左归丸含药血清对成骨细胞分泌骨钙素的影响

目的：通过观察左归丸含药血清对成骨细胞分泌骨钙素（OC）的影响，探讨其治疗骨质疏松症的作用机制。方法：体外分离、培养成骨细胞，实验分为2组：成骨细胞（OB）＋正常血清组、OB＋左归丸含药血清组。采用放射免疫法，检测成骨细胞分泌OC的变化。结果：OB＋左归丸含药血清组与OB＋正常血清组相比，OB分泌OC的量显著增多，有统计学意义（P〈0.01）。结论：左归丸含药血清能促进成骨细胞分泌OC是其防治骨质疏松症的机制之一。     

左归丸联合温和灸对骨质疏松症模型大鼠骨密度、骨保护素mRNA及核因子κB受体活化因子配体mRNA的影响

目的探讨左归丸联合温和灸治疗骨质疏松症的可能作用机制。方法 40只雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、左归丸组、左归丸+温和灸组,每组10只。模型组、左归丸组、左归丸+温和灸组采用手术完整摘除双侧卵巢法制造骨质疏松症模型。造模3个月后左归丸组予左归丸10 ml/(kg·d)灌胃,左归丸+温和灸组予左归丸10 ml/(kg·d)灌胃+长强穴艾灸治疗,空白组和模型组予生理盐水10 ml/(kg·d)灌胃。各组均干预6周。干预前后测定大鼠股骨近端及第2腰椎骨密度,干预后通过PCR法检测大鼠骨组织骨保护素(OPG)mRNA和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)mRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组股骨、腰椎骨密度,骨组织OPG mRNA表达及OPG/RANKL降低,RANKL mRNA表达上升(P0.05或P0.01);与模型组比较,左归丸组、左归丸+温和灸组大鼠股骨、腰椎骨密度,骨组织OPG mRNA表达及OPG/RANKL均升高,RANKL mRNA表达降低(P0.05或P0.01),且左归丸+温和灸组大鼠股骨、腰椎骨密度,骨组织OPG mRNA表达及OPG/RANKL均较左归丸组升高,RANKL mRNA表达较左归丸组降低(P0.05)。结论左归丸联合温和灸能明显升高骨质疏松症大鼠的骨密度,上调OPG mRNA表达、下调RANKL mRNA表达可能是其作用机制之一。     

左归丸对低钾大鼠小脑颗粒神经元凋亡的保护作用

目的：探讨补益方左归丸体外抗凋亡作用及其分子机制。方法：应用体外培养的大鼠小脑颗粒神经元去极化诱导凋亡模型，观察不同浓度左归丸水提液对神经元存活率、DNA断裂特性、胞核形态学变化的影响。结果：左归丸水提液浓度依赖性地逆转低钾所致的大鼠小脑颗粒神经元凋亡，这种逆转作用不能被ERK抑制剂PD98059所阻断，但可被PI3K抑制剂LY294002阻断。结论：左归丸水提液对低钾所致的大鼠小脑颗粒神经元凋亡有保护作用，PI3K／Akt信号传导通路参与其作用。     

左归丸联合阿仑膦酸钠治疗绝经后骨质疏松症临床观察

目的:观察左归丸联合阿仑膦酸钠治疗绝经后骨质疏松症的效果。方法:80例随机分为西药组和左归丸组各40例,两组均用阿仑膦酸钠治疗,左归丸组加用左归丸治疗。结果:左归丸组治疗后雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、促间质细胞激素(LH)、黄体酮(P)与西药组比较差异无统计学意义(P>0.05)。左归丸组中医症状总积分低于西药组(P<0.05),左归丸组总有效率高于西药组(P<0.05),左归丸组治疗后腰椎L2～L4、右侧股骨颈、双髋骨密度高于西药组(P<0.05)。结论:左归丸联合阿仑膦酸钠治疗绝经后骨质疏松症可有效改善临床症状,提高骨密度,疗效较好。     

基于ER/ERK信号通路研究左归丸、左归丸去补阳药含药血清对成骨细胞功能的影响

目的:对比观察左归丸和左归丸去补阳药含药血清对成骨细胞功能的影响,从而部分阐明"阳中求阴"配伍防治骨质疏松的作用机制。方法:以成骨细胞MC3T3-E1为研究对象,制备左归丸、左归丸去补阳药含药血清,选用雌激素受体拮抗剂ICI182780共孵,阻断ER受体后检测左归丸、左归丸去补阳药含药血清对成骨细胞增殖、分化和矿化的影响。采用MTT法检测24 h、48 h、72 h左归丸、左归丸去补阳药含药血清对成骨细胞增殖的影响,采用改良钙钴染色法和茜素红染色法分别观察48 h左归丸、左归丸去补阳药含药血清对成骨细胞ALP活性和矿化结节的影响,采用Western-blot法检测48 h左归丸、左归丸去补阳药含药血清对ERα、ERK、p-ERK和Osterix蛋白表达的影响。结果:与空白对照组比较,左归丸组(9.68 g/kg)促进成骨细胞增殖,提高成骨细胞ALP活性和矿化结节数量,上调ERα、p-ERK和Osterix蛋白表达。ICI 182780阻断ER受体后,左归丸含药血清促成骨细胞增殖、分化和矿化的特性明显下降,ERα和p-ERK蛋白表达降低,相关转录因子Osterix的表达也被部分抑制。与空白对照组比较,左归丸去补阳药组(7.47 g/kg)未呈现促MC3T3-E1细胞增殖作用,可促进成骨细胞ALP活性和矿化结节形成数量增多,左归丸组明显优于左归丸去补阳药组,对ERα、p-ERK和Osterix蛋白表达影响不明显。结论:左归丸含药血清可以促进成骨细胞增殖、分化和矿化,机制可能与其上调成骨细胞ER受体激活ERK信号通路调控转录因子osterix有关;全方效果较好,部分揭示左归丸"阳中求阴"配伍防治骨质疏松的作用机制可能与其影响成骨细胞增殖和部分影响成骨细胞分化和矿化功能密切相关。     

补肾方药对老年大鼠下丘脑-垂体-肾上腙皮质所属组织结构形态变化的影响

目的：观察左归丸、右归丸对老年大鼠HPA轴所属组织形态结构变化的影响。方法：以自然衰老大鼠为肾虚证动物模型，HE染色，光镜观察HPA轴所属组织结构的增龄性变化，以及补肾方药（左、右归丸）的改善作用。结果：老年大鼠垂体、下丘脑、肾上腺皮质组织形态结构呈现明显的老年性退化，左归丸、右归丸能不同程度改善这些组织结构。结论：左归丸、右归丸能从组织结构形态方面延缓下丘脑-垂体-肾上腺皮质（HPA）轴的老年性变化。     

左归丸、右归丸对老年大鼠海马糖皮质激素受体mRNA表达的影响

目的：观察左归丸、右归丸对老年大鼠海马糖皮质激素受体（GR）mRNA表达的影响，探讨海马对下丘脑－垂体－肾上腺（HPA）轴的调节作用，以及左归丸、右归丸延缓老年大鼠神经内分泌调控退的作用机制。方法：以自然衰老大鼠为动物模型，采用原位杂交法，观察药物对大鼠海马各分区（DG、CA1、CA2、CA3）GRmRNA表达变化，结果：老年大鼠海马各分区GRmRNA表达均明显减弱，而左归丸、右归丸能不同程度地提高老年大鼠海马DG、CA1和CA3分区低下的GRmRNA的表达，结论：左归丸、右归丸通过提高GRmRNA表达，进而改善海马对HPA轴的抑制性调控作用，以延缓机体衰老。     

左归丸含药血清对血管生成体外三维模型的影响

目的:观察高效液相色谱(HPLC)监测制备的左归丸含药血清对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖及血管生成体外三维模型的影响。方法:左归丸灌胃大鼠后,于不同时间点制备血清,HPLC监测下,选取药物成分峰值最大时间点的含药血清进行体外实验。噻唑蓝(MTT)法观察左归丸含药血清对HUVEC增殖的影响,I型鼠尾胶原表面培养法观察左归丸含药血清对三维模型管样结构的影响。酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测雌二醇E2(estradiol)、血管内皮生长因子VEGF(vascular endothelial growth factor)水平。结果:左归丸灌胃后2h可达最高药物吸收峰值,左归丸11g/kg(72h),左归丸33g/kg(24、48、72h)对HUVEC均有明显的增殖作用。左归丸11g/kg、左归丸33g/kg均可明显的增加内皮小管的面积、长度、管径及生成指数。左归丸11g/kg、左归丸33g/kg均可明显的提高大鼠血清E2、VEGF水平。结论:HPLC监测下制备的左归丸含药血清能够促进血管内皮细胞的增殖,增大小管的面积、长度、管径及成管指数,提高血清E2、VEGF水平,从而促进血管生成。     

比较3种药对慢性哮喘大鼠的抗哮喘作用

目的研究左归丸、右归丸和玉屏风散的抗哮喘作用及其作用机制差异。方法雄性Brown Norway大鼠随机分为5组,卵清白蛋白诱导慢性哮喘模型,给药组分别灌胃给予左归丸、右归丸、玉屏风散,正常组和模型组给予生理盐水,每日给药1次,连续给药14 d。测定大鼠Penh值,血清辅助性T淋巴细胞亚群Th1、Th2炎症细胞因子水平及皮质酮(CROT)和促肾上腺皮质激素(ACTH)蛋白水平。处死大鼠,取肺组织切片定量测定气道重塑病理变化。RT-PCR法测定下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)及肺组织TGF-β1、Smad3 mRNA表达水平。结果玉屏风散组、右归丸组Penh值显著低于左归丸组。玉屏风散组Th1因子显著高于左归丸组,Th2因子显著低于左归丸组。右归丸组仅白细胞介素IL-5显著低于左归丸组。玉屏风散组血清CROT、ACTH蛋白及下丘脑CRH mRNA显著高于左归丸组,右归丸组ACTH蛋白及CRH mRNA显著高于左归丸组。玉屏风散组肺组织转化生长因子TGF-β1、Smad3 mRNA表达水平与左归丸组无显著差异,右归丸组Smad3 mRNA表达水平显著低于模型组。玉屏风散和左归丸对气道重塑具有显著抑制作用。右归丸杯状细胞数显著低于左归丸组。结论左归丸、右归丸、玉屏风散均具有显著抗哮喘作用。玉屏风散对Th1/Th2平衡、下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)及TGF-β1/Smad3通路的调节作用均较强;右归丸对TGF-β1/Smad3通路调节作用弱于左归丸,对HPA轴调节作用强于左归丸。     

左归丸对6.0 Gyγ射线损伤大鼠卵巢组织凋亡和p53蛋白表达的影响

目的 探讨6.0 Gyγ射线对性成熟期大鼠血清性激素水平、卵巢组织凋亡的影响,以及左归丸的干预效应.方法 将60只8周龄雌性SD大鼠,随机分成正常对照组、辐射组、补佳乐组、左归丸高剂量组、左归丸低剂量组和左归丸高剂量+补佳乐组,每组10只.γ射线一次性照射(6.0 Gy,LD40)24小时后给予补佳乐、左归丸高剂量、低...     

左归丸、右归丸对成骨细胞骨硬化蛋白的影响

目的:观察左归丸、右归丸对体外培养的成骨细胞骨硬化蛋白(Sclerostin)及β连环蛋白(β-catenin)表达的影响。方法:成年SD大鼠灌胃法获得左归丸、右归丸含药血清。体外培养SD乳鼠颅骨成骨细胞,取第3代细胞分对照组、左归丸组、右归丸组,各组含药血清培养后分别测细胞增殖、Sclerostin和β-catenin蛋白表达。结果:与对照组比较,右归丸组在5d、7d、9d时细胞明显增殖,左归丸组在7d、9d时细胞显著增殖(P<0.01),与左归丸组比较,右归丸组在5d时细胞明显增殖(P<0.05)。右归丸组在24h、48hSclerostin蛋白表达较对照组增高(P<0.05),左归丸组在24h较对照组减少(P<0.05)。与右归丸组相比,左归丸组在24h、48h Sclerostin蛋白表达显著下降(P<0.01)。右归丸组β-catenin蛋白表达在48h时较对照组有显著增高(P<0.05),左归丸组β-catenin蛋白表达在24h、48h均显著高于对照组(P<0.01)和右归丸组(P<0.05)。结论:右归丸、左归丸对成骨细胞均具有显著的促增殖作用,而右归丸较左归丸作用更明显。左归丸可能是通过抑制Sclerostin蛋白的表达发挥促成骨作用,右归丸无抑制Sclerostin蛋白表达作用。     

左归丸对大鼠卵巢血管生成与胎盘生长因子、肝细胞生长因子及其受体关系的影响

目的?观察左归丸对初老大鼠卵巢中胎盘生长因子（PLGF）及酪氨酸激酶受体（Flt-1）和肝细胞生长因子（HGF）及间质上皮细胞转化因子（c-Met）受体表达的影响。方法?初老大鼠40只按随机数字表法分为模型组、结合雌激素组、左归丸11、33 g/kg剂量组，每组10只，另取10只4月龄大鼠作为正常对照组。正常对照组以蒸馏水20 g/kg灌胃；结合雌激素组灌胃65 μg/kg结合雌激素混悬液；左归丸11、33 g/kg组分别灌胃左归丸浸膏11、33 g/kg，1次/天，连续20天；观察大鼠生殖器官形态学变化，计算卵巢、子宫、阴道脏器指数，采用免疫组化法及Western Blot法检测大鼠卵巢 PLGF、Flt-1、HGF、c-Met 蛋白表达水平，原位杂交技术检测PLGF、Flt-1、HGF、c-Met mRNA表达水平，ELISA 法检测雌二醇（E2）、孕激素（P）、促卵泡生成激素（FSH）水平。结果?与正常对照组比较，模型组大鼠生长卵泡数、黄体数、血管数更少，闭锁卵泡数多，卵巢、子宫、阴道指数及E2、P含量明显降低，FSH含量明显升高，大鼠卵巢PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平显著降低（P<0.01)；与模型组比较，左归丸11、33 g/kg组及结合雌激素组的生长卵泡数、黄体数、血管数增多，闭锁卵泡数明显减少，卵巢指数、子宫指数、阴道指数及E2、P水平明显升高，FSH水平明显降低，PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平显著升高（P<0.05，P<0.01）；与结合雌激素组比较，左归丸33 g/kg组E2、P升高（P<0.05 ），左归丸11、33 g/kg组中生长卵泡数、黄体数、血管数更少，闭锁卵泡数更多，卵巢、子宫、阴道指数，FSH水平，PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平比较，差异均无统计学意义（P>0.05）；与左归丸11 g/kg组比较，左归丸33 g/kg组生长卵泡数、黄体数、血管数增多，锁卵泡数减少，卵巢、子宫、阴道指数及E2、P水平均有所上升，FSH水平下降，PLGF、Flt-1、HGF、c-Met蛋白及mRNA水平升高（P<0.05，P<0.01）。结论?左归丸可能通过上调 PLGF、Flt-1、HGF、c-Met 蛋白及mRNA水平，促进初老大鼠卵巢血管生成，进而改善大鼠卵巢功能，且高剂量优于低剂量。     

辨证运用左归丸加味治疗精子异常43例临床观察

目的：探讨左归丸加味治疗精子异常的最佳疗效。方法：从宏观辨证分型，从微观辨别精液的质与量，选用左归丸加味治疗精子异常43例，与单纯运用西药治疗的对照组40例作对比观察。结果：治疗组痊愈35例，总有效率95．35％；对照组痊愈8例，总有效率45．00％。治疗组对患者的精液量，精子数量，精子活动度有明显改善作用，效果明显优于对照组。结论：左归丸加味治疗精子异常疗效确切。     

左归丸促进骨髓形成肝细胞的分子机制研究

目的：探讨左归丸促进骨髓形成肝细胞的分子机制。方法：采用交叉性别骨髓移植模型，雌性BALB／c小鼠接受9．0Gys ^60Co源γ射线照射后，经尾静脉注射输入同种系雄性小鼠骨髓细胞，分左归丸组和模型组，6个月后处死实验动物，取肝组织标本。选用小鼠基因表达谱寡核苷酸芯片，观察实验小鼠肝组织基因表达谱的变化。结果：左归丸组小鼠在骨髓移植6个月后肝组织的基因表达谱与模型组比较有显著不同，差异表达基因有1147条，已知功能基因有533条，其中上调基因264条，下调基因269条。结论：左归丸可能是通过影响肝组织基因表达谱的变化促进骨髓形成肝细胞。     

左归丸对卵巢切除所致骨质疏松大鼠骨钙素和降钙素含量的影响

目的：探讨左归丸防治骨质疏松症的机理。方法：以卵巢切除所致的骨质疏松大鼠为模型。采用骨组织形态计量学方法测定胫骨骨小梁体积百分比（TBV%），骨小梁吸收表面百分比（TRS%）和骨小梁形成表面百分比（TFS%），采用放射免疫分析法测定外周血清中雌二醇（E2），骨钙素（BGP）和降钙素（CT）的含量。结果：左归丸能使胫骨TBV%显著增高，使TRS%和TFS%显著降低，大鼠切除卵巢后，在E2含量大幅度降低的同时。BGP含量明显增加，CT含量明显降低，左归丸对E2含量无显著影响，但能使CT含量增加。使BGP含量降低。结论：左归丸能使CT含量增加是其防治骨质疏松症的机理之一。     

左归丸对卵巢摘除小鼠类雌激素样作用的实验研究

目的观察左归丸对去卵巢小鼠的雌激素样作用。方法采用经典的双侧卵巢切除法使小鼠体内雌激素降低,术后3天,左归丸灌胃给药4周,取材,测血清中雌二醇水平、计算子宫系数。通过HE染色,观察阴道和子宫形态改变,并对比子宫和阴道内膜的厚度的前后变化。结果子宫系数:左归丸高剂量组与模型组比较,具有显著性差异(P0.05);子宫内膜:左归丸高、中剂量组与模型组比较均具有极显著性差异(P0.01);阴道内膜:左归丸高、中、低计量组与模型组比较均具有极显著性差异(P0.01);可以明显缓解子宫和阴道内膜的萎缩;血清中雌激素水平:左归丸高剂量组与模型组相比,小鼠血清中的雌二醇含量并没有明显性变化(P0.05),左归丸中剂量、低剂量组与模型组相比,小鼠血清中的雌二醇水平回升趋势具有显著性差异(P0.05)。结论左归丸具有明显的类雌激素样作用,能够改善雌激素减少导致的子宫萎缩和阴道形态的变化,但左归丸提高去卵巢小鼠血清中的雌激素含量与其类雌激素样作用并没有明显相关性。     

左归丸含药血清对骨髓间充质干细胞GPR48、BSP表达影响的实验研究

目的:通过左归丸含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞GPR48、BSP、BGP的实验研究,探究左归丸对治疗骨质疏松症的疗效机制。从而为"肾藏精"这一理论提供实验依据。方法:将SPF级大鼠分为正常组、左归丸组、诱导液组、阳性药物组骨疏康组、福善美,对大鼠进行灌胃5天。制备含药血清,并观察左归丸含药血清对骨髓间充质干细胞的影响。结果:与正常组和阳性药物组及诱导液组相比,左归丸组的蛋白表达水平明显上升。结论:1G蛋白偶联受体GPR48的变化可能引起骨质疏松症的发生;2左归丸能够有效治疗骨质疏松,这种作用可能通过G蛋白偶联受体GPR48信号通路来实现。     

左归丸及其组方治疗绝经后骨质疏松症的基础研究进展

骨质疏松症(osteoporosis, OP)是一种发病率高、骨折风险高、治疗率低的骨代谢疾病。传统中药复方在预防和治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis, PMOP)方面有着悠久的历史与渊源,抗骨质疏松中药复方与单一药物相比具有明显的优势。左归丸作为传统补益肾阴方剂,临床运用广泛,现代药理研究发现左归丸有效抗炎、抗氧化、抗骨质疏松等作用。通过检索近年来关于左归丸治疗PMOP文献,从左归丸对骨髓间充质干细胞、成骨细胞的作用及干预骨质疏松症相关信号通路的进展,探讨左归丸对PMOP的潜在治疗机制。     

左归丸联合钙尔奇D治疗绝经后骨质疏松肾阴虚证的疗效评估

目的:评价左归丸联合钙尔奇D治疗绝经后骨质疏松(POMP)肾阴虚证的疗效。方法:选择2014年1月至2016年12月期间经我院诊疗的150例POMP肾阴虚证患者为研究对象,随机分为对照组和左归丸组2组各75例。左归丸组在对照组钙尔奇D同等治疗基础上加用左归丸治疗,治疗周期均为6个月,2组治疗结束后从疼痛积分(VAS)、骨密度(BMD)影像、血清雌二醇(E_2)、中医证候积分和治疗有效率方面进行比较。结果:治疗结束后,BMD影像提示左归丸较对照组明显改善患者的骨质疏松状态,与对照组比较左归丸可以明显改善患者腰背疼痛和血清雌二醇含量以及肾阴虚证候积分,上述各指标组间比较差异有统计学意义。结论:在原有治疗基础上加用左归丸治疗后不仅治疗有效率明显提升,还能显著改善肾阴虚证相关症状,且未出现明显不良反应,左归丸联合钙尔奇D治疗肾阴虚型POMP值得临床推广应用。     

左归丸治疗更年期综合征72例

为观察左归丸治疗以更年期综合征的效果,对72例患者采用左归丸治疗,20天为1疗程,共治疗3疗程。结果：总有效率为90.28％;月经紊乱、汗出、潮热、情绪、睡眠等症状均有不同程度的改善。提示左归丸对更年期综合征有较好临床疗效。