合猪胆酸钠对人卵巢癌细胞生长抑制作用的影响

目的 探讨维甲酸（ATRA）及猪胆酸钠（SBANa)联合反应对人卵巢癌细胞生长的抑制作用。方法 实验共分为三组：单用ATRA组、单用SBANa组及ATRA＋SBANa联合用药组。应用MTT比色法、流式细胞仪对COC1、COC2、CAOV3三种卵巢癌细胞系在不同浓度的ATRA及SBANa下进行检测。结果 ATRA及SBANa联合应用后，能增强抑制卵巢癌细胞生长作用，当达到ATRA10μmol/L SBANa 100μg/ml浓度时，G0、G1期细胞比例增加，G2M、S期细胞比例下降，细胞增殖速度较单独用药组减缓。MTT检测提示在联合用药浓度达到ATRA 10μmol/L SBANa 100μg/ml时，癌细胞抑制率最佳。结论 ATRA及SBANa联合应用可增强对卵巢癌细胞增殖的抑制作用，并在ATRA 30μmol/L SBANa 100μg/ml浓度时，促进癌细胞凋亡。