肝郁证模型大鼠血清蛋白质组的差异表达研究

目的:通过分析肝郁证模型大鼠血清蛋白质组的差异表达,从蛋白质组学角度探讨肝郁证的实质。方法:以束缚制动法制备肝郁证大鼠模型,二维凝胶电泳(2-DE)分离大鼠血清蛋白质,获得差异表达蛋白质;利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和数据库分析鉴定差异表达蛋白质。结果:发现9个具有明显表达差异的蛋白质斑点,经鉴定可以确定的6个蛋白质分别为:转甲状腺素蛋白(transthyretin,TTR)、水解酶Ba1-647、血清白蛋白前体、抗乙酰胆碱受体抗体Fab片段、Ig-λ2链C区和β1球蛋白。结论:筛选出的差异表达蛋白质主要涉及免疫、神经内分泌和营养物质代谢方面,和现有研究结果相符,证实从蛋白质组学的角度研究证实质是可行的。     

脾胃湿热证大鼠模型血清蛋白质组学差异表达研究

目的:通过分析脾胃湿热证模型大鼠血清蛋白质的差异表达,从蛋白质组学角度探讨脾胃湿热证的证候实质。方法:应用血清蛋白质组学、生物信息学等系统生物学方法,采用二维凝胶电泳(2-DE)分离技术分离脾胃湿热证模型大鼠血清蛋白质,获得差异表达蛋白质,利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和数据库鉴定差异表达蛋白质。结果:发现12个具有明显表达差异的蛋白质斑点,经鉴定可以确定的9个蛋白质分别是备解素B因子、凝血因子Ⅱ、C-反应蛋白、alpha-胰蛋白酶抑制剂重链H4、载脂蛋白AI、重组人载脂蛋白AI、血小板凝血酶敏感蛋白、α-巨球蛋白、补体3。结论:筛选出来的差异表达蛋白质主要涉及机体免疫、物质代谢、炎症反应及血液流变学等,通过对脾胃湿热证模型大鼠蛋白质组差异表达的研究,从理论和技术的角度为运用蛋白质组学对脾胃虚实证候实质的深入研究提供了借鉴。     

应用SELDI技术建立甲状腺癌辨证分型的血清蛋白质组学诊断模型

目的:探讨甲状腺癌不同证型间的血清蛋白表达质谱的差异并构建诊断模型。方法:应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分别检测19例肝郁气滞型和21痰瘀互结型甲状腺癌的血清蛋白质指纹图谱,筛选出两组间特异性表达差异蛋白,并结合生物信息学方法建立诊断模型。结果:在2000~20000Da范围内共检测到86个蛋白质峰,其中22个蛋白质峰在两组之间表达有显著性差异(P0.01),17个蛋白质峰在肝郁气滞组中高表达,5个蛋白质峰在痰瘀互结组中高表达,BPS判别分析选出M/Z为4099.85、9418.17的2个蛋白质峰构建两组间血清差异蛋白决策树分类诊断模型。结论:初步建立了甲状腺癌的中医辨证模式——血清蛋白质指纹图谱,也为中医证候实质的研究探讨新的方法和途径。     

慢性乙型病毒性肝炎中医虚证的蛋白质组学规律初探

目的 运用蛋白质组学方法,寻找血浆中差异表达的蛋白质,分析其与慢性乙肝中医虚证(肝肾阴虚证、脾肾阳虚证)证候的对应关系,初步探索出慢性乙肝中医虚证的蛋白质组学规律,为中医临床辨识慢性乙肝虚证提供可供参考的客观化指标.方法 通过双向凝胶电泳,获得血浆蛋白质( Two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱,经质谱分析鉴定出差异表达的蛋白质.结果 ①各组血浆蛋白2-DE图谱经ImageMaster 2D Platinum V5.0软件分析,各组均可获得重复性稳定的蛋白点450±100个.②归纳总结图谱发现,慢性乙肝中医二虚证与正常人相比存在明显的规律性差异,表现为蛋白点3、8、9(分别为APO -A2、Haptoglobin HP)表达量均明显下降.经质谱分析鉴定得出:蛋白点3为载脂蛋白A2( Apo-A2),蛋白点8、9为结合珠蛋白.结论 ①成功建立起慢性乙肝血浆蛋白质组2-DE图谱.②归纳总结慢性乙肝中医二虚证APO-A2、HP表达量均明显下降,提示慢性乙肝中医二虚证具有相同的蛋白质变化规律,推测这些相同的蛋白质变化可能与慢性乙肝各中医虚型证型的形成机制有关.     

血府逐瘀汤对气滞血瘀证大鼠血清蛋白质组表达的影响

目的观察血府逐瘀汤对气滞血瘀证模型大鼠血清蛋白质组表达的影响,初步探讨血府逐瘀汤在分子水平的作用机理.方法复合因素制作大鼠气滞血瘀证模型,采集正常大鼠、气滞血瘀证大鼠及血府逐瘀汤治疗组大鼠的血清,应用一种简单的方法去除血清中的白蛋白,利用双向凝胶电泳分离血清总蛋白,通过Image Master 2D Elite 6.01凝胶图像分析软件分析2-DE图谱,比较各组问蛋白表达谱的改变情况.结果正常组大鼠血清蛋白质点为(354±20),模型组大鼠血清的蛋白质点为(347±37),治疗组大鼠的蛋白质点数为(360±35),软件分析确定的差异蛋白点有7个,其中模型组大鼠血清与正常组相比有1个蛋白质下调,5个蛋白质上调,1个蛋白表达缺失,而给予血府逐瘀汤后可改善这些改变及缺失的蛋白质的表达水平.结论血府逐瘀汤治疗气滞血瘀证的作用机制可能与这些差异表达的蛋白有关,这为血府逐瘀汤作用的分子机理研究提供了新的思路.     

人急性胰腺炎各证型血清双向电泳图谱比较

目的 探讨急性胰腺炎不同证型患者血清的蛋白质组双向电泳图谱变化,为研究这些变化在辨证中的意义提供实验依据.方法 检测32例急性胰腺炎患者血清蛋白质组的变化,与正常对照组的蛋白质表达对比分析.结果 通过血清样本2-DE电泳分离蛋白,得到的蛋白质点数分别为：正常对照组（320±15）个,蛔虫上扰组（329±26）个,脾胃实热组（363±24）个,脾胃湿热组（388±35）个,肝郁气滞组（403±36）个.CD8在脾胃湿热和脾胃实热证型中,比正常对照组表达量降低,且差异显著.脾胃湿热证型和肝郁气滞证型中,白介素6（IL-6）蛋白变化较对照组差异显著.结论 不同证型患者与对照组血清蛋白表达存在明显差异,其与疾病的发展和转归相互影响、相互作用,在急性胰腺炎证型的治疗中应重视免疫功能的变化.差异点的发现为今后进一步深入研究急性胰腺炎不同证型的准确辨证提供了研究依据.     

肝郁证辨证与相关蛋白关系初步研究

运用血清蛋白质组技术,辨病与辨证相结合,以不同疾病组肝郁证病人和正常人的血清为样本,通过二维凝胶电泳分离蛋白质组分制备蛋白质图谱,分析比较正常组与肝郁证组血清蛋白质图谱,发现差异蛋白群。建立重复稳定的血清蛋白质技术,以期为进一步生物质谱技术及生物信息学技术鉴定与肝郁证相关的蛋白质;从整体上探讨肝郁证特有蛋白质的表达,研究揭示肝郁证候的重要相关蛋白质特性奠定基础。     

基于血清蛋白组学的慢性肾衰中医不同证型的研究

目的:探讨慢性肾功能衰竭中医不同证型的血清蛋白质谱的变化及生物学基础。方法:收集慢性肾功能衰竭患者83例及正常人36例并辨证分型,采用SELDI-TOF蛋白芯片技术对不同证型的血清蛋白质表达谱进行研究。结果:在慢性肾衰中医各证型的整体研究中,17个蛋白峰有显著差异(P0.001),通过层次聚类分析显示中医各证型之间聚类性质差异较小;通过对中医不同证型作两两比较发现,脾肾气虚组与脾肾阳虚组之间得到2个差异蛋白峰(P0.01),脾肾气虚组与阴阳两虚组得到4个差异蛋白峰(P0.01),脾肾气虚组与脾肾气阴两虚组之间得到5个差异蛋白峰(P0.01),脾肾阳虚组与阴阳两虚组之间得到4个差异蛋白峰(P0.01),脾肾阳虚组与脾肾气阴两虚组之间得到4个差异蛋白峰(P0.01),阴阳两虚组与脾肾气阴两虚组之间得到2个差异蛋白峰(P0.01);运用PCA分析显示,各证型组之间的差异蛋白峰能较好把各组相区分。结论:采用SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术分析慢性肾功能衰竭中医不同证型血清蛋白质谱变化对探讨中医证型的生物学基础具有一定的意义。     

应用SELDI-TOF-MS技术分析不同中医证型肝癌血清标志物的研究

目的:应用表面加强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)检测不同中医证型肝癌患者血清蛋白质指纹图谱,筛选特异性相关血清生物学标志物。方法:应用SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术检测5种中医证型(气滞证、脾虚证、湿热证、血瘀证、阴虚证)肝癌患者血清,获得CM10蛋白质芯片蛋白表达图谱,用Marker Wizard软件分析差异蛋白并经数据库搜索初步鉴定。结果:应用弱阳离子交换芯片(CM10)在不同中医证型肝癌血清中检测到在不同质荷比(M/Z)差异蛋白质峰,气滞证组M/Z为4182Da、6589Da及湿热证组M/Z为5710Da的血清蛋白质峰下调,脾虚证组M/Z为5816Da、血瘀证组M/Z为4297Da、阴虚证组M/Z为6992Da的血清蛋白质峰上调,上述蛋白质含量差异均有统计学意义(P0.01)。结论:应用SEIDI-T0F-MS可以筛选不同中医证型肝癌患者血清特异性生物标志物,检测到的差异蛋白质可能是鉴别肝癌不同中医证型的血清生物学指标。     

2型糖尿病中医辨证分型与血清骨钙素、甲状旁腺素水平的相关性研究

目的 :观察 2型糖尿病中医辨证分型与血清骨钙素 (BGP)、甲状旁腺素 (PTH)的关系 ,为中医辨证分型提供客观依据。方法 :将 6 0名 2型糖尿病患者辨证分为阴虚热盛型组、气阴两虚型组、阴阳两虚型组 ,并另设一个健康对照组 ,测定各组的血清骨钙素、甲状旁腺素水平 ,并进行比较。结果 :2型糖尿病组血清骨钙素、甲状旁腺素水平显著高于健康对照组 (P<0 .0 1) ;各证型组之间 ,阴阳两虚型组血清骨钙素显著低于气阴两虚型组及阴虚热盛型组 (P<0 .0 5 ,P<0 .0 1) ,甲状旁腺素显著高于阴虚热盛型组 (P<0 .0 5 ) ,气阴两虚型组血清骨钙素显著低于阴虚热盛型组 (P<0 .0 5 )。结论 :血清骨钙素、甲状旁腺素的水平可能反映了 2型糖尿病各中医证型“肾虚”的程度 ,有可能成为 2型糖尿病中医辨证分型的客观指标     

少女原发性痛经主要中医证型及影响因素分析

目的探讨青春期少女痛经的主要中医证型及影响因素,以便为指导临床治疗及开展经期身心保健提供有效对策。方法采取问卷调查的方法,对笔者所在高校120名少女进行调查。结果剔除资料不足及盆腔有阳性发现者,共107名。中医证型以气滞血瘀和寒湿凝滞最多见,痛经程度越重,气滞、寒凝、血瘀则越明显;相关因素分析中有显著性意义的因素有经期未忌生冷、烦躁焦虑、月经失调,白带异常、睡眠不足、节食、偏食、母亲有痛经史、初潮年龄也有一定意义;痛经显著意义的影响因素与少女痛经主要中医证型一致。结论少女原发性痛经的主要中医证型为气滞血瘀和寒湿凝滞,经期未忌生冷、烦躁焦虑、月经失调、白带异常、睡眠不足、节食、偏食、母亲有痛经史、初潮年龄等对痛经有不同程度的影响,经期身心保健对痛经的治疗有重要意义。     

急性心肌梗死中医辨证分型的聚类研究

目的观察急性心肌梗死(AMI)患者中医辨证分型的特点及规律。方法利用冠心病个体化诊疗研究平台,采用SPSS12.0统计软件包,对744例AMI患者的四诊信息进行K-means聚类分析,再对每种类型进行主成分分析,判定每种类型的代表症状,归纳出证型。结果调查收集AMI患者的症状共有46种,症状频率出现较高的为胸闷、胸痛、乏力、气短、心悸、喘憋;舌质多见暗红、淡暗、紫暗,舌苔以腻、白为主;常见的脉象为弦滑、弦、滑、弦细;总结出八种证候群。结论根据聚类分析结果并结合临床实践,认为AMI患者分为八型较符合临床实际,聚类分析有助于中医辨证客观化研究。     

证候蛋白质组学与中医证候学相关性探讨

以蛋白质组学为代表的后基因组时代的到来，必然使分子生物学经历从局部观走向整体观、从线形思维走向复杂思维的转变。基于蛋白质组学的发展趋势，总结了近年来中医证候学研究方法，提倡用二维电泳及生物信息学方法鉴定不同的蛋白质。将蛋白质组学引入中医证候分类及证候演变规律的研究，对从分子流行病学水平来探讨中医学与蛋白质组学乃至现代分子生物学研究相结合都是必须的。而蛋白质组学与传统中医药在研究生命科学的思维方法上逐步趋于一致，相互渗透，说明在探讨复杂性生命现象时中西医两种医学相结合的必然性和重要性。     

中西医结合治疗急性心肌梗塞304例临床观察

目的：对本院１９７８年１月～１９９７年１２月中西医结合治疗３０４例急性心肌梗塞（ＡＭＩ）的临床疗效和中医辨证论治规律进行回顾性总结分析。方法：对３０４例ＡＭＩ病案进行逐项统计，包括年龄、性别、梗塞部位、并发症、死亡原因以及中医证修、治则、方药等。结果：本组心律失常、泵衰竭、栓塞等并发症发生率分别为６８．７５％、３６．８４％、０．６６％。而国内文献报告为８６％～１００％、５０％、２％。实行静脉溶栓治     

低分子肝素治疗不同证型脑梗死疗效比较

目的 观察脑梗死不同证型对低分子肝素（LWMH）的疗效反应。方法 将176例急性脑梗死随机分为LWMH治疗组与常规治疗组，再进一步将两组分为LWMH治疗血瘀组、LWMH治疗非血瘀组和常规治疗血瘀组、常规治疗非血瘀组共四组，以治疗前后欧洲卒中量表（ESS）和日常生活能力量表（ADL）的分数差值作为疗效观察指标。结果 LWMH治疗组和常规治疗组在治疗后10d的ESS分数差值无显著性差异，但治疗后21d两组的ESS分数差值差异显著；治疗后21dLWMH治疗血瘀组的ESS分数差值与其余三组比较有显著性差异；治疗后21d所有组间的ADL分数差值无显著性差异。结论 LWMH对急性脑梗死血瘀证患者有更好的疗效。     

蛋白质组学在证候实质和方剂作用机制研究中的应用

综述蛋白质组学在证候实质、中药方剂作用机制方面的研究进展。证候是中医学的核心内容,直接指导遣方用药,证候整体、即时和动态的复杂特性与新兴蛋白质组学的特征极其相似,认为两者有着某种内在联系和对应关系。蛋白质组学为科学地解释中医理论实质提供了可能,成为构建现代医学和传统医学相互关系的纽带。     

2型糖尿病下肢血管病变中医证型探讨及其危险因素相关性研究

目的分析2型糖尿病下肢血管病变(T2DMPVD)的危险因素,探讨其中医辨证分型规律及两者间关系。方法回顾性分析237例2型糖尿病住院病例资料,以下肢动脉彩色多普勒结果作为标准,分为T2DMPVD组和正常组,收集其年龄、病程、血糖、血压、血脂、血尿酸(UA)、24 h尿微量白蛋白定量(mALB)、游离脂肪酸(FFA)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)等指标,并对T2DMPVD组进行中医辨证分型。通过统计分析,总结T2DMPVD危险因素及其与中医证型的关系。结果T2DMPVD组和正常组在年龄、病程及mALB方面存在显著性差异;T2DMPVD组中医辨证分型分为阴虚热盛证(A型)、气阴两虚证(B型)、肝肾阴虚证(C型)、痰瘀阻络证(D型),B型和D型病例年龄与其他证型两两比较有显著性差异;病程A型与其他任一证型比较、C型与D型比较,均有显著性差异;收缩压(SBP)A型、B型与C型、D型比较均有显著性差异;舒张压(DBP)和糖化血红蛋白(HbA1 c)A型与B型、D型和B型与C型、D型比较有显著性差异。结论年龄、病程、微量蛋白尿是导致T2DMPVD的危险因素;T2DMPVD组病例4种证型均匀分布,无明显偏重;年龄大、病程长的病例更容易出现D型;C型患者的SBP及DBP水平在4种证型中属于较高水平;A型病例HbA1 c水平较高。     

高血压病患者血清胰岛素、C肽水平与中医辨证分型的关系

目的：探讨高血压病患者胰岛素抵抗及高胰岛素血症与中医证型的相关规律。方法：将高血压病的４种证型及健康对照组各选３０例，测定血中胰岛素及Ｃ肽水平等。结果：高血压病患者血吸纱水平显著高于健康对照组，并且各证型之间也存在明显差异，其顺序为痰湿壅盛〉肝火亢盛〉阴阳两虚〉阴虚阳亢〉健康对照。结论：高血压病患者胰岛素血症以实证为重而虚证较轻。     

证候与基因组学、蛋白质组学相关研究及其思考

证候是中医独有的概念,证候实质的研究,就是用现代科学理论揭示中医证候理论中蕴藏的科学内涵,阐明证候及其相关疾病的微观机制。基因组学与蛋白质组学的引入有望给证候学研究带来契机。从证候实质研究现状、证候与基因组学、蛋白质组学相关研究和复杂系统研究的方法论问题等方面,探讨了从基因组学和蛋白质组学研究中医证候实质可能的思路与方法。     

中医肝病辨治现代研究与蛋白质组学

蛋白质组学的研究理念和方法与中医学的整体观、辨证观有许多相似之处,将蛋白组学引入证实质研究,更符合证研究自身的特点.运用蛋白质组学理念和方法来研究中医肝病的辨病、辨证和防治用药,将揭示中医肝病发生、发展、转化的实质,为中医药防治肝病提供理论依据.建立蛋白质组学与中医肝病相关联的转换模式概念,定会丰富中医肝病辨治理论,也为中医证型的研究提供新的思维模式.