何首乌有效成分二苯乙烯苷对少半乳糖致脑老化小鼠脑组织神经营养因子表达的影响

目的：观察何首乌有效成分二苯乙烯苷（2，3，5，4’-四羟基-二苯乙烯-β-葡萄糖苷TSG）对D-半乳糖致脑老化小鼠海马组织神经营养因子的影响，方法：1）实验分组：将三月龄Balb／c雌性小鼠随机分为正常对照组、模型组（D-半乳糖注射组）、D-半乳糖＋TSG大剂量组（0．3g／kg／d）、中剂量组（0．1g／kg／d）、小剂量组（0．03g／kg／d）；除正常对照组注射等量的生理盐水外，其余各组用D-半乳糖（生理盐水溶解后），每日颈后皮下注射50mg／kg，连续60天，建立脑老化小鼠模型。同时各组分别灌胃给药（除正常对照及模型组给予溶剂外）其余各组给予TSG每日一次，连续60d后，断头取脑分离皮层海马迅速液氮冷冻，-70℃保存。2）样品处理：将各组小鼠的海马组织匀浆离心取上清，Follin法测定蛋白浓度，调整蛋白浓度一致后并加上样缓冲液，煮沸5分钟。     

限食对D-半乳糖脑老化小鼠大脑抗自由基酶活力的保护作用

目的探讨限食对D-半乳糖诱导的脑老化小鼠脑组织氧化损伤的保护作用。方法3月龄ICR小鼠40只分4组,即脑老化模型组、脑老化限食组、限食组和普通对照组。以D-半乳糖100mg/(kg·d)皮下注射法建立脑老化模型,限食鼠则按正常热能摄入量的70%投喂。实验干预9周后,先以Morris水迷宫实验测定小鼠空间学习记忆能力,再取大脑测定抗氧化酶SOD、GSH-Px活性及丙二醛(MDA)含量。结果①水迷宫实验:D-半乳糖脑老化小鼠逃避潜伏期明显大于对照小鼠(P0.05),限食处理的脑老化小鼠逃避潜伏期显著低于脑老化鼠(P0.05)而与正常对照组无显著差异。②生化检测:D-半乳糖脑老化小鼠脑内SOD、GSH-Px活性显著低于对照小鼠(P0.05),限食脑老化小鼠脑内SOD、GSH-Px活性显著高于脑老化鼠(P0.05)而与正常对照组无显著差异。但限食对正常小鼠脑组织SOD、GSH-Px活性未见显著影响。脑老化小鼠脑内MDA含量显著升高而限食可使MDA含量维持在接近正常对照组水平。结论在本试验条件下,限食能减轻脑老化小鼠认知功能衰退及脑组织抗超氧阴离子自由基酶活性下降,保护大脑免遭D-半乳糖氧化损伤所致脑老化。     

EGCG对D-半乳糖诱导的阿尔茨海默病小鼠的抗凋亡作用

目的研究(-)表没食子儿茶素没食子酸酯对D-半乳糖诱导的阿尔茨海默病小鼠的抗凋亡作用。方法给小鼠每日按150mg·kg-1皮下注射D-半乳糖一次,连续注射6周,以制备阿尔茨海默病小鼠模型,造模2周后,给EGCG低剂量和高剂量治疗组小鼠每日分别按2mg·kg-1和6mg·kg-1灌胃给予EGCG一次,连续给药4周。通过HE染色、TUNEL染色、免疫组化和Western blot印迹分析等方法观察EGCG对D-半乳糖诱导的阿尔茨海默病小鼠脑内神经元凋亡情况及海马区促凋亡蛋白caspase-3的活性及表达。结果给小鼠连续皮下注射D-半乳糖明显的增加了神经元细胞凋亡指数(P<0.01),并提高了小鼠海马区caspase-3的活性及表达(P<0.05);EGCG(2mg·kg-1和6mg·kg-1)明显的降低了D-半乳糖诱导的阿尔茨海默病小鼠神经元细胞的凋亡指数(P<0.01),并降低了小鼠海马区caspase-3的活性及表达(P<0.05)。结论EGCG通过抑制D-半乳糖诱导的阿尔茨海默病小鼠海马区caspase-3的活性及表达,发挥有效的抗凋亡作用。     

保护蛋白对D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠保护作用的初步研究

目的:初步研究保护蛋白对D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠的保护作用并探讨其机制。方法:昆明鼠随机分成三组,模型组和保护组腹腔注射D-半乳糖120 mg/(Kg·d)诱导小鼠亚急性衰老,保护组同时注射保护蛋白6mg/(Kg·d) ,对照组注射等量生理盐水。40 d后,处死小鼠,分别测定各组小鼠血清总SOD活性,脑组织MDA及脂褐素含量,并电镜观察小鼠大脑皮层神经元的超微结构。结果:对照组、保护组小鼠的血清总SOD活性明显高于模型组(P<0.05) ,脑组织MDA和脂褐素含量显著低于模型组(P<0.05) ,而保护组与对照组的各项指标无显著性差异(P>0.05)。电镜观察可见模型组小鼠次级溶酶体增多并有脂褐素沉积,线粒体有轻度肿胀;PRP保护组次级溶酶体增多但无脂褐素沉积,其它细胞器基本正常。结论:保护蛋白对D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠有一定的保护作用     

二苯乙烯苷（TSG）对D-半乳糖致脑老化小鼠学习记忆及神经营养因子的影响

目的：观察TSG对D-半乳糖致脑老化模型小鼠学习记忆及脑内神经营养因子表达的影响。方法：将雌性小鼠随机分为正常对照、D-半乳糖模型、VitE阳性对照、TSG小剂量（0．033g／kg）、TSG中剂量（0．1g／kg）、TSG大剂量（0．3g／kg）6个组，采用灌胃给药途径给药60天；用D-半乳糖生理盐水溶液每日颈后皮下注射50mg／kg（60天）造模；进行Morris水迷宫测试后取材，用免疫组化及western blotting方法检测TSG对神经营养因子神经生长因子（Nervegrowth factor，NGF）和Neurotrophin（NT-3）的影响。结果：与对照组相比，模型组小鼠学习记忆能力明显降低，海马CAl区NGF和NT-3阳性细胞数目、面积和灰度均明显减少，western blotting结果显示模型组皮层NGF和NT-3条带明显变细；     

肉苁蓉总苷对D-半乳糖脑老化模型小鼠的保护作用

目的：研究肉苁蓉总苷(Glycosides of cistanche，GCs)对D-半乳糖脑老化模型小鼠的保护作用，并探讨其作用机制。方法：皮下注射D-半乳糖50mg/kg/d，制备脑老化模型。NIH小鼠随机分为6组：D-半乳糖模型组；D-半乳糖 GCs组，每日分别给予GCs31.25mg/kg，62.5mg/kg,125mg/kg灌胃；D-半乳糖 维生素E     

云南产钝顶螺旋藻多糖对D-半乳糖所致衰老小鼠的作用

雌性NIH小鼠每天颈背sc D-半乳糖80mg/kg,连续42d,造成亚急性衰老模型。在注射D-半乳糖的同时每天分别ig钝顶螺旋藻多糖(PSP)200mg/kg、100mg/kg,能显著降低小鼠心、肝脑组织MDA含量,明显促进红细胞、肝及脑SOD活性,使全血及肝GSH-Px活性与GSH含量恢复至正常水平,同时使肝、脑MAO-B活性显著降低,皮肤羟脯氨酸含量显著回升。提示PSP对D-半乳糖所致衰老小鼠有明显的改善作用。     

保护蛋白对D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠保护作用的初步研究

目的 :初步研究保护蛋白对 D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠的保护作用并探讨其机制。方法 :昆明鼠随机分成三组 ,模型组和保护组腹腔注射 D-半乳糖 12 0 mg/(Kg·d)诱导小鼠亚急性衰老 ,保护组同时注射保护蛋白 6mg/(Kg·d) ,对照组注射等量生理盐水。40 d后 ,处死小鼠 ,分别测定各组小鼠血清总 SOD活性 ,脑组织 MDA及脂褐素含量 ,并电镜观察小鼠大脑皮层神经元的超微结构。结果 :对照组、保护组小鼠的血清总 SOD活性明显高于模型组 (P<0 .0 5 ) ,脑组织 MDA和脂褐素含量显著低于模型组 (P<0 .0 5 ) ,而保护组与对照组的各项指标无显著性差异 (P>0 .0 5 )。电镜观察可见模型组小鼠次级溶酶体增多并有脂褐素沉积 ,线粒体有轻度肿胀 ;PRP保护组次级溶酶体增多但无脂褐素沉积 ,其它细胞器基本正常。结论 :保护蛋白对 D-半乳糖诱导的亚急性衰老小鼠有一定的保护作用     

花椒多酚类化合物对衰老小鼠记忆障碍的改善作用

目的探讨花椒多酚类化合物总提取物（ZPPC）对D-半乳糖致衰老模型小鼠学习记忆能力及抗氧化能力的影响。方法模型组,ZPPC低、中、高剂量组和阳性对照组皮下注射10%D-半乳糖6周建立衰老小鼠模型,ZPPC低、中、高剂量组同时灌胃给予ZPPC,正常对照组和模型组给予等量的生理盐水,阳性对照组同时灌胃给予维生素E。用Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力,同时检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活力以及丙二醛（MDA）含量。结果与正常对照组比较,模型组小鼠学习记忆能力降低,脑组织SOD活力下降,MDA含量增加,均有统计学差异（P〈0.01）。灌胃给予高中低不同剂量的ZPPC后,小鼠上述变化明显改善,与模型组比较有统计学差异（P〈0.05或P〈0.01）。结论 ZPPC可改善D-半乳糖衰老模型小鼠的学习记忆能力,其作用机制可能与ZPPC具有抗氧化能力有关。     

墨旱莲水煎剂延缓肝脏衰老作用的研究

目的:研究墨旱莲水煎剂的延缓肝脏衰老作用。方法:正常对照组小鼠每日腹腔注射生理盐水1mg/10g鼠重并同时灌胃与墨旱莲水煎剂等容量的生理盐水;单纯D-半乳糖损伤组小鼠每日腹腔注射与正常组等容量的D-半乳糖1mg/10g鼠重并同时灌胃与墨旱莲水煎剂等容量的生理盐水;墨旱莲水煎剂组腹腔注射与单纯D-半乳糖损伤组等容量的D-半乳糖1mg/10g鼠重,同时分别灌胃墨旱莲水煎剂8mg/g、16mg/g、32mg/g鼠重。43天后取肝进行形态学观察并测定肝组织中SOD和GSH-PX活性及MDA含量。结果:形态学观察与单纯D-半乳糖损伤组小鼠相比墨旱莲水煎剂组肝细胞损伤轻;与正常对照组相比单纯D-半乳糖损伤组的SOD和GSH-PX活性降低非常显著,MDA含量升高非常显著(P<0.01);与单纯D-半乳糖损伤组相比墨旱莲水煎剂组SOD和GSH-PX活性显著升高且MDA含量显著降低,并呈剂量依赖性(P<0.05～P<0.01)。结论:墨旱莲水煎剂有延缓肝脏衰老作用。     

PNUTS 在 D-半乳糖诱导老化小鼠耳蜗中的表达

目的 观察 D-半乳糖诱导的老化小鼠耳蜗中蛋白磷酸酶 1 核目标亚基（PNUTS）的表达。 方法 6 周龄清洁级昆明小鼠 20 只随机分为对照组和 D-半乳糖组, 每组 10 只。 D-半乳糖组小鼠颈背部皮下注射 D-半乳糖 800 mg/（kg·d）; 对照组颈背部注射等量生理盐水, 均为每日 1 次, 连续 8 周。 造模完成后, 进行听脑干反应（ABR）测试检测小鼠听力变化; 取 2 组小鼠耳蜗, 采用 Western blot 检测 PNUTS 及 p53 蛋白表达; 免疫组织化学观察 PNUTS 蛋白在耳蜗毛细胞、螺旋神经节细胞及血管纹中的表达与分布情况。 结果 D-半乳糖组小鼠在 8、12、24 kHz 这 3 个频率下的 ABR 阈值与对照组差异均无统计学意义。 PNUTS 蛋白在小鼠耳蜗毛细胞、螺旋神经节细胞及血管纹细胞中有表达,且 D-半乳糖组小鼠耳蜗中 PNUTS 蛋白的阳性表达水平较对照组显著降低（P＜ 0.05）;而 p53 蛋白表达水平则显著升高（P＜ 0.01）。 结论 PNUTS 在小鼠耳蜗中有表达, 且 D-半乳糖能够诱导老化小鼠耳蜗中 PNUTS 表达下调。     

二苯乙烯苷对D-半乳糖致脑老化小鼠学习记忆及神经营养因子的影响

目的 :观察何首乌提取物二苯乙烯苷 (TSG)对D -半乳糖致痴呆模型小鼠学习记忆及脑内神经营养因子表达的影响。方法 :将小鼠随机分为正常对照组、D -半乳糖模型组、VitE阳性对照组及TSG低、中、高剂量 (0 033、0 1、0 3g/kg)6个组 ,除正常对照组外 ,其余各组小鼠在建立脑老化模型的同时灌胃给予相应药物60d ,随后进行Morris水迷宫测试 ,并采用免疫组化的方法检测TSG对神经生长因子 (NGF)和神经营养因子 -3(NT -3)的影响。结果 :与正常对照组比较 ,模型组小鼠在Morris水迷宫测试中游出时间和游出距离延长 ,海马CA1区NGF和NT -3的表达明显减少 ;TSG则能缩短小鼠游出时间和游出距离 ,增加海马CA1区NGF和NT -3的表达。结论 :TSG能明显提高学习记忆能力 ,对阿尔茨海默病可能具有防治作用。     

左乙拉西坦对青霉素点燃癫痫幼鼠海马钙调素依赖蛋白激酶Ⅱα的影响

目的:比较新型抗癫痫药物左乙拉西坦(LEV)和传统抗癫痫药物苯巴比妥(PB)对青霉素点燃癫痫幼鼠海马CA3区神经元形态及钙调素依赖蛋白激酶Ⅱα(CaMKⅡα)的影响。方法:选出生后20 d健康的SD大鼠(雌雄不限)50只,随机分为青霉素致痫组40只和空白对照组10只,将存活的造模成功大鼠随机分为癫痫对照组(用生理盐水灌胃)、LEV组[300 mg/(kg.d)灌胃]和PB组[30 mg/(kg.d)灌胃]。在用药5周后,HE染色观察海马CA3区神经元形态,免疫组化检测CaMKⅡα的表达。结果:空白对照组大鼠海马CA3区神经元排列密集、规则,而致痫组海马神经元排列紊乱、疏松;癫痫对照组、PB组、LEV组与空白对照组比较CaMKⅡα的表达明显减少,差异有统计学意义。PB组与癫痫对照组比较CaMKⅡα的表达稍减少,但差异无统计学意义。LEV组与PB组比较CaMKⅡα的表达增加,差异有统计学意义。结论:发育期反复惊厥可导致大鼠成年后海马神经细胞损伤,造成海马CA3区CaMKⅡα表达下降,故可推测CaMKⅡα的表达下降可能是反复癫痫发作致认知损害的机制之一;长期使用苯巴比妥可使海马CA3区CaMKⅡα表达下降,而长期使用左乙拉西坦对海马CA3区CaMKⅡα表达的影响较小。     

氯化铝和D-半乳糖对β淀粉样蛋白表达的影响及其机制

目的：探讨β淀粉样蛋白在小鼠D-半乳糖和氯化铝中毒模型中的变化及其机制。方法：使用D-半乳糖联合氯化铝制作阿尔茨海默病小鼠模型,于用药后0、45、60、75、90d取海马。取海马前用水迷宫实验分析小鼠的记忆和学习能力,对所取海马用改良的Bielschowsky氏银染来观察其病理改变。用Western杂交确定β淀粉样蛋白和BACE1蛋白的改变。结果：氯化铝和D-半乳糖处理的小鼠在水迷宫测试中逃避潜伏期明显延长;Bielschowsky氏银染发现海马细胞层次出现紊乱,但未发现典型的＂老年斑＂及＂神经元纤维缠结＂;β淀粉样蛋白及BACE1的蛋白水平显著升高。结论：D-半乳糖及氯化铝可导致游离态的β淀粉样蛋白的生成增加,但并不能形成特征性的阿尔茨海默病样病理改变。     

核桃仁抗小鼠皮肤衰老的实验研究

目的考察核桃仁延缓小鼠皮肤衰老的作用。方法 30只小鼠随机分为正常组、模型组及治疗组。模型组与治疗组以D-半乳糖1g/(kg·d)皮下注射造衰老模型,第11天开始治疗组灌核桃仁水提液8mL/kg,持续30d,观察HE病理变化及测定皮肤中Hyp含量。结果治疗组比模型组皮肤结构完整,表皮与真皮界线清晰,Hyp含量显著高于模型组(P<0.05)。结论核桃仁具有良好的抗皮肤衰老作用。     

黄连解毒汤通过调控巨噬细胞极化防治动脉粥样硬化的机制

目的:研究黄连解毒汤对动脉粥样硬化(AS)模型小鼠M1、M2型巨噬细胞极化的调控作用,初步阐明其防治AS的机制。方法:将60只雄性ApoE^-/-小鼠随机分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组[阳性对照,5 mg/(kg·d)]和黄连解毒汤低、中、高剂量组[5、10、20 mg/(kg·d),以生药总量计],每组10只。除空白对照组外,其余各组小鼠均饲以高脂饲料复制AS模型。造模结束后,各药物组小鼠灌胃相应药液,空白对照组和模型组小鼠灌胃生理盐水。每天给药1次,连续4周。给药结束后,采用全自动生化仪检测小鼠血清中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,采用天狼猩红染色法观察小鼠主动脉胶原纤维形成情况,采用酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、甘露糖受体(CD206)含量,采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测小鼠主动脉中白细胞介素1β(IL-1β)、iNOS、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10、类几丁质酶3样分子(YM1)、炎症区域分子1(Fizz1)mRNA的表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠血清中TC、TG、LDL-C、iNOS含量以及主动脉中IL-1β、iNOS、TNF-αmRNA的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),血清中HDL-C、CD206含量以及主动脉中IL-10、YM1、Fizz1 mRNA的表达水平均显著降低(P<0.01);主动脉血管内皮下可见厚厚一层胶原纤维。与模型组比较,各药物组小鼠上述血清指标均显著改善(P<0.05或P<0.01);且黄连解毒汤中、高剂量组小鼠主动脉中IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA的表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),IL-10、YM1、Fizz1 mRNA的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),且其血管内皮相对光滑。结论:黄连解毒汤可通过抑制M1型巨噬细胞极化、促进M2型巨噬细胞极化,减少炎症反应,维持动脉内粥样斑块的稳定性,从而发挥抗AS的作用。     

胡桃叶黄酮对D-半乳糖衰老模型小鼠的影响

目的 观察胡桃叶总黄酮对d-半乳糖衰老模型小鼠的SOD、ACHE、MDA的影响,探讨其抗衰老作用及机制.方法 小鼠随机均分为6组,除正常对照组外,各组每天皮下注射D-半乳糖(0.05g/kg),连续注射6周.从注射的第7天开始,3个实验组同时灌胃高、中、低剂量的胡桃叶总黄酮,阳性对照组灌以维生素E(0.05g/kg)模型对照组与正常对照组每天灌胃等量的蒸馏水,连续给药5周后测定血清SOD、ACHE和脑组织MDA的含量变化.结果 实验组的血清SOD显著高于模型对照组(P＜0.05),ACHE活力极显著高于模型对照组(P＜0.01),实验组的脑MDA含量显著低于模型对照组(P＜0.05);与正常对照组比,各项指标相近(P＞0.05).结论 胡桃叶总黄酮能提高抗氧化能力,降低自由基含量,增强胆碱能神经系统功能,从而防止衰老.     

清脑片对小鼠脑膜微循环及血瘀模型的影响

目的 观察清脑片对小鼠脑膜微循环及血瘀模型的影响。方法 60只昆明种小鼠,SPF级,♀♂各半,随机分为清脑片组、脑络通组（高、中、低剂量脑络通胶囊混悬液）、空白组及模型组6组,灌服给药,空白组及模型组灌服同体积的生理盐水,连续给药10 d,记录小鼠平静后2 min内的血流灌注量。取结扎（空白组做假手术）前110~120 s的血流灌注量平均值作为结扎前的平均灌注量,取230~240 s的血流灌注量平均值作为结扎后的平均灌注量,并进行分析。另取60只KM小鼠,SPF级,♀♂各半,随机分为6组,给药方法同前,每天给药1次,连续灌服15 d。除空白组每天后腿肌注生理盐水外,其他5组每天后腿肌注地塞米松0.8 mg·kg^-1,连续肌注15 d。于第16天灌药及肌注后1 h,小鼠摘眼球取血,测全血黏度。结果 与空白组比较,模型组脑膜微循环血流量显著减少（P<0.01）。脑络通组和清脑片高剂量组可显著改善双侧颈总动脉结扎所致的小鼠脑血流量减少（P<0.01）;清脑片中剂量明显改善双侧颈总动脉结扎所致的小鼠脑血流量减少（P<0.05）。高剂量清脑片组可显著降低高切和中切黏度（P<0.01）,中剂量清脑片组可明显减低高切和中切黏度（P<0.05）;高、中剂量清脑片组可明显降低低切黏度（P<0.05）。结论 清脑片对小鼠脑膜微循环以及小鼠血瘀模型有良好的改善作用。     

SSF改善衰老小鼠记忆缺陷和神经、免疫系统的病理改变

目的：研究黄芩中有效成份SSF对衰老小鼠记忆障碍和神经、免疫系统病理改变的作用。方法：采用水迷宫行为实验法,检测SSF对衰老小鼠学习、记忆障碍的作用;大脑皮层光镜检测SSF对衰老小鼠神经病理改变的作用;胸腺和脾指数评价SSF对衰老小鼠免疫系统的作用;脑复康对照药。结果：与盐水对照组相比,D－半乳糖（120mg/kg,ip,47d)使小鼠到达终点平台潜伏期和进入盲端的次数显著增加,大脑皮层细胞明显病理改变,脾指数减小。SSF（50,100和200mg/kg,ip,47d)和脑复康（200mg/kg,ip,47d)均可改善D－半乳糖引起小鼠记忆障碍和神经、免疫系统异常改变。结论：SSF能改善D－半乳糖引起小鼠学习记忆障碍和神经、免疫系统的病理改变。